氧化还原系统在砷剂诱导卵巢癌细胞凋亡中的作用

[目的]观察氧化还原系统在砷剂诱导卵巢癌细胞凋亡中的作用。[方法]砷剂孵育卵巢癌细胞48小时后,琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪检测细胞凋亡,分光光度法检测细胞内谷胱甘肽、活性氧及丙二醛含量。[结果]砷剂具有诱导卵巢癌细胞凋亡作用,砷剂诱导后细胞内谷胱甘肽含量减少(P<0.01)、活性氧及丙二醛含量增加(P<0.05)。[结论]氧化还原系统的改变是砷剂诱导卵巢癌细胞凋亡的重要途径之一。     

不同肿瘤细胞对表没食子儿茶素没食子酸酯细胞毒敏感性的差异及其机制

目的　探讨表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG )对大肠癌LoVo细胞、胃癌MGC 80 3细胞和肝癌BEL 740 2细胞细胞毒作用 ,及其作用的差异性和可能的分子机制。方法　在有或无谷胱甘肽合成酶抑制剂DL buthionine [S ,R ] sulfoximine(BSO )预处理的情况下 ,采用MTT法和台盼蓝拒染法测定EGCG对 3株肿瘤细胞的细胞毒作用。采用紫外分光光度法和流式细胞术分别测定经BSO处理的 3株肿瘤细胞的细胞内谷胱甘肽含量和bcl 2蛋白表达水平的变化。结果　EGCG对 3株肿瘤细胞均有细胞毒作用 ,但作用的强弱有所不同 ,其中LoVo细胞较为敏感 ,MGC 80 3细胞次之 ,而BEL 740 2细胞的敏感性最差。他们的IC5 0值分别为 12 5 .30 μg/ml、188.5 2 μg/ml和 2 6 4.5 3μg/ml。用BSO降低这些肿瘤细胞内谷胱甘肽的含量 ,可明显地增强EGCG对 3株肿瘤细胞细胞毒作用的敏感性。BSO以时间依赖的方式下调MGC 80 3和BEL 740 2细胞中bcl 2蛋白表达水平。结论　EGCG对 3株肿瘤细胞细胞毒作用的差异性与细胞内谷胱甘肽含量有关 ,谷胱甘肽和bcl 2蛋白的相互作用可能是这种差异性的分子机制。     

红细胞谷胱甘肽与肿瘤化疗反应

谷胱甘肽是哺乳动物细胞内主要的非蛋白硫基,在细胞解毒过程中起着重要作用.它以还原型(GSH)和氧化型(GSSH)两种形式平衡存在.体外和体内研究表明,总谷胱甘肽浓度与化疗抗药性及放疗耐受性呈正相关,应用消耗谷胱甘肽的药物(如BSO和马来酸乙二酯,能消除获得性抗药性.然而迄今为止尚未对肿瘤GSH状态及其与疗效的关系进行研究,因大多数肿瘤需经某种创伤性手术取样,并且活检标本中细胞成份量不同(即基质或肿瘤细胞亚群GSH含量各异)可混淆谷胱甘肽测定.研究表明,甲状腺功能减退、核黄素缺乏症等     

血液肿瘤细胞对氧化砷的敏感性与其抗氧化能力的关系

目的　探讨血液肿瘤细胞对三氧化二砷 (As2 O3 )的敏感性和细胞抗氧化能力的关系。方法　应用 9个血液肿瘤细胞系 ,通过细胞活力、形态学和流式细胞仪检测细胞凋亡 ,并测定细胞系的谷胱甘肽 (GSH)含量和 4种抗氧化酶的活性。结果　除了HL 6 0、U937、K5 6 2和Jurkat细胞外 ,其他5个细胞对As2 O3 诱导的凋亡敏感。与敏感细胞系比较 ,As2 O3 耐受细胞系存在较高的GSH含量和(或 )过氧化氢酶活性。谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽S转移酶和超氧化物歧化酶活性与细胞对As2 O3 诱导凋亡效应敏感性无明显相关。结论　细胞内GSH水平和过氧化氢酶的活性是决定血液肿瘤细胞对As2 O3 敏感性的重要因素。     

