不明原因复发性流产与精子DNA完整性的相关性研究探讨

目的:分析与探讨不明原因复发性流产与精子DNA完整性的相互关系。方法:精子DNA完整性的检验选用精子染色质扩散实验(sperm chromatin dispersion,SCD),以精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)表示。将符合条件的65例男性患者作为实验组,随机选取配偶有正常妊娠史且无流产史的65例男性患者作为对照组,并分别测定两组男性精液相关参数和精子DFI。结果:实验组与对照组比较,在年龄、禁欲时间、精液量、精子活率、精子密度差异无统计学意义(P0.05)。实验组的DFI为(40.89±14.50),对照组的DFI为(22.89±6.94),差异具有统计学意义(P0.01)。结论:不明原因复发性流产与精子DNA损伤存在一定的关系。     

精子染色质结构与不明原因复发性流产的相关性研究

目的:分析精子染色质结构与不明原因复发性流产的关系。方法:选择2013年4月至2014年4月期间收治的40例不明原因复发性流产孕妇的配偶组成实验组,同时选择40例正常男性组成对照组。对两组男性的精液进行常规检查、精子染色质扩散试验(sperm chromatin dispersion,SCD)实验以及苯胺蓝染色实验,分析两组男性精液的常规数值、DNA完整性以及核蛋白组型,分析不明原因复发性流产与精子染色质结构的关系。结果:经过检测,实验组男性精液的p H、精液体积与对照组比较无差异性(P>0.05),但实验组精液的密度、活动率、活动力均显著低于对照组,畸形率显著高于对照组(P<0.05);经过分析,实验组男性的SCD大光晕与中光晕的比值显著小于对照组,小光晕、无光晕以及DFI值显著高于对照组(P<0.05);经过苯胺蓝染色实验分析,实验组男性苯胺兰染色阳性例数以及阳性比例均显著高于对照组(P<0.05)。结论:男性精子染色质DNA异常可能是不明原因复发性流产发生的原因之一,需要进一步深入的科学研究。     

高龄男性精子质量与不明原因复发性流产相关性分析

目的:探讨高龄男性精子质量与不明原因复发性流产相关性分析。方法:选取2014年1月至2016年6月于我院接受治疗的27例不明原因复发性流产夫妇(女方不明原因自然流产≥2次)高龄男性为观察组研究对象,另选取同时期于我院进行生殖健康体检的138例高龄男性为对照组研究对象,对其进行精液检测。比较两组患者的精液,并分析高龄男性精子质量与不明原因复发性流产相关性。结果:两组在精液量、精子p H值上不存在明显差异,而观察组在精子密度、精子存活率、精子活力包括a级、b级百分率上明显低于对照组(P<0.05)。精子密度、精子存活率、精子活力与不明原因复发性流产有关。结论:精子密度、精子存活率、精子活力等高龄男性精子质量因素与不明原因复发性流产有关。     

从免疫细胞的变化探讨不明原因复发性流产的病因和治疗

不明原因复发性流产作为生殖医学领域的疑难病症,其发病率一直呈现上升趋势。因其原因不明、机制不定,治疗便无从下手。目前国内外对其研究主要围绕免疫因素,而免疫细胞作为较直观的载体,有望通过检测其变化为明确不明原因复发性流产的病因和治疗提供方向。通过免疫球蛋白、间充质干细胞(MSCs)、免疫抑制剂等治疗后,不明原因复发性流产患者的高自然杀伤细胞(NK)及其被激活的细胞毒性、高辅助性T细胞(Th)1/Th2、Th17、调节性T细胞(Tregs)数量和功能的损伤或缺失、高巨噬细胞(M)1/M2、树突状细胞(DCs)功能和分化异常等情况分别得到改善。此外,食用禁忌保护特定母体人类主要组织相容性复合体(MHC)产生的调节性T细胞(Tr)和效应T细胞(Te),在新生儿刚出生后的关键时期建立有效的T细胞平衡;对母体补充醋酸盐的摄入,减少致肥饮食摄入、升高母乳miR103-3p水平,管理体重,能分别改善后代和母体上述免疫细胞的失衡。两者联合可作为免疫细胞平衡可持续发展的研究导向。     

精子DNA碎片率对女性复发性自然流产的影响

目的:探讨精子DNA碎片率与女性复发性自然流产的关系。方法:收集2013年6月至2013年12月在本中心就诊的发生过2次或2次以上自然流产的患者。将此配偶有不明原因复发性流产史的80例作为实验组;另外选择配偶无流产史的80例作为对照组。分别测定两组男方精子DAN碎片率。结果:实验组精子DNA碎片检出阳性32例,对照组精子DNA碎片检出阳性12例,有统计学差异(P0.05)。结论:复发性自然流产组精子DNA碎片率阳性检出率显著高于对照组,提示精子DNA碎片率较高可能跟早期复发性自然流产有关。     

