多重耐药革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶的表型及基因型研究

目的 了解革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶表型及基因分型,并分析其耐药特性。方法以纸片扩散初筛法、扩散确证法、头孢西丁三维试验、MBL的协同试验了解β-内酰胺酶的表型,用PCR技术进行扩增并进行DNA测序;药敏试验采用K-B法,分析其耐药特性。结果 多重耐药革兰阴性杆菌β-内酰胺酶的表型总检出率为26.49%,主要由产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）引起,占16.56%;其次为ESBLs＋头霉素酶（AmpC）引起,占6.62%;ESBLs＋AmpC＋金属酶（MOL）引起,占1.66%,单独由AmpC引起的仅占0.66%,有3株未能定型0.99%;β-内酰胺酶的基因型总检出率为24.83%,单产ESBLs的多重耐药革兰阴性杆菌株占17.55%,同时产ESBLs与AmpC的菌株占6.95%,产ESBLs、MBL与AmpC的菌株占0.33%,单产AmpC的菌株占0.33%;多重耐药革兰阴性杆菌对临床常用抗菌药物的总体耐药率最低为阿米卡星（18.75%）、最高为氨苄西林（97.50%）,大部分细菌呈多重耐药性。结论 多重耐药革兰阴性杆菌携带多种β-内酰胺酶,具有多重耐药性。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌β-内酰胺酶基因研究

目的检测20株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的β-内酰胺酶基因,以便了解该20株产ESBLs大肠埃希菌β-内酰胺酶基因亚型携带存在状况。方法收集医院2013年分离到的20株产ESBLs大肠埃希菌,采用聚合酶链反应(PCR)方法分析16种A类β-内酰胺酶基因、6种C类β-内酰胺酶基因、3种D类β-内酰胺酶基因。结果 20株产ESBLs大肠埃希菌对头孢呋辛、头孢噻肟、头孢吡肟的耐药率均为100.0%;共检出4种A类β-内酰胺酶基因,其中检出blaTEM16株、blaSHV1株、blaCTX-M-1 cluster 3株、blaCTX-M-9 cluster 14株,检出率分别为80.0%、5.0%、15.0%、70.0%,C类β-内酰胺酶基因检出blaDHA2株,检出率为10.0%,D类β-内酰胺酶基因检出blaOXA-1 cluster 3株,检出率为15.0%;20株产ESBLs大肠埃希菌每一株均有β-内酰胺酶基因检出,少者检出1种,多者同时检出2⁴种,且该组菌株blaCTX-M总检出率85.0%。结论产β-内酰胺酶基因是该组大肠埃希菌对β-酰胺类抗菌药物产生耐药的重要原因。     

中段尿培养产超广谱β-内酰胺酶菌株的检测及药敏分析

目的 了解中段尿培养产超广谱β-内酰胺酶(ESBLa)革兰阴性杆菌的分离情况及其对常用抗生素的耐药特点,为临床合理选择抗生素提供依据.方法 收集该院2006年1月至2007年10月中段尿培养分离出的革兰阴性杆菌216株,用纸片扩散确证试验检测超广谱β-内酰胺酶阳性菌株,并用K-β琼脂扩散法做药敏试验.结果 216株革兰阴性杆菌共检出ESBLs 67株,检出率为31.0%,其中大肠埃希杆菌ESBLs检出率为31.5%,肺炎克雷伯杆菌ESBLa检出率为27.6%.除亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、呋喃妥因外,产ESBLs菌株对其它常用抗生素的耐药率明显高于非产ESBLs菌株(P＜0.05).结论 泌尿道感染患者革兰阴性杆菌产ESBLa的情况比较严重,而且ESBLs菌株多为多重耐药株.临床医师应依据药敏报告结果选择抗生素.亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、呋喃妥因是治疗由产ESBLs菌引起泌尿感染的有效抗生素.     

产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科细菌致急性前列腺感染的病原菌分析

目的 探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌在急性前列腺感染中的检出率,并分析其药敏谱.方法 收集84株样本,用法国生物梅里埃公司ATB-Expression进行细菌鉴定,药敏试验采用ATB G-5药敏试剂条测试,表型确证试验检测ESBLs酶.结果 84例急性前列腺炎患者培养出56株病原菌,主要为革兰阴性杆菌,占67.8%,以肠杆菌科细菌为主,占革兰阴性杆菌的94.7%;革兰阳性菌占21.4%,以溶血葡萄球菌为主,占革兰阳性球菌的58.3%;14株大肠埃希菌中7株产ESBLs,占50.0%,13株肺炎克雷伯菌中3株产ESBLs,占23.1%;所有菌株均对亚胺培南和美罗培南敏感.结论 对产ESBLs肠杆菌科细菌致急性前列腺感染,按照药敏试验及时选择有效抗菌药物.     

