MTT法分析培养成骨细胞的存活和增殖能力

用ＭＴＴ法测定离体培养的成骨细胞存活与增殖能力。并观察１３７Ｃｓγ线对成骨细胞生长的影响。细胞接受０、３、６、９、１２Ｇｙ照射，培养至第７天，增殖率分别为４１６、３３６、２７５、１４７、１０８％。结果表明：１３７ＣＳγ线剂量高于３Ｇｙ成骨细胞增殖受到显著抑制，９Ｇｙ以上，则基本抑制其增殖。     

MTT法分析培养成骨细胞的存活和增殖能力

用ＭＴＴ法测定离体培养的成骨细胞存活与增殖能力。并观察＾１３７Ｃｓγ线对成骨细胞生长的影响。细胞接受０、３、６、９、１２Ｇｙ照射，培养至第７天，增殖率分别为４１６、３３６、２７５、１４７、１０８％。结果表明：＾１３７Ｃｓγ线剂量高于３Ｇｙ成骨细胞增殖受到显著抑制，９Ｇｙ以上，则基本抑制其增殖。     

血小板衍生生长因子刺激鼠成骨细胞内Ca^2＋浓度变化的实？…

观察血小板衍生长因子等生长因子对鼠成骨细胞内Ｃａ＾＋浓度变化的影响。方法酶消化法体外分离培养胎鼠成骨细胞,应用ＡＣＡＳ检测成骨细胞内Ｃａ＾２＋浓度的变化。结果ＰＤＧＦ可促进成骨细胞内Ｃａ＾２＋浓度的瞬时增加;ＰＤＧＦ与ＢＭＰ、ＴＧＦ－β联合应用对成骨细胞Ｃａ＾２＋浓度升高有协同作用;ＡＣＡＳ能准确测量胞内Ｃａ＾２＋浓度的动态变化,结论ＰＤＧＦ可促进成骨细胞Ｃａ＾２＋浓度的增加,且与ＢＭＰ,ＴＧＦ－     

血小板衍生生长因子刺激鼠成骨细胞内Ca~(2十)浓度变化的实验研究

目的观察血小板衍生生长因子（PDGF）等生长因子对鼠成骨细胞内Ca2+脏度变化的影响。方法酶消化法体外分离培养胎儿鼠成骨细胞,应用ACAS检测成骨细胞内Ca2+脓度的变化。结果PDGF可促进成骨细胞内Ca2+脓度的瞬时增加;PDGF与BMP、TGF-β联合应用对成骨细胞Ca2+浓度升高有协同作用;ACAS能准确测量胞内Ca2+浓度的动态变化。结论PDGF可促进成骨细胞内Ca2+浓度的增加．且与BMP、TGF-β有协同效应。     

氟化物对乳鼠颅骨成骨细胞活性的影响

目的:建立大鼠颅骨成骨细胞体外培养技术,用一种新的试剂alamarBlueTM研究不同浓度氟化物对大鼠成骨细胞活力的影响.方法:应用酶消化法分离培养大鼠颅骨的成骨细胞;AlamarBlueTM摄入法检测细胞增殖.结果:100μmol/L～1 mmol/L氟化钠在体外可刺激细胞增殖,2 mmol/L以上氟化钠可抑制细胞增殖.结论:氟化物对大鼠颅骨成骨细胞的增殖具有双向作用,即低浓度促进,高浓度抑制.     

甲状旁腺素对鼠成骨细胞胶原合成的影响

成骨细胞作为骨组织中唯一具有甲状旁腺素受体（Illyl？H）的细胞，研究hP’FH不同作用方式下其胶原合成量的变化，可帮助阐明间歇性给予hPFH刺激骨形成的机制。一、材料与方法1.甲状旁腺激素受体、胶原酶11（美国Sign公司），达尔伯克必需基本培养基（DMEM）（美国GibeO公司），’H一脯氨酸（北京4OI原子能研究所），天狼猩红（英国MohayChend。al公司），其余试剂均为国产分析纯试剂。2.Wistar新生鼠成骨细胞原代培养及苦味酸天狼猩红染色：参照文献卜，2］进行。3.’H一脯氨酸掺人：消化1代末细胞，至24TL板使其为4X103／cd。…     

地塞米松对体外培养成骨细胞生长的影响

目的探讨地塞米松对体外培养成骨细胞生长的影响。方法采用新西兰大白鼠股骨骨髓单个核细胞行体外培养成骨细胞，根据加入成骨细胞培养液中相同浓度（1×10^-1mol／L）地塞米松的不同剂量将其分为20μl、30μl、40μl组，并设对照组（培养液中无地塞米松），分别采用倒置显微镜和瑞氏一姬姆萨染色、碱性磷酸酶染色、苏丹Ⅳ染色观察活细胞形态、数量及细胞内成分。结果地塞米松各组抑制细胞增生的作用显著优于对照组（P〈0．01）；对照组骨髓单个核细胞均可转变为成骨细胞，而地塞米松各组均可抑制骨髓单个核细胞向成骨细胞分化，并促使其脂肪变性，尤以30μl和40μl组最强。结论地塞米松可抑制体外培养的骨髓单个核细胞向成骨细胞转化，且作用与其剂量呈正相关。     

