三种革兰阴性细菌在按蚊饲养水体及按蚊中肠内存活能力的研究

目的 探讨分离自中华按蚊雌成蚊中肠的3种革兰阴性细菌,即气单孢菌、A4菌(未鉴定)和肠杆菌在按蚊幼虫孳牛水体中及按蚊体内的存活能力. 方法 3种目标细菌在实验室经数量扩增后,添加到饲养按蚊幼虫的水体中,依次收集饲养盆和蛹盒内的水样品,并解剖羽化后吸血雌成蚊,取其中肠制成研磨液;建立水样品和研磨液中细菌的16S rDNA序列克隆文库,并从各样品中分离可培养细菌,比较各样品中的优势菌种和不同处理中可培养细菌的种类组成. 结果 在所有样品中均未检测到与加入的人工培养细菌种类相同的细菌.按蚊幼虫饲养水体和蛹盒水体中的可培养细菌均以嗜水气单孢菌和睾丸酮丛毛单胞菌为主,在少量按蚊的中肠内含有可培养细菌,但均不是目标细菌;而各处理样品中的优势菌均为铜绿假单孢菌. 结论 3种细菌经人工培养后,不能在按蚊幼虫生活水体中建立种群,导致未能在按蚊成蚊中肠内柃测到这些细菌.     

三种革兰阴性细菌在按蚊饲养水体及按蚊中肠内存活能力的研究

目的 探讨分离自中华按蚊雌成蚊中肠的3种革兰阴性细菌,即气单孢菌、A4菌(未鉴定)和肠杆菌在按蚊幼虫孳牛水体中及按蚊体内的存活能力. 方法 3种目标细菌在实验室经数量扩增后,添加到饲养按蚊幼虫的水体中,依次收集饲养盆和蛹盒内的水样品,并解剖羽化后吸血雌成蚊,取其中肠制成研磨液;建立水样品和研磨液中细菌的16S rDNA序列克隆文库,并从各样品中分离可培养细菌,比较各样品中的优势菌种和不同处理中可培养细菌的种类组成. 结果 在所有样品中均未检测到与加入的人工培养细菌种类相同的细菌.按蚊幼虫饲养水体和蛹盒水体中的可培养细菌均以嗜水气单孢菌和睾丸酮丛毛单胞菌为主,在少量按蚊的中肠内含有可培养细菌,但均不是目标细菌;而各处理样品中的优势菌均为铜绿假单孢菌. 结论 3种细菌经人工培养后,不能在按蚊幼虫生活水体中建立种群,导致未能在按蚊成蚊中肠内柃测到这些细菌.     

嗜人按蚊中肠单克隆抗体的制备及初步鉴定

目的 制备并鉴定抗嗜人按蚊中肠单克隆抗体杂交瘤细胞株。方法 用嗜人按蚊中肠做抗原，用细胞融合技术制备单克隆抗体，并采用ELISA法对单克隆抗体进行筛选和鉴定。结果 建立了1株持续分泌抗嗜人按蚊中肠单克隆抗体的杂交瘤细胞株。BALB／c小鼠腹水单克隆抗体的最高稀释度达1：12800；单克隆抗体的重链属IgG1亚类；Western blot证实单抗能与嗜人按蚊中肠抗原特异性结合。结论 成功制备了抗嗜人按蚊中肠单克隆抗体。     

抗蚊媒中肠抗体对冈比亚按蚊生殖率和死亡率影响的研究

目的探讨冈比亚按蚊中肠抗原抗媒介免疫的作用,进一步研究抗媒介疫苗抗原. 方法解剖室内饲养的冈比亚按蚊雌蚊中肠,立即置于冷的pH 7.4 PBS溶液中,用SDS-PAGE方法获得分子质量为43 ku中肠蛋白抗原,皮下注射免疫大白兔3次,获得的免疫血浆膜饲冈比亚按蚊成蚊,与对照组比较,观察其对冈比亚按蚊死亡率和生殖率的影响. 结果膜饲免疫血浆的冈比亚按蚊的死亡率与对照组相比显著增高,死亡率增加56%;生殖率明显下降,实验组蚊虫平均产卵率为71.4个,对照组为88.1个,下降18.7%. 结论采用有效的方法分离蚊媒中肠的关键性抗原-中肠蛋白抗原可能成为抗蚊媒和其它抗媒介疫苗的靶抗原.     

