二肽基肽酶-4通过CXCR4/mTOR信号通路介导小鼠肺泡巨噬细胞MH-S自噬的机制研究

目的 探究二肽基肽酶-4（DPP-4）通过趋化因子受体4（CXCR4）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路介导小鼠肺泡巨噬细胞MH-S自噬的机制。方法 体外培养小鼠肺泡巨噬细胞MH-S并分组转染。分别设置PBS组（PBS培养MH-S细胞）、LPS组（100 ng/mL LPS诱导24 h）、DPP-4组（DPP-4表达病毒转染）、si-DPP-4组（si-DPP-4病毒载体转染）、DPP-4 + BafA1组（DPP-4表达病毒转染+自噬抑制剂BafA1干预）及si-DPP-4 + BafA1组（si-DPP-4病毒载体转染+自噬抑制剂BafA1干预）。绿色荧光蛋白（GFP）检测转染效率，稳定转染后，酶联免疫吸附试验检测MH-S细胞上清液炎症因子水平，腺病毒检测MH-S细胞自噬流变化，实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞DPP-4、CXCR4、mTOR mRNA的表达，Western blottig检测CXCR4/mTOR通路蛋白的表达。结果 LPS组IL-1β、IL-6、TNF-α、GFP、RPF、Merge数量，CXCR4 mRNA、mTOR mRNA和CXCR4蛋白、p-mTOR/mTOR蛋白相对表达量高于PBS组（P <0.05）；DPP-4组与LPS组IL-1β、IL-6及TNF-α水平比较，差异无统计学意义（P >0.05）；DPP-4组GFP、RPF、Merge数量，DPP-4 mRNA相对表达量高于LPS组（P <0.05），CXCR4 mRNA、mTOR mRNA、CXCR4蛋白、p-mTOR/mTOR蛋白相对表达量低于LPS组（P <0.05）；si-DPP-4组IL-1β、IL-6、TNF-α水平高于LPS组（P <0.05），GFP、RPF及MergeMerge数量低于LPS组（P <0.05）；si-DPP-4组和DPP-4 + BafA1组IL-1β、IL-6、TNF-α水平、CXCR4蛋白、p-mTOR/mTOR蛋白相对表达量高于DPP-4组（P <0.05），GFP、RPF及Merge数量低于DPP-4组（P <0.05）；si-DPP-4组DPP-4 mRNA相对表达量低于DPP-4组（P <0.05），CXCR4 mRNA、mTOR mRNA相对表达量高于DPP-4组（P <0.05）；si-DPP-4 + BafA1组IL-1β、IL-6水平、CXCR4 mRNA、mTOR mRNA、CXCR4蛋白、p-mTOR/mTOR蛋白相对表达量高于si-DPP-4组（P <0.05），GFP、RPF、Merge数量低于si-DPP-4组（P <0.05）。结论 DPP-4能够调节小鼠肺巨噬细胞自噬作用，调控炎症反应，其作用机制可能与CXCR4/mTOR通路有关。     

干扰素诱导蛋白16在胎膜早破孕妇血清、胎盘组织中的表达及其意义

目的 研究孕妇血清、胎盘组织中γ干扰素诱导蛋白16（IFI16）表达水平与胎膜早破（PROM）的关系，为感染性PROM的早期诊断提供参考。方法 选取2019年9月—2020年9月徐州医科大学附属徐州妇幼保健院收治的PROM手术终止妊娠孕妇60例作为研究组。依据孕周将研究组分为足月PROM组［（38.16±1.47）周］和未足月PROM组［（34.87±2.05）周］，各30例。选取同期该院足月正常剖宫产的产妇30例作为对照组。对比3组胎盘组织IFI16表达情况，IFI16 mRNA、Caspase-1 mRNA表达水平及孕妇血清IFI16、炎症因子［白细胞介素-6（IL-6）、IL-1β］水平。结果 足月PROM组、未足月PROM组IFI16蛋白阳性率高于对照组（P <0.05），足月PROM组与未足月PROM组IFI16蛋白阳性率比较，差异无统计学意义（P >0.05）。未足月PROM组、足月PROM组胎盘组织IFI16 mRNA、Caspase-1 mRNA相对表达量较对照组高（P <0.05）。未足月PROM组、足月PROM组血清IFI16、IL-6、IL-1β水平较对照组高（P <0.05）。结论 IFI16在孕妇血清及胎盘组织中升高可能与PROM孕妇的炎症反应有关，IFI16水平升高对PROM炎症反应可能有预测意义。     

