肾上腺素对内毒素血症大鼠早期炎症因子及急性肺损伤的影响

目的：探讨肾上腺素对内毒素( lipopolysaccharide,LPS)所致大鼠肺损伤的保护作用及其作用机制。方法30只SD大鼠随机分为3组(每组10只)：正常对照组大鼠静脉输注生理盐水2．4 ml/( kg·h);LPS组大鼠静脉注射LPS 6 mg/kg后,静脉输注生理盐水2．4 ml/( kg·h);肾上腺素组大鼠静脉注射LPS 6 mg/kg后,静脉输注肾上腺素0．6μg/( kg·min)。在LPS注射后2 h和6 h通过心导管抽血,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子( TNF)-α、白细胞介素( IL)-6和IL-10水平,并在6 h处死大鼠取肺脏组织,分别予肺组织含水量检测,HE染色观察肺组织病理学变化,以及ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)内TNF-α、IL-6和IL-10水平。结果(1)与正常对照组肺含水量(70．19%±5．87%)相比,LPS组肺含水量(85．24%±5．87%)明显升高( P <0．05),与 LPS 组相比,肾上腺素组肺含水量(78．00%±6．41%)明显降低(P<0．05)。(2)病理观察结果显示,LPS组大鼠肺泡隔内毛细血管充血、水肿及炎症细胞浸润,少部分肺组织可见肺不张及肺泡内水肿、出血。肾上腺素组大鼠肺病理损伤较LPS组明显减轻。(3)与LPS组相比,肾上腺素组各时点血清TNF-α及IL-6水平明显降低(P<0．05), IL-10水平明显升高(P<0．05)。(4)与LPS组相比,肾上腺素组大鼠BALF中TNF-α水平降低[(78±9)ng/L vs.(102±16) ng/L],IL-6水平降低[(268±42) ng/L vs.(347±50) ng/L],IL-10水平升高[(210±23)ng/L vs.(146±34) ng/L](P<0．05)。结论肾上腺素可减轻LPS诱导的急性肺损伤,其保护作用可能与降低TNF-α、IL-6水平,升高IL-10水平有关。     

宫内炎症暴露对早产儿固有免疫应答的影响

目的探讨宫内炎症暴露对早产儿固有免疫应答的影响。方法 2013年6月至2014年6月出生、胎龄35周的早产儿47例纳入本研究。依据胎盘病理检查结果,将早产儿分为宫内炎症阳性组和阴性组。采用Ficoll密度梯度离心法和贴壁黏附法分别获得脐血单个核细胞以及单核细胞。用内毒素(LPS,100 ng/ml)刺激单个核细胞12 h后,流式细胞术(PCR)检测CD14+单核细胞HLA-DR的表达量以及CD3+CD4+/CD3+CD8+的比例。用LPS(100 ng/ml)刺激单核细胞6 h后,Real-Time PCR检测单核细胞IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-αm RNA表达量的变化。ELISA检测脐血以及单核细胞培养上清液中IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α水平。结果宫内炎症阳性组脐血血浆IL-6水平高于宫内炎症阴性组,差异有统计学意义(P=0.001)。LPS刺激后,两组单核细胞IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-αm RNA表达量及培养上清液中蛋白水平均显著升高,与刺激前比较差异均有统计学意义(P0.05);但两组间比较差异均无统计学意义(P0.05)。LPS刺激后,宫内炎症阳性组CD14+单核细胞HLA-DR表达量显著降低,而宫内炎症阴性组则显著升高,与刺激前比较差异均有统计学意义(P0.05);且阳性组HLA-DR表达量显著低于阴性组(P=0.002)。结论宫内炎症暴露并不影响早产儿脐血单核细胞对LPS的应答反应水平,但可抑制单核细胞激活后主要抗原递呈受体的表达。     

