多囊卵巢综合征患者颗粒细胞蛋白质组学分析

目的 应用定量蛋白质组学方法分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者颗粒细胞蛋白质表达变化。方法 收集2020年9月至2021年9月于我院生殖医学中心行IVF/ICSI助孕的患者取卵后废弃卵泡液标本24例,其中PCOS组12例和正常排卵对照组12例,从中提取颗粒细胞。采用液相色谱-串联质谱方法得到其蛋白质表达谱,生物信息学分析鉴定差异表达蛋白及其功能。采用Western Blot法验证质谱结果。结果 共鉴定出329种差异表达蛋白,其中上调蛋白169个,下调蛋白160个。KEGG富集分析结果显示,差异蛋白在亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸分解,糖酵解/糖异生,谷胱甘肽代谢等通路显著富集。结论 PCOS女性与正常排卵女性之间颗粒细胞蛋白质表达谱存在显著差异,进一步探索差异蛋白的功能或许可以为PCOS发病机制的研究提供线索。     

多囊卵巢综合征患者卵巢黄素化颗粒细胞瘦素信号转导分子STAT3磷酸化表达的研究

目的检测多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢黄素化颗粒细胞瘦素信号转导子和活化子STAT3磷酸化(p-STAT3)水平,并观察瘦素体外对培养卵巢黄素化颗粒细胞p-STAT3水平的影响,探讨瘦素在PCOS发病机制中的作用。方法选择行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的肥胖型PCOS患者(肥胖PCOS组)、非肥胖型PCOS患者(非肥胖PCOS组)、排卵功能正常和单纯输卵管因素不育的肥胖(肥胖对照组)及正常体重妇女(正常对照组)各15例。采用免疫印迹技术检测卵巢黄素化颗粒细胞p-STAT3水平。同时将正常人卵巢黄素化颗粒细胞行体外培养,分别加入不同浓度的瘦素(0、10、100、1,000 ng/ml)培养48 h,观察瘦素体外对人卵巢黄素化颗粒细胞p-STAT3水平的影响。结果(1)肥胖型PCOS组、肥胖对照组、非肥胖PCOS组和正常对照组卵巢黄素化颗粒细胞p-STAT3水平分别为(24.28±0.51)、(21.31±1.32)、(11.69±0.67)、(9.03±0.20),实验组间比较有显著性差异(P<0.05),其中肥胖型PCOS组p-STAT3表达水平最高,其次依次为肥胖对照组、非肥胖PCOS组和正常对照组。各组之间两两比较,均有显著性差异(P<0.05)。(2)加入瘦素培养48 h后,卵巢黄素化颗粒细胞p-STAT3水平随瘦素浓度升高而增高,呈浓度依赖性,至瘦素浓度达到100 ng/ml时,p-STAT3水平达到高峰,随后呈下降趋势。结论瘦素通过介导JAK2/STAT3信号途径可能参与了肥胖型PCOS的发病机制。     

血管生成素样蛋白基因1和2(ANGPTL1、2)在多囊卵巢综合征患者卵丘颗粒细胞上的表达

目的探讨血管生成素样蛋白基因1和2(ANGPTL1和ANGPTL2)在成熟的卵丘颗粒细胞(CCMⅡ)上表达与多囊卵巢综合征(PCOS)的相关性。方法共募集就诊于烟台毓璜顶医院生殖中心80例不育女性的CCMII样品,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定体外受精-胚胎移植(IVF-ET)促排卵治疗后38例实验组PCOS妇女(CCMII=148)和同期42例对照组(non-PCOS)妇女(CCMII=152)的卵丘颗粒细胞(CC)的ANGPTL1mRNA和ANGPTL2mRNA差异表达。结果 PCOS妇女CCMII中ANGPTL1表达水平低于non-PCOS妇女,但无统计学差异(P0.05);而PCOS妇女CCMII中ANGPTL2表达水平高于non-PCOS妇女,具有统计学差异(P0.05)。结论 ANGPTL1在PCOS患者CCMII上的表达无明显变化,推测ANGPTL1与PCOS患者的疾病发生无相关性。但PCOS患者CCMII上ANGPTL2明显升高,提示其可能参与PCOS患者的致病过程,影响卵巢内正常微环境,进而影响卵泡的正常发育。     

黄体生成素对多囊卵巢综合征患者卵巢黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物1和2 mRNAs及蛋白质表达的影响

