HK6和B7-H4在卵巢癌诊断价值的探讨

目的:分别检测卵巢正常和卵巢良性病变和卵巢癌组织及血清中HK6、B7-H4表达水平,探讨HK6和B7-H4联合诊断卵巢癌的临床意义。方法:免疫组织化学SP法和酶联免疫吸附实验检测卵巢组织及血清中HK6和B7-H4表达水平,并结合临床病理资料分析28例卵巢癌中HK6和B7-H4在组织表达与血清浓度之间相关性。结果:HK6在卵巢癌组织中呈阳性表达,但B7-H4在黏液性癌中呈阴性表达。HK6和B7-H4在卵巢正常患者和卵巢良性病变患者血清中低表达,在卵巢癌患者血清中相对较高表达。卵巢癌患者血清中HK6和B7-H4两种蛋白的表达有明显的正相关关系(P0.01)。结论:HK6和B7-H4在卵巢癌组织及血清中均较高表达,两者联合可指导卵巢癌诊断。     

KLK11对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探究激肽释放酶相关肽11(KLK11)对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法:qRT-PCR及Western blot技术检测卵巢癌细胞中KLK11基因的表达水平。Western blot评估siRNA特异性抑制KLK11在A2780和HO8910细胞株中表达的抑制效率。CCK-8、划痕实验及Transwell实验检测KLK11对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。Western blot检测卵巢癌细胞中上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、锌指转录因子(Snail)的表达水平。结果:与人正常卵巢上皮细胞相比,KLK11在卵巢癌细胞株中表达上调(P<0.01);与Control组相比,si-KLK11组卵巢癌细胞中KLK11蛋白表达降低(P<0.01),卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力被抑制(P<0.01);同时,si-KLK11组A2780和HO8910细胞中Vimentin、Snail蛋白表达水平均下调(P<0.01),而E-cadherin蛋白表达水平上调(P<0.01)。结...     

卵巢癌患者血清TGF-α、TGF-β_1和CA125的检测及意义

目的探讨卵巢癌患者血清中TGF-α、TGF-β1和CA125与卵巢癌患者预后的相互关系。方法采用放射免疫测定法和酶联免疫吸附法检测57例卵巢癌患者(恶性组)术前术后血清中TGF-α、TGF-β1和CA125水平,设52例卵巢良性肿瘤患者(良性组)及55名正常妇女(正常组)为对照组。结果恶性组术前TGF-α、TGF-β1、CA125水平比良性组及正常组明显增高(P均<0.01);术后TGF-α、CA125水平明显降低,TGF-β1水平明显升高(P均<0.01)。结论检测卵巢癌患者血清中TGF-α、TGF-β1和CA125水平对判断患者预后有重要价值。     

卵巢上皮性癌中新基因NM23-H1B的表达

目的 研究人类新基因NM23-H1B与卵巢癌的关系。方法 收集2003年4月～2004年2月经病理证实的卵巢癌手术切除标本20例及卵巢交界性肿瘤4例(卵巢瘤组)，正常卵巢组织4例(对照组)。采用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)、Northern杂交测定NM23-H1BmRNA的表达。结果 采用RT—PCR在所有的标本中均检测到NM23-H1B基因mRNA的表达，其在正常卵巢组织中表达较低，而所有的卵巢肿瘤中其表达均出现明显上调，早期卵巢癌中的表达高于晚期。Northern杂交显示，NM23-H1B基因在正常卵巢组织的表达量较低，交界性肿瘤中的表达则与正常组织中相似，而在卵巢癌组织中表达明显增高，早期卵巢癌中的mRNA表达量高于晚期卵巢癌，早期卵巢癌中似乎在分化好(Ⅰ级)的表达量明显高于分化较差(Ⅱ、Ⅲ级)者。结论 NM23-H1B基因与卵巢癌有明显的相关性。     

