溃疡性结肠炎肠黏膜组织PAR-2及COX-2表达及其相关性研究

目的：研究溃疡性结肠炎（UC）患者肠黏膜蛋白酶激活受体2（PAR-2）及环氧合酶2（COX-2）表达情况及在UC发病机制中的作用。方法：UC患者36例,对照组33例,均行内镜检查并活检肠黏膜组织,应用组织病理学及免疫组织化学分析组织中PAR-2及COX-2表达情况。结果：UC患者肠黏膜PAR-2和COX-2表达均高于对照组（P〈0．05）。重度UC组PAR-2及COX-2表达高于中度、轻度及对照组（P〈0．05）;病理I～IV级病变肠黏膜中PAR-2表达均高于对照组（P〈O．05）,Ⅲ～IV级高于I～Ⅱ级（P〈0．05）。病理Ⅲ～IV级COX-2表达明显高于I～Ⅱ级及对照组（P〈O．05,P〈0．01）。UC患者正规治疗,进入缓解期后两者表达明显下降（P〈O．01）。在肠黏膜组织中PAR-2表达与COX-2表达呈正相关（r：=O．501,P〈0．01）;均与UC病理分级呈正相关（P〈O．05）。结论：UC的发生发展与PAR-2及COX-2过度表达密切相关,两者共同促进炎症的发生发展。     

HMGB1对急性坏死性胰腺炎大鼠肠上皮细胞紧密连接相关蛋白表达的影响

目的：观察急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠肠黏膜中高迁移率族蛋白B1（HMG81）的表达对肠黏膜上皮细胞紧密连接功能的影响。方法：24只Wistar大鼠随机分为正常对9帚组、ANP组和丙酮酸乙酯（EP）处理组,分别于建模后24h取材。测定血浆淀粉酶（AMY）、血浆D-乳酸、肠黏膜髓过氧化物酶（MPO）水平变化;应用Westernblot法检测ANP大鼠肠黏膜中HMGBl和occludin蛋白水平的变化。结果：在建模后24h,大鼠AMY、D-乳酸与肠黏膜MPO水平ANP组明显高于正常对照组和EP处理组（P〈0．05）,但EP处理组仍高于正常对照组（P〈0．05）;ANP组大鼠肠黏膜HMGBl表达水平明显高于正常对照组和EP处理组（P〈005）,EP处理组高于正常对照组（P〈0．05）;而肠黏膜上皮细胞紧密连接蛋白occludin的表达ANP组较正常对照组和EP处理组下降（P〈0．05）,EP处理组低于正常对照组（P〈0．05）。结论：ANP大鼠肠黏膜中HMGBl表达增高,可通过降低occludin蛋白表达,增加肠黏膜屏障通透性。EP能显著抑制HMGBl表达,使occludin蛋白表达升高,对ANP肠黏膜损伤有明显保护作用。     

参附注射液对大鼠肠缺血再灌注损伤后肠黏膜细胞凋亡的影响

目的：研究参附注射液对大鼠肠缺血再灌注期间黏膜上皮细胞凋亡的影响，并探讨其可能机制。方法：采用大鼠肠缺血再灌注模型。24只大鼠随机分为假手术对照组（C组）、缺血再灌注组（I／R组）和参附治疗组（SF组），在规定时间检测小肠黏膜上皮细胞caspase-3、Bcl-2蛋白的表达，凋亡细胞数目，同时观察小肠黏膜病理形态学改变。结果：IR组肠黏膜上皮细胞凋亡指数（apoptosisindex,AI）、caspase-3、Bcl-2蛋白显著高于C组（P〈0．01）。SF组AI、caspase-3蛋白低于IR组（P〈0.01或P〈0．05），而Bcl-2蛋白较IR组上调（P〈0．01）。caspase-3表达与AI呈正相关（r=0，914，P〈0，01）；Bel-2的表达与AI、caspase-3呈直线负相关（r分别=-0．375，-0．367，P〈001）。SF组小肠黏膜病理损伤程度较I／R组明显减轻（P〈0.01）。结论：参附注射液通过抑制caspase-3表达和促进Bcl-2基因表达减少缺血再灌注期间肠黏膜上皮细胞的凋亡。从而一定程度上减轻肠黏膜缺血再灌注损伤。     