斯氏按蚊和中华按蚊中肠免疫活性抗原的研究

目的　鉴别斯氏按蚊和中华按蚊中肠具有阻断疟疾传播作用的免疫活性蛋白， 并对斯氏按蚊雌蚊中肠免疫活性蛋白在中肠的分布进行定位。方法　应用酶联免疫电转移印迹技术 （ Ｅ Ｉ Ｔ Ｂ） 分析斯氏按蚊雌、雄蚊和中华按蚊雌蚊中肠的免疫活性抗原； 用间接荧光抗体技术 （ Ｉ Ｆ Ａ） 对斯氏按蚊雌蚊中肠免疫活性抗原进行定位。结果　斯氏按蚊雌、雄蚊蚊中肠抗原及中华按蚊雌蚊中肠抗原与斯氏按蚊雌蚊中肠抗血清作用， 分别显示９ 、９ 和６ 条蛋白带； 斯氏按蚊雌蚊中肠壁外侧出现较强的亮绿色荧光， 肠壁细胞核仅出现样弱的亮绿色荧光。结论　上述三种抗原间既有相同的免疫活性蛋白带， 也有各自特异的蛋白带， ７９ 、７６ 、６０ 、４６ｋ Ｄａ 的蛋白带为斯氏按蚊雌蚊中肠特异性免疫活性蛋白带； 斯氏按蚊雌蚊中肠免疫活性蛋白主要分布在中肠肠壁外侧， 仅有少量分布在肠壁细胞核。     

三种低分子量肝素在急性冠脉综合征介入治疗中安全性和有效性的比较研究

目的 比较三种低分子量肝素(依诺肝素、那屈肝素和达肝素)在急性冠脉综合症(ACS)介入治疗中的安全性和有效性.方法 本研究采用前瞻性、随机、单盲、单中心设计,76例入选的ACS患者随机分为依诺肝素组(1mg/kg)、那屈肝素组(0.01ml/kg)和达肝素组(120IU/kg),每12h皮下注射一次,至少使用48h后行冠状动脉造影或经皮冠状动脉介入术(PCI),所有手术在末次注射低分子量肝素(LMWH)后8h以内完成,术中不追加LMwH或普通肝素(UFH),监测三组手术前和手术结束时的部分活化凝血酶原激酶时间(APTT)和抗Xa因子活性,同时观察30d终点事件包括死亡、急性心肌梗死、急性左心衰和靶血管再次重建和严重出血事件,结果三组病例手术前和手术结束时平均APTT差异无统计学意义,术前和手术结束时APTT≥45s的病例数在依诺肝素组、那屈肝素组和达肝素组分别为24例(96.0%)、23例(95.8%)和26例(96.3%),差异无统计学意义.三组手术前和手术结束时抗Xa因子差异无统计学意义,但达到抗Xa因子≥0.5IU/L的比例不同,在依诺肝素组、那屈肝素组和达肝素组分别为:术前23例(92.0%)、21例(87.5%)和17例(63.O%)(P=0.018),手术结束时22例(88.0%)、19例(79.2%)和15例(55.6%)(P=0.022).30d随访三组终点事件的发生率差异无统计学意义,未发生严重出血事件发生.依诺肝素组发生1例因急性左心衰导致死亡,1例术后血小板＜10×1012/L,另有1例输血200mJ;那屈肝素组发生1例靶电管再次重建;达肝素组1例术中支架后急性血栓形成,导致急性前间壁心肌梗死,结论依诺肝索、那屈肝素和达肝索在ACS患者心导管室应用中均安全有效,术前皮下注射LMWH 4次且手术在末次注射的8h内完成,不需在冠状动脉造影和介人手术中静脉追加LMWH或UFH.     