胆道闭锁患儿血清microRNA-21水平的表达及与肝纤维化的相关性分析

目的 探讨胆道闭锁患儿血清microRNA-21（miR-21）水平的表达及与肝纤维化的相关性。方法 选取2017年7月—2019年7月河北省儿童医院收治的先天性胆道闭锁患儿76例作为胆道闭锁组，同期在该院进行体检的健康婴幼儿50例作为正常对照组。采用qRT-PCR法检测研究对象血清miR-21 mRNA相对表达量，进一步根据胆道闭锁组的miR-21 mRNA相对表达量中位数将其分为高miR-21组和低miR-21组，每组38例。比较不同miR-21 mRNA相对表达量胆道闭锁患儿的血清总胆红素水平、肝组织纤维化评分及天冬氨酸转氨酶与血小板比值（APRI）、血清肝纤维化指标［层粘连蛋白（LN）、透明质酸酶（HA）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-Col）］水平、肝脏组织上皮-间质细胞转化（EMT）相关分子［E-cadherin、ZEB1］水平的差异。分析胆道闭锁患儿血清miR-21与肝纤维化的相关性。结果 高miR-21组、低miR-21组、正常对照组血清miR-21 mRNA相对表达量和总胆红素水平比较，差异有统计学意义（P <0.05），高miR-21组血清miR-21 mRNA相对表达量和总胆红素水平高于低miR-21组；低miR-21组miR-21 mRNA相对表达量和总胆红素水平高于正常对照组。高miR-21组肝组织纤维化评分、APRI、LN、HIA、PCⅢ、Ⅳ-Col水平高于低miR-21组（P <0.05）。高miR-21组肝脏组织E-cadherin mRNA相对表达量低于低miR-21组（P <0.05）；ZEB1 mRNA相对表达量高于低miR-21组（P <0.05）。Pearson相关分析发现，胆道闭锁患儿血清miR-21水平与血清总胆红素水平、肝组织纤维化评分、APRI呈正相关（r =0.546、0.669和0.578，均P <0.05）；与肝纤维化指标LN、HA、PCⅢ、Ⅳ-Col的水平呈正相关（r =0.781、0.663、0.503和0.628，均P <0.05）；与E-cadherin mRNA相对表达量呈负相关（r =-0.614，P <0.05），与ZEB1 mRNA相对表达量呈正相关（r =0.607，P <0.05）。结论 高表达的miR-21可能参与胆道闭锁患儿肝纤维化过程，可能与其促进EMT的作用相关。     

妊娠糖尿病患者血清microRNA-21调节Bcl-2/Caspase-9对滋养层细胞生物学行为的影响

目的 探讨妊娠糖尿病（GDM）患者血清microRNA-21（miR-21）表达变化及其对滋养层细胞生物学行为的作用机制。方法 选取2019年1月—2020年10月三亚市妇幼保健院收治的66例GDM孕妇及同期体检且孕周相近的38例健康孕妇作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测血清miR-21 mRNA表达水平,microRNA转染JAR细胞系构建Control、miR-21 NC、miR-21、miR-21 inhibitor NC和miR-21 inhibitor组细胞。采用CCK-8法检测细胞活力,Brdu检测细胞增殖,Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭,TUNEL法检测细胞凋亡;采用Western blotting检测Bcl-2、Bax、Cleaved-Caspase 9、E-cadherin及Vimentin蛋白表达。结果 研究组患者miR-21 mRNA相对表达量及FPG、HbA1c水平较对照组高（P <0.05）。miR-21组细胞miR-21 mRNA相对表达量高于Control组（P <0.05）,miR-21 inhibitor组细胞 mRNA相对表达量低于Control组（P <0.05）。CCK-8法检测结果显示,miR-21组细胞活力较Control组下调（P <0.05）,miR-21 inhibitor组细胞活力较Control组上升（P <0.05）。miR-21组细胞增殖能力较Control组减弱（P <0.05）,miR-21 inhibitor组细胞增殖能力较Control组增强（P <0.05）。miR-21组细胞凋亡率较Control组升高（P <0.05）,miR-21 inhibitor组细胞凋亡率较Control组降低（P <0.05）。miR-21组的穿膜细胞数低于Control组（P <0.05）,miR-21 inhibitor组的穿膜细胞数高于Control组（P <0.05）。相较于Control组,miR-21组E-cadherin表达上调,Vimentin表达下调（P <0.05）,miR-21 inhibitor组E-cadherin表达下调,Vimentin表达上调（P <0.05）。相较于Control组,miR-21组Cleaved Caspased-9、Bax蛋白相对表达量上升,Bcl-2蛋白相对表达量下降（P <0.05）;miR-21 inhibitor组Caspased-9、Bax蛋白相对表达量下降,Bcl-2蛋白相对表达量上升（P <0.05）。结论 GDM孕妇存在miR-21高表达,miR-21可通过调节Bcl-2/Caspase-9介导对滋养层细胞增殖、侵袭的抑制作用,继而促进细胞凋亡。     

