瑞香狼毒化学及药理研究进展

瑞香狼毒为传统中药,主要含有二萜类、香豆素类、木脂素类及黄酮类化学成分。二萜及双黄酮具有较强的抗肿瘤及抗HIV等病毒活性。对瑞香狼毒的化学成分和药理活性进行了综述。     

瑞香狼毒的化学成分研究

瑞香狼毒Stellera chamaejasme L.又名断肠草，为瑞香科狼毒属植物，广泛分布于我国西北、华北等地。该植物的根部应用历史悠久，为中药“狼毒”的正品。始载《神农本草经》，列为下品。中医认为，其性味苦平，有大毒，有逐水祛痰、破积杀虫之功效。有报道证实其有抗肿瘤作用，以及抗菌、抗结     

瑞香狼毒对小鼠移植肿瘤生长的影响

瑞香狼毒水提物5-20g/kg(相当生药)ip 10d对小鼠移植肿瘤S-180、HePS、lewis肺癌生长抑制率分别为16.2～47.8、20.1～45.8、10.9～40.6％;醇提物2.5～10g/kg ip 10d对S-180、HePS、lewis肺癌生长抑制率分别为8.1～47.0、4.9～20.8、20.1～40.8％;并和剂量呈正相关。瑞香狼毒水提物及醇提物一次腹腔注射小鼠LD50分别为184.3和132.7g/kg。     

瑞香狼毒水提取物对人膀胱癌T24细胞Survivin表达的影响

目的研究瑞香狼毒水提取物对人膀胱癌T24细胞的抑制作用及生存素(Survivin)表达的影响。方法用不同浓度的瑞香狼毒水提取物处理T24细胞,分别用MTT法检测膀胱癌细胞抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫细胞化学检测药物作用后细胞中Survivin蛋白的表达。结果瑞香狼毒水提取物干预细胞后,①膀胱癌T24细胞增殖受到抑制,抑制效应呈剂量依赖性并随时间的延长逐渐升高;②瑞香狼毒水提取物可以促进膀胱癌T24细胞的凋亡;③膀胱癌T24细胞中的Survivin蛋白表达下降。结论瑞香狼毒水提取物可以通过下调Survivin蛋白的表达从而抑制膀胱癌T24细胞增殖,促进其凋亡,并具有浓度和时间依赖性。     

瑞香狼毒与狼毒大戟抑制小鼠移植性肿瘤生长作用的比较

中药狼毒品种较多 ,常用的有瑞香科植物瑞香狼毒(ＳｔｅｌｌｅｒａＣｈａｍａｅｊａｓｍｅＬ .)和大戟科植物狼毒大戟 (ＥｕｐｈｏｒｂｉａＦｉｓｃｈｅｒｉａｎａＳｔｅａｄ)的根[1] ,为比较两种狼毒的抗癌作用 ,观察了瑞香狼毒与狼毒大戟水提物对小鼠移植性肿瘤Ｖ14 ,Ｓ 180 ,Ｈｅｐｓ生长的抑制作用。1　材料与方法1 1　动物　昆明种小鼠 ,18～ 2 2 ｇ ,雌雄兼用 ,购自本校实验动物中心。1 2　肿瘤模型　小鼠移植性肿瘤Ｖ14 ,Ｓ 180 ,Ｈｅｐｓ由中国医学科学院药物研究所提供。1 3　药物　瑞香狼毒与狼毒大戟由济南市药材站提供 ,经鉴定 …     

瑞香狼毒总黄酮提取物对肺癌细胞增殖及细胞周期的影响

目的 研究瑞香狼毒总黄酮提取物对肺癌A549细胞的增殖抑制、细胞周期的影响.方法 采用超声波技术提取瑞香狼毒根中的总黄酮.四甲基偶氮唑盐法检测总黄酮提取物对A549细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪检测总黄酮提取物对A549细胞周期和凋亡的影响.结果 瑞香狼毒总黄酮提取物呈明显的时间-剂量依赖性抑制A549细胞的增殖,即随着时间的延长、总黄酮提取物浓度的增加,抑制作用增强;总黄酮提取物可诱导A549细胞凋亡,并将A549细胞阻滞在G1期.结论 瑞香狼毒总黄酮提取物具有抗肺癌的活性.     