冲击波对体外培养的鼠成骨细胞增殖分化的影响

目的：探讨冲击波对体外培养的鼠成骨细胞的增殖及分化能力的影响。方法：将原代培养的成骨细胞随机分成冲击波组和对照组,用不同能量（5、10、15、20 kV）冲击波处理后接种于96孔培养板,根据细胞存活率和增殖情况确定最佳的冲击波能量值。将传4代成骨细胞用冲击波处理后,用CCK-8法、细胞分泌碱性磷酸酶试剂盒、茜素红染色对两组细胞增殖及分化进行测定。结果：冲击波处理体外原代培养成骨细胞的最佳能量值为10 kV（500次）,CCK-8法检测显示,冲击波组细胞增殖速度快于对照组（P〈0.001）,细胞分泌碱性磷酸酶高于对照组（P〈0.001）,茜素红染色显示,冲击波组矿化结节面积明显大于对照组（P〈0.001）。结论：最佳能量冲击波可促进成骨细胞的增殖与分化。     

柠檬酸化硫酸钙对鼠成骨细胞增殖、分化的影响

目的:观察柠檬酸化硫酸钙对成骨细胞功能的影响,探讨该材料作为骨移植替代材料的可行性。方法:采用体外培养成骨细胞的方法,观察材料浸提液对成骨细胞增殖、碱性磷酸酶和骨钙素分泌能力的影响。结果:在100%浓度柠檬酸化硫酸钙浸提液中培养的成骨细胞增殖相对缓慢(但相对增殖率>90%),其细胞核内嗜银蛋白颗粒染色分析与对照组无显著性差异(P>0.05),其分泌骨钙素、碱性磷酸酶能力显著高于对照组(P<0.01)。结论:柠檬酸化硫酸钙对成骨细胞不具有细胞毒性作用,随着硫酸钙的溶解,在材料植入部位的局部形成高钙环境,这有利于成骨细胞的增殖和分化促进新骨的形成。     

MTT法检测重组人内抑素对人内皮细胞增殖的影响

目的探讨观察重组人内抑素对人血管内皮细胞增殖影响的方法.方法采用MTT法观察不同浓度重组人胎儿内抑素是否对碱性成纤维细胞生长因子刺激的人血管内皮细胞系ECV增殖产生抑制作用.结果 MTT法分析显示细胞活力与光密度改变之间存在线性关系,重组人内抑素可抑制胎儿血管内皮细胞ECV的增殖,半数抑制浓度约为3.50 mg*L-1.结论 MTT法检测重组人内抑素对人血管内皮细胞增殖的抑制作用准确可靠、操作简便.     

MTT法检测氧化石墨烯的细胞毒性

目的研究丝素一氧化石墨烯复合膜（SF-GO）的细胞毒性。方法采用MTY比色法检测含有不同浓度氧化石墨烯（0．1wt％、0．2wt％、0．5wt％、1．0wt％）制成的丝素一氧化石墨烯复合膜在不同时期（1d、3d、5d、7d）对小鼠成纤维细胞L929细胞相对增殖率（RGR）的影响;通过透射电镜观察各组细胞的形态,最终评价丝素一氧化石墨烯复合膜的细胞毒性。结果随着氧化石墨烯浓度的增加,细胞毒性在不断增加（P〈0．01）;随着测定天数的增加,氧化石墨烯的细胞毒性虽减小,但无统计学意义,且各组总体趋势均在减小;通过透射电镜照片可见各组细胞形态基本正常,细胞生长良好,为长梭形或卵圆形,并可见圆形分裂细胞,细胞折光性强。结论氧化石墨烯浓度≤1wt％时无明显细胞毒性。     

MTT法检测乳腺癌细胞对化疗药物敏感性的研究

目的：探讨3-（4,5）-2-噻唑-（2,5）-二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）药敏试验在指导临床乳腺癌化疗中的作用。方法：应用MTT法检测50例乳腺癌新鲜标本肿瘤细胞对10种化疗药物的敏感度。结果：对乳腺癌细胞抑制率强的药物为PTX、NVB、VP-16、5-FU、DDP,对乳腺癌细胞抑制率较弱的化疗药物为VCR、ADM、MTX、MMC、HCPT。结论：MTT体外药敏试验对指导临床乳腺癌个体化治疗具有重要意义。     

四甲基偶氮唑盐法用于非小细胞肺癌药敏试验条件的筛选

目的筛选非小细胞肺癌药敏试验的条件。方法取25例非小细胞肺癌患者的瘤细胞,用四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察9种化疗药物,在不同浓度、不同时间对瘤细胞的敏感性。结果9种化疗药物对瘤细胞的敏感性,有随着药物浓度的增加、作用时间的延长而增高的趋势,但每个药物都有各自的特点。结论非小细胞肺癌细胞MTT法药敏试验的浓度应为临床用药量的计算值,药物作用时间应以48h为宜。     