微囊藻毒素-LR对PC12细胞氧化性损伤作用的实验研究

目的:探讨微囊藻毒素-LR(microcystins-LR,MC-LR)对PC12细胞的毒性作用及其机制。方法:用MC-LR对PC12细胞进行染毒,以MTT法测定其对细胞的毒性作用;同时通过测定细胞培养液和细胞内的氧化应激指标初步判断MC-LR对细胞的氧化损伤作用。结果:MC-LR染毒12、24、48 h,对PC12细胞的半数抑制浓度(IC_(50))分别是89.06、47.24、33.13μg/L。MC-LR染毒24h后,细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性升高。当染毒浓度大于等于10μg/L时,细胞中生成丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量随着染毒浓度的增加逐渐升高(P0.05);过氧化氢酶(CAT)含量的变化和SOD具有一致性。而谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量与对照组相比未见显著差异(P0.05)。结论:MC-LR可以抑制PC12细胞的增殖能力和引起细胞膜损伤,并发生氧化损伤作用。     

含硫氨基酸影响抗癌药疗效的研究

文献提示,含硫化合物可降低烃化剂类抗癌药的毒性,与此同时亦可降低抗癌疗效。Karen等、Green等和Hamilton等报道,细胞内谷胱甘肽(GSH)的含量水平与烃化剂类抗癌药苯丙氨酸氮芥及金属类的顺铂(DDP)等的抗癌作用有密切关系。我们为此进行了实验研究,以探讨含硫氨基酸(蛋氨酸和半胱氨酸)与抗癌药DDP和甲基苯丙氨酸氮芥(AT-1420)合用时,前者对抗癌药在小鼠网细胞肉瘤L_2和小鼠肉瘤S180的抗癌作用方面有何影响?从而为配制不含     

硝基苯和苯胺对大鼠原代肝细胞氧化损伤的作用

目的:从氧化损伤途径研究硝基苯和苯胺对Wistar大鼠原代肝细胞的联合毒作用,为预防环境化合物对人体健康损害提供理论依据。方法:分别用不同浓度(1.25、2.5、5.0、10.0和20～mmol/L),的硝基苯、苯胺及其混合物处理大鼠原代肝细胞24 h后,采用MTT法测定各组细胞的存活率,并进一步测定各组细胞或上清液中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和超氧化物歧化酶(SOD)的变化。结果:与阴性对照组相比,大鼠原代肝细胞经硝基苯、苯胺及其混合物处理24 h后,其细胞存活率均随所给化合物浓度的增加而降低(P<0.05),且硝基苯-苯胺联合染毒组的细胞存活率明显低于单一化合物的细胞存活率(P<0.05)。随着硝基苯、苯胺和两者混合物浓度的增高,MDA、ALT含量呈现上升趋势(P<0.05);且硝基苯-苯胺联合染毒组细胞MDA、ALT含量均显著高于硝基苯和苯胺单独存在时(P<0.05)。与阴性对照组比较,硝基苯和苯胺及其混合物均可显著降低细胞SOD、GSH和GSH-px含量(P<0.05),并呈现剂量反应关系(P<0.05)。与硝基苯和苯胺单独作用组相比,硝基苯-苯胺联合染毒组细胞SOD、GSH和GSH-px活力均显著降低(P<0.05)。结论:硝基苯和苯胺及其混合物可造成大鼠原代肝细胞氧化损伤,硝基苯与苯胺对肝细胞毒性作用可能存在着协同作用,其作用机制有待进一步研究。     

木犀草素通过Nrf2/HO-1通路诱导耐多柔比星K562/ADR细胞发生铁死亡

目的：研究木犀草素(luteolin,Lut)对人耐多柔比星(adriamycin,ADR)慢性髓系白血病(chronicmyelogenousleukemia,CML)细胞K562/ADR增殖及铁死亡的影响,并探讨可能的作用机制。方法：用不同浓度的ADR处理K562细胞和K562/ADR细胞,采用CCK-8法检测K562细胞和K562/ADR细胞对ADR的敏感性;采用CCK-8法检测不同浓度Lut对K562/ADR细胞增殖的影响,并计算半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)筛选出后续实验的药物浓度。不同浓度的Lut处理后,在倒置光学显微镜下观察细胞形态的变化;CCK-8法检测Lut对ADR的增敏作用,FCM法检测Lut对K562/ADR细胞凋亡的影响;随后再用荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧(reactive oxygenspecie,ROS)的含量,谷胱甘肽(glutathione,GSH)试剂盒检测各组细胞内GSH的含量;Fe²⁺比色法检测各组细胞内Fe²⁺的含量,蛋白质印迹法检测各组...     

