溶组织内阿米巴同工酶的初步研究

用3株溶组织内阿米巴及1株侵入内阿米巴以琼脂糖凝胶电泳法检测其四种酶的同工酶,即:苹果酸酶、葡萄糖磷酸异构酶、磷酸葡萄糖变位酶、己糖激酶,以酶谱来区别不同的酶株群。结果显示:3株溶组织内阿米巴与侵入内阿米巴的同工酶谱有显著差异,但3株溶组织内阿米巴的酶谱几无差异,属于强致病的酶株群ⅩⅣ,对来源不同的溶组织内阿米巴,却属同一酶株群的原因进行了讨论。     

溶组织内阿米巴ELISA试剂盒在阿米巴病调查的应用

目的了解景洪市爱尼族人群阿米巴病流行情况,为阿米巴病监测和防治提供依据,并评价ELISA试剂盒在阿米巴病调查应用的效果。方法以整群随机抽样爱尼族村寨,逐户收集新鲜粪便标本,用观察法、碘液涂片镜检法和TECHLAB第二代溶组织内阿米巴ELISA试剂盒对照检测粪便标本溶内阿米巴。结果镜检278例,E·h/E·d感染为9·71%;ELISA检测366例,E·h感染率为9·29%;镜检和ELISA共同阳性15例,占镜检阳性的55·56%;粪便观察和ELISA检测结果诊断5例为肠阿米巴病,发病率为1·37%,E·h致病率为14·71%。结论景洪爱尼族阿米巴病流行严重,应加强阿米巴病的监测和防治工作,同时积极推广新技术。     

溶组织内阿米巴滋养体的超微结构

溶组织内阿米巴滋养体表面呈波浪状,伪足呈叶状,偶见球状。质膜外可见外被,质膜下偶见膜下颗粒。胞质内主要为营养细胞器与糖原颗粒。虫体有溶酶体与内质网,缺乏高尔基体和线粒体。在虫体分裂期常可见晶格状聚合多核糖体。     

PCR鉴别致病性和非致病性溶组织内阿米巴原虫感染

选用编码溶组织内阿米巴原虫３００００－Ｍｒ抗原的基因片段中不同的保守序列作ＰＣＲ引物，建立检测原虫ｃＤＮＡ的两种方法，来鉴别致病性和非致病性原虫株，其结果与同工酶电泳谱株群分析、特异性单抗检测３００００－Ｍｒ抗原相比，对病原含量少的标本检出率高，敏感性强。     

溶组织内阿米巴性宫颈阴道炎1例

患者50岁,近年常感下腹不适,痛胀,阴道痒痛,有脓性分泌物,时多吋少,近期加重,于1996年10月来本院就诊。妇科检查疑为宫颈癌,分泌物涂片做细胞学检查,发现大量的炎症细胞,瑞氏染色,发现大量的阿米巴滋养体,体积较大,20～30μm,形态不规则,胞浆呈天蓝色,有伪足样突出,内层呈颗粒状,细胞核偏中,     

对阿米巴肝脓液中的溶组织内阿米巴种特异基因的分析

目的：分析引发肝脓肿的溶组织内阿米巴虫株的种特异基因（SSG）的差异。方法：直接从阿米巴肝脓液中扩增溶组织内阿米巴SSG，以溶组织内阿米巴HM－1；IMSS株SSG扩增产物为探针，用southern杂交的分析方法SSG的多态性。结果：扩增出的HM－1：IMSS株的SSG长650bp；14例阿米巴肝脓肿患的肝脓液中有4例未检出溶组织内阿米巴的SSG基因，其余10例的SSG具多态性，在650bp-980bp之间呈梯形分布。结论：使受检致病的溶组织内阿米巴虫株存在种内差异，其临床意义有待进一步研究。     

从溶组织内阿米巴教学中得到的启示

激发学生学习的兴趣现在一直是教学改革的大课题。在溶组织内阿米巴的教学过程中引入一定数量的非医学知识而又与其密切相关的信息,调动学生学习的积极性,提高学习兴趣,收到良好的课堂教学效果。     

粪便和精液中检出溶组织内阿米巴滋养体各1例

目的：病原学检出粪便和精液中溶组织内阿米巴滋养体各1例,观察标本中滋养体形态学特点,为病原学诊断提供参考。方法挑取黏液血便和经稀释后血性精液,置于37℃恒温箱孵育5 min后行常规直接涂片检查;精液标本涂片后行瑞氏和铁苏木素染色。结果粪便标本镜下见红细胞成堆聚集,白细胞数较少;滋养体直径大于红细胞数倍,胞内见吞噬的红细胞;滋养体形态多变,以伪足作缓慢运动。精液直接涂片法未见滋养体伪足运动,但形状会发生缓慢变化。染色后见单个胞核的虫体,核浆比小,核仁居中,胞质内有空泡状结构。结论粪便标本经37℃孵育后易观察到滋养体活动,可提高检出率;精液直接涂片法因精子活动干扰不易观察到伪足运动,需结合瑞氏和铁苏木素染色进行诊断。     

pH对溶组织内阿米巴运动的影响

用细胞电泳技术,对两株溶组织内阿米巴在pH梯度中的细胞电泳及伪足形成情况进行观察。结果表明:随着pH值变大,电泳速度加快,伪足出现率也增多,两者之间具有显著的相关性。提示阿米巴的伪足运动可能与其质膜的电荷变化有关。     