医院感染产β-内酰胺酶金黄色葡萄球菌耐药性研究分析

目的了解医院产β-内酰胺酶金黄色葡萄球菌的分布及耐药性,以降低医院感染率。方法对2012-2013年产β-内酰胺酶金黄色葡萄球菌分布、耐药性及其导致医院感染发生率进行研究分析,应用χ2检验对数据进行统计分析。结果 2012-2013年临床送检标本中共分离出阳性菌7 285株,其中金黄色葡萄球菌检出643株,占8.8%,643株金黄色葡萄球菌中检出产β-内酰胺酶金黄色葡萄球菌413株,检出率为64.2%;产β-内酰胺酶金黄色葡萄球菌标本来源主要为痰液、伤口分泌物、血液,分别占76.5%、7.5%、6.0%;主要科室分布在重症监护病房、内分泌科、呼吸内科,分布率分别为9.2%、4.1%、12.6%;产β-内酰胺酶金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素、庆大霉素、四环素、亚胺培南等抗菌药物耐药率较高,分别为100.0%、88.6%、96.1%、92.3%、100.0%,对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺的耐药率为0;产β-内酰胺酶金黄色葡萄球菌导致医院感染发生率最多的科室为重症监护病房、呼吸内科、血液内科等。结论产β-内酰胺酶金黄色葡萄球菌易导致医院感染发生,应引起临床高度重视,临床应积极主动预防和控制医院感染的发生。     

山区医院产超广谱β-内酰胺酶细菌耐药性分析

目的 调查山区医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌的耐药现状,为临床医师用药提供科学依据. 方法 细菌分离、鉴定按<全国临床检验操作规程>进行;药物敏感性试验采用K-B法. 结果 244株肠杆菌科细菌检出产ESBLs菌89株,总产酶率为36.5%;药敏试验结果显示,产ESBLs菌对常用抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌. 结论 产ESBLs是革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗菌经物耐药的重要机制,对产ESBLs菌应进行监测与控制.     

不动杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测

目的研究不动杆菌产超广谱β-内酰胺酶的检测方法,分析其与抗生素耐药的关系。方珐采用NCCLS（美国临床标准委员会）推荐方法对收集120株不动杆菌进行产ESBLs（超广谱β-内酰胺酶）的筛选和确认实验,按照PCR基因分型原则采用碱裂解法提取质粒DNA,以此为模版设计引物和反应条件,用PCR法对产ESBLs株进行基因分型．结果产ESBLs共检出20株,检出率占16．7％．产酶株耐药率明显高于非产酶株。PCR进行ESBLs基因分型。检出TEM型12株,SHV型4株,PER型4株,未检出OXA．姑论西安市不动杆菌产ESBLs株基因型以TEM为主,产ESBLs可能是西安市不动杆菌耐药的主要机制。     

耐第三代头孢菌素革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶及耐药基因分析

目的了解革兰阴性杆菌对第三代头孢菌素耐药的分子机制。方法采用常规琼脂2倍稀释法测定11株(CR01-CR11)临床分离革兰阴性杆菌,对13种β-内酰胺类抗菌药物的敏感性,纸片扩散法检测耐药菌的ESBLs表型,通过PCR扩增检测其耐药基因。结果MIC结果表明,11株病原菌对几种常见的第三代头孢菌素具有明显的耐药性;表型确证实验表明,除CR07外,其余10株均为产ESBLs菌株;酶的水解底物轮廓实验表明,10株产ESBLs株菌所产生的β-内酰胺酶均能高效水解头孢哌酮和头孢孟多,而对头孢他啶水解活性较低。结论10株产ESBLs革兰阴性杆菌的酶活性、等电点及耐药基因在一定程度上揭示了病原菌产ESBLs与其耐药性之间的关系。     