Toll样受体信号与新生儿脓毒症炎症反应机制初探

目的 探讨Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)及其信号传递分子在新生儿脓毒症炎症免疫反应中的作用.方法 新生儿脓毒症20例,正常新生儿对照组16例,抽取各组新生儿静脉血3ml备检,未加任何体外丝裂原刺激培养.采用适时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞TLR1～TLR10、髓样分化蛋白2(myeloid differentiation protein 2,MD-2)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α mRNA的表达;酶联免疫吸附试验检测IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等前炎症因子蛋白表达.结果 (1)新生儿脓毒症组TLR2、TLR4 mRNA表达均显著高于正常对照组(TLR2:55.16±12.78 vs 9.53±3.73,P＜0.01;TLR4:125.22±30.64 vs 23.17±5.78,P＜0.01),其他TLRs表达无明显改变;(2)新生儿脓毒症组TLR4信号传递分子MD-2及MyD88明显增高(MD-2:376.83±62.16 vs 12.92±2.54,P＜0.01;MyD88:11.97±2.48 vs 2.77±0.59,P＜0.01);(3)新生儿脓毒症组前炎症细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α表达明显增高[PCR:(IL-1β:21.72±5.56 vs 5.69±1.26,P＜0.01;IL-6:71.39±18.34 vs 9.65±2.13,P＜0.01;IL-8:29.39±6.72 vs 8.72±1.95,P＜0.01;TNF-α:65.42±16.95 vs 12.33±3.45,P＜0.01)],[ELISA:(IL-1β:2 977.36±653.97 vs 480.52±120.36,P＜0.01;IL-6:3 143.82±775.08 vs 393.78±96.55,P＜0.01;IL-8:2 510.78±686.77 vs 276.91±72.46,P＜0.01;TNF-α:3 582.24±876.13 vs 1 233.68±289.39,P＜0.01)].结论 新生儿脓毒症TLRs信号途径异常活化,前炎症细胞因子表达明显增高,提示新生儿天然免疫已具初步的抗感染免疫反应能力,TLRs异常活化可能是新生儿脓毒症免疫功能紊乱的始动因素.     

急性肺损伤幼猪肠黏膜上皮细胞凋亡的表达

目的 观察细胞凋亡在急性肺损伤(AU)幼猪肠黏膜上皮的发生情况及相关机制.方法 采用脂多糖(LPS)诱导幼猪ALI模型,分离肠黏膜上皮细胞,采用流式细胞结合末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位缺口末端标记(TUNEL)和电镜方法观察凋亡细胞的改变.同时检测炎症/抗炎因子TNF-α/IL-10 mRNA的表达和氧化与抗氧化损伤指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平与凋亡发生的关系,进一步阐明凋亡的发生机制.结果 模型组肠上皮细胞凋亡较正常组明显增加(P<0.01);模型组TNF-α mRNA表达增强,IL-10mRNA表达减弱,MDA含量增加、SOD活性减低与正常组比较差异均有统计学意义(P<0.01).结论 ALI幼猪肠黏膜上皮细胞凋亡增加,与炎症/抗炎因子表达失衡,氧化/抗氧化损伤异常有关.     

婴幼儿脓毒症不同免疫状态细胞因子变化探讨

目的 检测不同免疫状态脓毒症婴幼儿细胞因子浓度的变化,探讨婴幼儿脓毒症免疫功能紊乱的可能机制.方法 深圳市儿童医院重症监护室2007年5月至11月收治的脓毒症患儿36例为研究组,16例正常婴幼儿为对照组.根据人类白细胞抗原(HLA)-DR的测定值,将患儿分为免疫激活组(DR-H组)和免疫抑制组(DR-L组).用流式细胞术检测CD14+单核细胞HLA-DR表达率;实时荧光定量PCR检测CD4+T细胞IL-10、IL-6 mRNA表达;ELISA检测IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10血浆浓度.结果 (1)小儿危重病例评分DR-H组高于DR-L组(90.15±4.43 vs 81.91±7.45,P＜0.05).(2)细胞因子变化:两组前炎症细胞因子IL-1β、IL-6血浓度均明显高于对照组(P＜0.05),DR-H组TNF-α高于对照组.两组问比较,IL-1β及IL-6差异无显著性,DR-H组TNF-α高于DR-L组(P＜0.05).两组IL-6基因表达均高于对照组(P＜0.05),以DR-L组增高尤为显著.两组IL-10均高于对照组(P＜0.05),DR-L组IL-10基因表达高于对照组及DR-H组.结论 CD14+单核细胞HLA-DR表达检测对婴幼儿脓毒症危重程度及预后有一定判断价值.婴幼儿脓毒症发病过程中,前炎症细胞因子始终处于高表达状态,导致免疫抑制的主要原因可能是抗炎因子IL-10过表达.     