重症监护室耐药非发酵革兰阴性菌院内感染的危险因素及治疗进展研究

多耐药非发酵革兰阴性菌已成为重症监护室院内感染的重要病原菌,近年来其检出率在全球有逐年上升的趋势,对其危险因素和治疗进展的探讨具有重要意义.入院前有抗生素使用史、反复插管、最初不恰当抗生素治疗即病原菌对所用抗菌药物不敏感、重症监护室住院时间延长等是耐药菌院内感染常见的危险因素.关于耐药菌院内感染的治疗,采用早期适当联合用药原则,控制感染.     

空气净化器对卧室霉菌和细菌浓度及哮喘患者症状改善的影响

目的 探讨使用空气净化器对卧室内霉菌和细菌浓度变化的影响及其对哮喘患者症状改善情况.方法 随机选取广州不同地区28例哮喘患者,在其卧室内安装空气净化器,采用柯赫沉降法在卧室中以五点采样收集卧室的霉菌(8 h)和细菌(30 min),测量使用空气净化器前以及使用后连续6个月卧室内霉菌和细菌的浓度,同时记录卧室的温度和相对湿度.实验期间采用哮喘控制测试量表(ACT量表)评估患者主观感受.采用SPSS 20.0软件进行录入统计,分析其卧室内霉菌浓度、细菌浓度、温度与相对湿度的关系及ACT量表得分变化趋势.结果 使用空气净化器前,卧室内霉菌的浓度为(21.35±13.12) cfu/m3,细菌的浓度为(1 060±1 138) cfu/m3,温度为(21±6) ℃,相对湿度为(64±15)%.霉菌浓度和相对湿度差异有统计学意义(P<0.01),而与温度比较差异无统计学意义(P=0.069),细菌浓度和相对湿度(P=0.648)及温度(P=0.122)之间差异无统计学意义.在使用空气净化器后卧室内霉菌浓度下降,细菌浓度呈波动变化.患者ACT量表得分(22±3)分较使用前(20±3)分上升,哮喘症状控制良好.结论 空气净化器的使用,可使卧室内霉菌的浓度下降,改善患者哮喘症状.     

苏云金杆菌以色列变种乳剂对嗜人按蚊和中华按蚊幼虫毒效的现场研究

目的 研究苏云金杆菌以色列变种（Bti）乳剂现场杀灭嗜人按蚊和中华按蚊幼虫的效果。方法 采用生物测定方法，分别确定Bti乳剂对嗜人按蚊和中华按蚊幼虫的LC50和LC95。通过现场试验，观察不同剂量组Bti乳剂对嗜人按蚊和中华按蚊幼虫的即效与持效。结果 Bti乳剂对嗜人按蚊（广西分离株）和中华按蚊（江苏分离株）Ⅲ龄幼虫的24hLC50分别为1．14μmol／L和0．15μmol／L，LC95依次为3．91μmol／L和0．46μmol／L。现场试验：对于嗜人按蚊，施药后第1、2、3d，1．5ml／m^2剂量组的平均幼虫死亡率依次为98．0％、96．0％、18．4％；3．0ml／m^2剂量组的平均幼虫死亡率分别为1000A、97．2％、90．8％。对于中华按蚊，施药后第1、2、3d，1．0ml／m^2剂量组的平均幼虫死亡率分别为98．4％、89．60A、67．6％；2．0ml／m^2剂量组平均幼虫死亡率依次为100％、99．2％、86．0％。结论Bti乳剂施药剂量1．0～3．0ml／m^2，能有效控制单季稻田按蚊幼虫孳生，持效为2～3d。     

革兰阳性细菌菌毛结构和功能研究进展

菌毛(pili)是细菌表面的一种多亚基蛋白聚合物。在革兰阳性菌中,菌毛亚基蛋白通过分选锚定酶(sortase,Srt)介导的反应进行共价聚合并锚定到细胞壁上。菌毛参与细菌对宿主组织和细胞的黏附、侵袭和定植等重要生理活动。本文综述革兰阳性菌菌毛结构、分子装配及其功能方面研究进展。     