丙酮酸乙酯对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜HMGB1表达的影响

目的探讨丙酮酸乙酯（EP）对大鼠重症急性胰腺炎（SAP）肠组织中高迁移率族蛋白B1（HMGBl）表达的影响，以期为SAP的治疗提供思路。方法雄性Wistar大鼠90只随机分为3组：A组为SAP组；B组为SAP＋EP处理组（EP组）；C组假手术对照组（对照组）。3组动物于术后3，6，12，24，48h取材。测定血淀粉酶（AMY）、D-乳酸、肠组织丙二醛（MDA）含量。通过光学显微镜观察肠组织病理变化及免疫组织化学法观察HMGBl在肠组织中的表达。Western-blot法进行HMGBl检测。结果A，B组AMY和D-乳酸水平明显升高，但B组较A组显著降低（P〈0．05）。A组肠组织中MDA明显高于C组（P〈0．01），B组肠组织中MDA升高幅度较A组小（P〈0．05）。B组较A组肠组织病理损伤明显减轻。A组6h时肠组织HMGBl表达水平显著高于C组，于24h达峰值，且持续至48h（P〈0、01）。B组肠组织HMGBl表达水平均明显低于A组（P〈0．05）。结论SAP时，HMGBl可介导肠黏膜通透性增加。EP能显著抑制HMGBl的表达，改善肠黏膜屏障功能，对SAP肠黏膜损伤有明显的保护作用。     

早期肠内免疫营养对烫伤大鼠免疫功能的影响

目的了解早期肠内免疫营养对烫伤大鼠全身及肠道免疫功能的影响。方法将健康SD大鼠分为标准营养组（EN组）和免疫营养组（EIN组），每组32只。将两组大鼠制成烧伤总面积30％TBSA的Ⅲ度烫伤模型，于伤后1、4、7、10d检测其外周血T淋巴细胞亚群、肠黏膜增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平、浆细胞数量及肠黏液分泌型免疫球蛋白A（S-IgA）含量的变化。另取8只健康大鼠检测上述指标作为正常参考值。结果（1）与正常值比较，伤后EN组CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋降低但CD8^＋升高，与各项指标大部分时相点比较，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。伤后10d与EN组（CD4^＋／CD8^＋为1．26±0．10）比较，EIN组CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋（CD4^＋／CD8^＋为1．86±0．25）升高而CD8^＋下降（P〈0．01）。（2）伤后4、7、10d，EIN组肠黏膜PCNA表达水平、浆细胞数量及肠黏液S-IgA含量较EN组明显升高（P〈0．05或P〈0．01）。结论烫伤后早期给予肠内免疫营养，可以提高全身及肠道免疫功能，效果优于标准肠内营养。     

三白灌肠液保留灌肠治疗大肠湿热型溃疡性结肠炎的临床研究

为探讨三白灌肠液保留灌肠治疗大肠湿热型溃疡性结肠炎（UC）的临床疗效,将300例大肠湿热型UC患者随机分为治疗组和对照组,各150例,治疗组应用三白灌肠液保留灌肠,对照组将美沙拉嗪制成溶液保留灌肠,对比两组患者临床总体疗效和肠黏膜镜下表现积分。结果显示,两组总有效率比较差异无统计学意义,P〉0．05;但治疗组完全缓解率明显高于对照组,P〈0．05。治疗组治疗后肠黏膜镜下表现积分明显低于对照组,P〈0．05。结果表明,三白灌肠液保留灌肠治疗大肠湿热型UC疗效满意,无不良反应,值得临床应用。     