急性重症感染并发弥漫性血管内凝血的实验诊断

对５０例急性重症感染病人（２４例合并ＤＩＣ，２６例未合并ＤＩＣ）做了凝血酶原时间（ＰＴ）、活化的部分凝血活酶时间（ＡＰＴＴ）、纤维蛋白原含量（Ｆｇ）、血小板数量（Ｐｌｔ）、抗凝血Ⅲ（ＡＴ－Ⅲ）、纤溶酶原活性（ＰＬＧ）、α＿２纤溶酶活性（α＿２ＡＰ）和Ｄ－二聚体含量（Ｄ－Ｄｉｍｅｒ）８种凝血纤溶指标的测定观察。结果表明：ＤＩＣ在感染性多系统脏器衰竭（ＭＳＯＦ）的发生发展过程中具有重要作用。单次Ｆｇ含量测定对感染性ＤＩＣ的诊断价值不大。ＰＴ、ＡＰＴＴ、ＡＴ－Ⅲ、ＰＬＧ、Ｐｌｔ、Ｄ－Ｄｉｍｅｒ和α＿２ＡＰ可做为感染性ＤＩＣ的实验诊断指标，但单项测定对ＤＩＣ的诊断率均未超过８０％，而多项指标的联合检测可提高诊断率至９０％以上。     

浅部真菌病临床标本致病菌DNA提取方法的初步研究

目的初步建立直接从浅部真菌病临床标本中提取致病菌DNA的方法,为PCR技术快速诊断浅部真菌病及相关研究奠定基础。方法采用蛋白酶K消化法、煮沸法和冻融法处理直接镜检阳性的临床标本,以经典的酚-氯法抽提致病菌DNA,并用真菌通用引物ITS1进行PCR扩增检验。结果共收集标本61例,其中有44例PCR可扩增出特异性条带,甲屑的PCR检出率为81．0％,皮屑为69．2％;PER检测为阴性的17例中有7例标本量较少,有5例菌量较少。整个DNA提取过程约需3h。结论本研究初步建立的直接从浅部真菌病临床标本中提取致病菌DNA的方法能满足后续PCR反应的需要：DNA提取效率与标本量和菌量有关。     

实时荧光PCR定量检测粪便中Akkermansia muciniphila方法研究

目的 建立实时荧光PCR定量检测粪便中Akkermansia muciniphila （A. muciniphila）的方法,为A. muciniphila的定量检测及深入研究提供技术支持。 方法 建立SYBR Green Ⅰ 荧光PCR 定量检测A. muciniphila的方法,利用A. muciniphila标准品制备标准曲线,评价该方法的灵敏度、特异性、抗干扰性及重复性,并对30例人粪便样本进行检测。 结果 标准曲线线性关系良好（R2=0.999）;方法灵敏度可达到1.0×102CFU/mL;该方法可特异性扩增A. muciniphila,不受其他肠道细菌的影响;组内和组间重复性较好,Ct值的变异系数均小于2%;30例人粪便样品中A. muciniphila阳性率为73%,Ct值为17.40～31.77。 结论 本研究建立的实时荧光PCR定量检测粪便中A. muciniphila的方法简便、快速、经济,且具有良好的灵敏度、特异性、抗干扰性和重复性,适用于实际粪便样品的检测。     

302例可疑肝吸虫病人实验室检测结果分析

目的对临床表现或肝胆检查可疑进行实验室检测，以确诊肝吸虫病。方法对广东省各大医院送检的可疑肝吸虫病人进行ELISA血清学检测及其部分阳性作粪便检查的结果对照。结果疑似肝吸虫病的ELISA阳性率为52.32％，ELISA阳性与粪检阳性对照符合率达97．10％。结论在可疑肝吸虫病人中，有50％以上为抗体阳性，表明对临床可疑患进行肝吸虫病的实验室检测是必要的。     

套式/多重PCR检测疟疾感染的应用研究

目的了解标签引物-套式/多重PCR技术在检测疟疾感染中的现场应用价值。方法随机采取我省疟疾流行区有发热症状的居民及家庭成员的耳垂血79份,同时制作厚血片和滤纸血样本各1份,用标签引物-套式/多重PCR检测所采集滤纸血样本中的疟原虫,并与镜检法进行比较。结果79份样本中,用标签引物-套式/多重PCR技术检出间日疟原虫阳性6例,镜检初检出10例间日疟原虫阳性,经复查血片后有4例排除了疟疾感染。镜检复核阳性的6例样本PCR均为阳性。以镜检复核为标准,两法阳性和阴性符合率为100%。结论标签引物-套式/多重PCR检测疟疾感染具高度敏感性和特异性,对疟疾鉴别诊断和明确诊断具有重要价值。     

