接种表达细胞因子基因的重组HIV-1基因组DNA疫苗能增强HIV-1特异性免疫应答

１型人类免疫缺陷症病毒（ＨＩＶ－１）ＤＮＡ疫苗能诱导实验动物产生体液和细胞免疫应答,但这些免疫应答弱且短暂。ＤＮＡ疫苗免疫研究结果证实,白细胞介素２（ＩＬ－２）或粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）基因与ＨＩＶ－１基因共表达可增强抗原特异性抗体应答。 作者以ＨＩＶ－１基因组为载体,通过ＤＮＡ重组技术分别构建了缺失ｔａｔ及ｎｅｆ基因（以消除其免疫抑制作用）但含有ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦ及γ干扰素（ＩＦＮ－γ）基因的重组质粒,分别称为ｐＴＸ ＧＥ／ＩＬ－２、ｐＴＸ ＧＥ／ＧＭ－ＣＳＦ及 ｐＴＸ ＧＥ…     

GM-CSF基因增强HCV非结构蛋白DNA疫苗诱导的细胞免疫应答

作者分别构建了编码丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）非结构蛋白ＮＳ３、ＮＳ４和ＮＳ５的质粒ｐＴＶ－ＮＳ３４５、编码粒细胞－巨噬细胞－集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）的质粒ｐＴＶ－ＧＭＣＳＦ以及编码ＮＳ３４５和ＧＭ－ＣＳＦ的双顺反子质粒ｐＴＶ－ＮＳ３４５／ＧＭＣＳＦ，分别将这三种质粒转染ＣＯＳ－７细胞，用免疫沉淀法检测ＨＣＶＮＳ３４５蛋白的表达，用ＥＬＩＳＡ检测培养上清中的ＧＭ－ＣＳＦ。将Ｂｕｆｆａｌｏ大鼠分为４组，第１、２、４组分别肌注ｐＴＶ－ＮＳ３４５、ｐＴＶ－ＮＳ３４５／ＧＭＣＳＦ和对照载体ｇＴＶ ４００μ…     

HIV-1疫苗诱导广泛中和抗体应答

 诱导中和抗体是许多有效疫苗的关键特征,也是在动物模型中唯一证明能完全阻断HIV感染的免疫应答.但是,HIV-1广泛的遗传变异性和复杂的免疫逃避机制,已经使得迄今为止所有利用HIv-1疫苗免疫原诱导有效中和抗体应答的尝试受到阻碍.最近对病毒免疫逃避机制有了进一步了解,同时对病毒包膜糖蛋白结构和免疫生物学特性的研究也不断深入,这些都将有助于克服困难,设计出新的免疫原诱导产生保护性抗HIV-1抗体.     

表达HIV-1Nef辅助蛋白的质粒DNA诱导的体液免疫应答的鉴定[英]

1型人类免疫缺陷症病毒（HIV-1）的nef基因产物是25～27kDa的辅助性胞质蛋白。研究表明感染了缺失大部分nef的猴免疫缺陷症病毒的恒河猴其病毒负荷低而且不发展为艾滋病样疾病。鉴于Nef蛋白在病毒生活周期早期便可产生,故Nef似乎为有效的HIV疫苗候选物。     

改进多质粒HIV-1 DNA疫苗的问题

自从质粒疫苗被首次报道以来 ,质粒主链的设计有很大改变。尽管第一代 1型人类免疫缺陷病毒 (HIV- 1)质粒疫苗安全、具有免疫原性 ,但改进 DNA疫苗的免疫效果才是这一技术的主要目的。研究表明 ,可以通过调整转染率、表达率或者是通过应用各种 T细胞和 B细胞质粒佐剂来诱生最佳免疫应答。     

粘膜免疫DNA疫苗可在粘膜部位诱导抗HIV-1免疫应答

粘膜免疫是机体抵抗病原体以防全身感染,尤其是性传播疾病的第一道防线。本文报告了经阴道接种DNA质粒pCMN160的小鼠产生抗人类免疫缺陷症病毒(HIV)分泌性IgA和中和抗体的结果。     