重组人生长激素对大鼠肠道缺血再灌注后肠壁组织T淋巴细胞亚群和浆细胞凋亡的影响

目的探讨肠道屏障功能损害时应用重组人生长激素（rhGH）对肠道免疫屏障中肠黏膜及固有层内T淋巴细胞亚群和浆细胞凋亡的影响。方法将60只Wistar大鼠雌雄各半随机分为实验组和对照组，按实验天数又各分为3组，每组10只，以肠缺血再灌注模型造成肠道屏障功能损害的病理现象，实验组给予rhGH每日（1．33U／kg体重），采用免疫组织化学双染法观察回肠末端黏膜固有层内CD8^＋、CD4^＋、CD3^＋T淋巴细胞数及IgA浆细胞的凋亡数量变化。结果（1）对照组CD3^＋T淋巴细胞及IgA浆细胞的凋亡数量第6天明显高于第2、4天。差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）实验组CD8^＋、CD4^＋T淋巴细胞的凋亡数量第6天明显低于第4天，差异有统计学意义（P〈0．01）。（3）实验组与对照组相比第2、4、6天IgA浆细胞的凋亡数量均明显减少。差异有统计学意义（P〈0．01）。实验组与对照组相比大鼠第2天CD8^＋、CD4^＋、CD3^＋T淋巴细胞的凋亡数量均减少，差异有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。结论肠道屏障功能损害时应用重组人生长激素能够减少肠道免疫细胞的凋亡数量，对IgA浆细胞作用最明显。可能的作用时间在第6天。     

中药芪黄煎剂对大鼠胃癌术后早期免疫功能和肠黏膜屏障的影响

目的：探讨健脾通里中药芪黄煎剂对大鼠胃癌术后早期免疫功能的调控和肠黏膜屏障的保护作用。方法：30只Wistar大鼠,胃癌造模成功后,随机分为对照组（滴注肠内营养能全素）和芪黄煎剂治疗组（肠内营养能全素联合中药芪黄煎剂）,每组15例。术后第8d采取标本,分别观察免疫和肠黏膜屏障功能。结果：芪黄煎剂组术后8d抗炎细胞因子水平明显升高,与对照组比较有明显差异（P〈0．05）;而促炎细胞因子水平显著降低,与对照组比较有明显差异（P〈0．05）。术后8d芪黄煎剂组鼠小肠肠壁较对照组明显增厚,肠腺数量增多,肠绒毛高而密集。小肠黏膜厚度比较差异显著（P〈0．01）,小肠绒毛高度比较存在显著性差异（P〈O．01）。同时两组问细菌易位的发生率有显著差异（P〈0．01）。结论：胃癌术后早期应用健脾通里中药能够抑制促炎细胞因子的分泌或表达,同时增加抗炎细胞因子的释放与表达,减轻机体术后炎症反应,维护胃癌手术后肠黏膜上皮结构和形态完整。     

整合素α4β7的表达与溃疡性结肠炎大鼠肠淋巴细胞归巢

目的 探讨淋巴细胞归巢受体整合素α4β7的表达与溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠淋巴细胞归巢的关系,分析UC大鼠肠道黏膜免疫功能改变的机制.方法 将40只SD大鼠随机分为UC组和对照组,分别于造模后72 h取标本检测:免疫组织化学法检测肠组织中地址素MAdCAM-1;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肠组织中α4β7的表达;流式细胞检测大鼠门静脉血中整合素α4阳性淋巴细胞数的变化.结果 UC组大鼠结肠黏膜下MAdCAM-1表达明显增强(0.72±0.33比0.21±0.41,P<0.01),主要表达在黏膜下微血管区;UC组α4、β7 mRNA的表达量与对照组比较明显升高(0.683±0.238;0.842±0.374比0.146±0.132;0.241±0.624,P均<0.01);UC组结肠静脉回流血中α4+淋巴细胞的比例明显高于对照组(76.73±8.24比14.66±6.74,P<0.01).结论 UC大鼠发病时α4β7阳性淋巴细胞的比例升高,参与肠淋巴细胞过渡归巢现象,肠黏膜免疫功能亢进可能是UC发病的重要因素.     