ATP生物发光法与MTT法检测卵巢癌体外化疗敏感性的比较

目的比较ATh法与MTT（四唑蓝）法对卵巢癌细胞体外化疗敏感性的预测价值。方法分别以ATP法和MTF法检测5种化疗药物对卵巢癌3AO细胞株的抑制作用。结果（1）ATP法与MTT法相关性良好（r＝0．9031）。（2）ATP法更加灵敏、稳定。ATP法在80个细胞时即可测出发光强度的改变;而MTT法细胞数达300时才能测出OD值变化。试验所需细胞浓度,ATP法与MTT法分别为1×104－5×104个／ml和1×106-5×106个／ml,ATP法比MTT法低得多。结论ATP法作为检测卵巢癌细胞体外化疗敏感性的手段优于MTT法。     

胃癌细胞MTT法药敏试验的研究

目的：筛选对胃癌有效的药物,为临床合理用药提供依据。方法用四氮唑蓝快速比色法（MTT法）对人胃癌BGC-823细胞和胃癌实体瘤细胞进行7种化疗药物敏感性试验．结果7种化疗药物对BGC－823细胞和实体瘤细胞的生长均有一定的抑制作用．其敏感性顺序为DDP＞MMC＞ADM＞VP－16＞5－Fu＞Ara－C＞VCR,但不同个体的药物敏感性有所差异。结论在胃癌药敏试验中．MTT法能筛选有效的化疗药物,合理设计化疗方案,为临床化疗个体化用药提供客观依据。     

心肌细胞培养方法和活细胞噻唑兰法测定

目的:介绍心肌细胞培养方法和研究比色分析法测定活心肌细胞.方法:接种不同数量细胞培养后行噻唑兰(MTT)比色分析;正常培养、含不同浓度维拉帕米培养的细胞行MTT代谢比色分析,并测乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果:比色值与接种细胞数量、细胞释放的LDH活性呈高度相关(r=0.996、-0.986,P<0.01).结论:MTT比色分析法可用于测定活心肌细胞.     

MTT比色分析法检测卵巢癌药物敏感性

目的:探讨四氮唑蓝比色分析法(MTT法)用于指导临床个体化化疗药物选择的实用性,为卵巢癌临床化疗用药提供参考.方法:采用常用的12种化疗药物对65例卵巢癌进行MTT法药物敏感试验.结果:不同类型的卵巢癌及同一类型的不同个体对化疗药物的敏感性差异较大.卵巢癌对紫杉醇、表阿霉素、卡铂和顺铂中度敏感,平均抑制率分别为(67.3±4.6)%、(54.5±4.8)%、(52.0±4.3)%和(50.8±4.5)%;对鬼臼乙叉甙、烃基喜树碱和长春地新低度敏感,平均抑制率分别为(39.6±3.8)%、(39.3±4.3)%和(30.7±2.6)%;而对丝裂霉素C、噻替哌、5氟尿嘧啶、长春新碱和氨甲喋呤则耐药,平均抑制率均小于30%.结论:卵巢癌化疗敏感性个体差异较大.MTT法是一种简便而快速的肿瘤体外药物敏感实验方法,可为卵巢癌临床个体化化疗方案的选择提供客观依据.     

苯海拉明等有机胺类约物干扰MTT还原法的应用

目的:探讨苯海拉明等有机胺类药物对MTT还原法测定细胞活性准确性的影响.方法:采用原代新生大鼠皮层星形胶质细胞模型,以不同浓度的苯海拉明等有机胺类药物分别作用于星形胶质细胞24 h,以形态学观察、Hoechst 33342和PI核荧光双染法对比MTT染色结果.分析苯海拉明等对MTT还原法应用的影响.结果:苯海拉明(10-4 mol/L)、吡拉明(10-4 mol/L)和卓兰替丁(10-3 mol/L)作用于星形胶质细胞能显著增加甲瓒的生成,而核荧光双染法显示,这时星形胶质细胞的增殖和凋亡以及坏死情况并没有发生显著性改变.通过显微镜形态学观察发现,苯海拉明(10-4 moL/L)能显著减少星形胶质细胞膜上的针状晶体--甲瓒.结论:苯海拉明等有机胺类药物通过抑制甲瓒外排而促进胞内MTT被大量还原,从而影响MTT还原法测定细胞活性的准确性.     

MTT法检测非小细胞肺癌对紫杉醇的敏感性

目的 探讨四氮唑蓝比色分析法（MTT法）用于指导临床个体化化疗药物选择的实用性,为非小细胞肺癌临床化疗用药提供参考.方法 培养肺癌A549细胞,加入不同浓度的紫杉醇,作用24、48、72、96 h,用MTT法计算细胞生长抑制率,测定其对肿瘤细胞的体外敏感性.结果 不同浓度的紫杉醇对A549细胞的生长均有一定的抑制作用,且呈剂量依赖性和时间依赖性.结论 MTT法检测有助于指导临床选择化疗药物剂量,提高化疗效果,减少毒副作用,为非小细胞肺癌临床个体化化疗方案的选择提供客观依据.