miR-300在浆液性卵巢癌患者血清中的表达及其临床意义

目的:探讨miR-300在浆液性卵巢癌患者血清中的表达及其临床意义。方法:收集卵巢癌患者、良性卵巢肿瘤患者及健康妇女各57例的血清标本,提取血清总RNA,通过实时定量PCR检测血清miR-300的表达水平,并绘制ROC曲线;采用χ2检验miR-300的表达水平与卵巢癌患者临床病理特征的关系,Kaplan-Meier法分析患者5年总体生存率之间的关系。结果:卵巢癌患者血清中miR-300的表达水平显著高于良性卵巢肿瘤患者及健康对照患者,miR-300ROC曲线下面积0.812(95%CI:0.761-0.911),灵敏度为84.6%,特异度为85.3%。血清miR-300的表达水平与浆液性卵巢癌患者的临床分期密切相关(P=0.0018),而与年龄(P=0.792)及淋巴结分期(P=0.793)无显著相关性。血清miR-300高表达的卵巢癌患者5年总体生存率要显著低于血清miR-300低表达患者。结论:浆液性卵巢癌患者血清中miR-300表达水平增高,为浆液性卵巢癌的临床诊断及预后判断提供了重要参考。     

CK19和CEA mRNA表达与乳腺癌外周血微转移的相关性研究

目的 检测乳腺癌患者外周血中细胞角蛋白19(CK19)和癌胚抗原(CEA)mRNA的表达,探讨其表达是否可作为判断外周血微转移及预后的分子生物学指标.方法 采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测45例术前乳腺癌患者及30例乳腺良性病变患者外周血中CK19和CEA mRNA的表达情况.结果 CK19和CEA mRNA在乳腺癌患者血清中阳性率分别为62.2%和53.3%,在30例乳腺良性患者血清中CK19 mRNA阳性率为3.3%,无CEA mRNA表达.乳腺癌患者和良性肿瘤患者血清中CK19、CEA mRNA表达阳性率比较差异有统计学意义(P＜0.01).CK19和CEA mRNA阳性率与临床分期、淋巴结转移均有关,二者表达呈正相关(P＜0.01).结论 乳腺癌患者外周血中CK19和CEA mRNA表达与临床分期密切相关,提示两项指标有望预测乳腺癌外周血微转移和判断预后.     

应用寡核苷酸芯片筛选宫颈癌患者外周血生物标志物的研究

目的 应用人类全基因组寡核苷酸芯片技术在宫颈癌患者外周血中确定生物分子标志物.方法 从24例早期宫颈癌患者和18例正常对照者的外周血淋巴细胞中提取总RNA.应用微阵列技术,采用人类全基因组寡核苷酸芯片检测4例宫颈癌患者和3例正常对照者的差异表达基因,再对20例宫颈癌患者和15例正常对照者将初步筛选出的5个候选基因用实时定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)的方法进行验证.结果 筛选得到57个差异表达基因,其中38个基因表达上调,19个基因表达下调;对初步筛选出的5个候选基因经实时定量逆转录多聚酶链反应的方法进行验证后发现黏合素-C、核仁素和磷酸丙酮酸水合酶2(enolase 2,ENO2)基因在宫颈癌患者中较之在正常对照者中有显著的上调表达.结论 黏合素-C、核仁素和ENO2基因在宫颈癌患者外周血中的上调表达可能为确定宫颈癌外周血的生物标志物提供有益的依据.     

梅毒血清固定患者Th17免疫调节网络中基因的差异表达

目的检测梅毒血清固定患者Th17细胞免疫调节网络相关84种基因的表达水平,初步揭示Th17细胞在梅毒血清固定中的作用机理。方法收集2015年9—11月深圳市慢性病防治中心的8例梅毒血清固定患者(固定组)及8例健康人(健康对照组)的外周血,提取总RNA,逆转录合成c DNA,应用实时定量聚合酶链反应Array法(PCR-Array)检测Th17细胞免疫调节网络相关84种基因m RNA的表达水平,以表达差异(上调或下调)大于2倍的基因作为有意义的差异表达基因。结果固定组与健康对照组相比表达上调的基因为Foxp3和IL-10;表达下调基因13种,分别为:CCL22、CSF2、CSF3、CXCL6、IL-17A、IL-17D、IL-21、IL-23R、IL-9、IRF4、RORA、RORC、STAT3。结论 Th17细胞免疫调节网络中基因的异常表达可能与梅毒血清固定相关。     