红霉素对高氧暴露早产鼠肺组织肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-8的干预作用

目的 观察大环内酯类抗生素红霉素对高氧暴露下早产新生大鼠肺组织肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和白细胞介素(interleukin,IL)-8表达的影响,探讨红霉素对高氧肺损伤的干预作用.方法 早产新生SD大鼠生后ld按随机数字表法随机分为4组:空气暴露+生理盐水组、空气暴露+红霉素组、高氧暴露+生理盐水组及高氧暴露+红霉素组.空气暴露组置于同一室常压空气中;高氧暴露组持续暴露于常压氧舱中,氧浓度＞85％.4组早产鼠分别于空气或高浓度氧暴露后1、7、14d提取肺组织标本.采用石蜡包埋切片行苏木精-伊红染色观察肺组织的病理学变化.采取ELISA法分析血清细胞因子TNF-α和IL-8的水平.结果 (1)与空气暴露+生理盐水组比较,高氧暴露1、7d,高氧暴露+生理盐水组早产鼠肺组织TNF-α和IL-8表达水平显著增强[1 d:TNF-α:(16.163±0.574) ng/ml vs.(21.923±2.066) ng/ml,IL-8:(18.214±3.649) ng/ml vs.(23.546±5.240) ng/ml;7 d:TNF-α:(15.940±0.821) ng/ml vs.(19.688±0.764) ng/ml,IL-8:(18.541±4.114) ng/ml vs.(24.255±4.692) ng/ml],尤其TNF-α表达增强出现更早,14 d明显减弱(P＜0.05).(2)与高氧暴露+生理盐水组比较,红霉素干预后l、7、14d,高氧暴露+红霉素组早产鼠肺组织中TNF-α和IL-8表达水平显著降低(P＜0.05)[1 d:TNF-α:(21.923±2.066) ng/ml vs.(18.903±1.851) ng/ml,7 d:IL-8:(24.255±4.692) ng/ml vs.(23.508±3.543) ng/ml,14 d:TNF-α:(16.443±5.466) ng/ml vs.(14.453±0.963) ng/ml],但相对于1、7d时,14d降低程度轻.结论 氧化爆发诱导的炎症介质TNF-α和IL-8释放参与高氧肺损伤的发生发展过程,红霉素可能通过机体免疫调节作用,抑制炎症介质释放,在减轻高氧肺损伤过程中发挥重要作用.     

系膜细胞来源的IL-13对系膜细胞促炎性细胞因子基因表达的调控作用

目的：探讨脂多糖(LPS)对体外培养的人肾小球系膜细胞(HMC)表达IL-13的调节作用及IL-13对HMC促炎性细胞因子、趋化因子和促纤维化因子基因表达的影响,以探讨IL-13对肾小球疾病状态下系膜细胞炎症反应的抑制作用。方法：HMC分为实验组和对照组,实验组予以不同浓度的LPS(1 μg/ml,10 μg/ml,100 μg/ml)刺激或用不同浓度的IL-13(1 ng/ml, 10 ng/ml, 100 ng/ml)预处理。应用RT-PCR和ELISA检测系膜细胞IL-13 mRNA 和蛋白表达;应用核酸酶保护法检测系膜细胞TNF-α,IL-1α,IL-1β,MCP-1,IL-8和TGF-β1 mRNA表达。结果：①未予任何刺激的对照组,系膜细胞不表达IL-13 mRNA和蛋白;LPS可呈剂量依赖性的方式促进系膜细胞IL-13 mRNA的表达和蛋白分泌。②正常培养状态下,系膜细胞可组成型表达TNFα,IL-1β,IL8和TGF-β1,而不表达IL-1α和MCP-1 mRNA;LPS刺激后上述炎症因子表达显著上调;IL-13可呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的系膜细胞炎症性细胞因子的基因表达。结论：IL-13是系膜细胞的自分泌因子;IL-13可抑制LPS诱导的系膜细胞促炎性细胞因子、趋化因子和促纤维化因子的表达,提示自分泌和旁分泌的IL-13对于肾小球疾病状态下肾脏系膜细胞的炎症反应具有抑制作用。     

