阿齐霉素对弓形虫形态影响的研究

为评价阿齐霉素对弓形虫的抑制、杀伤效应,体外培养的猴肾细胞经弓形虫感染后,给予不同浓度阿齐霉素(0．1μg／ml、1μg／ml、10μg／m1),然后以电镜观察药物作用后的弓形虫形态、体积、超微结构的改变。结果经透射电镜观察发现：虫体在药物作用下发生崩解,细胞内留下空泡,有的呈团块,没有明显的细胞器可见。通过扫描电镜观察,由于阿齐霉素的影响,使附着于猴肾细胞表面的虫体与未加药组相比明显皱缩,从而充分反映阿齐霉素的抑制、杀伤虫体作用。     

徐长卿6个提取部位体外抗水痘带状疱疹病毒作用研究

目的:研究徐长卿6个提取部位体外抗水痘带状疱疹病毒(VZV)的作用。方法:以MTT法测定312.5¹0 000.0μg/ml质量浓度范围内徐长卿6个提取部位对非洲绿猴肾(Vero)细胞的毒性;倒置显微镜下观察187.510 000.0μg/ml质量浓度范围内徐长卿6个提取部位对非洲绿猴肾(Vero)细胞的毒性;倒置显微镜下观察187.5³ 000.0μg/ml质量浓度范围内徐长卿6个提取部位抗VZV吸附的作用;计算半数有效浓度(EC50),以评价187.53 000.0μg/ml质量浓度范围内徐长卿6个提取部位抗VZV吸附的作用;计算半数有效浓度(EC50),以评价187.5³ 000.0μg/ml质量浓度范围内徐长卿6个提取部位对VZV的杀伤作用与抑制VZV在Vero细胞中的增殖作用。结果:徐长卿提取物6个部位药物质量浓度与细胞存活率之间存在线性关系;除200μg/ml徐长卿石油醚部位对VZV无吸附作用外,其余各提取部位均在相应质量浓度下对VZV吸附有一定抑制作用;徐长卿6个提取部位在相应质量浓度下对VZV有一定杀伤作用与抑制VZV在Vero细胞中的增殖作用。结论:徐长卿超临界萃取部位具有较强的体外抗VZV活性。     

阿齐霉素对细胞内弓形虫疗效的实验研究

作者运用ＭＴＴ比色法检测弓形虫侵入的猴肾细胞在阿齐霉素作用下的增殖情况。为阻断孕妇感染弓形虫宫内垂直感染胎儿制定预防治疗措施时提供科学的实验依据。材料与方法一、弓形虫与细胞　弓形虫悬液 10 7/ｍｌ(由省农科院畜牧兽医研究所提供 ) ,0 1ｍｌ/只腹腔注射接种 18± 2 ｇ昆明种雌性小鼠 ,第 4天断颈取腹水 ,10 0 0转 /分离心 5分钟 ,使腹腔细胞沉淀 ,取上清液 ,30 0 0转 /分离心 2 0分钟 ,取沉淀 ,将弓形虫数调整至 10 7/ｍｌ,猴肾细胞 (由省农科院畜牧兽医研究所提供 )铺满培养瓶底面后 ,用 0 2 5%胰蛋白酶消化 1分钟后 ,倒去…     

阿克拉霉素B、阿霉素和小檗碱对人外周血NK细胞活性影响的初步研究

本文研究了阿克拉霉素B、阿霉素和小檗碱对人外周血NK细胞活性的影响.NK细胞活性由测定~(51)Cr从NK细胞作用的标记K562细胞的释放率来决定.阿克拉霉素B(0.5和1.Oμg/ml),阿霉素(0.5和1.0μg/ml)和小檗碱(1.0和10μg/ml)作用1小时后,未见对NK细胞活性有显著影响,提示三个药物可能即不明显抑制也不促进NK细胞的细胞毒作用.阿克拉霉素B和小檗碱在高浓度时表现轻微的促进作用,但阿霉素有轻微抑制作用.三个药物均有不同程度地增加靶细胞~(51)Cr的自然释放率,以阿霉素最强,提示有细胞膜毒性产生.因而尚难肯定阿克拉霉素B和小檗碱的NK细胞活性促进作用.     