心肌肌钙蛋白I酶联荧光免疫定量检测方法的方法学评价

目的初步评价心肌肌钙蛋白I(cTnI)的酶联荧光免疫定量测定方法的临床应用性能。方法依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)颁布的《定量临床检验方法的初步评价;批准指南(EP10-A)》提供的方法,按特定的顺序连续5d测定高、中、低浓度标准品中的cTnI,对MINIVIDAS测定cTnI的方法进行初步评价。结果当标准品中的cTnI浓度为0.602μg/L、7.911μg/L、15.22μg/L时,cTnI测定的回归方程为Y=1.02X-0.12,相关系数r2=0.9999;绝对偏差分别是-0.06μg/L、-0.09μg/L、0.18μg/L;总不精密度分别是7.22%、2.17%、1.62%。结论MINIVIDAS酶联荧光免疫定量测定cTnI方法的检测性能符合临床应用要求。     

剖宫产术后子宫瘢痕妊娠的诊治方法初步研究

目的：探讨剖宫产术后子宫瘢痕妊娠的诊治方法和疗效。方法随机选取2013年1月—2016年1月该院剖宫产术后子宫瘢痕妊娠患者20例,随机分组,A组注射甲氨蝶呤+清宫术治疗,B组注射甲氨蝶呤+宫腔镜手术治疗。结果跟A组总有效率70.00%比较,B组总有效率明显较高,达到90.00%,经χ2检验行统计学处理显示治疗效果差异有统计学意义(P<0.05)。跟A组(62.51±6.38)d、(33.52±4.38)d比较,B组月经恢复时间(39.56±6.34)d、血β-HCG恢复时间(15.52±1.36)d明显较短,经t检验行统计学处理显示月经恢复时间、血β-HCG恢复时间差异有统计学意义(P<0.05)。结论剖宫产术后子宫瘢痕妊娠注射甲氨蝶呤+宫腔镜手术治疗效果确切,值得推广。     

外周血PCR和ELISA方法早期诊断婴幼儿Cpn感染

目的探讨婴幼儿肺炎衣原体（Cpn）感染的早期诊断。方法呼吸道感染婴幼儿110例，采用荧光定量PCR（FQ-PcR）技术检测外周血单核细胞Cpn DNA，用ELISA法检测血浆肺炎衣原体IgM抗体。结果110例呼吸系统感染患儿中，PCR和ELISA同时阳性18例，PCR单独阳性15例，IgM单独阳性2例，总计35例，阳性率31．8％。FQ-PCR和ELISA法结果间差异有统计学意义（X^2=4，2007，P〈0．05）。结论肺炎衣原体是婴幼儿呼吸道感染的重要病原之一，FQ-PCR可快速、敏感、准确地定量检测外周血CPDNA载量，直接了解肺炎衣原体在患儿体内感染和复制情况。     

猴腺病毒(SAdV)PCR检测方法的建立及初步应用

目的建立SAdV特异的PCR检测方法并研究实验猴群和猴源性生物制品中SAdV感染或污染情况。方法比对分析多株SAdV序列,设计SAdV特异引物,优化PCR实验条件,建立的PCR方法经验证后检测实验猴群和猴源性生物制品,阳性产物测序并构建进化树。结果经特异性和敏感性鉴定,在设计的5对引物中确定一对最佳引物,可以区分SAdV和MAD,ICH,CELO且可以检测到的最小DNA量为47.9 pg/mL。PCR方法检测实验猴群,阳性率49.2%,测序及进化分析表明,SAdV感染型别呈广泛基因多样性。主要分布在G亚属和以SAdV-49为代表的分支。结论经测序验证,PCR检测方法具有很好准确性,初步应用表明我国实验猴群中SAdV高度流行,应加强实验猴群及相关生物制品中SAdV的监测,避免人类感染SAdV的潜在风险。     

脑脊液浆细胞检查对CNS感染诊断价值初步探讨

对80例四类中枢神经系统(CNS)感染病人之脑脊液(CSF)中浆细胞计数结果进行了对比分析。该80例病患中,计脑囊虫病(CC)13例,结核性脑膜炎(TBM)23例,病毒性脑膜炎(VM)19例,以及化脓性脑膜炎(PM)25例。浆细胞由B淋巴细胞分化而来,亦称抗体形成细胞(AFC)。各CSF标本中,凡发现有浆细胞者均定为阳性。CC病例组与其他三组相比,CSF的浆细胞阳性率和CSF白细胞中的浆细胞％构成(X)均显著为高;具有最高％构成的一例达31％(可是,其CSF嗜酸性粒细胞％构成仅3％)。至于TBM病例组,仅CSF浆细胞阳性率明显高于VM组和PM组者,其CSF白细胞中的浆细胞％构成(X)与VM组(PM组)者之差异均不显著。从80名病例中随机选出的12个CSF浆细胞阳性标本,它们各各的白细胞中浆细胞％构成与嗜中性粒细胞％构成之间尚无明显的负相关(r=-0.479)。