丙泊酚后处理对离体培养胎鼠海马神经元凋亡及cPKCγ/GAP-43信号通路的影响

目的 探究丙泊酚后处理对离体胎鼠海马神经元凋亡及经典型蛋白激酶Cγ（cPKCγ）/生长相关蛋白-43（GAP-43）信号通路的影响。方法 取培养7 d的胎鼠海马神经元，随机分为对照组、缺氧组、丙泊酚组。缺氧组和丙泊酚组于90% NO₂+10% CO₂的无氧培养箱中缺氧处理30 min。丙泊酚组在缺氧处理后立即加入终浓度为50 μmol/L的丙泊酚新培养基，对照组和缺氧组换等体积的新培养基孵育2 h。采用MTT法检测神经元存活率，流式细胞仪检测神经元凋亡率，比色法检测神经元超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量，实时荧光定量聚合酶链反应、Western blotting检测cPKCγ、GAP-43 mRNA和蛋白的表达。结果 免疫组织化学染色结果显示，培养7 d的海马神经元胞质饱满，状态良好。与对照组比较，缺氧组和丙泊酚组海马神经元存活率、SOD活性降低（P <0.05），凋亡率升高（P <0.05），MDA含量增加（P <0.05）；与缺氧组相比，丙泊酚组海马神经元存活率、SOD活性升高（P <0.05），凋亡率降低（P <0.05），MDA含量减少（P <0.05）。与对照组比较，缺氧组和丙泊酚组海马神经元cPKCγ、GAP-43 mRNA和蛋白相对表达量降低（P <0.05）；与缺氧组比较，丙泊酚组海马神经元cPKCγ、GAP-43 mRNA和蛋白相对表达量升高（P <0.05）。结论 缺氧的胎鼠海马神经元经丙泊酚后处理后可以增加神经元抗氧化应激水平，降低神经元凋亡率，其保护作用可能与激活cPKCγ/GAP-43信号通路有关。     

MicroRNA-196b、IGFBP-3在非小细胞肺癌组织中的表达及与预后关系

目的 探究microRNA-196b（miR-196b）、胰岛素样生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及与预后的关系。方法 选取2020年4月—2022年4月在无锡市第二人民医院手术治疗的NSCLC患者78例。收集患者的病历资料,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织、癌旁组织中miR-196b、IGFBP-3的表达。所有患者随访12个月,根据预后结局分为进展组、稳定组。筛查NSCLC患者预后的影响因素,评估组织中miR-196b、IGFBP-3表达对NSCLC患者预后的预测效能。分析癌组织中miR-196b、IGFBP-3不同表达患者生存曲线的差异。结果 进展组临床分期Ⅲ期占比、术前淋巴结转移率均高于稳定组（P <0.05）。进展组癌组织miR-196b相对表达量高于稳定组（P <0.05）,IGFBP-3阳性表达率低于稳定组（P <0.05）。癌组织miR-196b相对表达量高于癌旁组织（P <0.05）,IGFBP-3阳性表达率低于癌旁组织（P <0.05）。多因素逐步Logistic回归分析结果显示：临床分期［O^R=3.684（95% CI：1.259,10.778）］、术前淋巴结转移［O^R=3.557（95% CI：1.216,10.408）］、癌组织miR-196b表达［O^R=3.979（95% CI：1.359,11.641）］是NSCLC患者预后的危险因素（P <0.05）,癌组织IGFBP-3表达阳性［O^R=0.220（95% CI：0.075,0.642）］是NSCLC患者预后的保护因素（P <0.05）。癌组织miR-196b、IGFBP-3及联合预测NSCLC患者预后的敏感性分别为66.25%（95% CI：0.512,0.797）、60.00%（95% CI：0.496,0.781）、87.50%（95% CI：0.725,0.963）,特异性分别为69.74%（95% CI：0.534,0.825）、76.32%（95% CI：0.603,0.892）、72.37%（95% CI：0.576,0.861）,曲线下面积分别为0.703、0.680、0.805。miR-196b低表达组生存情况优于高表达组（P <0.05）。IGFBP-3阳性表达组生存情况优于阴性表达组（P <0.05）。结论 NSCLC患者癌组织miR-196b、IGFBP-3表达与预后相关,且联合预测NSCLC患者预后效能良好。     