平阳霉素对HeLa细胞DNA的体外断裂作用

用琼脂糖电泳及DNA电镜技术观察平阳霉素对HeLa细胞DNA的体外断裂作用。药物处理的DNA经琼脂糖电泳及溴乙锭染色后,紫外荧光摄影。0.5μg DNA与5μg/ml药物作用2h及200μg/ml作用10min即可见DNA断裂。应用碱性蛋白膜展层法制作DNA电镜标本,5μg/ml DNA与10μg/ml药物作用2h可见自然弯曲的DNA长链(±SD=5.97±1.95μm)被切割成DNA短段(±SD=0.73±0.24μm),对照组DNA长度长于药物处理组(P<0.01)。     

博莱霉素A_2B_2和A_5对人癌细胞脱氧核糖核酸的断链效应

本文观察比较了博莱霉素A_5(国产)、博莱霉素A_2B_2(日本)和博莱霉素A_2B_2国际标准品对于人体胃癌细胞的总脱氧核糖核酸和其50kb部分,以及人舌癌细胞的总脱氧核糖核酸的体外断链效应。作用后脱氧核糖核酸经琼脂糖微型快速电泳和溴化乙锭染色后,紫外荧光摄影。显示三种博莱霉素产品对人癌细胞双链脱氧核糖核酸的作用模型电泳图。并观察了作用时间及药物浓度的效应。人体DNA10μg在博莱霉素400μg/ml(～0.27mM)浓度下,37℃作用30分钟后,即可观察到人体DNA的断裂效应;37℃作用120分钟后,几乎全部人体DNA分子均被切割断链。人体DNA20μg在系列浓度的博莱霉素存在下,37℃作用120分钟,观察到博莱霉素断链的最低有效浓度为1μg/ml(～0.67μM)左右。没有发现博莱霉素-人胃癌细胞脱氧核糖核酸与博莱霉素-人舌癌细胞脱氧核糖核酸的作用模型之间有何明显差别。 本文还讨论了以人体细胞脱氧核糖核酸为对象,研究抗癌药物作用模式的实践意义,和本实验系统正被应用于人体“癌基因”(Oncogenes)有关研究的价值。     

胡桃醌对肿瘤细胞的增殖抑制作用和抗菌作用

本文主要探讨胡桃醌对部分移植性肿瘤细胞增殖作用的影响。经72h的作用结果表明,胡桃醌对不同肿瘤细胞的增殖抑制浓度分别为:HeLa Cell IC_(50) 13.8μg/ml,P388 CellIC_(50) 9.8μg/ml,P388/ADR Cell IC_(50) 7.1μg/ml,S180 Cell IC_(50) 11.6μg/ml. 从胡桃醌对S_(180)细胞的增殖抑制作用,可以得出该化合物的作用方式有,杀伤细胞与浓度的依赖关系。     

阿克拉霉素A对HeLa细胞核仁及细胞表面超微结构的影响

本文报道用透射电镜及扫描电镜观察国产阿克拉霉素A对HeLa细胞核仁及细胞表面超微结构的影响。阿克拉霉素 A0.5μg/ml处理 10分钟即可见核仁内出现多个核仁纤维中心,继而出现核仁分离及微球体,核仁的这些超微结构改变与该药特异性抑制rRNA生物合成相关。阿克拉霉素A0.5μg/ml作用8小时细胞表面微绒毛消失,继而细胞表面破裂,细胞崩解提示细胞膜可能也是阿克拉霉素作用的靶位之一。     