Evaluation of the BacT/Alert automated blood culture system for detecting bacteria and measuring their growth kinetics in leucodepleted and non-leucodepleted platelet concentrates

BACKGROUND AND OBJECTIVE: To evaluate the BacT/Alert automated blood culture system for the detection of bacteria in platelet concentrates, and to determine bacterial growth kinetics in leucodepleted and non-leucodepleted units. MATERIALS AND METHODS: Apheresis (Cobe Leucocyte Reduction System [LRS]) and pooled buffy coat-derived (Optipress) platelet concentrates (PCs) were tested. Six organisms were used for spiking the PCs: Clostridium perfringens, Bacillus cereus, Group B Streptococcus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus and Escherichia coli. Units were inoculated to give a final concentration of approximately equal to 1 and 50 colony-forming units (CFU)/ml. On days 0, 2 and 5, BacT/Alert standard aerobic and anaerobic bottles were inoculated with a 5-ml fill volume and bacteria were enumerated. RESULTS: The BacT/Alert Automated blood culture system gave rapid determination times of spiked units, with all positives detected within 48 h and 98.1% detected within 24 h. In general, as the inoculum concentration increased, the detection time decreased. Rapid growth was obtained with all organisms tested except for B. cereus, which failed to grow on four occasions. Bacterial numbers on day 2 ranged from 10(5) to 10(11) CFU/ml and on day 5 ranged from 10(4) to 10(12) CFU/ml. Growth was not significantly greater in leucodepleted units. CONCLUSIONS: The study confirmed that PCs are an excellent growth medium for bacteria. Rapid and substantial growth was obtained with all organisms under test. Leucodepletion does not appear to enhance bacterial proliferation. The BacT/Alert automated blood culture system could rapidly detect contamination of units. Bacterial screening using an automated blood culture system is therefore a potential option.     

Influence of liver tumor promoters and structurally related chemicals on survival of normal adult rat hepatocytes in primary culture

Summary The influence of four liver tumor promoters and two structurally related chemicals (non-promoters) on survival of normal adult rat hepatocytes was examined in primary culture. Of the four promoters, butylated hydroxytoluene (BHT), dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT), barbital sodium and phenobarbital sodium, only phenobarbital efficiently prolonged the hepatocyte survival and maintained the morphological features of the cells. Both BHT and DDT were toxic to hepatocytes within the dose ranges tested. Barbital was also ineffective for maintenance of primary cultured hepatocytes but not toxic to the cells. Of the two non-promoters, barbituric acid and amobarbital, barbituric acid also showed no maintenance effect on hepatocytes. However, amobarbital resembled phenobarbital in its effect on the maintenance of hepatocytes in primary culture. DNA synthesis of primary cultured hepatocytes was severely suppressed by phenobarbital in a dose-dependent manner. The results clearly show that the ability to support long-term survival of primary cultured hepatocytes is a common property of some barbiturates but not of liver tumor promoters, and that the maintenance of hepatocytes by phenobarbital is not due to a counterbalance of stimulated proliferation and death of the cells.Abbreviations used BHT butylated hydroxytoluene - DDT dichlorodiphenyltrichloroethane - EDTA ethylenediaminetetraacetic acid disodium     

石家庄市世行贷款结控项目细菌学复发随访结果

目的分析石家庄市实施世界银行贷款中国结核病控制项目远期效果,制定预防与控制措施。方法总结分析选定三县区1993、1994年项目治愈病人为对象随访复发情况。结果对589例涂阳病人进行随访,满1年时,初治病人细菌学复发率1.4%,复治病人细菌学复发率为2.9%,满2年时初治病人细菌学复发率2.5%,复治病人细菌学复发率为2.9%。结论石家庄市项目实施取得了满意的远期效果,达到了世界卫生组织的要求。