2型糖尿病小鼠(KKAy)动物模型的鉴定和早期肾脏病理改变

目的：探讨KKA^y小鼠作为2型糖尿病动物模型在肾脏病研究方面的价值。方法：8周龄的雄性KKA^y小鼠（n=15)和C57BL－J小鼠（n=18),于16,20,24周处死动物。尾静脉取血测血糖（血糖仪试纸法）,全自动生化分析仪测定血LDL,TG,CHO,Cr,BUN,放免方法测血胰岛素水平。用三氯醋酸比浊法测定24h尿蛋白浓度,不同病理染色方法了解其肾脏病理改变与蛋白尿的关系。用北京航空航天大学计算机中心提供的医学彩色图象分析软件分析。结果：不同周龄手KKA^y小鼠的体重,血糖（P＜0．01）,血浆胰岛素水平,血甘油三酯,胆固醇和低密度脂蛋白水平都比同龄C57BL小鼠高（P＜0．05）。而血肌酐,尿素氮差异无 。20,24周时KKA^y小鼠的尿蛋白浓度较同龄C57BL小鼠也显著升高（P＜0．005）。KKA^y小鼠的肾小球面积普遍比C57BL小鼠大,系膜基质增加,肾小管腔扩大,管壁变薄,肾小球基底膜增厚,还可以见到蛋白管型,小管灶状萎缩。结论：KKA^y小鼠16周龄以后出现高血糖,高胰岛素血症,高脂血症,伴有尿蛋白增加,和肾小球系膜基质增加,肾小球基底膜增厚和小管扩张,是较好的研究2型糖尿病肾脏早期发病的动物模型。     

自发2型糖尿病模型KKAy小鼠脑微血管病变的研究

目的 研究KKAy小鼠的脑微血管病变,明确糖尿病脑络病理变化的具体表现.方法 9～11周龄雄性KKAy小鼠和对照组的雄性C57BL/J小鼠,测量16、20、24、28周龄小鼠空腹血糖和体重.28周时处死动物,测定血清6-Keto-PGF1α和TXB2含量.光镜和电镜观察脑组织病理形态.结果 KKAy小鼠体重、血糖比同龄对照组C57BL/J小鼠高,血清TXB2含量增高,6-Keto-PGF1α降低.KKAy小鼠脑微血管内皮细胞核肿大,管腔狭小,腔内有红细胞、血小板淤滞.神经细胞胞核疏松肿胀,线粒体轻微肿胀,粗面内质网较瘦小,核糖小体减少.结论 在高血糖和异常6-Keto-PGF1α和TXB2含量的毒性作用下,KKAy小鼠脑组织微血管内皮细胞结构和功能均有损伤,最终导致神经细胞结构破坏.     

2 型糖尿病动物模型KKAy小鼠肝、肾的病变

目的 研究2型糖尿病动物模型KKAy小鼠的糖尿病肝、肾的病变过程,探索KKAy小鼠作为2型糖尿病并发多脏器病变模型的价值.方法 9～11周龄雄性KKAy小鼠(n=20)和对照组的雄性C57BL/J小鼠(n=25),测量14、16、20、24、28周龄小鼠空腹血糖和体重.两组动物分别于24、28周处死,测定血清肌酐、尿素;胆固醇、甘油三酯;丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST).光镜观察两组小鼠肾脏、肝脏的病理改变.结果 ①KKAy小鼠体重、血糖比同龄对照组C57BL/J小鼠高(P<0.01).②24、28周龄KKAy小鼠血脂均较对照组高(P<0.05);24周龄KKAy小鼠肌酐,ALT比对照组高(P<0.05);28周龄KKAy小鼠的肌酐、ALT及AST比对照组高(P<0.05).③24、28周龄KKAy小鼠肾脏系膜基质增多,肾小管上皮细胞胞质出现明显空泡,肾问质有纤维化;肝脏结构紊乱,肝细胞胞质有明显空泡,肝细胞脂肪变.结论 KKAy小鼠14周龄以后可出现明显肥胖,高血糖,24周龄、28周龄出现高脂血症,有肝、肾形态和功能的损害,是较好的研究2型糖尿病病变过程及并发症的动物模型.     