2009甲型H1N1流感患儿免疫功能改变初探

目的 探讨2009甲型H1N1流感(以下简称"甲流")患儿免疫功能及可能的免疫发病机制.方法 深圳市儿童医院2009年11月1日-2010年1月10日甲流住院患儿60例,轻症35例(轻症肺炎),重症25例(重症肺炎或甲流相关性脑病,死亡3例),同年龄正常对照组20例.采用real-time PCR、流式细胞术及ELISA检测外周血单个核细胞胞浆模式识别受体(PRRs)维甲酸诱导基因I/黑色素瘤分化相关基因5(RIG/MDA5)、胞膜PRRs Toll样受体(TLRs)分子及其信号途径传导分子、细胞因子/趋化因子及负性调节因子变化;T、B及NK细胞凋亡及凋亡相关基因TRAIL和CASPASE-3表达.结果 (1)甲流患儿RIG/MDA5表达、TLR2、TLR4表达明显高于正常对照组[TLR2(9.69±3.15)×10-2vs.(3.96±0.83)×10-2,t=10.16,P＜0.05;TLR4(10.23±2.85)×10-2vs.(7.46±2.18)×10-2,t=3.76,P＜0.05],以重症甲流患儿增高为著,RIG/MDA5表达增高最为明显;TLRs途径信号传导分子MyD88、TRAM等表达明显高于轻症甲流患儿.(2)甲流患儿CD3+[(1.22±0.38)×109/Lvs.(3.59±1.10)×109/L,t=9.21,P＜0.05]、CD4+、CD8+T细胞及NK细胞绝对计数明显低于正常对照组,B细胞无明显改变.(3)轻症甲流患儿TNF-α、IL-6、IL-1β等炎症细胞因子血浓度或基因高于正常对照组,重症患儿炎症细胞因子TNF-α[(6.42±1.76)×10-2vs.(9.05±2.51)×10-2,t=4.55,P＜0.05]明显低于正常对照组.IFN-α/β表达持续高于正常对照组,尤以重症甲流患儿为著;IFN-I诱导基因IP-10[(20.52±6.09)×10-2vs(1.18±0.34)×10-2,t=18.74,P＜0.05]、RANTES或iNOS轻症患儿表达高于正常对照组,重症患儿表达则趋于减少.(4)甲流患儿CD3+[(32.90±7.66)%vs.(20.21±6.58)%,t=6.21,P＜0.05]、CD4+、CD8+T细胞、NK细胞凋亡高于正常对照组,以重症患儿更为显著.凋亡相关基因TRAIL和CASPASE-3表达明显高于正常对照组.(5)重症患儿PRRs负性凋节因子SOCS1、SOCS3、IRAK-M、TRAF4及FLN29表达明显高于轻症患儿,抗炎细胞因子IL-10及IL-10/TNFα比值随病情加重增高.结论 甲流患儿机体免疫功能紊乱,轻症患儿处于全身免疫激活状态,重症患儿同时存在免疫激活/免疫抑制反应.     

缺氧缺血性脑病新生儿血清细胞因子及T细胞亚群的变化

目的探讨缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿血清白介素(IL)-1β、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及外周血T细胞亚群的变化。方法选择2006年5月至2009年10月本院新生儿病房收住院的30例HIE患儿为病例组,同期无窒息的足月新生儿30例为对照组,应用ELISA法检测两组新生儿血清IL-1β、IL-10、TNF-α水平,分离外周血单个核细胞,用免疫组化法检测CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+细胞百分率。结果病例组血清IL-1β、IL-10、TNF-α水平(pg/ml)均高于对照组[(16.2±4.6)比(13.0±4.1),(21.6±5.1)比(16.4±4.2),(19.5±0.3)比(12.1±0.3),P均<0.05],CD3+、CD4+、CD8+细胞数量(%)低于对照组[(41.3±7.1)比(45.2±7.3),(36.1±6.6)比(40.0±5.8),(22.9±4.2)比(25.8±4.4),P均<0.05]。结论 HIE患儿存在一定程度的免疫功能紊乱,IL-1β、IL-10、TNF-α和T细胞亚群可能参与了HIE的发病过程。     

Salubrinal抑制脂多糖诱导H9C2心肌细胞凋亡的保护机制

目的 研究脓毒症中内质网应激诱导心肌细胞凋亡的机制.方法 建立脂多糖(lipopolysacchride,LPS)H9C2心肌细胞脓毒症模型.通过实时定量聚合酶链反应(RTq-PCR)和流式细胞技术分别观察LPS干预H9C2心肌细胞24 h后的促凋亡蛋白CHOP mRNA、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和细胞凋亡的变化.使用内质网应激抑制剂Salubrinal预处理H9C2心肌细胞,观察以上指标变化.结果 LPS组CHOP mRNA表达(2.40±0.30)与对照组比较(1.00±0)显著上调(P＜0.05),LPS组MMP(1.07 ±0.33)与对照组(2.62±0.51)比较显著下降(P＜0.05),LPS组细胞凋亡率[(16.58±2.71)％]与对照组[(3.85±1.07)％]比较显著上升(P＜0.05).Salubrinal+ LPS组CHOP mRNA表达(1.60±0.23)与LPS组(2.40±0.30)比较显著下调(P＜0.05),Salubrinal+ LPS组MMP(1.85 ±0.31)与LPS组比较,显著上调(P＜0.05);Salubrinal+ LPS组细胞凋亡率[(6.05±1.48)％]与LPS组比较,显著下调(P＜0.05).结论 在H9C2心肌细胞脓毒症模型中,Salubrinal通过抑制LPS诱导CHOP mRNA的表达,减轻线粒体的损伤,从而降低心肌细胞凋亡率.脓毒症心肌细胞中内质网应激可能通过线粒体途径诱导细胞凋亡.     