瑞香狼毒水提物抗肿瘤作用

瑞香狼毒水提物（ＳｃＬ）抑制小鼠移植肿瘤Ｓ－１８０生长，５－２０ｇ／ｋｇ（相当生药）ｉｐ１０ｄ，抑制率为１６．２％～４７．８％。ＳｃＬ对体外培养的Ｓ－１８０细胞生长、集落形成和ＭＴＴ甲化合物生成有显著抑制作用，并和剂量呈正相关。０．２５～１６ｇ／Ｌ处理细胞２４ｈ，细胞生长抑制率为５．１％～８９．４％，ＭＴＴ甲化合物生成抑制率为２．４％～７６．９％；处理细胞１２ｈ，Ｓ－１８０细胞软琼脂集落形成减少１．５％～６３．１％。本文结果提示瑞香狼毒的抗肿瘤作用与其直接细胞毒作用有关。     

瑞香狼毒水提物小鼠血清对人膀胱癌T24细胞增殖的影响

目的：探讨瑞香狼毒水提物（SCLA）的抗癌作用及机制。方法：以不同剂量SCLA灌胃给药后,于不同时间采集小鼠血清,处理体外培养的人膀胱癌T24细胞,用MTS比色法,于酶标仪上测定吸光度值,观察SCLA对细胞增殖的影响。结果：SCLA小鼠血清显著降低T24细胞增殖。结论：瑞香狼毒抑制人膀胱癌T24细胞增殖,可能成为膀胱癌新的治疗药物。     

狼毒抗肿瘤作用的实验研究 1.狼毒抗肿瘤作用的筛选

狼毒是一种不常用的中药,根据民间治疗胃癌的经验,我们对大庆地区的瑞香狼毒、狼毒大戟,按抗肿瘤植物药体内筛选规程进行了制样和抗肿瘤筛选。结果证明,狼毒大戟B样提取物对多种可移植性动物肿瘤有显著的抑制作用。     

瑞香狼毒中的化学成分

目的 研究瑞香狼毒Stellera chamaejasme根中的化学成分。方法 利用各种色谱法分离化学成分，通过理化性质和波谱的分析鉴定结构。结果 从瑞香狼毒根中分离得到1个木脂素类化合物和3个双黄酮类化合物，分别鉴定为bursehernin(I)，狼毒宁B(chamaejasmeninB，Ⅱ)，异新狼毒素A(isoneochamaejasminA，Ⅲ)和( )-狼毒素[( )-chamaejasmin，Ⅳ]。结论 化合物Ⅲ和Ⅳ为新旋光异构体，化合物I为首次从狼毒属中分得。     

瑞香狼毒诱导HL—60细胞凋亡和调节SGC—7901细胞bcl—2蛋白表达

目的：探索瑞香狼素（SC）抗肿瘤机制。方法：以HL－60和SGC－7901为靶细胞,用MTT比色法测定细胞增殖抑制,荧光显微镜观察凋亡细胞的形态学改变,DNA电泳和流式细胞仪检测DNA断裂,免疫组化检测bcl-2蛋白表达。结果：含SC药物血清处理细胞48h后,HL－60细胞增殖呈剂量依赖性抑制,并表现出典型的凋亡细胞形态学改变及DNA断裂;即染色体聚集,核固缩,断裂及阶梯状DNA电泳条带,G1期前细胞从11．7％增到57．4％;而SGC－7901细胞bcl-2蛋白表达率从78．3％下降到32．9％。结论：SC可诱导肿瘤细胞凋亡,降低bcl-2蛋白表达。     

瑞香狼毒水提物小鼠药物血清对小鼠白血病L1210细胞增殖、克隆形成和DNA合成的影响

目的;从整体水平探讨瑞香狼毒水提物（SCLA）的抗癌作用及机制。方法：以不同剂量SCLAig给药后,不同时间采集小鼠血清,处理体外培养的小鼠白血病L1210细胞,观察肿瘤细胞MTT还原,克隆形成能力和DNA合成的改变。结果;SCLA3,6,12g/kg给药1,2,4,8h后的药物血清处理肿瘤细胞后,其MTT还原及克隆形成率均显著降低;给药2h时的药物血清表现出更强的抑制肿瘤细胞增殖作用。SCLA小鼠药物血清也显著抑制[^3H]TdR掺入L1210细胞DNA。结论：直接抑制癌细胞增殖及DNA合成是瑞香狼毒的重要抗癌机制。     