黄芪和葛根素对2型糖尿病KKAy小鼠的肾脏保护作用及纤黏连蛋白表达的影响

目的 从肾功能和肾组织形态改变方面观察黄芪注射液联用葛根素注射液对2型糖尿病KKAy小鼠肾脏的保护作用及二者对肾组织纤黏连蛋白(fibronectin,FN)的表达影响.方法 将雄性KKAy小鼠分为模型组、黄芪注射液联合葛根素注射液治疗组,同龄雄性C57BL/6J小鼠为正常对照组.定期监测血糖、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、血清尿素及尿酸,HE及Masson染色观察肾组织病理变化,免疫组化观察肾组织FN表达情况.结果 从20周龄开始,模型组小鼠空腹血糖、血脂、血清尿素及尿酸较正常组明显升高,治疗组小鼠上述指标较模型组明显改善.HE及Masson染色见模型组肾小球硬化,肾小管上皮细胞胞浆空泡明显,肾间质胶原组织增多,治疗组小鼠以上病变明显减轻;免疫组化显示模型组FN表达较正常组明显升高,治疗组各周龄小鼠肾脏组织FN的表达与模型组比较均减少.结论 黄芪注射液联用葛根素注射液能改善2型糖尿病KKAy小鼠的肾功能,减轻肾脏的病理改变,减少系膜区FN的表达,具有保护肾脏作用.     

中药对2型糖尿病模型KKAy小鼠降糖作用的实验研究进展

查阅相关文献,从2型糖尿病模型KKAy小鼠的基本特征及中药单药、复方对KKAy小鼠的干预作用等2个方面进行概述,分析中药对2型糖尿病模型KKAy小鼠的降糖作用。认为KKAy小鼠会自发性出现“三多”症状,并伴有肥胖、高血糖、高胰岛素血症、胰岛功能不足及肝肾损伤等并发症,其发生发展机制与人类2型糖尿病非常接近,可广泛用于2型糖尿病的实验研究;单味中药及中药复方对2型糖尿病模型KKAy小鼠降糖作用及并发症方面的研究取得了一定进展,但对其作用机制的研究应更加深入。     

黄芪多糖对1型糖尿病小鼠的免疫调节作用

目的：探讨黄芪多糖（Astragalus polysaccharide,APS）对1型糖尿病的免疫调节作用。方法：以低剂量链脲菌素（streptozotocin,STZ）多次腹腔注射,建立1型糖尿病小鼠模型,每天分别用100、200、400mg/kg APS或1ml生理盐水腹腔注射,15d、30d时将小鼠处死。以形态学方法观察胰岛炎症,以放射免疫法检测血胰岛素自身抗体,以放射性同位素氚标记的嘧啶核苷（[^3H]thymidine incorporation,^3H-TdR）掺入法研究脾细胞对刀豆蛋白A（concanavalin A,Con A）的增殖反应,以酶联免疫吸附（enzymelinkedi mmunosorbent assay,ELISA）法检测脾细胞白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）和干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）的分泌,以蛋白免疫印迹（Western-blot）法检验脾过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ）的表达。结果：与对照组比较,APS处理组胰岛炎症减轻,血胰岛素自身抗体水平下降,脾细胞对Con A的增殖能力减弱,Th1/Th2分泌因子比值下调,脾PPARγ水平提高,所有这些均与APS的剂量和使用持续时间密切相关。结论：APS可通过调节体液免疫和细胞免疫治疗小鼠1型糖尿病。     

甲基化转移酶抑制剂对2型糖尿病 KKAy小鼠血糖和体重的影响

目的观察甲基化转移酶抑制剂地西他滨对2型糖尿病KKAy小鼠血糖和体重的影响,探讨其可能机制。方法将20只2型糖尿病KKAy小鼠按随机数字表法分为两组,实验组10只使用地西他滨治疗,剂量为15 mg? m-2? d-1,对照组10只使用生理盐水治疗,记录两组治疗前后的血糖、体重。结果治疗结束后,对照组小鼠的血糖和体重均增加（P＜0．05）,实验组体重增加（P＜0．05）,而血糖治疗前后差异无统计学意义（P＞0．05）。治疗后实验组血糖、体重及增加幅度均低于对照组（P＜0．05）。结论甲基化转移酶抑制剂能缓解2型糖尿病小鼠血糖和肥胖的恶化,其机制可能与能量代谢通路和胰岛素信号的重要基因发生了去甲基化有关。     