目的探讨黄体生成素(LH)对多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物(IRS)-1和IRS-2 mRNAs及蛋白质表达的影响,其及在卵巢局部胰岛素抵抗中的作用。方法收集行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的11例PCOS患者(PCOS组)和15例排卵正常的输卵管性不育患者(对照组)促排卵后黄素化颗粒细胞行体外培养,分别用不同浓度LH(0、20、200、2,000 mIU/ml)处理细胞48 h,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法(Western-blot)检测黄素化颗粒细胞IRS-1和IRS-2 mRNAs及蛋白质的表达。结果(1)与对照组比较,PCOS组黄素化颗粒细胞IRS-1 mRNA及蛋白质表达显著增加(P<0.05),IRS-2 mRNA及蛋白质表达显著降低(P<0.05);(2)不同浓度LH作用后,PCOS组黄素化颗粒细胞IRS-1 mRNA及蛋白质的表达显著增加,IRS-2 mRNA及蛋白质的表达变化不明显;对照组则均无显著变化。结论PCOS异常增高的LH可能通过增加黄素化颗粒细胞IRS-1 mRNA及蛋白质的表达参与了患者卵巢局部选择性胰岛素抵抗的发生。     

自噬在多囊卵巢综合征中的调控作用研究

多囊卵巢综合征(PCOS)是一种复杂的内分泌代谢性疾病,是女性无排卵性不孕症的常见病因,其发病机制尚不完全明确。自噬对细胞内环境的稳定至关重要,同时又参与多种疾病的发生、发展。本文综述了参与自噬的关键分子及其在PCOS内分泌代谢和颗粒细胞中的研究进展,以帮助更好地了解PCOS的发病机制。     

胰岛素对卵巢颗粒细胞黄体生成素/绒毛膜促性腺激素受体表达的影响

目的 :研究胰岛素 ( INS)对猪卵巢颗粒细胞黄体生成素 /绒毛膜促性腺激素( L H/ CG)受体表达的影响 ,探讨高胰岛素血症可能在多囊卵巢综合征 ( PCOS)卵泡发育停滞中的作用。方法 :采用逆转录聚合酶链反应 ( RT-PCR)及其蛋白免疫印迹 ( Westernblot)法分别对加药处理的 4组猪卵巢颗粒细胞检测 LH/ CG受体的 m RNA及其蛋白表达。结果 :RT-PCR结果表明卵泡刺激素 ( FSH) +INS组 ( 0 .2 47± 0 .0 44)与 FSH组( 0 .1 61± 0 .0 2 3 )相比 L H/ CG受体 m RNA表达明显增强 ( P<0 .0 5) ;FSH+L H+INS组( 0 .2 40± 0 .0 3 0 )与 FSH+L H组 ( 0 .1 2 1± 0 .0 1 3 )相比 ,L H/ CG受体 m RNA表达明显增强 ( P <0 .0 1 )。 Western blot结果表明 FSH +INS组 ( 570 2 .3± 81 5.9)、与 FSH组( 3 81 3 .0± 3 48.5)相比 L H/ CG受体蛋白表达明显增强 ( P<0 .0 5) ;FSH+L H+INS组( 5898.8± 93 3 .8)与 FSH+L H组 ( 2 42 1 .0± 3 41 .5)相比 L H/ CG受体蛋白表达明显增强 ( P<0 .0 1 )。结论 :INS可以协同 FSH及 L H增强卵巢颗粒细胞 L H/ CG受体的表达 ,推测高胰岛素可能通过增强 L H+CG受体表达使 PCOS患者发育至窦状卵泡阶段的卵泡颗粒细胞过早黄素化 ,导致卵泡发育停滞。     

罗格列酮对多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞芳香化酶的表达和雌二醇分泌的影响

研究罗格列酮对多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢颗粒细胞芳香化酶(aromatase)的表达和雌二醇(E2)分泌的影响,以了解罗格列酮对PCOS卵巢颗粒细胞的局部作用。一、材料与方法1.研究对象:选择2004年11月至2005年3月在本院生殖中心接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗并伴有胰岛素抵抗的PCOS患者(PCOS组)及同期非PCOS原因导致不育的患者(非PCOS组)各5例。胰岛素(INS)释放试验:空腹INS>16·15mIU/L,餐后(服75 g葡萄糖)INS 1 h>109·8mIU/L或2 h>89·0 mIU/L,其中一项阳性即为胰岛素抵抗。诊断标准,满足以下三项中的任意两项即可…     

多囊卵巢综合征患者血清circPUM1和miR-760的表达变化和临床意义

目的探讨环状RNA PUM1(circPUM1)、微小RNA-760(miR-760)在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)患者血清表达情况, 及其与患者BMI、生化指标的相关性。方法选择2019年2月至2022年2月在郑州大学附属郑州中心医院诊治的118例PCOS患者做为研究对象(PCOS组), 另选同期在本院体检120例女性作为对照组, 采用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测血清circPUM1、miR-760表达水平, 并检测血清各糖脂代谢指标和性激素指标;Pearson法分析circPUM1、miR-760表达水平的相关性, 及circPUM1、miR-760与各指标的相关性。结果对照组体质指数(body mass index, BMI)、空腹血糖(fasting blood glucose, FBG)、空腹胰岛素(fasting insulin, FINS)、胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance index, HOMA-IR)、甘油三酯(trig...     