系膜细胞来源的白细胞介素-13对系膜细胞细胞因子基因表达的研究(英文)

目的　白细胞介素 1 3(IL 1 3)是新近发现的一种抗炎性细胞因子 ,其在肾小球肾炎中的作用尚不清楚 ,该研究探讨脂多糖 (LPS)对体外培养的人肾小球系膜细胞 (HMC)表达IL 1 3作用以及IL 1 3对HMC促炎性细胞因子、趋化因子和促纤维化因子基因表达的影响。方法　体外培养HMC ,加入不同浓度的LPS和 (或 )IL 1 3后 ,用逆转录 -聚合酶链反应和ELISA检测HMCIL 1 3mRNA表达和细胞培养上清液中IL 1 3蛋白含量 ;应用核酸酶保护法检测HMC肿瘤坏死因子 α(TNF α)、白介素 - 1α(IL 1α)、白介素 - 1 β(IL 1 β)、单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1 )、白介素 8(IL 8)、转化生长因子 - β1 (TGF β1 )mRNA的表达。 结果　未予LPS刺激的HMC不表达IL 1 3mRNA和蛋白 ;LPS呈剂量依赖性和时间依赖性诱导HMC表达IL 1 3mRNA和分泌IL 1 3蛋白。HMC受LPS刺激后 1 2h即可表达IL 1 3mRNA ,4 8h达高峰 ,72h仍维持在较高的水平。HMC受LPS刺激后 2 4h ,其培养上清液中检测到IL 1 3蛋白 ,4 8h和 72h进一步增加。外源性IL 1 3呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的系膜细胞TNF α ,IL 1α ,IL 1 β ,MCP 1 ,IL 8,TGF β1mRNA的表达。应用抗IL 1 3抗体中和内源性IL 1 3后 ,上述炎症因子表达增强。结论　IL 1 3是HMC自分泌因子。IL 1 3可抑制LPS诱导     

大鼠百日咳菌液脑水肿脑组织肿瘤坏死因子-α变化

目的　了解肿瘤坏死因子 α (TNF α)在百日咳菌液导致的感染性脑水肿 (感脑 )时的变化及与感脑脑损害的关系。方法　 99只大鼠随机分成空白对照组 (C组 ,n =11) ;生理盐水组 (NS组 ,n =44 ) ;百日咳菌液脑水肿组 (PB组 ,n =44 )。NS组和PB组又分为 30 ,6 0 ,12 0 ,2 40min 4个亚组。用RT PCR和ELISA方法检测不同时间大鼠感脑脑组织匀浆中的TNF αmRNA表达及蛋白质生成水平。结果　TNF α含量在PB 2 40min组 (76 8.4± 86 .3pg/ g)显著增加 ,分别与C组 (318.1± 31.1pg/ g) ,NS 30min(32 4.2± 6 5 .6 pg/ g) ,6 0min(32 2 .1± 73.4pg/g) ,12 0min(316 .8± 49.1pg/g) ,2 40min(32 9.9± 77.6 pg/g)及PB 30min(36 0 .3± 6 6 .6 pg/g) ,6 0min(35 8.5±49.1pg/ g) ,12 0min(35 6 .0± 5 2 .3pg/ g)组比较差异均有非常显著性 (P <0 .0 1)。TNF αmRNA表达信号在PB6 0min组开始增加 ,并随注菌后时间的增加 ,而逐渐增强 ,2 40min达高峰。结论　感脑时脑组织中的TNF α含量显著增加 ,提示TNF α与感脑脑损害密切相关。     

TNF-α和IκBα在内毒素致新生大鼠肺出血中的作用研究(英文)