三氧化二砷与顺铂联用对人乳腺癌细胞杀伤作用的研究

目的探讨三氧化二砷与顺铂联合应用对人乳腺癌细胞的杀伤作用。方法将三氧化二砷与顺铂单独及联合应用于体外培养的乳腺癌MCF-7细胞,采用MTT法测定细胞抑制率,于透射电镜下观察细胞超微结构变化;用流式细胞仪观察细胞凋亡情况。结果1μg/ml三氧化二砷与1μg/ml顺铂联合应用于乳腺癌MCF-7细胞48h后,细胞抑制率为27.01%,明显高于单用三氧化二砷（1μg/ml）时的12.12%及单用顺铂（1μg/ml）时的10.93%。细胞超微结构及流式细胞仪观察均显示,联合应用比单用促凋亡效应更显著（P〈0.01）。结论三氧化二砷与顺铂联合应用,可高效杀伤人乳腺癌细胞,此协同作用主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡来实现的。     

蕈状海鞘毒类似物对疱疹病毒和脊髓灰质炎病毒作用的研究

应用Hela细胞一病毒感染系统,研究6种合成药对DNA和RNA病毒的增殖抑制作用。结果发现合成药SE4对单纯疱疹病毒1型(HSV-1)和脊髓灰质炎病毒都有抑制作用,抑制浓度分别为1.56μg/ml和25μg/ml。当浓度为25μg/ml时,SE4对HSV-1具有明显杀伤作用,可完全抑制该病毒的增殖。实验结果表明,合成药SE4对DNA病毒的作用优于RNA病毒。     

弓形虫SAG1基因在HeLa细胞表达的研究

目的 :研究弓形虫 SAG1基因在 He L a细胞中的表达 ,为研制弓形虫疫苗奠定基础。方法 :采用磷酸钙 -DNA共沉淀转化法将重组质粒 pc DNA3- SAG1导入 He L a细胞 ,用 G418进行选择培养 ,筛选出表达阳性的细胞克隆 ,再通过培养和加压 ,建立稳定分泌 SAG1抗原的阳性 He L a细胞克隆株 ,分离表达产物 ,进行 SDS- PAGE、Western blot分析。结果 :采用钙沉淀法成功地将重组质粒 SAG1导入 He L a细胞 ,通过 G418选择和加压培养 ,获得稳定分泌 SAG1抗原的阳性 He L a细胞 ,表达的蛋白经 SDS- PAGE、Western blot分析 ,显示其分子量 30 k Da蛋白 ,与理论值相符。结论 :成功构建重组质粒 pc DNA3- SAG1,建立稳定分泌 SAG1抗原的阳性 He L a细胞克隆株     

香菇多糖促BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞抗弓形虫感染的研究

目的:研究香菇多糖预处理对弓形虫感染后BALB/c小鼠巨噬细胞免疫功能的影响.方法:将45只周龄、体重相近的雌性BALB/c小鼠随机均分为3组,即空白对照(无菌生理盐水)、模型(无菌生理盐水)和香菇多糖组(0.5g·L-1).各组小鼠以每次1mL、每天1次腹腔注射给药,连续给药5 d后,第6天模型与香菇多糖组各用3×1...     

生育期妇女与弓形虫感染关系的探讨

目的:了解孝感市孝南区孕妇弓形虫感染的情况,探讨弓形虫感染与异常孕产的关系。方法:采用酶联免疫吸附测定(EL ISA)方法对843例孕妇(有异常孕产史孕妇189例和无异常孕产史孕妇654例)进行血清弓形虫抗体检测,并对检测结果采用χ2检验进行统计学分析。结果:弓形虫抗体阳性率为2.85%,有异常孕产史孕妇阳性率为7.94%(15/189),明显高于无异常孕产史孕妇的1.38%(9/654)(P<0.05)。结论:孝感市孝南区孕妇弓形虫抗体阳性率低于全国平均水平,弓形虫感染可能是异常孕产的重要原因。     

P43基因在白血病患者弓形虫感染诊断中的应用

目的建立快速、特异、敏感诊断白血病患者弓形虫感染情况的DNA检测方法,并分析其临床意义。方法利用ELISA和PCR方法对46例白血病及20名正常人同时进行检测。结果检测白血病40例,PCR和ELISA方法检测弓形虫P43基因片段和其抗原,阳性各为8例及6例,其阳性率分别为17.4%和13.1%。作为阴性对照的20名正常者同时进行弓形虫的检测,其结果均为阴性。结论体外扩增弓形虫P43基因的方法具有准确、快速、特异和敏感的优点,可以作为白血病患者弓形虫感染诊断的有价值的方法之一。     