分泌型卷曲相关蛋白家族成员在多囊卵巢患者不同成熟度卵母细胞周围的卵丘颗粒细胞中的基因表达

目的探讨在多囊卵巢综合征(PCOS)患者与非PCOS患者中,分泌型卷曲相关蛋白(sFRPs)家族成员基因在不同成熟度卵母细胞周围的卵丘颗粒细胞上的表达差异。方法收集27例接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕治疗的不育女性患者(其中11例PCOS患者,16例非PCOS患者),通过控制性促排卵治疗后,采用标准长方案促排卵,经阴道超声引导下穿刺取卵后,获得共198枚卵丘-卵母细胞复合体(PCOS患者98枚,非PCOS患者100枚);采用机械剥离法获取卵丘颗粒细胞,根据卵母细胞成熟度不同,将对应的卵丘颗粒细胞分为4组:非PCOS患者成熟卵母细胞周围的颗粒细胞组(CCN-MII),非PCOS患者非成熟卵母细胞周围的颗粒细胞组(CCN-MI+GV),PCOS患者成熟卵母细胞周围的颗粒细胞组(CCP-MII)和PCOS患者非成熟卵母细胞周围的颗粒细胞组(CCP-MI+GV)。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测部分sFRPs家族基因成员(sFRP1、sFRP2、sFRP3、sFRP4、sFRP5)在PCOS及非PCOS患者不同成熟度卵母细胞周围的卵丘颗粒细胞上的表达情况。结果 (1)PCOS患者中,在未成熟卵母细胞周围的颗粒细胞中sFRP4的表达显著高于在成熟卵母细胞周围的颗粒细胞中的表达,即sFRP4在CCP-MⅠ+GV组表达高于CCP-MⅡ组[(7.80±1.21)vs.(1.00±0.00)](P0.05);(2)在非PCOS患者中,sFRPs家族成员sFRP4和sFRP5在不同成熟度卵泡母细胞周围的卵丘颗粒细胞中表达变化显著,CCN-MⅠ+GV组中的表达量均显著高于CCN-MⅡ组[sFRP4(7.04±1.30)vs.(1.00±0.00)](P0.05)和[sFRP5(2.84±0.73)vs.(1.00±0.00)](P0.05);(3)sFRP4的表达在PCOS及非PCOS患者间成熟卵母细胞对应的颗粒细胞组间均无显著性差异。结论在PCOS患者中,仅sFRP4在卵丘颗粒细胞上的表达与卵母细胞的成熟度相关;而在非PCOS患者中,sFRP4和sFRP5的表达均与卵母细胞的成熟度相关,其表达量随卵母细胞成熟而降低。     

多囊卵巢综合征的微创手术治疗

多囊卵巢综合征(PCOS)是以慢性无排卵、闭经、或月经稀发、不孕、肥胖、多毛和卵巢多囊性增大为临床特征的综合征候群。目前,临床上还没有单用一种药可以改善PCOS的所有症状,主要是对症治疗,对于严重PCOS促排卵治疗无效者,多采用手术治疗。我院于2003年8月至2005年12月对PCOS不     

miR-9-5p调控雄激素受体的表达促进卵巢颗粒细胞增殖

目的 分析微小RNA-9-5p(miR-9-5p)在多囊卵巢综合征(PCOS)中的诊断价值,并探讨对卵巢颗粒细胞(KGN)增殖的作用机制.方法 采用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析miR-9-5p在50例PCOS患者(实验组)及50例健康女性(对照组)血清中的表达特征.采用受试者工作特征曲线(ROC)评估miR...     