黄芪多糖对KKAy小鼠骨骼肌蛋白激酶B丝氨酸磷酸化的影响

目的:观察胰岛素刺激下蛋白激酶B(PKB)丝氨酸磷酸化水平在遗传性2型糖尿病小鼠(KKAy)骨骼肌组织的变化及黄芪多糖(APS)对其影响。方法:选取雌性KKAy16只,随机分为2组:糖尿病组和糖尿病黄芪多糖治疗组;选取雌性C57BL/6J小鼠20只作为对照组,随机分为正常对照组和黄芪多糖对照组。于黄芪多糖治疗前后观察体重、血糖、血胰岛素水平、胰岛素抵抗指数及口服葡萄糖耐量试验,治疗8周后用免疫印迹法检测骨骼肌组织胰岛素刺激的丝氨酸磷酸化PKB表达。结果:KKAy小鼠体重、血糖及胰岛素抵抗指数均显著高于C57BL/6J组,同时伴有明显的糖耐量异常(P<0.01),经APS治疗8周后,各项实验指标均明显降低(P<0.01)。KKAy小鼠骨骼肌组织胰岛素刺激的丝氨酸磷酸化PKB表达水平显著低于C57BL/6J小鼠(P<0.01),黄芪多糖可明显提高KKAy小鼠骨骼肌丝氨酸磷酸化PKB表达(P<0.05),但对C57BL/6J小鼠各项指标无显著影响。结论:胰岛素刺激下的PKB磷酸化障碍是2型糖尿病胰岛素抵抗的重要机制之一,黄芪多糖可增强胰岛素刺激的丝氨酸磷酸化PKB表达水平,从而改善KKAy小鼠胰岛素抵抗。     

黄芪多糖对2型糖尿病大鼠抵抗素基因表达的影响

目的：探讨黄芪多糖对2型糖尿病（2-diabetes mellitus,2-DM）大鼠抵抗素（resistin）基因表达的影响。方法：将Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、黄芪多糖高、中、低剂量治疗组。用药12周后,RT—PCR检测resistinmRNA基因表达水平。结果：黄芪多糖高、中剂量治疗组resistinmRNA表达低于模型组（P〈0．01）。结论：黄芪多糖可降低2型糖尿病大鼠resistinmRNA表达。     

黄芪多糖对2型糖尿病大鼠肾组织胰岛素信号转导的影响

目的:研究黄芪多糖(APS)对 2 型糖尿病大鼠肾组织胰岛素信号分子表达的影响。方法:Wistar大鼠随机分成正常对照组(Control组)、链脲佐菌素(STZ)糖尿病组(DM组)和糖尿病黄芪多糖治疗组(DM+APS组),5周后观察动物一般情况,处死动物取血测血糖、血清胰岛素水平,用免疫组化的方法检测肾组织中胰岛素受体(InsR)、胰岛素受体底物 1(IRS 1)、磷脂酰肌醇3 激酶(PI3K)表达水平。结果:DM组体重水平高于 Control组和DM+APS组,差别有显著性(P<0.01);DM组和DM+APS组血糖水平均高于 Control组(P<0.01),DM+APS组血糖水平低于DM组(P<0.01);各组间血胰岛素水平差别无显著性(P> 0. 05); DM组肾组织 InsR、IRS 1、PI3K的表达水平均低于Control组和DM+APS组(P<0.05)。结论:黄芪多糖可降低 2 型糖尿病大鼠血糖水平,其机制可能与提高糖尿病大鼠肾组织中 InsR、IRS 1、PI3K水平,增加组织对胰岛素的敏感性,改善胰岛素信号转导有关。     

中药黄芪多糖对糖尿病大鼠心肌GLUT4表达的影响

目的:探讨黄芪多糖(APS)对糖尿病大鼠的治疗作用以及对心肌组织葡萄糖转运蛋白(GLUT)4表达的影响。方法:Wistar大鼠40只,雄性,随机分为4组,每组10只:正常对照组、糖尿病组(高热量饮食+小剂量链脲佐霉素35mg·kg-1,尾静脉注射)、APS组(正常对照组+APS)和APS+糖尿病组(APS400mg·kg-1·d-1,溶液灌胃)。给药5周后观察动物一般情况,检测血糖和血清胰岛素水平,取心脏包埋制片用免疫荧光法检测GLUT4表达。结果:糖尿病组动物血糖水平及体重显著高于其他3组(P<0.01),APS+糖尿病组血糖水平高于正常对照组(P<0.01),血清胰岛素水平变化无统计学差异(P>0.05),心肌GLUT4表达量明显低于其他各组(P<0.01);APS组血糖,体重及血清胰岛素水平与正常对照组间均无统计学差异(P>0.05)。结论:APS具有降低糖尿病大鼠血糖和改善心肌胰岛素抵抗的作用,其机理可能与增强心肌组织中GLUT4的表达有关。     

