大鼠展神经核向动眼神经核的兴奋性和抑制性投射研究

目的:研究展神经核向动眼神经核内直肌亚核投射的神经递质通路.方法:利用荧光金(fluoro-gold,FG)逆行追踪结合免疫荧光组织化学双标技术观察大鼠展神经核内FG逆行标记细胞和谷氨酸(glutamate,Glu)、γ-氨基丁酸(γ-amino-butyric acid,GABA)、谷氨酸受体1型(glutamate...     

大鼠展神经核的细胞构筑及其向动眼神经核的投射

为了探讨核间性眼肌麻痹的发生机制 ,本实验应用荧光金逆行标记法研究了大鼠展神经核的细胞构筑及其与动眼神经核之间的联系。结果表明 :(1)展神经核至少含有两类神经元 ,即除展神经核运动神经元之外还含有一定数量的位于展神经核和动眼神经核之间的核间神经元 ;(2 )运动神经元多为大、中型多极神经元和梨状神经元 ,核间神经元多为小梭形神经元 ;(3 )展神经核由腹内侧亚群和背外侧亚群两个部分组成 ;背外侧亚群以核间神经元为主 ,腹内侧亚群在吻侧 1/ 3部核间神经元和展神经核运动神经元各独立成群而在尾侧 2 / 3部它们则混杂在一起     

GABA样神经元和GABA能三叉一丘脑投射神经元在三叉神经感觉核簇的分布及形态学特征

用直接抗GABA免疫组化方法和与HRP逆行追踪相结合的双标记法在光镜下观察了GABA样神经元和GABA能丘脑投射神经元在大鼠三又神经惑觉核簇的分布和形态特征。结果显示:GABA样神经元广泛存在于三叉神经感觉核簇的各亚核中,但在每一亚核和尾侧亚核的各层,其分布状况和细胞形态特征各异。在尾侧亚孩,GABA样神经元的分布密度为Ⅰ、Ⅱ层>Ⅳ、Ⅴ层>Ⅲ层;在极间亚核,GABA样细胞分为背、腹二群,以腹侧群为主;在吻侧亚核,分为背内侧群、内侧带群和腹外侧群三群;在感觉主核分为背内侧群和腹外侧群;在三叉上核分为吻内侧群和尾外侧群。同样,本文首次发现,GABA能丘脑投射神经元也广泛存在于三叉神经感觉核簇各核中,而且在各亚核及各层中其分布密度及细胞形态也不相同。在尾侧亚核,双标细胞占38.6%,主要分布在Ⅰ、Ⅱ层,具有较长附突;在极间亚核,双标细胞占40%,主要分布在腹侧群;在吻侧亚核中仅在腹侧群有少量小的双标细胞;在感觉主核,双标细胞占20-30%,主要集中在背内侧群,腹外侧群仅有少量;在三叉上核,双标细胞仅出现在尾外侧群。结果提示:GABA对三叉神经感觉核簇中的各种深浅感觉功能的传导和整合可产生广泛的抑制影响,但其影响形式、程度和机制可能各不相同。     

大鼠前庭神经核群向腰髓投射特征——BDA法逆行研究

目的　研究大鼠前庭神经核群向脊髓的投射纤维特征。方法　在 7例SD大鼠采用结合生物素的葡聚糖胺(BDA)逆行法观察大鼠前庭核群向脊髓的投射。结果　除前庭神经上核 (SVN)外的其余各前庭核均有向大鼠腰髓的投射 ,单侧注射的实验动物中 ,前庭神经内侧核 (MVN)、外侧核 (LVN)和降核 (DVN)的标记神经元可见于双侧 ,其中MVN和LVN的标记神经元以注射同侧占优势 ,而DVN标记神经元两侧数量基本一致。结论　大鼠前庭脊髓尾侧束发出纤维投向脊髓腰段     

前庭神经核纤维与投射至纹状体的束旁核神经元的突触联系

目的：观察发自前庭神经内侧核的纤维末梢与投射至纹状体的丘脑束旁核神经元的突触联系。方法：采用15只Wistar大鼠,应用顺行和逆行标记技术,免疫组织化学和免疫电镜方法。结果：将CTb单侧注入纹状体,同时将BDA注入同侧的前庭神经内侧核。在束旁核发现了CTb标记神经元和BDA标记轴突终末,BDA标记纤维和终末存在于外侧束旁核整个长度的背侧2／3区,而CTb标记神经元也存在于外侧束旁核背侧2／3区,2种标记相互重叠。电镜下可见标记终末与标记神经元形成非对称性的轴-体和轴-树突触。结论：由前庭神经内侧核发出的投射纤维在束旁核与投射至纹状体的束旁核神经元之间存在着非对称性的突触联系。     