Combined toxicity of nitrobenzene and aniline in primary culture of rat hepatocytes

目的:从氧化损伤途径研究硝基苯和苯胺对Wistar大鼠原代肝细胞的联合毒作用,为预防环境化合物对人体健康损害提供理论依据.方法:分别用不同浓度(1.25、2.5、5.0、10.0和20.0 mmol/L)的硝基苯、苯胺及其混合物处理大鼠原代肝细胞24 h后,采用MTT法测定各组细胞的存活率,并进一步测定各组细胞或上清液中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和超氧化物歧化酶(SOD)的变化.结果:与阴性对照组相比,大鼠原代肝细胞经硝基苯、苯胺及其混合物处理24 h后,其细胞存活率均随所给化合物浓度的增加而降低(P＜0.05),且硝基苯-苯胺联合染毒组的细胞存活率明显低于单一化合物的细胞存活率(P＜0.05).随着硝基苯、苯胺和两者混合物浓度的增高,MDA、ALT含量呈现上升趋势(P＜0.05);且硝基苯-苯胺联合染毒组细胞MDA、ALT含量均显著高于硝基苯和苯胺单独存在时(P＜0.05).与阴性对照组比较,硝基苯和苯胺及其混合物均可显著降低细胞SOD、GSH和GSH-px含量(P＜0.05),并呈现剂量反应关系(P＜0.05).与硝基苯和苯胺单独作用组相比,硝基苯-苯胺联合染毒组细胞SOD、GSH和GSH-px活力均显著降低(P＜0.05).结论:硝基苯和苯胺及其混合物可造成大鼠原代肝细胞氧化损伤,硝基苯与苯胺对肝细胞毒性作用可能存在着协同作用,其作用机制有待进一步研究.     

左旋肉碱对化疗时肾脏作用的实验研究

目的　探讨左旋肉碱对 5 -Fu致肾脏损伤的保护作用。方法　 2 4只大鼠分为对照组和实验组 ,两组均于实验第 4d以 5 Fu灌注腹腔造成大鼠肾脏损伤的模型 ,实验组每日给予左旋肉碱灌胃 ,第 8d处死后行一氧化氮 (NO)、丙二醛 (MDA)含量测定及谷胱甘肽过氧化氢酶 (GSH Px)、一氧化氮合酶 (NOS)的酶活性检测。结果　肾脏组织中实验组NOS酶活性及MDA、NO含量均较对照组明显降低 (P <0 0 5 ) ;而GSH Px酶活性与对照组相比明显增高 (P <0 0 5 )。结论　左旋肉碱对 5 Fu引起大鼠肾脏损伤的保护作用 ,可能是通过提高组织清除氧自由基的能力 ,减少氧自由基的生成 ,降低脂质过氧化反应引起的肾脏细胞结构和功能异常实现的     

还原型谷胱甘肽对蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡影响的研究

目的:探讨还原型谷胱甘肽在启动蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡中的作用.方法:选取4种人甲状腺未分化癌细胞系ARO、FRO、KTC2和8305C,分别设空白对照组、万珂处理组;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡;测定还原型谷胱甘肽(GSH)含量、谷氨酸半胱氨酸合成酶(GCL)和谷胱甘肽合成酶(GS)的活性;实时定量PCR法检测GCL和GS mRNA的水平.结果:与对照组相比,蛋白酶体抑制剂万珂对人甲状腺癌细胞系FRO和KTC2具有很强的细胞凋亡诱导作用;万珂处理24 h时,FRO、KTC2细胞中GSH水平下降,差异有统计学意义,P＜0.01;ARO和8305C细胞中GSH水平显著增加,差异有统计学意义,P＜0.01.万珂处理组FRO和KTC2甲状腺癌细胞中,GCL的活性没有变化而GCL mRNA也仅有轻度增加,P＞0.05;但在ARO和8305C细胞中,万珂作用8h后,GCL的活性及mRNA的表达显著增加,差异有统计学意义,P＜0.01;而GS活性及mRNA水平在各组细胞中的变化差异均无统计学意义,P＞0.05.结论:蛋白酶体抑制剂可诱导耐药的甲状腺癌细胞中GCL转录和活性增高,提高GSH在细胞中的表达,导致蛋白酶体抑制剂诱导的肿瘤细胞凋亡受抑.     