用新型喷射技术按种HIV-1DNA疫苗诱导粘膜IgA应答

疫苗接种方式对于抗１型人类免疫缺陷症病毒（ＨＩＶ－１）免疫的诱导至关重要。本文报告了采用喷射接种途径将ＤＮＡ疫苗转移至活体动物组织所获得的免疫结果。选用Ｆ１代雌性小鼠于０、４～６及８～１２周以分别含ＨＩＶ－１ｔａｔ、ｇｐ１６０及ｐ３７基因的质粒ＤＮＡ５～１０μｇ，经滴鼻、基因枪口内接种、舌部肌肉注射以及颊部高压喷射四种方式进行接种。免疫后７～１０天收集血清标本贮存于一２０℃。采集肠道分泌物和肺部洗液。粘膜洗液经离心沉淀取上清冻存于一７０℃。用亲和层析纯化的重组抗原进行ＥＬＩＳＡ测定抗体应答。通过…     

对HIV-1 env DNA疫苗免疫应答的遗传学控制

含有编码1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)env蛋白的HIV-1特异性DNA疫苗可诱导强的体液和细胞介导免疫应答。作者用不同品系的小鼠研究了HIV-1特异性DNA疫苗诱导抗体产生及迟发型超敏反应(DTH)的遗传学控制。     

白细胞介素12—增强DNA疫苗诱导细胞免疫的良好 …

细胞因子作为免疫佐剂,可增强ＤＮＡ疫苗的免疫效果。白细胞介素１２促进Ｔｈ１细胞增殖、增强其功能活性及各种类型细胞免疫,因而是提高ＤＮＡ疫苗细胞免疫功能的良好佐剂。本文简述ＩＬ－１２作为免疫佐剂用于艾滋病和其他多种传染病的ＤＮＡ疫苗及肿瘤基因治疗方面的现状。     

HIV-1DNA疫苗和趋化因子

DNA疫苗已被证实具有在动物模型和人体中诱导体液及细胞免疫应答的能力。同样也证实由质粒表达载体传递的基因能在宿主中表达功能蛋白。另外 ,注射编码细胞因子、趋化因子或共刺激分子的质粒 (也称作免疫调节质粒 )能使该技术进一步扩展至定向免疫。作者研究了趋化因子与 1型人类免疫缺陷症病毒 (HIV- 1 ) DNA疫苗共同免疫的效果以及机体对 DNA免疫产生应答后趋化因子水平的变化。　　分别对小鼠和黑猩猩注射 5 0 μg和 5 0 0 μg表达 HIV- 1 env蛋白和 gag/pol蛋白的重组质粒 ,同时注射表达 IL- 8、VIP- 1 0、MIP- 1 α、MCP- 1…     

白细胞介素12──增强DNA疫苗诱导细胞免疫的良好佐剂

细胞因子作为免疫佐剂,可增强ＤＮＡ疫苗的免疫效果。白细胞介素１２（ＩＬ－１２）可促进 Ｔｈ１细胞增殖、增强其功能活性及各种类型细胞免疫,因而是提高ＤＮＡ疫苗细胞免疫功能的良好 佐剂。本文简述 ＩＬ－ １２（主要是 ＩＬ－１２基因）作为免疫佐剂用于艾滋病和其他多种传染病的 ＤＮＡ疫 苗及肿瘤基因治疗方面的研究现状。     

启动鼠体液和细胞免疫应答的质粒DNA疫苗接种途径

作者构建了编码HBsAg的表达质粒pCI/S并建立了能稳定表达HBsAg的H-2~d肥大细胞瘤细胞系P815/S和B淋巴瘤细胞系A20/S。将10或100μg pCI/S分别注射Ba1b/c（H-2~d）小鼠的胫骨前肌（im）或四头肌、尾基部的皮下组织（sc）、腹腔（ip）、尾静脉（iv）。对照组注射等量的空白载体质粒     

DNA疫苗诱导的抗结核病保护性免疫应答

BCG是公认的结核病预防疫苗,但其保护力从0%~80%不等,因而印度德里大学南校的Khera等分别以pAK3和pAK4为载体制备了6种表达结核杆菌(MTB)ESAT-6蛋白(E6)、α晶体蛋白(αcry)或超氧化物歧化酶(sod)的DNA疫苗(pAK3-E6、pAK4-E6、pAK3-αcry、pAK4-αcry、pAK3-sod和pAK4-sod),并评估了疫苗诱导小鼠体液和细胞免疫应答的能力及对MTB感染豚鼠的保护效力。分别用100μg pAK3-E6、pAK4-E6、pAK3-αcry、pAK4-αcry、pAK3-sod、pAK4-sod、pAK3或pAK4肌肉免疫Balb/c小鼠,每3周1次,共免疫3次。末次免疫后3周检测免疫小鼠的特异…     