革兰阴性杆菌临床分离株对β-内酰胺类抗菌药物的耐药性研究

目的研究医院感染革兰阴性(G-)杆菌对β-内酰胺类抗菌药物的耐药性特征及耐药机制。方法测定泵抑制剂对MIC的影响,β-内酰胺酶(Bla)的表型鉴定及等电点测定,PCR扩增检测Bla基因及DNA序列测定。结果所试菌对大多数药物的耐药率高,均产Bla,其中42.1%产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、17.5%产头孢菌素酶(AmpC酶)、7.0%产金属β-内酰胺酶,10.5%同时为外排泵阳性菌;8株阴沟肠杆菌的ampC基因与阴沟肠杆菌ECLC074的ampC基因高度同源。结论产Bla是G-杆菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的主要机制,ESBLs检出率最高;产AmpC酶阴沟肠杆菌的ampC基因均起源于ECLC074的ampC基因;亚胺培南是治疗耐药G-杆菌所致感染最有效的药物,β-内酰胺酶抑制剂复合物和阿米卡星可分别用于治疗耐药非发酵杆菌和持续高产AmpC酶阴沟肠杆菌所致感染。     

临床分离的191株产超广谱β-内酰胺酶细菌耐药性研究

目的了解本地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌的检出率、细菌类型、对抗菌药物的敏感性,特别是探讨提高头孢曲松对该细菌抗菌活性的可行办法. 方法对从临床患者标本中分离出的574株革兰阴性杆菌进行产ESBLs菌株检测、药敏实验,并对191株产ESBLs细菌进行耐头孢曲松加不同比例的酶抑制剂的敏感实验. 结果在574株临床分离的革兰阴性菌中,共检出ESBLs细菌191株,检出率为33.28%,其中以不动杆菌属的检出率最高,为43.22%,其次为大肠埃希菌、克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌);产ESBLs细菌对抗菌药物的耐药性明显高于非产ESBLs细菌;头孢曲松/克拉维酸2∶1复合制剂抗菌效果最佳. 结论各地区ESBLs产生率最高的菌种虽有差异,但均为临床治疗比较棘手、极易造成医院感染暴发流行的重要致病菌;合理使用抗菌药物及酶抑制剂对治疗疾病和控制医院感染的发生至关重要,把对ESBLs的检测作为实验室常规工作亦很必要.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌相关耐药基因研究

目的 了解常州地区大肠埃希菌耐药状况及β-内酰胺类耐药基因.方法 用琼脂稀释法检测氨苄西林、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头抱噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南和亚胺培南对大肠埃希菌的最低抑菌浓度,用聚合酶链反应(PCR)检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌TEM、SHV等17种耐药基因,并用DNA测序仪测序.结果 80株大肠埃希菌ESBLs检出率为46.3%,37株大肠埃希菌检出TEM、SHV、CTX-M-1群、OXA-1群和DHA 5种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为81.1%、78.4%、21.6%、10.8%、5.4%;37株菌中有36株至少检出1种β-内酰胺酶基因,24株同时检出>2种β-内酰胺酶基因,1株菌最多同时检出4种β-内酰胺酶基因,只有1株未检出β-内酰胺酶基因.结论 大肠埃希菌已携带多种β-内酰胺酶耐药基因,成为对β-内酰胺类抗菌药物耐药的重要原因之一.     

2000-2008年江汉平原地区产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科流行率及耐药性变迁

目的调查临床分离的产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科流行率及其耐药性变化趋势。方法对江汉平原4所大中型医院2000-2008年分离的肠杆菌科细菌资料进行分析,统计其中产超广谱β-内酰胺酶细菌分离率及耐药性变化,使用K-B法进行药敏试验,纸片扩散表型确证法进行检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测。结果临床分离的肠杆菌科细菌8928株中共分离出产ESBLs菌株3817株,产ESBLs肠杆菌科细菌分离率从2000年的17.34%增加到2008年的67.03%,检出率上升明显;产ESBLs肠杆菌科主要为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,分别占产ESBLs肠杆菌科66.34%和27.67%;菌株检出来源主要尿液和痰标本;除碳青酶烯类抗菌药物外,产ESBLs菌对其他类抗菌药物均不同程度耐药且耐药性上升趋势明显;产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对青霉素类如氨苄西林、哌拉西林耐药率均95.0%,对氨苄西林/舒巴坦耐药率高达83.8%和75.5%;对氨基糖苷类、喹诺酮类药物耐药率分别为42.7%～66.6%,对碳青酶烯类药物亚胺培南、美罗培南敏感率仍98.0%。结论产ESBLs细菌检出率及耐药率近年大幅上升,应高度重视ESBLs检测,控制其传播和流行。     