2-DG对肺腺癌A549细胞增殖的影响及其相关机制

目的:探讨2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)对肺腺癌A549细胞增殖的影响及其相关机制.方法:不同浓度的2-DG与抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)单独及联合处理A549细胞,CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞生存率;DCFH-DA (2’,7’-dichlorodihydrofluorescein diacetate)染色检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的变化;比色法检测A549细胞内氧化型谷胱甘肽占总谷胱甘肽含量的百分比;实时荧光定量PCR检测细胞内SOD、CAT和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px) mRNA的转录情况.结果:2-DG可以显著抑制A549细胞的生长,同时伴随着细胞内ROS产生增多和氧化型谷胱甘肽所占的百分比升高.2-DG干预后,细胞内CAT和GSH-Px mRNA表达水平上调,而SOD mRNA的表达水平未出现明显变化.A549细胞经NAC和CAT预处理后,2-DG的抗肿瘤作用明显减弱,而特异性氧自由基清除剂SOD对2-DG的抗肿瘤作用没有明显影响.结论:2-DG能够抑制A549细胞增殖,其机制可能与诱导ROS的生成,尤其是H2O2的生成有关.     

lq7611对离体培养的人宫颈癌细胞谷胱甘肽含量的影响—放射增敏机理探讨

本文报道了Iq7611对有氧和乏氧状态下的Hela细胞谷胱甘肽含量的影响。结果表明Iq7611可降低Hela细胞谷胱肽的含量,尤以乏氧状态时更为明显。众所周知,肿瘤细胞内谷胱甘肽通过捕获自由基而减弱了放射对肿瘤的杀伤作用。由于Iq7611可降低肿瘤组织的谷胱甘脉含量,所以增强了肿瘤细胞对放射的敏感性,这可能是Iq7611放射增敏作用的杌理之一。     

维生素E琥珀酸酯经由活性氧诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡

背景与目的:研究维生素E琥珀酸酯(VES)对人胃腺癌SGG7901细胞生长的抑制作用,探索VES诱导SGC-7901细胞凋亡情况及其可能机制.材料与方法:胃癌SGC-7901细胞分为VES不同浓度处理组和1 mmol/L甘露醇+20 μg/ml VES处理组(细胞先用1 mmol/L的甘露醇处理2 h后,加入20 μg/ml的VES处理),SGC-7901细胞经受试物处理24 h后,采用MTT、单细胞凝胶电泳方法和流式细胞技术,检测VES诱导SGC-7901细胞的氧化损伤及凋亡的情况,用相应的生化检测试剂盒检测细胞内活性氧及谷胱甘肽的含量变化. 结果:0、1.25、2.5、5、10、20 μg/ml的VES对胃癌细胞SGC-7901细胞的生长均有不同程度的抑制作用,其中20 μg/mlVES组抑制作用最大,其生长抑制率达76.91%.研究结果还显示随VES浓度的增加,细胞凋亡率呈现增加的趋势.彗星实验结果显示,各实验组随着VES浓度的增加,彗星尾长与彗星细胞率呈现增加的趋势.VES 10、20 μg/ml组与阴性对照组相比,SGC-7901细胞内谷胱甘肽含量显著下降(P<0.05),同时活性氧含量显著增加(P<0.05).1 mmol/L甘露醇+20μg/ml VES处理组与VE$20 μg/ml处理组比较:SGC-7901细胞DNA损伤程度较轻,细胞凋亡率明显低于YES 20 μg/ml处理组,其细胞内活性氧的生成减少,细胞内谷胱甘肽的消耗减少(P<0.05).绪论:VES可显著抑制胃癌细胞SGC-7901的生长,且随VES剂量的增加,其抑制作用越强.细胞内活性氧含量增加、谷胱甘肽耗竭所导致的氧化损伤作用可能是VES诱导细胞凋亡的机制之一.     

蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡机制的探讨

目的:探讨p38MAPK信号转导通路参与蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡的作用机制。方法:选取甲状腺癌细胞系,利用丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的三种抑制剂抑制磷酸化途径,利用微小RNA干扰技术转染细胞,封闭p38MAPK。用蛋白质印迹法检测红系衍生的核因子2相关因子2(Nrf2)及p38MAPK的表达,实时定量PCR检测细胞内GCLC mRNA的表达,测定还原型谷胱甘肽的含量,流式细胞仪法检测甲状腺癌细胞凋亡率。结果:在甲状腺癌细胞系8305C细胞中,与对照组相比,p38MAPK的抑制剂SB203580和sip38MAPK均能够抑制蛋白酶体抑制剂诱导的Nrf2细胞核易位(P<0.01),并使随后的GCLC mRNA表达减少、GSH含量减少(P<0.01),显著提高蛋白酶体抑制剂诱导的甲状腺癌细胞凋亡率(P<0.01),而其他2种抑制剂和随机序列核酸siRNA无上述作用。结论:蛋白酶体抑制剂通过p38MAPK途径激活Nrf2的细胞核易位,进而导致GCLC的诱导作用和谷胱甘肽生成的连锁反应,成为蛋白酶体抑制剂在甲状腺癌细胞中的一种抗凋亡机制。     