MF59能增强禽流感疫苗应答

Novartis公司的一项新研究显示，曾用MF59-佐剂H5N3疫苗于6年前免疫的人经含同-专利佐剂的H5N1（分化体1）疫苗单次免疫后产生7天的保护性免疫应答。根据发表在欧洲流感会议上的数据，这种免疫应答有广泛的交叉反应性和涵盖迄今已知的所有H5N1分化体，甚至对未包含在以上两种疫苗内的病毒株都有应答，     

小鼠对以非复制或自身复制表达载体DNA免疫表达HIV-1Nef的体液和细胞免疫应答

人类免疫缺陷症病毒 ( HIV)辅助蛋白Nef在病毒感染周期的早期表达 ,它被证实是体液及细胞免疫应答的有效免疫原 ,为了增强体液和细胞免疫应答 ,作者采用最近开发的利用牛乳头状瘤病毒 ( BPV)调控元件的两种不同的自身复制性载体 p BN和一种非复制性但大量转录的载体 p CGE2表达 Nef,并在小鼠中进行了试验。　　作者将 p BN- NEF、p CGE2 - NEF构建物用脂质介导的转染法转染至 COS- 1细胞 ,同时用不含 nef基因的 p CMβ- Gal载体转染COS- 1细胞 ,作为阴性对照。分别于 48和 72小时、9天、2至 3周收获转染细胞 ,用蛋白印迹法、…     

质粒DNA气溶胶吸入诱导呼吸道粘膜免疫应答的可能性

本文介绍了有关质粒DNA气溶胶吸入免疫的研究概况,以及呼吸道免疫系统的研究 进展,并就质粒DNA气溶胶吸入免疫的可能性进行了分析,提出今后研究方向。     

流感血凝素DNA疫苗诱导体液免疫应答的检定

作者向小鼠股四头肌注射流感病毒A/PR/8/34株的血凝素(HA)DNA10ng～100μg,共1～3次,每次间隔3周.用血凝抑制(HI)试验和ELISA检测免疫后小鼠体内抗HA抗体水平.两项试验结果都显示HA DNA注射剂量和注射次数与产生的抗体水平直接相关.注射lμg HA DNA三次或一次注射10～100μg HA DNA的小鼠体内均可测到抗体,而100μg HA DNA诱导的抗体水平至少与感染活流感病毒(A/PR/8/34)后产生的抗体水平相仿.免疫后抗体水平至少可维持18个月.注射次数对抗体水平影响不大.     

弓形体重组质粒pcDNA_3-SAG1免疫小鼠诱导的细胞免疫应答研究

目的 :用 pc DNA3- SAG1真核表达质粒直接免疫小鼠 ,观察 DNA免疫所诱导的小鼠细胞免疫应答 ,为研制弓形虫疫苗奠定基础。方法 :大量制备重组质粒 pc DAN3- SAG1,然后将其导入 BAL B/ c小鼠体内 ,每隔 2 1d接种一次 ,一共免疫三次。用 MTT方法对脾脏的 NK细胞和其淋巴细胞的转化率进行测定 ;采用免疫荧光法对 CD4+、CD8+ 细胞进行测定。结果 :实验组 NK细胞杀伤率为 :70 .0± 3.6 4,而 pc DNA3及空白对照分别为 :48.5± 6 .0 8和 47.0± 5 .93。实验组 NK细胞活性比对照组明显增高 (P<0 .0 5 ) ,而 pc DNA3质粒及空白对照组差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;对 T淋巴细胞亚群 CD4+、CD8+进行动态分析 ,可见随着感染时间的延长 ,CD8+的数量逐渐上升 ,CD4+ / CD8+的比率逐渐下降 ,实验组与 pc DNA3质粒及空白对照有明显差异 (P<0 .0 5 ) ;Con A刺激小鼠淋巴细胞转化实验 ,能刺激免疫鼠及对照鼠淋巴细胞增生 ,实验组与 pc DNA3质粒及空白对照组差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :重组质粒pc DNA3- SAG1免疫 BAL B/ c小鼠可诱导一定的细胞免疫。     

编码膜结合IL-4或IL-12的质粒可明显增强癌胚抗原DNA疫苗的活性

DNA疫苗可诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和体液免疫应答,是抗肿瘤和预防传染病的一种行之有效的方法.已有实验证明,细胞因子具有增强DNA疫苗免疫应答的佐剂作用,但循环性细胞因子会引起一些不良生理反应,所以此项研究试图利用膜结合表达的方式将细胞因子固定在注射部位,达到既能产生免疫佐剂作用,又不引起明显的不良反应.