右美托咪定对脓毒症小鼠认知功能及HSP70表达的影响

目的 探讨右美托咪定（Dex）对脓毒症小鼠认知功能及热休克蛋白70（HSP70）表达的影响，为其脑保护机制的研究提供参考。方法 将80只C57BL/6小鼠随机分为对照组（CON组）、单纯Dex组（Dex组）、脓毒血症组（LPS组）和Dex +脓毒血症组（D + L组），每组20只。首先，Dex组和D + L组腹腔注射Dex 25 μg/kg，CON组和LPS组腹腔注射等剂量的生理盐水；30 min后LPS组和D + L组腹腔注射5 mg/kg脂多糖（LPS）复制脓毒血症模型，CON组和Dex组腹腔注射等剂量的生理盐水。采用Morris水迷宫实验评估小鼠学习记忆能力，酶联免疫吸附试验检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）水平，化学比色法检测海马组织过氧化物歧化酶（SOD）活性和谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）水平，苏木精-伊红染色观察海马CA1区病理变化，免疫组织化学染色和实时荧光定量聚合酶链反应检测海马HSP70蛋白、mRNA表达。结果 各组小鼠第1、2、3、4、5天逃避潜伏期比较，经重复测量设计的方差分析，结果 ①不同时间点的逃避潜伏期比较，差异有统计学意义（P <0.05）；②各组小鼠的逃避潜伏期比较，差异有统计学意义（P <0.05），LPS组较CON组延长，D + L组较LPS组缩短；③各组小鼠逃避潜伏期变化趋势比较，差异有统计学意义（P <0.05）。各组小鼠游泳速度比较，差异无统计学意义（P >0.05）。LPS组目标象限停留时间短于CON组（P <0.05），D + L组长于LPS组（P <0.05）；LPS组穿越平台次数少于CON组（P <0.05）；D + L组多于LPS组（P <0.05）。LPS组血清TNF-α、IL-1β水平较CON组升高（P <0.05），D + L组较LPS组降低（P <0.05）。LPS组GSH、SOD水平较CON组降低（P <0.05），MDA水平较CON组升高（P <0.05），D + L组GSH、SOD水平较LPS组升高（P <0.05），MDA水平较LPS组下降（P <0.05）。LPS组HSP70蛋白阳性表达率较CON组升高（P <0.05），D + L组较LPS组升高（P <0.05），Dex组与CON组比较，差异无统计学意义（P >0.05）。LPS组HSP70 mRNA相对表达量较CON组升高（P <0.05），D + L组较LPS组升高（P <0.05）；Dex组与CON组比较，差异无统计学意义（P >0.05）。结论 Dex能够降低脓毒症小鼠体内炎症和氧化应激水平，改善认知功能，其机制可能与上调HSP70表达有关。     

基于microRNA-92a-3p靶向SIRT1调控氧糖剥夺再灌注诱导脑微血管内皮细胞炎症反应的作用机制研究

目的 探讨基于microRNA-92a-3p（miR-92a-3p）靶向调控SIRT1氧糖剥夺再灌注（OGD/R）诱导小鼠脑微血管内皮细胞（bEnd.3）炎症反应的作用机制。方法 实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）测定miR-92a-3p、SIRT1、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）mRNA的表达；Western blotting明确SIRT1、核转录因子-κB（NF-κB）p65、磷酸化NF-κB（p-NF-κB）p65、TNF-α和IL-1β蛋白的表达；双荧光素酶报告基因验证miR-92a-3p与SIRT1靶向关系；划痕实验检测bEnd.3细胞的迁移能力。结果 OGD/R组miR-92a-3p相对表达量较对照组升高（P <0.05）。M_SIRT1 WT+mimics+TK组荧光素酶活性较M_SIRT1 WT+mimics NC+TK组低（P <0.05）。OGD/R组SIRT1蛋白和mRNA相对表达量较对照组降低（P <0.05），OGD+92a抑制剂组较OGD+92a抑制剂内参组升高（P <0.05）。miR-92a-3p模拟物组NF-κBp65/p-NF-κBp65蛋白较模拟物内参组高，SIRT1蛋白和mRNA表达较模拟物内参组低（P <0.05）。miR-92a-3p模拟物组IL-1β、TNF-α蛋白和mRNA相对表达量较模拟物内参组高（P <0.05）。miR-92a-3p模拟物组伤口愈合率较模拟物内参组低（P <0.05）。结论 miR-92a-3p通过靶向抑制SIRT1表达，促进OGD/R诱导的脑微血管内皮细胞炎症反应。     