目的：探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和核因子-κB抑制 蛋白α(IκBα)在内毒素脂多糖(LPS)致新生大鼠肺出血发生机制中的作用。方法：将48只7～10日龄Wistar大鼠分为LPS组和生理盐水(NS)组。LPS组腹腔注射LPS 5 mg/kg,按LPS⑸浜蠊鄄斓氖奔浞治0 min,1 h,2 h,4 h,8 h,16 h和24 h组,每组6只;NS组腹腔注射等量生理盐水作为对照。对鼠肺进行大体和光镜观察,分别采用酶联免疫 吸附(ELISA)、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot杂交法动态观察肺组织TNF-α蛋白和mRNA表达及IκBα表达的变化。结果：LPS注射后1 h可引起新生 大鼠明显的肺出血及炎性改变。肺组织TNF-α蛋白含量从LPS注射后1 h增加,2 h达高峰; TNF-α mRNA的表达从LPS注射后 0.5 h 明显增强(P<0.01),2 h达高峰;而I κBα于LPS注射后 1 h 起表达很快减弱,明显低于NS组(P<0.05),8 h表达最 弱(P<0.01)。结论：LPS可致新生大鼠肺出血。新生大鼠肺出血可 能与肺组织IκBα蛋白表达减弱,导致NF-κB活化、TNF-α基因转录上调及蛋白合成增加有关。     

年龄依赖性癫痫性脑病患儿的血清细胞因子变化

目的 探讨白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α (TNFα)和干扰素α (IFNα)在年龄依赖性癫痫性脑病(ADEE)患儿血清中的变化。方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测20例ADEE患儿血清中IL-2,TNFα和IFNα的水平,年龄和性别相匹配的20例正常儿童为对照组。结果 癫痫组血清IL-2,TNFα和IFNα水平均明显高于对照组分别为(379.53±44.86) ng/L比(239.66±21.03) ng/L;(962.42±107.69) ng/L比(501.62±38.93) ng/L;(586.12±84.86) ng/L比(329.56±30.43) ng/L。(t=2.59,3.51,2.71,P分别<0.05,0.01,0.05)。相关分析发现ADEE患儿血清IL-2与TNFα水平之间呈显著正相关(r=0.671,P<0.01)。结论 ADEE患儿存在免疫功能异常,细胞因子参与了免疫病理损害过程。     

黄芪对心肌炎心肌穿孔素及外周血TNF-α的影响

目的：儿童病毒性心肌炎(VMC)发病率高,临床上缺乏有效的治疗药物。该研究旨在探讨黄芪注射液治疗小鼠柯萨奇B3(CVB-3)病毒性心肌炎的疗效及其机制。方法：24只Balb/C鼠腹腔感染柯萨奇病毒B3亲心肌细胞株后,随机等分为两组：黄芪治疗组(黄芪注射液10 g/kg,腹腔注射,每天1次,连续7d)和对照组(同法每天注射等容积注射用水)。实验第8天留取心肌和血液标本,进行心肌病理检查,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测心肌穿孔素(PFP)mRNA表达及放免法检测外周血肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果：①黄芪治疗组心肌组织病理改变明显轻于对照组;②黄芪治疗组心肌PFP mRNA的表达明显低于对照组［(1.10±0.07) vs (1.31±0.12)］(P<0.01);③黄芪治疗组血清TNF-α含量明显低于对照组［(2.39±0.21) ng/ml vs (2.97±0.32) ng/ml］(P<0.01)。④PFP mRNA表达水平与血清TNF-α含量呈显著正相关(r=0.84,P<0.01)。结论：黄芪注射液对病毒性心肌炎有明显的治疗作用,其机制可能是通过减轻病毒性心肌炎中PFP介导的细胞毒性作用和炎症反应。     

儿茶素对肾病综合征TGF-β1表达的影响研究

目的：研究儿茶素对肾病综合征大鼠TGF-β1表达的影响。方法：20只SD雌性大鼠随机分成正常组、肾病组、激素组、儿茶素治疗组共4组。实验末应用生化法测定血清中白蛋白(Alb)、总蛋白(TP)、三酰甘油(TG)、BUN、转化生长因子 β1(TGF-β1)及24 h尿蛋白排泄量,分别应用免疫组化与原位杂交法检测肾固有细胞中TGF-β1与TGF-β1mRNA的表达,并应用半定量评分法对各组大鼠病理改变进行计量分析。结果：儿茶素治疗组大鼠血清中总TGF-β1 ［(59.40±8.12) μg/L］、活性TGF-β1 ［(47.56±9.88) μg/L］,肾组织中TGF-β1 ［(45.1±2.0)%］、TGF-β1 mRNA 表达水平［(51.6±3.19)%］均明显低于肾病组［分别为(127.78±16.11) μg/L,(93.79±12.45) μg/L,(56.9±3.5)%,(60.4±4.8)%］(P<0.01);与肾病组相比,儿茶素治疗组血清Alb明显增高,TG含量明显下降［(11.28±4.18) g/L vs (1.46±0.71) g/L;(2.89±0.64) mmol/L vs (6.02±0.90) mmol/L;P<0.01］;与肾病组相比,儿茶素组大鼠肾脏病理损害明显减轻(P<0.05)。结论：儿茶素可通过抑制TGF-β1 mRNA的表达,降低肾脏局部及血清中活性TGF-β1蛋白表达水平,减轻肾脏损伤,改善肾功能,延缓肾脏病理慢性进展。     