大鼠前庭核向迷走神经背侧复合体的间接投射

目的：研究大鼠前庭核向迷走神经背侧复合体的间接投射,探索前庭信息向脑干呕吐区传递的神经通路。方法：向前庭神经下核和前庭神经内侧核注入顺行追踪剂菜豆凝集素（PHA-L）,向迷走神经背侧复合体注入逆行追踪剂荧光金（FG）,用免疫荧光组织化学方法显示PHA-L顺行标记纤维和终末,在荧光显微镜下观察顺行标记PHA-L的纤维和终末与FG逆行标记的细胞重叠区域。结果：在延髓外侧巨细胞旁核和腹外侧区有顺行纤维和终末与逆行标记细胞的重叠。结论：前庭核团可能经外侧巨细胞旁核和腹外侧区向迷走神经背侧复合体有间接投射,为进一步揭示前庭核团与呕吐相关的内脏反应区之间的功能关系提供了形态学基础。     

GABA与NOS在大鼠杏仁皮质核神经元内的共存

本文采用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPHd)组织化学和γ氨基丁酸(GABA)免疫组化双重染色相结合的方法,观察杏仁皮质核(Co)神经元内GABA与NADPHd的共存。结果显示GABA样阳性神经元多散在分布于杏仁皮质后内侧核(PMCo)和杏仁皮质后外侧核(PLCo),以小型为主,中型较少;NADPHd阳性神经元多散在分布于PMCo、PLCo、杏仁皮质前核(ACo),以中、小型神经元为主;双标神经元(GABA/NADPHd均阳性)多散在分布于PLCo,以中、小型神经元为主。大鼠Co内有GABA与NADPHd共存的神经元,提示一氧化氮(NO)对Co内的GABA能神经元可能有调控作用。     

大鼠颈髓中央核向前庭神经外侧核的定位纤维投射

目的　探讨大鼠颈髓中央核向前庭神经外侧核的定位投射。方法　本实验通过向脊髓内单侧注射菜豆—白细胞凝集素 ,在不同节段上对由脊髓向前庭神经核的纤维投射做顺行示踪。结果　在颈髓颈 2和颈 3节段包括颈髓中央核单侧注射示踪剂后 ,应用免疫组织化学法在对侧前庭神经下核以及前庭神经内侧核的大型细胞、小型细胞部和尾部内可见大量标记终末。在对侧前庭神经外侧核由头部至尾部整个范围内 ,标记物数量最多 ;在颈膨大处单侧注射示踪剂后 ,在对侧前庭神经内侧核的大型细胞部见很多标记轴突和终末 ,但在前庭神经外侧核和前庭神经下核内 ,仅见少量标记轴突和终末。在颈膨大以下脊髓节段注射示踪剂后 ,在前庭神经内侧核的大型细胞部、前庭神经下核及前庭神经外侧核的尾部标记纤维和终末仅零星存在。结论　颈部初级传入纤维经过颈中央核中继后 ,可直接投射到对侧前庭神经外侧核 ,同时 ,研究结果亦提示颈髓中央核可能是颈部传入冲动的中继和整合之处     

大鼠前庭神经核复合体内5-羟色胺1A受体的分布

为了研究5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)亚型在大鼠前庭神经核复合体(VNC)内的分布情况,本文采用免疫组织化学方法,在光学显微镜下对5-HT1AR亚型免疫阳性结构进行了观察。结果显示:5-HT1AR免疫阳性产物在VNC各个核团全长均有分布,主要定位于VNC神经元的胞体和近侧端树突,呈弥散分布,但在胞浆中也观察到许多染色深浅不同、分布不均匀的点状阳性结构。其中5-HT1AR样阳性神经元在前庭内侧核的全长呈密集分布,在前庭下核的尾段呈中等密度分布,在前庭上核、前庭外侧核和X核的全长、前庭下核的吻段和中段以及Y核的中、尾段均呈低密度分布,Y核的吻侧呈稀疏分布。本文结果提示,5-HT1AR阳性结构广泛地分布于大鼠VNC内,它们可能在介导5-HT对神经元活动的调节,参与前庭信息的整合与加工方面发挥重要作用。     