IRS-1的表达和泛素化在KKAy及C57BL/6J小鼠糖尿病发展过程中的意义

目的:探讨胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白表达和泛素化水平在糖尿病发展过程中的作用。方法:20只8周龄C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组(正常饲料喂养,n=10)和胰岛素抵抗组(高脂饲料喂养,n=10)。8周龄KKAy小鼠8只,高脂饲料喂养,为2型糖尿病组。检测各组小鼠体重、血糖和血胰岛素水平。12周后免疫印迹检测各组动物肝组织IRS-1的表达量,同时采用剥离免疫印迹法检测肝组织IRS-1的泛素化水平。结果:高脂喂养12周后C57BL/6J小鼠出现胰岛素抵抗,KKAy小鼠出现肥胖和糖尿病。2型糖尿病组IRS-1的表达显著低于正常对照组和胰岛素抵抗组(P<0.05),而IRS-1的泛素化水平则显著高于胰岛素抵抗组(P<0.05),与对照组无显著性差异(P>0.05)。结论:2型糖尿病时IRS-1的表达下调,IRS-1泛素化水平增加是导致胰岛素信号转导障碍的重要原因。     

黄芪多糖对2型糖尿病早期大鼠视网膜Muller细胞Kir2.1表达的影响

目的:探讨黄芪多糖对链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病大鼠早期视网膜Muller细胞Kir2.1表达的影响。方法:雄性SPF级SD大鼠随机分为:正常对照组(C组,n=10),黄芪多糖对照组(CA组,n=10),饲以正常饲料;通过高脂饮食加小剂量STZ诱导复制2型糖尿病大鼠模型,将血糖>13.9 mmol/L者随机分为糖尿病组(DM组,n=8)及黄芪多糖治疗组(DA组,n=8)。治疗前后观察血糖、口服葡萄糖耐量变化。从4组大鼠视网膜提取总mRNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Kir2.1 mRNA的表达。结果:DM组血糖显著高于C组,同时伴有明显的糖耐量下降(P<0.01),经黄芪多糖治疗8周后,DA组血糖降低,与DM组比较糖耐量改善(P<0.01)。RT-PCR扩增的Kir2.1 cDNA产物在DM组表达比在C组下降,而在CA组表达较DM上升(P<0.05),但在C组与CA组中未出现这种显著性的改变(P>0.05)。结论:黄芪多糖能够降低血糖,糖尿病大鼠早期视网膜Muller细胞Kir2.1蛋白表达下降,而黄芪多糖对于逆转这一早期的改变可能起到一定作用,从而起到减少糖尿病视网膜病变发病率的作用。     

黄芪多糖在宿主抵抗李斯特菌中的作用

目的:观察黄芪提取物注射小鼠后,对小鼠抵抗单核细胞增生李斯特菌能力的影响。方法:水煮法提取黄芪多糖,配成悬液,腹腔注射感染李斯特菌的小鼠,并设对照,每组20只昆明鼠,观察小鼠的生存时间,脾脏的重量指数,脏器菌落计数,检测小鼠血清中抗体IgG水平,利用ELISA法测定小鼠脾脏释放的细胞因子。结果:注射黄芪多糖的小鼠,在30d观察期结束后仍有12只存活,而对照组只有2只存活。黄芪多糖组小鼠脾脏的重量指数(5.2±1.2),菌落计数(4.1±1.5)均比对照组的重量指数(11.0±0.9),菌落计数(8.8±1.3)明显降低。黄芪多糖组小鼠血清中抗体滴度(OD490)为0.38±0.05,对照组的抗体滴度为0.18±0.07。ELISA法测的黄芪多糖组小鼠脾脏细胞分泌IFN-γ为(240±15)ng/L,对照组为(150±19)ng/L。结论:黄芪多糖能够增强宿主的体液免疫和细胞免疫来保护宿主抵抗胞内菌的感染。     