急性中枢神经系统感染患儿脑脊液中IL-6和TNF水平的测定及临床意义

目的　探讨急性中枢神经系统感染患儿脑脊液 (CSF)中白细胞介素 - 6 (IL - 6 )和肿瘤坏死因子(TNF)水平的变化及临床意义。方法　采用ELISA法对 5 0例初诊为中枢神经系统感染患儿 ,其中化脓性脑膜炎(PM ) 1 8例 ,病毒性脑膜脑炎 (VE) 32例 ,进行了CSF中IL - 6和TNF水平测定 ,并与 1 2例对照组测定值进行比较。结果　PM组患儿CSF中IL - 6和TNF水平 (分别为 746± 499pg/ml和 5 6 5± 371 pg/ml)明显高于VE组 (分别为 1 6 5± 1 76 pg/ml和 75± 73pg/ml)和对照组 (分别 1 0± 1 7pg/ml和 2 1± 2 6pg/ml) (均 P <0 .0 0 1 ) ,VE组CSF中IL - 6和TNF水平亦明显高于对照组 (分别P <0 .0 1和P <0 .0 5 )。患儿CSF中IL - 6和TNF水平与脑脊液白细胞计数之间相关性分析 ,未见显著性意义。结论　IL - 6和TNF参与了急性中枢神经系统感染的病理生理过程 ,CSF中IL - 6和TNF的测定可能对化脓性脑膜炎和病毒性脑膜脑炎的鉴别具有一定的意义。     

内毒素诱导新生大鼠肾脏损害及地塞米松的干预作用

目的：探讨新生大鼠内毒素血症时肾脏损害的部分机制及地塞米松(Dex)的干预作用。方法：取7日 Wistar大鼠150只,随机分为A组(对照组)：等体积生理盐水腹腔注射;B组(LPS组)：内毒素(LPS)5 mg/kg腹腔注射制成内毒素血症模型;C组(治疗组)：LPS 5 mg/kg+Dex 5 mg/kg共同腹腔注射。各组于注射前(0 h)及注射后2,4,6,24 h分别断头处死留取肾脏。肾组织一氧化氮(NO)采用硝酸还原酶法测定,肾组织一氧化氮合酶(NOS)采用底物催化法测定,通过电镜观察肾脏超微结构变化。结果：①B组NO于2 h高于A组同时间点NO浓度(1.69±0.44 nmol/mg vs 1.20±0.36 nmol/mg),差异有显著性(P<0.05)。于24 h为同时间点A组的 2.3倍(3.12±0.41 nmol/mg vs 1.35±0.38 nmol/mg),差异有显著性(P<0.01);C组NO也于2 h明显高于A组同时间点NO浓度(1.63±0.27 nmol/mg vs 1.20±0.36 nmol/mg),(P<0.05),但于24 h升高程度低于B组(2.10±0.27 nmol/mg vs 3.12±0.41 nmol/mg) (P<0.05);②B组肾NOS于2 h明显高于A组同时间点NOS浓度(0.47±0.15 U/ml vs 0.38±0.12 U/ml) (P<0.05),于4 h短暂下降后于24 h明显高于同时间点A组NOS浓度(0.65±0.27 U/ml vs 0.38±0.15 U/ml) (P<0.05);C组NOS浓度自6 h逐渐升高,至24 h均明显低于B组 0.51±0.07 U/ml vs 0.65±0.27 U/ml) (P<0.05);③电镜下A组肾小球基底膜(GBM)完整,上皮细胞足突清晰,肾小管上皮细胞完整,可见刷状缘。B组6 h肾小球GBM完整,部分上皮细胞足突融合,肾小管上皮细胞线粒体空泡变性;24 h肾小球GBM断裂,上皮细胞足突明显融合,系膜细胞线粒体嵴断裂,空泡变性。肾小管上皮细胞线粒体扩张成大泡。C组24 h肾小球GBM基本正常,上皮细胞足突部分轻度融合,系膜细胞内少数线粒体空泡变性,肾小管可见刷状缘。 结论：新生鼠内毒素血症时肾脏NOS产生增加,诱导合成过量的NO参与肾损伤。Dex通过调节肾脏NOS而抑制NO的大量合成,具有肾脏保护作用。     