胡桃醌对白血病细胞增殖的抑制作用

目的: 探讨胡桃醌对白血病细胞增殖的抑制作用,阐明胡桃醌抗白血病的机制。方法: 体外培养人白血病K562、Jurkat、U937、U266及NB4细胞株,按不同处理因素分组：调零组,含有培养基、MTT和三联溶解液;空白对照组,含有各种人白血病细胞、药物溶解介质、培养液、MTT 和三联溶解液;实验组,分别采用不同浓度（终浓度为0.25、0.50、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00和16.00 mg/L）的胡桃醌作用各种细胞株。MTT比色法检测胡桃醌对白血病细胞的增殖抑制作用。流式细胞术测定不同浓度胡桃醌对K562细胞株凋亡的影响。结果: 胡桃醌对白血病K562、Jurkat、U937、U266及NB4细胞株增殖均有较强的抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)(48 h)分别为3.87、1.13、4.48、1.87和4.67 mg/L。其中胡桃醌对Jurkat和U266细胞的抑制效果最为明显（P<0.05）,胡桃醌对其他3个白血病细胞株的IC50值均<40 mg/L,且胡桃醌对这5种细胞株增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性。流式细胞术检测显示,胡桃醌可诱导K562细胞凋亡,1、2、4、8和16 mg/L胡桃醌作用6 h,K562细胞凋亡率分别为(4.54±0.6) %、(11.5 4±0.6) %、(28.7±0.3) % 、(45.0±1.2) %和(76.1±1.4) %。结论: 胡桃醌可抑制多种白血病细胞株增殖,其机制可能与促进白血病细胞凋亡相关。     

小鼠肝癌细胞(H22)源外泌体的体内抗肝癌作用研究

目的在荷瘤动物模型观察小鼠肝癌细胞（H22）来源的外泌体（exosomes）激发宿主抗肝癌免疫应答的效应。方法用自行分离纯化的小鼠肝癌细胞H22源外泌体免疫小鼠,然后给小鼠皮下注射H22肿瘤细胞,观察肿瘤的生长状况。用MTT法检测小鼠脾细胞增殖情况和细胞毒活性;用免疫组织化学法检测肿瘤组织中CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞浸润情况。结果该外泌体使肿瘤出现时间延迟,肿瘤生长缓慢,小鼠生存率提高。促进脾淋巴细胞增殖并增强其细胞毒活性,促进CD4^＋和CD^8＋T细胞活化。结论小鼠肝癌细胞（H22）源外泌体能诱导抗肿瘤应答,有效地诱导特异性的杀伤肿瘤细胞活性,有针对亲本细胞的免疫保护作用。     

人外周血白介素-22产生细胞在不同淋巴细胞亚群中的比例

目的:采用流式细胞术(flow cytom etry,FCM)检测人外周血不同淋巴细胞亚群中白介素-22(IL-22)产生细胞的比例。方法:健康人外周全血用肝素抗凝管采集后与相同体积RPM I 1640培养液混匀,加入佛波酯和离子霉素,于37℃、5% CO₂静置培养2 h,再加入莫能霉素后继续培养4 h收集细胞。用荧光素标记单抗进行细胞表面抗原和胞内细胞因子染色,用FCM检测表达IL-22、IL-17的细胞在不同淋巴细胞亚群中的比例。结果:IL-22产生细胞在CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、自然杀伤(NK)细胞和B细胞的表达比例分别为1.83%、2.12%、0.67%、1.96%和1.09%,CD4+T细胞中的比例明显高于CD8+T细胞中的比例(P<0.01)。另外,在CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞中,均检测到共表达IL-22和IL-17的细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:用FCM检测IL-22产生细胞在CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞和B细胞均有表达,在CD4+T细胞的比例明显高于CD8+T细胞。     

当归酰天芥菜定对 L1210,HepG2和HCC细胞的抑制作用

目的: 研究当归酰天芥菜定(AH)的抗肿瘤活性及机制. 方法: 通过细胞生长曲线的绘制,分析AH对L1210细胞的抑制作用;通过MTT比色法,测定AH对L1210,HepG2和HCC细胞的抑制率;通过流式细胞术(FCM)检测AH对L1210细胞周期的影响. 结果: 在AH作用下,L1210细胞生长曲线斜率和最大生长密度降低. AH 80 mg*L-1对L1210细胞的抑制率为18.18%;AH 320 mg*L-1对HepG2和HCC细胞抑制率分别为12.28%和10.24%. FCM检测表明,AH 80 mg*L-1作用24 h后,L1210细胞的G2-M期细胞明显增加(P<0.01). 结论: AH对L1210细胞有一定的抑制作用,对HepG2和HCC细胞抑制作用较差. AH对L1210细胞的抑制作用发生在细胞周期的G2-M期.