溃疡性结肠炎大鼠淋巴细胞的过渡归巢与CCR7的表达

目的探讨实验性溃疡性结肠炎（UC）大鼠淋巴细胞过渡归巢现象与淋巴细胞表面CCR7受体表达的关系。方法40只SD大鼠随机分为对照组及模型组，观察结肠黏膜下淋巴细胞过渡归巢现象，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）半定量法检测结肠组织中CCR7的表达；流式细胞法（FCM）测定结肠回流血液中CCR7＋淋巴细胞的比例。结果模型组大鼠结肠黏膜下存在淋巴细胞过渡归巢，派尔集合淋巴结增生，最大截面积比较，差异有统计学意义[（9．56±0．32）比（1．48±0．58），t=5．12，P〈0．01]，CCR7mRNA的表达量与对照组比较明显升高[（0．772d-0．108）比（0．126±0．029），t=4．37，P〈0．01]、模型组结肠静脉回流血中CCR7＋淋巴细胞的比例明显高于对照组[（76．58±9．73）％比（16．62±7．84），t=3．97，P〈0．01]。结论溃疡性结肠炎大鼠的结肠黏膜下存在淋巴细胞过渡归巢现象，结肠组织中归巢受体CCR7的表达增高，结肠回流血液中CCR7＋的淋巴细胞的比例增高。     

高效免疫抑制剂治疗溃疡性结肠炎的临床研究

为观察高效免疫抑制剂用于治疗溃疡性结肠炎（UC）的可行性，我院应用吗替麦考酚酯分散片（M组）、他克莫司胶囊（T组）、环孢素软胶囊（C组）口服治疗UC患者各100例，并对患者的耐受性、服药后的不良反应、疾病活动指数（DAI）、内镜下肠黏膜改善情况进行疗效评价。结果显示，3组患者中因药物不耐受或出现不良反应等而遐出研究49例，其中M组9例（9．0％），T组30例（30．0％），C组10例（10．0％）。3组患者出现的不良反应都是可逆性的，停药后均很快恢复。3组患者治疗后DAI评分均明显降低，P〈0．05。M组、T组和C组内镜下肠黏膜完全缓解率分别为60．4％（55／91）、51．4％（36／70）和45．6％（41／90）。结果表明，高效免疫抑制剂治疗UC疗效肯定，而且安全性高，为UC的药物治疗提供了又一途径。     

优化溃结方对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织TNF-α含量与蛋白表达的影响

为研究优化溃结方对溃疡性结肠炎大鼠肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-a,TNF-α）的影响及其可能的治疗机制,将健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、补脾益肠丸组、柳氮磺吡啶（SASP）组和优化溃结方组。以三硝基苯磺酸（TN—BS）乙醇法建立溃疡性结肠炎大鼠模型。分组灌胃治疗后,检测溃疡性结肠炎大鼠结肠组织TNF-α含量和TNF-α蛋白表达。结果显示,模型组与正常组比较,TNF-α含量和TNF-α蛋白表达明显增高（P〈0．05）;优化溃结方组、补脾益肠丸组、SASP组与模型组比较,TNF-a含量和TNF-a蛋白表达均明显下降（P〈0．05）;优化溃结方组与补脾益肠丸组比较,TNF_a含量和TNF-d蛋白表达均下降（P〈0．05）;优化溃结方组与SASP组比较,TNF-α含量和TNF-α蛋白表达均下降（P〈0．05）。结果表明,优化溃结方可以降低溃疡性结肠炎大鼠结肠组织TNF-a含量和TNF-α蛋白表达。     

粪钙卫蛋白在溃疡性结肠炎活动性分级评价中的临床意义

目的探讨粪钙卫蛋白在溃疡性结肠炎（UC）活动性评价中的临床意义。方法收集2007年9月至2009年12月期间中国医科大学附属第四医院肛肠外科确诊为UC的患者63例及结肠镜检查结果正常但存在相应消化道症状的患者30例,检测并比较其粪钙卫蛋白、红细胞沉降率及C反应蛋白水平。结果活动期Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ级组的粪钙卫蛋白和C反应蛋白水平均高于对照组和缓解组（P〈0.05）,且随活动期级别增高,粪钙卫蛋白的水平逐渐增高（P〈0.05）;活动期Ⅱ级及Ⅲ级组的C反应蛋白水平均高于Ⅰ级组（P〈0.05）,但前两者比较差异无统计学意义（P〉0.05）;5组红细胞沉降率比较差异无统计学意义（P〉0.05）。UC活动组的粪钙卫蛋白水平（rs=0.807,P〈0.01）、C反应蛋白水平（rs=0.651,P〈0.01）和红细胞沉降率（rs=0.371,P〈0.05）均与结肠镜下分级相关。结论粪钙卫蛋白可用于评价UC的活动性。由于其检测方法简单、无创、方便及依从性好,具有一定的临床意义。     