一氧化碳释放分子3通过抑制肺泡上皮细胞凋亡减轻脂多糖诱导的新生鼠急性肺损伤

目的 探讨一氧化碳释放分子3(CORM3)对脂多糖(LPS)诱导的新生鼠急性肺损伤(ALI)肺泡上皮细胞凋亡的影响。 方法 32只新生SD大鼠均分为对照组、LPS组、CORM3组和失活CORM3（iCORM3）组;LPS组、CORM3组和iCORM3组采用LPS气管内滴注建立新生鼠ALI模型,分别腹腔注射生理盐水、CORM3和iCORM3;对照组不建立ALI模型,腹腔注射生理盐水。于建模后12 h取肺组织,苏木素 伊红染色观察肺组织病理改变,湿干(W/D)比值测定,肺泡灌洗液(BALF)细胞计数及蛋白含量测定。体外培养A549细胞,LPS诱导细胞凋亡。MTT检测细胞活性,Tunel染色观察组织、细胞凋亡变化。 结果 ①与对照组相比,LPS组肺组织形态结构明显紊乱,肺泡压缩,肺间质大量炎性细胞浸润;CORM3组肺组织形态结构基本正常,间质炎性细胞浸润少;iCORM3组见肺组织水肿及大量炎性细胞浸润。②与对照组相比,LPS组肺组织W/D比值、BALF细胞数及蛋白含量明显升高,肺泡上皮细胞凋亡率明显增多［(37.3±4.5)% vs (3.0±1.0)%］;A549细胞活力下降,凋亡率明显升高［(29.6±4.1)% vs (3.6±1.0)%］,差异均有统计学意义 （P<0.05）。CORM3组肺组织W/D比值、BALF细胞数和蛋白含量较LPS组显著下降,肺泡上皮细胞凋亡率减少［（19.3±4.6）%］;A549细胞活力回升,凋亡率［（15.3±4.5）%］明显降低,差异均有统计学意义 （P<0.05）。LPS组与iCORM3组间上述指标差异均无统计学意义。 结论 CO通过抑制肺泡上皮细胞凋亡减轻新生鼠ALI     

胰岛素样生长因子-1减少胎羊缺血性脑白质损伤后淀粉样前体蛋白表达(英文)

目的：淀粉样前体蛋白 (β APP)是脑白质损伤早期敏感的指标 ,并参与缺氧缺血性脑损伤机制。本研究观察胎羊缺血性脑白质损伤及胰岛素样生长因子 1(IGF 1)治疗对淀粉样前体蛋白 (β APP)表达的影响。方法：胎羊于胎龄 117 12 4天 (足月为 14 7天 )时通过双侧颈动脉阻塞 30min造成双侧脑缺血损伤 ,损伤后胎羊随机分为损伤组 (n =8)和重组人IGF 1(rhIGF 1)治疗组 (n =9) ;另设正常对照组 (n =5 ) ,为假手术动物。治疗组缺血后 90min经侧脑室注射 3μgrhIGF 1;损伤组经侧脑室注射等量人工脑脊液。缺血损伤后 96h结束实验 ,处死动物 ,取出胎羊 ,固定脑组织。免疫组化法检测脑白质胶质原纤维酸性蛋白 (GFAP)、β APP阳性细胞及白质内髓鞘碱性蛋白 (MBP)密度。应用免疫荧光双标记观察APP表达阳性细胞。结果：与正常对照组 (2 7.8± 4 .8)比较 ,缺血损伤组MBP密度 (4.7± 7.1,P <0 .0 0 1)明显减少。正常对照组未见 β APP阳性细胞 ,损伤后阳性细胞数明显增加 (49.6± 2 3.7,P <0 .0 0 1) ,rhIGF 1治疗可减少 β APP阳性细胞数 (17.9± 16 .5 ,P <0 .0 1)。免疫荧光双标记显示部分细胞为 β APP GFAP双标阳性细胞。 结论：胎羊缺血性脑白质损伤可导致星形胶质细胞表达β APP ,β APP表达增加可能与脑损伤有关