血清LncRNA PVT1、LncRNA H19表达与前列腺癌患者术后复发转移的关系

目的 探讨血清长链非编码RNA（LncRNA）浆细胞瘤可变易位基因1（PVT1）、LncRNA H19表达与前列腺癌患者术后复发转移的关系。方法 选取2016年5月—2018年5月南京医科大学附属常州市第二人民医院收治的169例前列腺癌患者作为前列腺癌组,统计患者术后3年复发转移率。另选取同期该院健康体检者74例作为对照组。qRT-PCR检测血清LncRNA PVT1、LncRNA H19表达。多因素Cox回归分析前列腺癌患者术后复发转移影响因素。ROC曲线分析血清LncRNA PVT1、LncRNA H19表达对前列腺癌患者术后复发转移的预测价值。结果 前列腺癌组血清LncRNA PVT1、LncRNA H19相对表达量高于对照组（P <0.05）。复发转移组与未复发转移组TNM分期、Gleason评分、PSA、LncRNA PVT1、LncRNA H19表达比较,差异有统计学意义（P <0.05）,两组年龄、病理类型、肿瘤直径、分化程度比较差异无统计学意义（P >0.05）。多因素Cox回归分析结果显示,TNM分期Ⅲ期［O^R=3.722（95 CI：1.416,7.784）,P <0.05］、Gleason评分≥7分［O^R=4.626（95% CI：1.670,9.815）,P <0.05］、LncRNA PVT1［O^R=1.982（95 CI%：1.521,2.584）,P <0.05］、LncRNA H19［O^R=1.868（95% CI：1.327,2.630）,P <0.05］是前列腺癌患者术后复发转移的独立危险因素。联合血清LncRNA PVT1、LncRNA H19表达预测AUC大于单独预测。结论 前列腺癌患者血清LncRNA PVT1、LncRNA H19高表达,为术后复发转移的独立危险因素,可作为前列腺癌患者术后复发转移预测指标。     

星状神经节阻滞术对大鼠急性心肌梗死后炎症反应的影响

目的 探讨星状神经节阻滞术（SGB）对大鼠急性心肌梗死（AMI）后心肌细胞炎症的保护作用。方法 选取8周龄雄性SPF级Wistar大鼠60只,体重200～250 g,随机分为假手术组、AMI组和SGB组,每组20只。假手术组只打开胸腔暴露心脏,不结扎冠状动脉;AMI组结扎冠状动脉左前降支复制AMI模型;SGB组在AMI模型复制成功后行SGB。模型复制成功后1周采集各组大鼠血清及心脏组织,qRT-PCR检测各组大鼠心肌组织中炎症因子（IL-6、IL-1β及TNF-α）mRNA;酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清中炎症因子（IL-6、IL-1β及TNF-α）,全自动生化分析仪检测各组大鼠血清中心肌酶（AST、LDH和CK-MB）。结果 各组大鼠心肌组织中炎症因子IL-6、IL-1β及TNF-α mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义（P <0.05）,SGB组IL-6、IL-1β及TNF-α mRNA的相对表达量均较AMI组降低（P <0.05）。各组大鼠血清中炎症因子IL-6、IL-1β及TNF-α表达水平比较,差异有统计学意义（P <0.05）,AMI组、SGB组IL-6、IL-1β及TNF-α表达水平较假手术组升高（P <0.05）,SGB组IL-6、IL-1β及TNF-α表达水平较AMI组降低（P <0.05）。各组大鼠血清AST、LDH及CK-MB表达水平比较,差异有统计学意义（P <0.05）,AMI组、SGB组AST、LDH及CK-MB表达水平较假手术组升高（P <0.05）,SGB组AST、LDH和CK-MB表达水平较AMI组降低（P <0.05）。结论 SGB对大鼠AMI后心肌细胞炎症有一定的保护作用。     

子痫前期孕妇外周血NOX2和胎盘组织中NOX2、ROS的表达及其临床意义

目的 探讨子痫前期孕妇外周血、胎盘组织中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)及胎盘组织中活性氧（ROS）的表达及其临床意义。方法 选取2021年3月—2022年10月在徐州医科大学附属徐州妇幼保健院就诊的子痫前期孕妇60例，其中早发型子痫前期孕妇30例（早发组），晚发型子痫前期孕妇30例（晚发组），另取同期在该院就诊的健康孕妇30例作为对照（正常组）。检测各组外周血NOX2、胎盘组织中NOX2 mRNA相对表达量和ROS表达。结果 早发组外周血NOX2、胎盘组织NOX2阳性表达率、NOX2mRNA相对表达量、ROS阳性表达率均高于对照组和晚发组（P <0.0125）；晚发组与对照组外周血NOX2、胎盘组织NOX2阳性表达率、NOX2 mRNA相对表达量、ROS阳性表达率比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。早发组≥30岁孕妇外周血NOX2高于<30岁孕妇（P <0.05）。早发组不同体质量指数、孕妇类型、严重程度孕妇外周血NOX2、胎盘组织NOX2阳性表达率、NOX2 mRNA相对表达量、ROS阳性表达率比较，差异均无统计学意义（P>0....     