黄芪多种成分抗人疱疹病毒的初步实验研究

目的：为了开发利用黄芪的抗病毒性质，我们进行了此项研究。方法：我们以阿普洛韦（ACV)为阳性对照，采用对病毒所致细胞病变的抑制及空斑减数实验，观察了黄芪总皂苷、总多糖、总黄酮抗HSV药效。结果：在Hep-2细胞系统中，ACV对HSV－1 HS－1株直接杀灭、感染阻断、增殖抑制的ED50为30．83ug/ml,16.04ug/ml,20.04ug/ml；对HSV－2333株的相应ED50为16.45ug/ml,18.62ug/ml,10.85ug/ml,黄芪总皂苷对HSV－1 HS－1株相应ED50为1．68ug/ml，1．72ug/ml，1．95ug/ml；对HSV－2333株相应ED50为1．73ug/ml，2．70ug/ml，2．74ug/ml，黄芪总多糖对HSV－1 HS－1株的相应ED50为4．03ug/ml，5．33ug/ml，4．90ug/ml；对HSV－2333株相应ED50为6．04ug/ml，5．43ug/ml，7．50ug/ml，黄芪总黄酮对HSV－1 HS－1株的相应ED50为4．95ug/ml，2．75ug/ml，3．49ug/ml；对HSV－2333株的相应ED50为3．56ug/ml，3．93ug/ml，6．27ug/ml。结论：黄芪对HSV－1的治疗指数为ACV的10．3，4．1，5．5倍；对HSV－2的治疗指数为ACV的3．7，2．7，1．0，1．6倍。总多糖对HSV－1的治疗指数为ACV的10．3，4．1，5．5倍；对HSV－2的治疗指数为ACV的3．7，2．7，3．3倍。总黄酮的治疗指数为ACV相近，值得开发利用。     

顺铂对人肺腺癌细胞作用与ERCC1、Bcl-2表达的相关性研究

目的:探讨ERCC1、Bcl-2表达与顺铂作用的关系,进而推测ERCC1、Bcl-2在顺铂耐药中的作用.方法:选择人肺腺癌细胞A549及其耐DDP细胞株A549/DDP作为研究对象,采用MTT法检测A549/DDP细胞耐药指数;免疫细胞化学方法、RT-PCR方法检测不同浓度、不同作用时间干预后细胞中ERCC1、Bcl-2的表达.结果:10μg/mL DDP作用12 h,A549细胞中ER-CC1、Bcl-2 mRNA表达开始增高,随着作用时间的延长,ERCC1、Bcl-2 mRNA的表达逐渐增高,在72 h表达最强.浓度为5μg/mL的DDP即可刺激A549细胞中ERCC1、Bcl-2 mRNA表达水平上升,随着DDP浓度的增加,其表达水平逐渐上升,ERCC1民mRNA表达水平在20μg/mL组达到高峰.与亲本细胞相比,A549/DDP中ERCC1、Bcl-2表达明显增高.结论:随着顺铂作用时间的延长和浓度的增加,A549细胞中ERCC1、Bcl-2 mRNA和蛋白的表达量增加,推测ERCC1、Bcl-2可能参与了顺铂继发耐药的形成.     