外源性一氧化氮对大鼠肝S9药物代谢酶活性的影响

本文报道了采用亚硝基铁氰化钠作为一氧化氮的前体，当亚硝基铁氰化钠终浓度为０．００３３￣０．１ｍＭ／Ｌ浓度组范围内，研究对大鼠肝Ｓ９的细胞色素Ｐ４５０的含量、苯胺羟化酶和谷胱甘肽硫转移酶活性的影响。实验结果表明外源性一氧化氮能明显降低细胞色素Ｐ４５０含量，抑制苯胺羟化酶活性，对谷胱甘肽硫转移酶活性无明显影响。     

口服花菜汁对大鼠肝脏谷胱甘肽转移酶、还原型谷胱甘肽及细胞色素P_(450)的影响

本文研究了花菜汁对大鼠肝脏谷胱甘肽转移酶(GST)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)水平及细胞色素P_(450)含量的影响。成年Splague—Dawley大鼠随机分为3组,每组12只,雌雄各半。3组动物分别用灌胃法给予花菜汁0、2.5、10.0ml/kg,每日2次,连续4周。结果显示,给花菜汁的2组动物肝细胞GST活性分别比对照组增加51.3％和66.7％;给花菜汁10.0ml/kg组肝脏GSH水平比对照组提高60.1％;细胞色素P_(450)含量在各组之间无显著差异。说明花菜在肿瘤预防中有一定实用意义。     

含硫氨基酸影响抗癌药疗效的研究

文献提示,含硫化合物可降低烃化剂类抗癌药的毒性,与此同时亦可降低抗癌疗效。Karen等、Green等和Hamilton等报道,细胞内谷胱甘肽(GSH)的含量水平与烃化剂类抗癌药苯丙氨酸氮芥及金属类的顺铂(DDP)等的抗癌作用有密切关系。我们为此进行了实验研究,以探讨含硫氨基酸(蛋氨酸和半胱氨酸)与抗癌药DDP和甲基     

葡萄籽原花青素对顺铂诱导小鼠睾丸支持细胞TM4损伤的保护作用

目的 研究葡萄籽原花青素（grape seed proanthocyanidin extract, GSPE）对顺铂（Cisplatin, cDDP）诱导的小鼠睾丸支持细胞TM4损伤的保护作用,并探讨其可能的机制。方法 体外培养正常小鼠睾丸支持细胞TM4,MTT法测定GSPE、cDDP分别对TM4细胞生长的影响以及GSPE对cDDP诱导的TM4细胞损伤的保护作用,硫代巴比妥酸法测定细胞内丙二醛（MDA）含量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）含量,二硫代二硝基苯甲酸法测定谷胱甘肽（GSH）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）含量,硝酸还原酶法测定一氧化氮（NO）、一氧 化氮合酶（NOS）含量,同时观察细胞形态学变化。结果 GSPE可显著增强TM4细胞存活率,抑制cDDP对TM4细胞的毒性作用,降低细胞内MDA、NO、NOS含量,减缓SOD、GSH、GSHPx 耗竭,对cDDP诱导TM4细胞抗氧化酶活力降低和脂质过氧化物含量升高有显著抑制作用（P ＜0.01）。结论 GSPE能有效抑制cDDP诱导的TM4细胞氧化性损伤,其机制可能与GSPE的抗氧化作用相关。     

JNK通路介导的铁死亡在三阴性乳腺癌细胞增殖及凋亡中的作用

目的：研究c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路介导的铁死亡在三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖及凋亡中的作用。方法：收集2020年1月—2022年5月佳木斯大学附属第一医院肿瘤科手术切除的105例TNBC癌组织和癌旁正常组织，并分别培养TNBC细胞系MDA-MB-231以及非TNBC细胞系MCF-7、SK-BR-3，采用Western blot检测TNBC组织、癌旁正常组织、TNBC细胞系、非TNBC细胞中磷酸化JNK(p-JNK)、铁死亡标志基因转铁蛋白受体1(TFR1)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达水平。另将MDA-MB-231细胞分为对照组、JNK激动剂组(5μmol/L ANISO)、铁死亡抑制剂组(2μmol/L Ferrostatin-1)、激动剂+抑制剂组(5μmol/L ANISO+2μmol/L Ferrostatin-1)。各组细胞分别处理24 h后，采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率，TUNEL法检测细胞凋亡率，分别采用试剂盒检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量；采用荧光定量PCR和Western blo...