妊娠糖尿病患者血清microRNA-873-5p、ZEB1与胰岛素抵抗、母婴结局的相关性研究

目的 探究妊娠糖尿病（GDM）患者血清microRNA-873-5p(miR-873-5p)、E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)与胰岛素抵抗、母婴结局的相关性。方法 选取连云港市第一人民医院2021年1月—2022年6月收治的137例GDM患者为研究组,另选取同期该院体检且一般资料与研究组患者相匹配的137例健康孕妇为对照组。实时荧光定量聚合酶链反应（q RT-PCR）检测两组研究对象血清miR-873-5p、ZEB1的表达;Pearson法分析GDM患者血清miR-873-5p、ZEB1与胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）的相关性;多因素一般Logistic回归分析影响GDM患者母婴结局的相关因素;绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析miR-873-5p、ZEB1对GDM患者母婴不良结局的预测效能。结果 研究组患者的空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）及HOMA-IR均高于对照组（P <0.05）;研究组患者血清miR-873-5p、ZEB1水平均高于对照组（P <0.05）;Pearson法分析结果显示,GDM患者血清miR-873-5p表达（r=0.754,P=0.0...     

黑色素瘤相关抗原A6在肝细胞癌中的表达及与预后的关系

目的 探讨黑色素瘤相关抗原A6(MAGEA6)在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及与预后的关系。方法 选取2013年2月—2016年10月海南省人民院收治入院的120例HCC患者为研究对象。分析受试者的年龄、性别、饮酒史、甲胎蛋白（AFP）、肿瘤直径、分化程度、TNM分期、肝功能Child-Pugh分级、淋巴结转移等临床资料。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测MAGEA6和AMPK mRNA的表达,免疫组织化学法检测MAGEA6蛋白的表达。根据肿瘤组织MAGEA6 mRNA相对表达量的中位值,将HCC患者分为MAGEA6低表达组和高表达组。比较两组患者的临床病理特征,绘制两组患者的Kaplan-Meier生存曲线,采用一般多因素Cox回归分析影响HCC患者预后的独立危险因素,Pearson法分析MAGEA6 mRNA与AMPK mRNA表达的相关性。结果 肿瘤组织MAGEA6 mRNA相对表达量、MAGEA6阳性率、MAGEA6蛋白免疫组织化学法评分高于癌旁组织（P <0.05）。MAGEA6低表达组与高表达组HCC患者的年龄、性别、饮酒史、分化程度、ChildPugh分级比较,差异...     

不同层次穴位埋线调节单纯性肥胖大鼠外周脂肪代谢的机制研究

目的 探讨不同层次穴位埋线调节单纯性肥胖外周脂肪代谢的机制。方法 将60只SD雄性大鼠随机分为对照组（A组）10只普通饲料喂养,模型组50只高脂饲料喂养。模型复制成功后,将模型组大鼠随机分为空白组（B组）、脂肪层埋线组（C组）、肌肉层埋线组（D组）、脂肪层埋线+AG490组（E组）、肌肉层埋线+AG490组（F组）,每组10只。给予不同的埋线治疗后,比较各组JAK2、STAT3、SOCS3、LEP-R mRNA和蛋白相对表达量。结果B、E、F组脂肪组织JAK2、STAT3 mRNA和蛋白相对表达量低于A组（P <0.05）;C、D组JAK2、STAT3mRNA和蛋白相对表达量高于B组（P <0.05）;E、F组与B组脂肪组织JAK2、STAT3 mRNA和蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义（P>0.05）;D、E、F组JAK2、STAT3 mRNA和蛋白相对表达量低于C组（P <0.05）;E、F组JAK2、STAT3 mRNA和蛋白相对表达量低于D组（P <0.05）。B、C、D、E、F组脂肪组织SOCS3mRNA相对表达量高于A组（P <0.0...     