产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌临床分离株的分布与基因型研究

目的了解临床分离的革兰阴性杆菌中产ESBLs的分布、耐药性及ESBLs基因型。方法对医院临床分离的革兰阴性杆菌,采用CLSI标准检测产ESBLs菌株,用PCR对ESBLs基因进行分型。结果 120株革兰阴性杆菌分离出38株产ESBLs菌,阳性率31.7%,其中,第1位是大肠埃希菌(53.8%),其次产酸克雷伯菌(35.3%)、肺炎克雷伯菌(33.3%);药敏结果显示,除对碳青酶烯类抗菌药物敏感外,ESBLs阳性株对多种抗菌药物的耐药率均较高,且明显高于ESBLs阴性株;38株产ESBLs菌基因型为TEM、SHV、CTX-M的分别为20、4、6株,有4株同时携带两种β-内酰胺酶基因的菌株,其他基因型4株。结论调查结果表明医院产ESBLs菌分离率较高,主要以大肠埃希菌、产酸克雷伯菌、肺炎克雷伯菌为主,其基因主要以TEM型、CTX-M型流行为主。     

耐甲氧西林葡萄球菌及产超广谱β-内酰胺酶细菌流行状况及耐药性分析

目的 调查耐甲氧西林葡萄球菌及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的流行状况及耐药性,为临床提供诊疗依据.方法 对2011年3月-2012年5月所有病原菌进行鉴定及药敏试验,按CLSI 2010年推荐方法对葡萄球菌属进行耐甲氧西林检测,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行ESBLs检测.结果 检出金黄色葡萄球菌342株、凝固酶阴性葡萄球菌254株,耐甲氧西林检出率分别为38.3％、69.7％,耐甲氧西林菌株对利奈唑胺、替考拉宁、万古霉素100.0％敏感,对喹奴普汀/达福普汀、莫西沙星、呋喃妥因的耐药率＜20.0％,对其他药物耐药性高;916株大肠埃希菌和514株肺炎克雷伯菌ESBLs检出率分别为59.0％、34.8％,产ESBLs菌株对碳青霉烯类、阿米卡星及部分β-内酰胺酶抑制剂复合剂类敏感性较高,对其他药物耐药性高;外科、内科、ICU是各种耐药菌株流行的重要病区.结论 耐甲氧西林葡萄球菌、产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌发生率高,耐药严重,及时监测耐药菌株的流行状况及耐药性指导临床诊疗行为,有效预防控制医院感染.     

医院感染与社区获得性感染革兰阴性杆菌耐药性与β-内酰胺酶的分布对比

目的了解铜陵地区医院感染(HI)和社区获得性感染(CAI)在病原菌分布、细菌的耐药性及产生β-内酰胺酶概率的差异性,以指导抗菌药物的合理使用。方法收集铜陵地区5所医院2003年10月1日~2004年9月30日,所有临床标本分离的革兰阴性杆菌作为受试菌,药敏试验采用Kirby-Bauer法进行,采用三维试验检测革兰阴性杆菌产ESBLs和AmpC酶,纸片协同法检测MBL。结果356株革兰阴性杆菌HI 267株,占75.0%,CAI 89株,占25.0%;HI标本主要来源于痰或气管分泌物(53.9%),CAI标本主要来源于尿液(34.8%);CAI组敏感率普遍高于HI组,356株革兰阴性杆菌检出产ESBLs和AmpC酶77株,总检出率为21.6%,HI 69株,检出率25.8%,CAI 8株,检出率9.0%。结论铜陵地区革兰阴性杆菌耐药性严重,HI组敏感率明显低于CAI组,且产生多种β-内酰胺酶。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的耐药性研究

目的 了解肿瘤患者临床分离的大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况及对16种抗生素的耐药性,为临床合理使用抗生素提供依据; 方法收集我院2007年1月-2008年8月分离出的269株大肠埃希菌和150株肺炎克雷伯菌,采用kirby-Bauer纸片扩散法进行药敏试验.用纸片扩散法确证实验检测超广谱β-内酰胺酶.结果 检出产ESBLs细菌共205株,检出率为48.9%,其中大肠埃希菌121株,检出率为28.9%,肺炎克雷伯菌84株,检出率20.0%;产ESBLS对碳青酶烯类(亚胺培南、美洛西林)、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、头孢吡肟耐药率较低均<16%,其余抗菌药物都产生较高的耐药性. 结论 加强ESBLs细菌检测,合理使用抗菌药物,碳青霉烯类、β-内酰胺酶抑制复合物、阿米卡星及头孢吡肟,是目前治疗ESBLs细菌有效抗菌药物.     