B超联合骨桥蛋白和CA125检测在卵巢癌早期诊断中的价值

目的观察B超检查、血清骨桥蛋白(OPN)和癌抗原125(CA125)联合检测对卵巢癌早期诊断的价值。方法采用电化学发光方法和ELISA法检测30例卵巢癌和40例卵巢良性肿瘤患者血清中CA125、OPN水平,患者术前均经B超检查了解盆腔情况。结果卵巢癌患者血清中CA125、OPN含量显著高于良性对照组(P<0.01),本实验OPN、CA125、B超检测的敏感性分别为80.0%,76.7%,73.3%,OPN+CA125+B超联合检测的敏感性为96.7%,OPN+CA125+B超联合检测较CA125、OPN及B超单独检测敏感性高(P<0.05)。结论 B超联合CA125和OPN检测可提高卵巢癌诊断的敏感性,在卵巢癌早期诊断中具有重要的临床价值,弥补肿瘤标志物单独检测的不足。     

抑癌基因RASSF1A在胃癌中的表达及意义

目的研究胃癌组织中抑癌基因RASSF1A的表达并探讨其临床意义。方法应用免疫组化法分别检测39例胃癌组织标本和18例正常对照胃组织标本RASSF1A蛋白表达;RT-PCR法检测4株胃癌细胞株、正常胃黏膜细胞株GES-1以及阳性对照Hela细胞中RASSF1A mRNA的表达;结合病理学特征进行分析。结果胃癌组织RASSF1A表达阳性细胞明显少于正常对照胃组织(P<0.01);不同分化程度、临床分期及浸润深度的胃癌组织,其RASSF1A表达存在显著性差异(P<0.05)。4株胃癌细胞株中仅MKN45细胞有RASSF1A mRNA表达;而正常胃黏膜细胞株GES-1和阳性对照Hela细胞均表达RASSF1A mRNA。结论胃癌组织中RASSF1A基因表达明显减少,其可作为评估胃癌恶性程度和预后的一项有意义的指标。     

明胶酶B在人卵巢上皮性肿瘤组织及血清中表达的研究

目的 观察明胶酶B在卵巢癌组织及血清中的表达情况，并探讨其意义。方法 采用链菌素亲生物素一过氧化物酶(S-P)免疫组化方法，检测32例卵巢癌、21例卵巢交界性肿瘤和10例卵巢良性肿瘤组织中明胶酶B的表达；采用ELISA法定量检测22例卵巢癌患者及10例正常妇女血清明胶酶B。结果 明胶酶B在肿瘤细胞中可见不同程度的表达。其在卵巢癌中的表达率明显高于交界性和良性肿瘤组织，差异有显著性；明胶酶B在卵巢癌细胞中的表达与FIGO分期、患者发病年龄、组织分级和病理类型均无明显相关性；卵巢癌患者血清明胶酶B的含量显著高于对照组，与组织中明胶酶B的表达正相关。结论 明胶酶B可能与卵巢癌的发生、发展有关。     

IGFBP-2、-3在卵巢上皮性癌患者血液和卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义

目的 探讨胰岛素样生长因子(IGF)结合蛋白2,3 (IGFBP-2,-3)在卵巢上皮性癌(简称卵巢癌)患者血液和卵巢肿瘤组织中的表达,及其与卵巢癌临床病理学特征的关系.方法 采用Western ligand blot和Western blot检测卵巢肿瘤患者及正常对照者(卵巢良性肿瘤10例,交界性肿瘤6例,卵巢癌10例,正常对照者10例)血清中IGFBP-2、IGFBP-3及IGF-Ⅱ含量;免疫组织化学染色检测正常卵巢组织(4例)和卵巢肿瘤组织中(卵巢良性肿瘤8例,卵巢交界性肿瘤8例,卵巢癌23例,包括中度和高度分化者15例,低度分化者8例)IGFBP-2,-3的表达.结果 卵巢癌患者血清大片段以及成熟IGF-Ⅱ均明显降低, IGFBP-2水平明显升高,而IGFBP-3含量明显降低甚至消失,与相应正常对照组、良性或交界性组相比差异均有统计学意义(P＜0.001或P＜0.01).免疫组织化学染色结果 显示卵巢癌IGFBP-2的表达明显升高 (P＜0.0001或 P＜0.005),且随着卵巢癌组织分化程度的降低,IGFBP-2的表达呈增强趋势;而IGFBP-3的表达随着卵巢癌细胞分化程度的降低,明显降低或呈阴性表达(P＜0.05).结论 卵巢癌患者血循环中IGFBP-3降解以及IGFBP-2明显升高的状况有可能导致IGF-Ⅱ生物学功能改变,并与卵巢癌的临床病理学特征有明显的相关性.     