SPP-1、GDF-15和CXCL-1在人小肝癌中表达的初步研究

目的:针对前期应用基因芯片(Affymetrix Rat Genome 230.2.0)筛选出的大鼠早期肝癌中高表达的人同源分泌蛋白基因SPP-1、GDF-15和CXCL-1,定量验证其在人小肝癌中mRNA和血清蛋白的表达水平,并探讨其临床应用价值。方法:应用实时定量PCR和双抗体夹心法ELISA,检测15例小肝癌及正常肝脏组织(癌旁正常肝脏组织)的mRNA水平及对应小肝癌血清和正常人血清中的蛋白表达水平。结果:①SPP-1、GDF-15和CXCL-1基因在小肝癌组织中较对照组表达显著上调,其差异有统计学意义(P<0.05);②SPP-1血清蛋白检测值与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);GDF-15血清蛋白含量在小肝癌组中表达水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);小肝癌组中CXCL-1血清蛋白含量较正常对照组表达下调,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:①NF-κB信号通路基因(CXCL-1)、P53信号通路基因(GDF-15)和SPP-1基因在人小肝癌组织中高表达,可能与肝癌发生的早期过程相关;②分泌性蛋白GDF-15和CXCL-1显示出小肝癌筛选诊断的潜在价值。     

MicroRNA-137通过Wnt信号通路对宫颈癌细胞增殖、凋亡及裸鼠移植瘤的作用研究

目的 探究microRNA-137（miR-137）通过Wnt信号通路对人宫颈癌细胞HeLa的增殖与凋亡,以及对裸鼠移植瘤的作用。方法 将人宫颈癌细胞HeLa分别转染miR-137-mimic质粒（miR-137组）和空载质粒（NC组）,另设空白组只加入等量转染试剂不做其他处理。待细胞稳定转染后,采用CCK-8法检测细胞活性。采用流式细胞仪检测细胞凋亡。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测Wnt、基质金属蛋白酶-7（MMP-7）、分泌型蛋白Dickkopf-1（DKK1）、miR-137 mRNA相对表达量;采用Western blotting检测Wnt、MMP-7、DKK1蛋白的相对表达量。将稳定转染的细胞接种于裸鼠背部,观察裸鼠移植瘤的生长情况,绘制生长曲线并计算抑瘤率。结果 空白组、NC组、miR-137组12 h、24 h、48 h的OD值比较,采用重复测量设计的方差分析,结果 ①不同时间点的OD值有差异（P <0.05）;②3组的OD值有差异（P <0.05）,miR-137组OD值较空白组和NC组低,相对细胞活性较低;③3组OD值的变化趋势有差异（P <0.05）。miR-137组细胞凋亡率高于空白组和NC组（P <0.05）。miR-137组细胞Wnt和MMP-7 mRNA相对表达量较空白组和NC组降低（P <0.05）;miR-137组细胞DKK1和miR-137 mRNA相对表达量较空白组和NC组升高（P <0.05）。miR-137组细胞Wnt、MMP-7蛋白相对表达量较空白组和NC组降低（P <0.05）;miR-137组细胞DKK1蛋白相对表达量较空白组和NC组升高（P <0.05）。NC组裸鼠移植瘤的抑瘤率与miR-137组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,miR-137组裸鼠移植瘤的抑瘤率增加。空白组、NC组、miR-137组裸鼠不同时间点的肿瘤体积比较,采用重复测量设计的方差分析,结果 ①不同时间点的肿瘤体积有差异（P <0.05）;②3组的肿瘤体积有差异（P <0.05）,miR-137组与空白组和NC组相比,肿瘤生长缓慢,相对抑瘤效果较好;③3组肿瘤体积的变化趋势有差异（P <0.05）。结论 在人宫颈癌细胞中过表达miR-137可以促进癌细胞凋亡,抑制癌细胞增殖,该作用可能与Wnt及其上下游MMP-7/DKK1信号通路有关。     

先天性巨结肠患儿不同肠管中SOX-2、SOX-10、GDNF的表达及其临床意义

目的 探讨先天性巨结肠患儿不同肠管中SOX-2、SOX-10、GDNF的表达及意义。方法 选取2014年1月—2019年8月邢台市人民医院手术治疗的先天性巨结肠患儿85例作为观察组,取切除的狭窄段、扩张段和移行段肠管组织,将同期行结肠造瘘术的患儿20例作为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测肠管组织SOX-2、SOX-10、GDNF的表达。结果 各组肌间神经丛直径、神经节细胞直径、神经节细胞数、神经节细胞质/核比较,差异有统计学意义（P <0.05）。其中,肠肌间神经丛直径：HD组狭窄段< HD组移行段< HD组扩张段和对照组;神经节细胞直径、神经节细胞数、神经节细胞质/核：HD组移行段< HD组扩张段和对照组;各组SOX-2、SOX-10、GDNF mRNA的相对表达量比较,差异有统计学意义（P <0.05）,HD组狭窄段< 病例组移行段< HD组扩张段和对照组。对照组与HD组扩张段比较,差异无统计学意义（P >0.05）。结论 先天性巨结肠患儿病变肠管组织中SOX-2、SOX-10、GDNF mRNA的相对表达量在扩张段、移行段、狭窄段逐渐降低,这与病变肠神经系统发育异常有关。     