厄贝沙坦联合格列齐特对2型糖尿病大鼠肾功能的保护作用与机制

目的 研究厄贝沙坦联合格列齐特对 2 型糖尿病（T2DM）大鼠肾功能的保护作用与机制。方法 建立 T2DM 大鼠模型后,分别给予格列齐特、厄贝沙坦联合格列齐特灌胃治疗,定期检测大鼠血糖、血脂、血清胰岛素、肌酐、尿素氮、尾动脉血压、肾脏肥大指数和肾皮质钠泵活性等指标的变化。结果 ①与正常对照组比较, 8 w 和 16 w 时模型大鼠 ISI 和肾皮质钠泵活性都显著降低,血糖、血脂、血压、血肌酐和尿素氮都显著升高（P〈0.01）,16 w时肾脏肥大指数显著升高（P〈0.01）。②与模型对照组比较,格列齐特治疗组和厄贝沙坦联合格列齐特治疗组大鼠血糖、血脂、血肌酐和尿素都显著降低,ISI 和肾皮质钠泵活性都显著升高,16 w 时肾脏肥大指数也显著降低（P〈0.01）。③与格列齐特治疗组比较,厄贝沙坦联合格列齐特治疗组大鼠尾动脉血压、血肌酐和尿素都显著降低,ISI 和肾皮质钠泵活性显著升高,16 w 时大鼠的肾脏肥大指数也显著降低（P〈0.01）,其余指标比较无统计学意义（P〉0.05）。④厄贝沙坦联合格列齐特治疗 8 w 和 16 w 组间比较,除 16 w 时血尿素氮显著降低外,其余指标差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 厄贝沙坦联合格列齐特比单独使用格列齐特治疗 T2DM 大鼠,能更有效保护大鼠肾功能,其机制可能与格列齐特降低大鼠血糖、血脂,同时厄贝沙坦抑制肾脏局部肾素-血管紧张素系统的作用有关。     

黄芪多糖对2型糖尿病大鼠HPA轴及海马糖皮质激素受体水平的调节作用

目的：观察黄芪多糖（APS）对2型糖尿病大鼠HPA轴及海马组织中糖皮质激素受体水平的调节作用。方法：30只SD大鼠随机分为正常对照组、DM模型组、APS干预组组,采用小剂量链脲佐茵素加高脂饮食饲养的方法建立2型糖尿病肥胖大鼠模型。成模4周后,断头处死所有大鼠,检测各组大鼠血CRH、ACTH、CorT的含量,以及海马组织中糖皮质激素受体（GR）mRNA的表达。结果：DM模型组血ACTH、CorT含量较正常组显著升高,与模型组大鼠相比,APS干预组大鼠血ACTH、CorT含量显著降低（P〈0．05）;DM模型组海马GRmRNA含量较正常组极显著降低,与模型组大鼠相比,APS干预组大鼠海马GRmRNA含量明显上调（P〈0．01）。结论：APS保护高糖环境下的海马组织,改善HPA轴功能。对糖尿病以及合并症起到治疗作用。     

苦瓜黄芪黄芩苷对2型糖尿病大鼠模型胰岛素抵抗的影响

目的:观察中药苦瓜、黄芪、黄芩苷实验性2型糖尿病大鼠血糖、胰岛素和胰岛素敏感指数的影响.方法:用高热量饲料加小剂量链脲佐菌素(30mg/kg)建立实验性2型糖尿病大鼠模型后,用苦瓜、黄芪、黄芩苷治疗6周,测定空腹血糖,血清胰岛素,计算出胰岛素敏感指数.结果:苦瓜、黄芪、黄芩苷能降低实验性2型糖尿病大鼠空腹血糖、提高胰岛素敏感指数.结论:苦瓜、黄芪、黄芩苷具有改善实验性2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用.     

青刺果多糖对糖尿病小鼠肝组织病理变化的影响

目的:观察青刺果多糖对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠肝组织病理变化的影响,并探讨其对糖尿病小鼠肝脏保护作用.方法:腹腔一次性注射四氧嘧啶复制模型.造模成功后,将实验动物分为模型组、青刺果多糖治疗组、阳性药物治疗组.另设正常对照组.实验小鼠分别于给药2周末和4周末处死,取肝脏称重,测定肝脏脏器指数,然后固定于4%的多聚甲醛中,制作病理切片,HE染色,光镜下观察.结果:青刺果多糖治疗组和阳性药物治疗组可显著降低糖尿病小鼠的肝脏脏器指数(P＜0.05).病理组织观察:模型组小鼠肝细胞索排列紊乱;肝血窦增宽,肝细胞索间纤维细胞增生,肝细胞发生脂肪变性和局灶性坏死,坏死灶内大量炎性细胞浸润,中央静脉周围炎性细胞浸润.经青刺果多糖治疗后,肝细胞索状结构清晰,肝血窦基本正常,肝细胞索间增生的纤维细胞数量减少,肝细胞有轻微的颗粒变性.结论:青刺果多糖对糖尿病小鼠肝脏具有保护作用.