婴幼儿骶管注用咪唑安定术后镇痛的研究

目的 评价骶管注入咪唑安定用于婴幼儿下腹部手术后镇痛的临床效果。方法 选择婴幼儿下腹部手术患儿120例。随机分为4组。A组为1％利多卡因（1ml／kg）行骶管阻滞,B组为1％利多卡因＋0．25%罗哌卡因（1ml／kg）,C组为1%利多卡因＋50ug／kg咪唑安定（1ml／kg）,D组1％利多卡因＋0．25oA罗哌卡因＋50ug／kg咪唑安定（1ml／kg）。观察术后24小时各时点镇痛、镇静效果度副作用。结果术后6小时B,C,D组疼痛减轻度明显优于A组（P〈0．05）。两组苯后疼痛客观评价B,C,D组明显优于A组（P〈0．05）。镇静效果C、D组明显优于A,B组,4组不良反应无明显差异。结论骶管注入50ug／kg咪唑安定在婴幼儿下腹部手术时可产生良好的术后镇痛效果。     

大环内酯类药物对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响

采用聚碳酸酯过滤膜或聚丙烯酰胺膜制备铜绿假单胞菌生物膜,计数滤膜菌落并用扫描电镜观察,研究大环内酯类及抗铜绿假单胞菌药物对铜绿假单胞菌生物形成的影响。结果表明与未经药物作用的滤膜菌落计数比较,阿尔霉素2mg/L和红霉素2mg/L可使生物膜内细菌由10^10CFU/cm^2降至10^3.3和10^3.7CFU/cm^2;阿奇霉素（2mg/L)分别与头孢他啶（0．0625mg/L)、亚胺培南（0．5mg/L）、美洛培南（0．25mg/L）、阿米卡星（0．0625mg/L )、环丙沙星（0．004mg/L）合用后,生物膜内细菌降至10^1.5-10^3.8CFU/cm^2;红霉素与上述药物合用后,生物膜内细菌降至10^2.8-10^5.5CFU/cm^2;麦迪霉素32mg/L、抗铜绿假单胞菌药物单用或两者联合应用,菌量为10^8.1-10^11.5CFU/cm^2。扫描电镜观察与菌落计数结果一致。表明红霉素、阿奇霉素能抑制铜绿假单胞菌生物膜的生成;麦迪霉素及五种抗铜绿假单胞菌药物对生物膜的形成无抑制作用。     

The effect of chronic azithromycin therapy on soluble endothelium-derived adhesion molecules in patients with coronary artery disease

In patients with coronary artery disease (CAD), azithromycin therapy is associated with decreased cytokine levels and overall reduction of inflammation. Chlamydia pneumoniae (C.Pn) is a common pathogen that may be an important factor in the development and progression of atherosclerosis. Cell-adhesion molecules have an important role in recruitment of inflammatory cells during plaque development and are expressed by endothelial cells on activation. We sought to define the effect of treatment with azithromycin on circulating levels of soluble vascular cell-adhesion molecule (VCAM-I), intercellular adhesion molecule (ICAM-1), and E-selectin in patients with CAD. Plasma concentrations of VCAM-1, ICAM-1, and E-selectin were measured in 40 patients with documented CAD and a positive (> or = 1:16) immunoglobulin G (IgG) titer against C.Pn, 20 subjects with normal coronary arteries, and 14 healthy volunteers. Patients were assigned randomly to receive either 500 mg/wk of azithromycin or placebo for 3 months. Serum samples were obtained at baseline, at 3 months, and during the follow-up visit at 6 months. Patients with documented CAD exhibited elevation of VCAM-1 (535 +/- 227 ng/ ml; p = 0.0001) and E-selectin (69 +/- 29 ng/ml; p = 0.006), but not ICAM-1 (321 +/- 65 ng/ml) concentrations as compared with the patients with angiographically proven normal coronary arteries (252 +/- 80; 50 +/- 22; and 311 +/- 40 ng/ml) and healthy controls (110 +/- 18; 29 +/- 2; and 238 +/- 47 ng/ml, respectively). Prolonged treatment with azithromycin did not significantly affect the plasma levels of soluble VCAM-1, ICAM-1, and E-selectin. Soluble markers of endothelial activation are markedly increased in patients with documented CAD as compared with those with normal coronary arteries and healthy controls. Despite substantial heterogeneity in plasma E-selectin, ICAM-1, and VCAM-1 levels, long-term azithromycin treatment did not affect plasma levels of these adhesion molecules, indicative of endothelial activation, over a period of 6 months.