白细胞介素-37在结肠癌组织中的表达及其对结肠癌细胞增殖、侵袭的作用

目的 探讨白细胞介素-37（IL-37）在结肠癌组织中表达的变化，并通过体外实验探讨其对结肠癌细胞增殖、侵袭的作用。方法 收集2017年4月—2019年4月在西安市第四医院手术切除的结肠癌组织及对应的癌旁组织，检测其IL-37的表达量；培养结肠癌HT29细胞，随机分为对照组、转染空白pcDNA3.1质粒的空白质粒组、转染表达IL-37的pcDNA3.1重组质粒的IL-37质粒组，MTS检测3组结肠癌HT29细胞的增殖能力，Transwell实验检测细胞的侵袭能力，qRT-PCR检测细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）mRNA相对表达量，Western blotting法检测IL-37、p-STAT3及p-Akt蛋白相对表达量。结果 结肠癌组织中IL-37的蛋白相对表达量低于癌旁组织（P <0.05）；3组细胞增殖及侵袭能力，CyclinD1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9 mRNA相对表达量，p-STAT3、p-Akt的蛋白相对表达量比较，差异有统计学意义（P <0.05），IL-37质粒组的细胞增殖及侵袭能力，CyclinD1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9 mRNA相对表达量，p-STAT3、p-AKT的蛋白相对表达量均低于对照组、空白质粒组。结论 IL-37在结肠癌组织中表达减少，上调IL-37的表达能够抑制结肠癌细胞的增殖、侵袭，该抑制作用可能与抑制STAT3/Akt通路有关。     

RAC3基因对早期滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨ras相关C3肉毒杆菌毒素底物3（RAC3）对早期滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 收集2015年5月至2016年5月在海军军医大学（第二军医大学）长征医院门诊或住院的不明原因自然流产和人工流产妊娠妇女的绒毛组织各20例,应用qPCR法检测绒毛组织中Rac3 mRNA的表达。取C57/B6小鼠孕6.5、14.5和19.5 d的胎盘组织进行mRNA芯片检测。在早期人滋养层细胞系HTR-8/SVneo中干扰和过表达RAC3后,应用CCK-8法和Transwell实验检测RAC3对HTR-8/SVneo细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果 不明原因自然流产绒毛组织中Rac3 mRNA的表达低于人工流产绒毛组织（P<0.05）。小鼠孕6.5、14.5 d胎盘组织中Rac3 mRNA的表达高于孕19.5 d（P均<0.05）。与对照组相比,干扰RAC3表达后HTR-8/SVneo细胞的增殖、迁移和侵袭能力均减弱（P均<0.05）,过表达RAC3后HTR-8/SVneo细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强（P均<0.01）。结论 RAC3对早期滋养层细胞的增殖、迁移和侵袭能力具有重要调控作用。     

去氧孕烯炔雌醇片预处理联合氯米芬用于宫颈机能不全患者体外受精-胚胎移植的临床研究

目的 观察去氧孕烯炔雌醇片预处理联合氯米芬用于宫颈机能不全患者体外受精-胚胎移植的临床疗效,并分析其不良妊娠结局的影响因素。方法 将120例拟接受体外受精-胚胎移植的宫颈机能不全患者随机分为观察组和对照组,对照组给予氯米芬微刺激治疗,观察组给予去氧孕烯炔雌醇片预处理联合氯米芬微刺激治疗。比较两组患者的周期取消率、生化妊娠率及临床妊娠率、获卵数、正常受精卵数、早孕期流产率、血清胰岛素样生长因子1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)。结果 观察组患者的促性腺激素（GTH）用量、GTH刺激天数少于对照组,人绒毛膜促性腺素（HCG）注射日雌激素值小于对照组,周期取消率、早孕期流产率、晚期流产率、早产率低于对照组（P <0.05）,正常受精率、生化妊娠率、临床妊娠率、活产率、A型子宫内膜率高于对照组,获卵数、正常受精卵数多于对照组,扳机日子宫内膜厚度厚于对照组（P <0.05）。观察组患者刺激前后血清IGF-1、IGFBP-3水平的差值大于对照组（P <0.05）。一般Logistic回归分析结果显示,不孕年龄[■=0.882(95%CI:0.511,0...