大鼠前庭神经核复合体内5-HT能终末与表达5-HT1A受体的前庭-臂旁核投射神经元之间的联系

目的 观察大鼠前庭神经核复合体(VNC)内5-羟色胺(5-HT)样阳性终末与表达5-HT1A受体(5-HT1A R)的前庭-臂旁核投射神经元之间的联系.方法 运用逆行束路追踪和免疫荧光组织化学染色相结合的双重标记技术,在激光共焦显微镜下观察.结果 将四甲基罗达明(TMR)注入臂旁核后,在双侧VNC的各个核团内均可观察到许多TMR逆标神经元,但以同侧为主.免疫荧光组织化学染色结果显示,在前庭内侧核(MVe)、前庭下核(SpVe)、前庭上核(SuVe)、前庭外侧核(LVe)、X核以及Y核的一些区域内,许多神经元表达5-HT1A R样免疫阳性,并可观察到大量5-HT样阳性纤维和终末.激光共焦显微镜下可进一步观察到一些TMR逆标神经元同时呈5-HT1A R样免疫阳性,且有部分5-HT样阳性终末与TMR/5-HT1A R双标神经元的胞体或树突形成密切接触.结论 提示5-HT可能通过5-HT1A R对前庭神经核复合体-臂旁核间的信息传递发挥调控作用.     

大鼠脊髓神经肽Y、神经降压肽免疫反应神经元向结合臂旁核的投射

用HRP逆行束路追踪法结合免疫细胞化学双标记技术,研究了大鼠颈、胸、腰、骶各段脊髓神经肽Y(NPY)、神经降压肽(NT)免疫反应神经元向结合臂旁核的投射。HRP逆行标记细胞分布于两侧脊髓灰质第Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ层、中央管背侧灰质连合及外侧颈核、外侧脊髓核中,以对侧为主。NPY免疫反应阳性神经元分布于两侧后角第Ⅰ层、第Ⅱ层浅部、外侧颈核、外侧脊髓核及骶髓后连合核中。NT免疫阳性神经元分布于两侧后角第Ⅰ层及第Ⅱ层中。在后角第Ⅰ层、外侧颈核和外侧脊髓核中,可观察到部分NPY-HRP双标记神经元;在后角第Ⅰ层可观察到部分NT-HRP双标记神经元。本研究结果提示,NPY和NT神经元可能参与脊髓-结合臂旁核的痛觉传递。     

大鼠前庭核向脑干呕吐区的间接投射

前庭信息调节内脏活动的神经通路是产生运动病的结构基础,但至今尚未明了。本研究旨在探讨接受初级前庭传入信息的前庭核到脑干呕吐中枢的神经通路。向大鼠前庭内侧核和前庭下核内注入顺行追踪剂生物素化葡聚糖胺(BDA),向脑干呕吐区注入逆行追踪剂荧光金(FG),用荧光组织化学方法显示BDA顺行标记纤维和终末,在荧光显微镜下观察BDA顺行标记纤维和终末与荧光金逆行标记细胞的重叠区域。结果发现在延髓背侧巨细胞旁核(DPGi)、巨细胞网状核(Gi)和小细胞网状核(PCRt)有顺行标记纤维与逆行标记细胞的重叠。表明前庭核可能经DPGi、Gi和PCRt向呕吐区有间接投射,此结果为进一步揭示前庭信号引发恶心、呕吐的神经机制提供了形态学依据。     

大鼠终纹床核向结合臂旁核的投射 Ⅱ.HRP、FG逆行追踪研究

用HRP、荧光金逆行束路追踪技术对大鼠终纹床核向结合臂旁核的投射进行了研究。结果显示,投射至结合臂旁核的终纹床核神经元几乎全部位于终纹床核前部,后部罕见。在终纹床核前部中投射神经元位于前背区、前外侧区及前腹侧区,其中以前外侧区中的细胞数目最多。标记细胞主要出现于BST的卵圆核及其腹侧邻近区、菱形核、大细胞核和纹旁核等处。     

大鼠终纹床核向结合臂旁核的投射 Ⅲ.神经降压肽、促肾上腺皮质激素释放因子肽能通路研究

用荧光金逆行束路追踪结合免疫荧光双标记技术及HRP逆行束路追踪结合免疫细胞化学双标记技术证明,在大鼠终纹床核投射至结合臂旁核的神经元中,位于前外侧区卵圆核及其腹侧邻近区中的部分为神经降压肽及促肾上腺皮质激素释放因子免疫反应阳性,双标记细胞分别约占这个部位逆行标记细胞总数的40％及20％;在前腹侧区的梭形核及大细胞核中,部分为促肾上腺皮质激素释放因子免疫反应阳性。     

大鼠展神经核运动神经元和核间神经元的分布及形态

目和的方法,应用ＨＲＰ逆行标记法和图像分析法,对大鼠展神经核运动神经元和核间神经元的分布,数量及形态,大小进行了观察。结果;大鼠的展神经核间神经元主要集中在展神经核的吻侧２／３,和腹外侧区,运动神经核则位于展神经核的背内侧区,仅在展神经核的中央,两种神经元有少量的混合。运动神经元和核间神经元的比例为２：１。大多数核间神经元呈小梭形,少数和运动神经元相似为较大的圆形或锥形。结论;大鼠展神经核运动 神     