健脾理肠汤口服及保留灌肠治疗溃疡性结肠炎48例临床观察

为观察健脾理肠汤口服及保留灌肠治疗溃疡性结肠炎（UC）的临床效果,将96例UC患者随机分为治疗组和对照组,每组各48例。治疗组采用健脾理肠汤口服及保留灌肠治疗,对照组采用柳氮磺吡啶保留灌肠治疗。结果显示,治疗组有效率91．7％,对照组77．1％,两组有显著性差异（P〈0．05）。结果表明,健脾理肠汤口服及保留灌肠治疗UC疗效肯定。     

美沙拉秦加痛泻要方加味治疗肝郁脾虚型溃疡性结肠炎34例

为观察美沙拉秦加痛泻要方加味治疗肝郁脾虚型溃疡性结肠炎的临床疗效,将67例肝郁脾虚型溃疡性结肠炎患者随机分为治疗组34例和对照组33例。对照组采用美沙拉秦肠溶片治疗,治疗组在此基础上加用痛泻要方加味治疗,比较两组总有效率、肠黏膜改善情况、镜下脓血改善情况、腹痛症状减轻情况以及复发率情况。结果显示,治疗组总有效率为94．1％,对照组为84．8％,两组无显著性差异（P〉0．05）。治疗组总复发率11．8％,对照组45．5％,两组有显著性差异（P〈0．05）。治疗组在改善肠黏膜、镜下脓血及减轻腹痛等方面均明显优于对照组（P〈0．05）。结果表明,美沙拉秦加痛泻要方加味治疗肝郁脾虚型溃疡性结肠炎疗效确切,复发率低。     

复方菊花冲剂保留灌肠治疗溃疡性结肠炎的临床和实验研究

为探讨复方菊花冲剂保留灌肠治疗湿热内蕴型溃疡性结肠炎（UC）的临床疗效及作用机理,随机设复方菊花冲剂治疗组（30例）和柳氮磺吡啶对照组（30例）,对治疗前后主要症状、体征积分值及肠镜黏膜像等进行对比观察,并造模形成大鼠UC,用药后观察大鼠结肠大体形态及结肠组织的病理变化。结果显示,治疗组在临床总疗效、主要症状、体征、黏膜像等方面均显著优于对照组（P〈0．05）。实验研究证明,复方菊花冲剂能促进大鼠肠黏膜炎症的吸收,促进溃疡修复愈合。结果表明,复方菊花冲剂保留灌肠治疗湿热内蕴型UC疗效确切,无明显副作用,使用方便。     

Toll样受体4介导心肺复苏后肠粘膜损伤的研究

目的探讨Toll样受体4（TLR4）信号在心脏骤停及复苏后肠粘膜损伤中的作用。方法采用15只雄性大鼠建立心脏骤停及心肺复苏模型（窒息法）,自主循环恢复后,留取回肠标本,观察6、24和48小时肠粘膜的形态学改变及损伤情况：Westernblot检测回肠粘膜TLR4表达,以及ELISA法测定粘膜肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的释放。结果复苏后动物肠粘膜显著受损,损伤程度均明显高于假手术组（sham）（P〈0．01）,其中6小时组为甚;TLR4表达在3个时间段均明显强于sham（P〈0．001）,并伴随着TNF-α表达升高。TLR4表达强弱与TNF-α释放及粘膜损伤程度变化呈正相关（P〈0．05）。结论本研究与其他疾病研究结果基本相符合,心肺复苏后肠粘膜损伤伴随着TLR4的高炎症信号,TLR4信号失控通过诱导炎性介质产生导致复苏后肠粘膜损伤。