罗格列酮对多囊卵巢综合征患者黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物-1和-2表达的影响

目的探讨胰岛素增敏剂罗格列酮对多囊卵巢综合征（PCOS）患者卵巢黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物（IRS）-1、-2表达的影响。方法收集行体外受精-胚胎移植（IVF-ET）治疗的9例PCOS患者（PCOS组）和12例排卵正常的输卵管性不育患者（对照组）促排卵后卵巢黄素化颗粒细胞行体外培养,并用罗格列酮处理48h,采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Western blot方法分别测定颗粒细胞IRS-1、-2mRNA和蛋白的表达。结果与对照组比较,PCOS组患者颗粒细胞IRS-1的表达升高,IRS-2表达降低（P〈0．05）;罗格列酮可显著降低PCOS患者黄素化颗粒细胞IRS-1的表达（P〈0．05）,增加其IRS-2的表达（P〈0．05）。结论罗格列酮可以通过调整IRS-1／2的表达失衡,改善PCOS卵巢局部胰岛素抵抗。     

控制体重对肥胖型多囊卵巢综合征患者的疗效观察

目的探讨肥胖型多囊卵巢综合征(PCOS)患者控制体重的疗效。方法选择BMI≥25的多囊卵巢综合征患者122例,随机分成二甲双胍联合达英-35对照组与体重控制实验组,治疗6个月后观察两组体重指数、内分泌代谢指标及妊娠结局。结果 (1)对照组与实验组治疗后代谢指标LH、TT、CHO、TG、LDL及FPG、1hPG、GAUC、FINS、HOMA-IR均较治疗前显著下降,具有统计学意义(P0.05)。(2)实验组患者BMI[(24.39±2.13)kg/m2]、FINS[(7.94±2.41)mU/L]、1hINS[(93.32±40.32)mU/L]、2hINS[(65.27±32.34)mU/L]、IAUC[(129.69±35.37)mU/L·h]较药物对照组[分别为(26.02±2.05)kg/m2、(15.02±2.11)mU/L、(136.32±62.31)mU/L、(99.27±70.34)mU/L、(193.98±98.75)mU/L·h]下降明显(P0.05),差异有统计学意义。(3)实验组月经恢复率(75.00%vs.54.72%,P0.05)及排卵率(64.58%vs.43.40%,P0.05)优于对照组。结论控制体重能有效改善患者糖脂代谢异常,尤其是胰岛素敏感性增加,总疗效优于复合药物治疗。     

多囊卵巢综合征患者胰岛素抵抗的研究进展

多囊卵巢综合征(PCOS)是一种常见的影响生育功能的妇科内分泌疾病,被认为与遗传、代谢、内分泌及环境等多因素相关。PCOS患者的胰岛素抵抗增加了2型糖尿病、高血压、脂质代谢异常等发生的风险,越来越多的研究开始关注PCOS患者的胰岛素抵抗,本文从胰岛素抵抗的发生机制、评估、治疗等方面阐述其在PCOS中的研究进展。     

Observation on human ovarian theca cell and granulosa cell interaction in polycystic ovary syndrome

<正> Objective:To investigate the role of human theca eell(TC) and granulosa cell (GC)interaction and insulin(INS) in steroidogenesis in normal ovarian cycle and in patientswith PCOS.Methods:Ovarian theca and granulosa cells from eleven normal women and eightPCOS patients were co-cultured on opposite side of collagen with or without INS.Theconcentrations of estradiol (E_2),progesterone (P) and androstenedione (A) in the cul-ture medium were examined by ELISA method.Results:When co-cultured with GC,TC in PCOS group produced more A and lessP than those of normal group.When co-cultured with theca cells,granulosa cells inPCOS group produced more E_2 than those of normal group.Addition of INS increasedthe difference significantly.Conclusions:The GC and TC interaction from the normal and PCOS ovaries is dif-ferent.There is a high A and high E_2 intraovary loop of PCOS leading to premature ar-rest of follicle growth and anovulation.Insulin may play an important regulatory role.     

经阴道超声引导下未成熟卵泡介入术治疗多囊卵巢综合征

目的评价经阴道超声引导下未成熟卵泡介入术（TUG-IFI）对多囊卵巢综合征（PCOS）的疗效。方法对接受辅助生殖技术治疗中低反应的PCOS患者行TUG-IFI,比较术前、后内分泌水平、排卵率、妊娠率以及相关超声参数的差异。结果87．50％患者在术后发生自发排卵,术后累积妊娠率为57．14％。术后血清睾酮（T）、黄体生成素（LH）及黄体生成素与卵泡刺激素的比值（LH／FSH）均显著低于术前（P〈0.01）。雌二醇（E2）、FSH和催乳素（PRL）的术前、后比较,差异均无显著性意义（P〉0．05）。HCG注射日,优势卵泡（〉18mm）和A型内膜明显增多,内膜明显增厚（P〈0．01）,小卵泡数目较术前减少,卵巢体积缩小（P〈0．05）。结论TUC-IFI是治疗PCOS患者有效、创伤小的方法,能有效改善患者卵巢功能,有利于排卵和妊娠。