大鼠红核酪氨酸羟化酶、生长抑素和亮啡吠能神经元至延髓外侧网状核的研究

用HRP逆行追踪和免疫细胞化学ABC法相结合研究了红核内酪氨酸羟化酶、生长抑素和亮啡呔免疫活性神经元至延髓外侧网状核的投射.结果表明,红核内HRP标记细胞为对侧性,主要分布于其尾侧2/3,同时,还可见酪氨酸羟化酶、生长抑素、亮啡呔单标细胞及HRP/酪氨酸羟化酶、HRP/生长抑素、HRP/亮啡呔双标细胞,其中HRP/酪氨酸羟化酶双标细胞约占HRP单标细胞25.2%,HRP/生长抑素双标细胞约占21.3%,HRP/亮啡呔双标细胞约占15.4%.红核参与镇痛和心血管活动的调节可能与上述神经递质有关.     

大鼠终纹床核向结合臂旁核的投射 Ⅰ.HRP、PHA-L顺行追踪研究

应用HRP、PHA-L顺行标记技术对大鼠终纹床核向结合臂旁核的投射进行了研究。在尾侧结合臂旁核,投射终支分布于臂旁外侧核的腹外侧亚核及臂旁内侧核,在腹外侧亚核与臂旁内侧核之间的结合臂中也可见标记纤维;在中吻部结合臂旁核标记终支分布于臂旁外侧核的外外侧亚核、背外侧亚核、中央外侧亚核、腹外侧亚核及内外侧亚核;在结合臂背内侧端背侧可见许多标记终支分布;在臂旁内侧核亦见标记终支。     

大鼠丘脑前核内海马下托复合体谷氨酸能传入终末与皮质投射神经元的突触联系

目的 探讨大鼠丘脑前核-海马下托复合体神经元环路的突触结构及谷氨酸分布特征.方法 应用HRP束路追踪结合包埋后胶体金免疫电镜技术.结果 在丘脑前核内,可见HRP顺行标记的海马下托复合体传入轴突终末,终末多为卵圆形,内含圆形透亮突触小泡和数个线粒体.其做为突触前成分与HRP标记的树突或非HRP标记的树突形成非对称性突触.在谷氨酸胶体金免疫反应切片上,胶体金颗粒标记胞体、树突、轴突终末等.HRP标记的轴突终末和一些非HRP标记的与突触后成分形成非对称性突触的轴突终末(Gray Ⅰ型)内,胶体金颗粒密度明显大于背景(胞体、树突、Gray Ⅱ型轴突终末等)的胶体金颗粒密度.其平均胶体金颗粒密度为突触后树突的3倍多,为对称性轴突终末(Gray Ⅱ型)的6倍多.在两张邻近的连续切片,γ-氨基丁酸(GABA)胶体金免疫反应切片上,GABA胶体金颗粒浓重标记Gray Ⅱ型轴突终末,背景标记极少;而非对称性轴突终末(Gray Ⅰ型)胶体金颗粒标记极弱.谷氨酸胶体金免疫反应切片上,Gray Ⅱ型轴突终末胶体金颗粒标记极弱.GABA阳性轴突终末与HRP标记的树突形成对称性突触,在同一树突上可见GABA能轴突终末形成的对称性突触和其他轴突终末形成的非对称性突触.结论 丘脑前核内来自海马下托复合体投射神经元的轴突终末是谷氨酸能的;来自海马下托复合体皮质投射神经元轴突终末,在丘脑前核与投射至海马下托皮质的神经元树突形成非对称性轴-树突触.     

大鼠脑干内向杏仁中央核投射的神经元对胃肠道伤害性刺激的FOS表达

本文应用ＨＲＰ逆行追踪与ＦＯＳ免疫组化结合的方法，观察了脑干内向杏仁中央核投射的神经元对胃肠道伤害性刺激的ＦＯＳ表达。结果在脑干内见到ＦＯＳ样免疫反应阳性、ＨＲＰ标记和ＦＯＳ／ＨＲＰ双重反应阳性的细胞，它们分布在延髓的孤束核、腹外侧区以及两者之间的网状结构、脑桥臂旁核、中脑导水管周围灰质腹外侧区、中缝背核和被盖背侧核等区域．ＦＯＳ／ＨＲＰ双重反应阳性细胞占ＨＲＰ标记细胞总数的３２．７％．脑干内检出ＦＯＳ／ＨＲＰ双重反应阳性细胞１４８４个，其中延髓占１９．４％，脑桥占７９．５％，中脑仅占１．１％。以上结果提示大鼠脑干内向杏仁中央核投射的神经元中约有１／３参与胃肠道伤害性刺激信息向Ｃｅ的传导，其中绝大多数是通过臂务核中继后投向杏仁中央核的。