大肠埃希菌产β-内酰胺酶类型的动态比较研究

目的动态比较研究大肠埃希菌(E.coli)所产各种β-内酰胺酶(β-lase)的分布.方法采用多底物改良相邻纸片法检测195株,其中S1期75株、S2期60株和S3期60株;E.coli所产各种β-lase.结果 S1期E.coli总β-lase检出率为70.67%,其中产青霉素酶18株(24.00%),产广谱酶8株(10.67%),产ESBLs 27株(36.00%),未检出其他β-lase;S2期E.coli总β-lase检出率为81.67%,其中产青霉素酶5株(8.33%),产广谱酶17株(28.33%),产ESBLs27株(45.00%),未检出其他β-lase;S3期E.coli总β-lase检出率为91.00%,其中产青霉素酶3株(5.00%),AmpC酶1株(1.67%),广谱酶10株(16.67%),产ESBLs29株(48.33%),同时产ESBLs AmpC酶株8株(13.33%),酶抑制剂耐药的β-内酰胺酶4株(6.00%,1株IRT、1株IRBSBLs、2株IRESBLs),未检出碳青酶烯酶.结论本组E.coli所产各种β-lase的总产酶率、β-lase类型数均随时间而提高.     

耐药柠檬酸杆菌属β-内酰胺酶检测

目的了解安徽医科大学第一附属医院临床分离的耐药柠檬酸杆菌属产β-内酰胺酶的情况。方法采用琼脂稀释法测定17种抗菌药物对临床分离的52株柠檬酸杆菌最低抑菌浓度（MIC）,用改良三维试验检测31株柠檬酸杆菌ESBLs、AmpC、MBL的产酶情况,再用聚合酶链反应（PCR）法扩增β-内酰胺酶基因。结果31株柠檬酸杆菌对多种抗菌药物耐药,三维试验检出24株菌产ESBLs,3株菌产AmpC酶,2株同时高产AmpC酶和ESBLs,未检出MBL;PCR检出20株菌携带blaTEM基因,1株菌携带blaSHV基因,8株菌携带blaCTX-M-1基因,15株菌携带blaCTX-M-13基因,5株菌携带blaCIT基因。结论31株多重耐药的柠檬酸杆菌同时产〉1种的ESBLs及高产AmpC酶,是其对β-内酰胺类药物耐药的重要原因。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药性及产酶因素分析

目的 分析医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及其产酶因素,为指导临床合理用药提供参考.方法 收集医院2011年住院患者不同标本的肺炎克雷伯菌162株,进行耐药性检测和产ESBLs菌株的确认,采用t检验、x2检验及多因素logistic回归进行分析.结果 162株肺炎克雷伯菌中,检出产ESBLs肺炎克雷伯菌65株,检出率40.1％;所有产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南敏感,耐药率为0,产ESBLs肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物耐药率普遍高于非产ESBLs;多因素logistic回归分析结果表明仅糖尿病、住院时间、抗菌药物联用及机械通气是造成细菌产ESBLs的危险因素.结论 连续使用抗菌药物或使用不当易造成细菌产ESBLs,应及时加强肺炎克雷伯菌中产ESBLs及其对抗菌药物耐药性的检测.     

弗氏柠檬酸杆菌β-内酰胺酶的分类检测

目的 研究弗氏柠檬酸杆菌所产各种β-内酰胺酶(β-lase)分布情况.方法 采用头孢硝噻吩试验检测33株弗氏柠檬酸杆菌所产β-lase,多底物纸片法(协同法、拮抗法)、AmpC酶检测法、碳青酶烯酶分类检测检测其所产各种β-lase.结果 33株弗氏柠檬酸杆菌,检出29株β-lase,总检出率为87.9%;头孢硝噻吩试验27株为阳性(81.8%);29株产酶菌株中,产青霉素酶2株,产头孢菌素酶3株,产广谱β-内酰胺酶5株,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)11株,产ESBLs AmpC酶6株,ESBLs总产酶率51.5%,产碳青酶烯酶2株(均为复合产超广谱酶 金属酶).结论 弗氏柠檬酸杆菌产β-lase率、ESBLs总产酶率和复合产酶率很高,产6种酶,以广谱酶、ESBLs为主.