超声联合HE4诊断早期上皮性卵巢癌的 临床价值

目的 探讨彩色多普勒超声联合新型肿瘤标志物HE4诊断早期卵巢癌的临床价值.方法 用酶联免疫吸附法(ELISA)测定36例卵巢癌患者(A组)及106例卵巢良性病变患者(B组)血清HE4水平,观察两组超声检测与术后病理结果.结果 1)A组血清HE4值显著升高,而RI值明显低于B组(P＜0.05).2)两种方法联合检测,敏感性为94.4％,特异性为95.3％,均高于单项检测.结论 超声与血清HE4联合检测可提高早期卵巢癌的诊断水平.     

BRCA1蛋白在原发性上皮性卵巢癌中的表达

目的探讨卵巢癌乳腺癌易感基因1(BRCA1)蛋白在原发性上皮性卵巢癌中的表达。方法取本院妇产病理研究室1996年1月~2003年8月的原发性上皮性卵巢癌存档蜡块,共81例。用鼠抗人BRCA1蛋白C端单克隆抗体检测原发性上皮性卵巢癌BRCA1蛋白的表达,以同侧或对侧卵巢的正常生发上皮、同期12例良性上皮性卵巢肿瘤标本的BRCA1蛋白的表达作为对照。结果81例原发性上皮性卵巢癌中,仅44例(54.3%)BRCA1蛋白在细胞核中正常表达,34例(42.0%)在细胞浆中错位表达,3例(3.7%)表达完全缺失。13例原发性上皮性卵巢癌患者找到正常卵巢生发上皮,有2例BRCA1蛋白表达异常,异常表达率为15.4%。BRCA1蛋白在12例良性上皮性卵巢肿瘤的上皮细胞中未见异常表达。结论原发性上皮性卵巢癌中BRCA1蛋白异常表达率高,表达异常包括细胞核中表达下降甚至缺失,以及细胞浆中错位表达,这可能与卵巢癌的发生发展密切相关。     

BRCA1蛋白在原发性上皮性卵巢癌中的表达

目的 探讨卵巢癌乳腺癌易感基因1(BRCA1)蛋白在原发性上皮性卵巢癌中的表达.方法 取本院妇产病理研究室1996年1月～ 2003年8月的原发性上皮性卵巢癌存档蜡块,共81例.用鼠抗人BRCA1蛋白C端单克隆抗体检测原发性上皮性卵巢癌BRCA1蛋白的表达,以同侧或对侧卵巢的正常生发上皮、同期12例良性上皮性卵巢肿瘤标本的BRCA1蛋白的表达作为对照.结果 81例原发性上皮性卵巢癌中,仅44例(54.3%)BRCA1蛋白在细胞核中正常表达,34例(42.0%)在细胞浆中错位表达,3例(3.7%)表达完全缺失.13例原发性上皮性卵巢癌患者找到正常卵巢生发上皮,有2例BRCA1蛋白表达异常,异常表达率为15.4%.BRCA1蛋白在12例良性上皮性卵巢肿瘤的上皮细胞中未见异常表达.结论 原发性上皮性卵巢癌中BRCA1蛋白异常表达率高,表达异常包括细胞核中表达下降甚至缺失,以及细胞浆中错位表达,这可能与卵巢癌的发生发展密切相关.     

乳腺癌患者血清中乳腺癌易感基因1和细胞角蛋白19的含量及意义

目的探讨健康女性、乳腺腺病及乳腺浸润性导管癌患者手术前后血清中乳腺癌易感基因1(BRCA1)、细胞角蛋白19(CK19)表达变化及临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测20例健康女性、20例乳腺腺病患者、60例乳腺癌患者手术前后血清中BRCA1、CK19的表达情况。分析两者与乳腺癌发生发展的关系。结果乳腺癌组血清BRCA1、CK19表达均明显高于乳腺腺病和健康女性组(P<0.05)。在乳腺腺病患者和健康女性血清中BRCA1、CK19表达差异均无统计学意义(P>0.05)。BRCA1在乳腺癌术前与术后血清中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。CK19在乳腺癌患者术前组血清中的表达高于术后组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论联合检测乳腺肿瘤患者血清中的BRCA1及CK19对乳腺癌的诊断及治疗效果的判断具有重要的临床意义。     

上皮性卵巢癌组织中ATG5、Beclin1与P53的表达及相关性研究

目的检测自噬相关基因ATG5、Beclin1与凋亡相关基因P53在上皮性卵巢癌、良性卵巢肿瘤及正常卵巢组织的表达情况,探讨其与卵巢癌发生、发展的相关性及意义。方法应用免疫组化SP法和RT-PCR技术检测25例正常卵巢、25例良性卵巢肿瘤及34例上皮性卵巢癌组织中ATG5、Beclin1、P53蛋白及mRNA的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果 1ATG5、Beclin1的表达主要在细胞质内,P53主要表达在胞核内。ATG5、Beclin1在正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤组织及卵巢癌组织中的表达阳性率两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。P53在卵巢癌组织中的表达阳性率与良性卵巢组织、正常卵巢组织相比,差异有统计学意义(P<0.01),而良性卵巢组织与正常卵巢组织表达阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。不同临床分期、病理分期的卵巢癌组织中ATG5、Beclin1及P53的表达比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,上皮性卵巢癌组织中ATG5与Beclin1蛋白表达呈正相关,ATG5与P53、Beclin1与P53蛋白表达均呈负相关(P<0.05)。2经RT-PCR检测,上皮性卵巢癌组织中ATG5、Beclin1的表达低于良性卵巢肿瘤组织及正常卵巢组织,良性卵巢组织低于正常卵巢组织,差异均具有统计学意义(P<0.05)。上皮性卵巢癌组织中P53的表达高于良性卵巢组织及正常组织(P<0.05),但良性卵巢组织与正常卵巢组织相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论上皮性卵巢癌的发病、进展可能与自噬相关基因Beclin1和ATG5自噬活性的抑制有关;自噬相关基因ATG5、Beclin1与凋亡相关基因P53在上皮性卵巢癌的发生发展中起拮抗作用,对其联合检测有利于了解和判断上皮性卵巢癌的进展程度、预后情况及指导治疗。     

RASSF 1A基因在卵巢癌组织及腹腔冲洗液中甲基化的研究

目的:探讨卵巢癌组织和腹腔冲洗液中Ras相关区域家族1A (Ras association domain family 1A,RASSF 1A)基因启动子异常甲基化状况及其在卵巢癌诊断中的价值。方法:采用甲基化特异性PCR方法检测42例卵巢癌组织、腹腔冲洗液或腹腔积液、11例正常卵巢组织和19例良性病变卵巢组织中RASSF 1A基因启动子区甲基化状态。结果:42例卵巢癌组织中RASSF 1A基因启动子区甲基化发生率为38.1%,11例正常卵巢组织和19例良性卵巢组织中RASSF 1A基因启动子区无甲基化,差异有统计学意义(P<0.01)。临床分期Ⅲ期和Ⅳ期的卵巢癌组织中RASSF 1A基因启动子区甲基化发生率为54.2%,高于临床Ⅰ期和Ⅱ期者16.6%(P<0.05)。淋巴结阳性者癌组织中RASSF 1A基因启动子区甲基化发生率56.5%,高于淋巴结阴性者15.8%。腹腔冲洗液或腹腔积液细胞学阳性者癌组织中RASSF 1A基因启动子区甲基化发生率为74.1%,高于腹腔冲洗液或腹腔积液细胞学阴性者33.3%(P<0.01)。结论:RASSF 1A基因甲基化在卵巢癌患者中具有较高的发生率,检测卵巢癌组织和腹腔冲洗液或腹腔积液中RASSF 1A基因的甲基化状态对卵巢癌的诊断和判断预后具有一定的价值。     

抑癌基因RASSF1A在胃癌中的表达及意义

目的 研究胃癌组织中抑癌基因RASSF1A的表达并探讨其临床意义.方法 应用免疫组化法分别检测39例胃癌组织标本和18例正常对照胃组织标本RASSF1A蛋白表达; RT-PCR法检测4株胃癌细胞株、正常胃黏膜细胞株GES-1以及阳性对照Hela细胞中RASSF1A mRNA的表达;结合病理学特征进行分析.结果 胃癌组织RASSF1A表达阳性细胞明显少于正常对照胃组织(P＜0.01);不同分化程度、临床分期及浸润深度的胃癌组织,其RASSF1A表达存在显著性差异(P＜0.05).4株胃癌细胞株中仅MKN45细胞有RASSF1A mRNA表达;而正常胃黏膜细胞株GES-1和阳性对照Hela细胞均表达RASSF1A mRNA.结论 胃癌组织中RASSF1A基因表达明显减少,其可作为评估胃癌恶性程度和预后的一项有意义的指标.