基于GEO数据库筛选不明原因复发性流产的枢纽基因及信号通路

目的 利用生物信息学方法筛选不明原因复发性流产(URSA)相关差异表达基因(DEGs)及信号通路,以期为URSA的诊断和治疗提供新思路。方法 从GEO数据库中筛选数据集,利用R软件DESeq 2包筛选DEGs,应用DAVID数据库对DEGs进行GO和KEGG分析,通过STRING数据库构建DEGs的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,再通过Cytoscape软件筛选出URSA的最显著模块及枢纽(Hub)基因,并对其进行可视化处理。采用GSE26787数据集验证Hub基因的差异表达。结果 经筛选共得到432个DEGs,其中121个DEGs上调,311个DEGs下调。GO富集分析显示,DEGs参与细胞分裂、有丝分裂核分裂、姐妹染色单体的凝聚力和信号转导等生物过程(BP);细胞成分(CC)位于纺锤体、染色体着丝粒点、纺锤体两极、中体;分子功能(MF)与蛋白结合、微管结合、受体活性等相关;KEGG富集分析表明,DEGs富集于自然杀伤(NK)细胞介导的细胞毒性、细胞周期、p53信号通路、抗原加工和呈递、精氨酸和脯氨酸代谢通路。通过PPI网络筛选得到与URSA密切相关的5个Hub基因,分别为CC...     

IL-2、IL-2Rα及IFN-γ SNPs与原因不明复发性流产的相关性研究

目的探讨白细胞介素-2基因(IL-2)、白细胞介素-2受体α基因(IL-2Rα)及γ干扰素基因(IFN-γ)单核苷酸多态性(SNPs)与原因不明复发性流产(URSA)的相关性。方法采用病例对照研究,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,对中国浙江地区145例URSA患者(观察组)及150例健康人(对照组)IL-2(rs6822844)G/T、IL-2Rα(rs2104286)A/G及IFN-γ(rs2430561)T/A进行分析。结果①URSA组IL-2Rα(rs2104286)AA基因型及A等位基因频率均高于对照组,差异均有统计学意义(均P0.05)。且A等位基因携带者URSA患病风险是G等位基因携带者的2倍(OR=2.11,95%CI=1.34-3.33,P=0.001),AA基因型较AG+GG基因型URSA患病风险增加约1倍(OR=2.32,95%CI=1.39-3.88,P=0.001);②URSA组及对照组IL-2 (rs6822844) GG基因型频率均为100%,差异无统计学意义(P0.05);③URSA组及对照组IFN-γ(rs2430561)位点均存在SNPs分布,但两组等位基因及基因型频率差异均无统计学意义(均P0.05)。结论 IL-2Rα(rs2104286)与浙江地区URSA相关,且A等位基因是本地区URSA的遗传易感基因;IL-2 (rs6822844)和IFN-γ(rs2430561) SNPs与浙江地区URSA无关。     

不育男性精子核成熟度的临床价值评估

目的评估精子核成熟度在男性不育症中的临床应用价值。方法收集80例患不育症的育龄期男性的精液标本,与40例配偶已自然受孕的正常男性精液标本进行对比研究,分析两组对象精子浓度、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率、精子核成熟度等指标之间的差异,评估精子核成熟度在男性不育症中的临床应用价值。结果不育组与正常生育组在年龄、身高、体重、精液体积、精液PH值、精子浓度、精子总活率和前向运动精子百分率等方面差异均无统计学意义(均P0.05),但不育组的正常形态精子百分率和精子核成熟度显著低于正常生育组,差异均具有统计学意义(均P0.01)。结论不育男性的精子核成熟度比正常男性低,在男性不育症的临床诊治中有一定的参考价值,值得推广应用。     

麒麟丸联合维参锌胶囊治疗复发性流产史男性精子DNA损伤的临床观察

目的:探讨麒麟丸在男性不育患者精子DNA损伤中的保护作用。方法:选择66例合并有精子DNA完整性异常(DFI15%)的复发性流产史男性不育症患者,随机分为治疗组33例和对照组33例。治疗组口服麒麟丸联合维参锌胶囊;对照组单独服用维参锌胶囊,共3个月。于治疗前及治疗3个月末采用计算机辅助精子分析(CASA)系统与流式细胞仪分别检测精液常规参数和DFI。使用SPSS19.0统计软件对治疗前后各项精液参数及DFI进行数据分析。结果:治疗前治疗组与对照组的精子密度、精子活动率、前向运动精子百分比和DFI差异无统计学意义(P0.05)。治疗3个月后,治疗组精子活动率与对照组及治疗前相比有显著提高(P0.01);前向运动精子百分比与对照组及治疗前相比有显著提高(P0.01);精子密度比对照组及治疗前有显著提高(P0.05);DFI较对照组及治疗前显著下降(P0.05)。结论:应用麒麟丸联合维参锌胶囊治疗复发性流产史男性不育症患者,可以显著改善其精子活力与精子DNA完整性。     

外周血及蜕膜组织中CD4~+ CD25~+调节性T细胞比例和炎症因子原因不明复发性流产的关系研究

目的:探究外周血及蜕膜组织中CD4~+CD25~+调节性T细胞比例以及相关炎症因子对原因不明复发性流产的影响。方法:选取2014年5月至2015年5月就诊于我院门诊的原因不明复发性流产(URSA)患者90例为观察组,并选取同期在妇产科门诊手术室的行人工流产手术的正常患者90例为对照组;分析两组患者的一般资料、外周血及蜕膜组织中CD4~+CD25~+调节性T细胞比例、调节性T细胞特异调节因子Foxp3和EBi3的表达以及血清炎症因子(包括TNF-α、IL-2、IL-6、IL-10)水平,研究其相关性。结果:与正常妊娠组相比,反复流产组外周血及蜕膜组织中Treg细胞比例明显降低,Foxp3和EBi3因子mRNA的表达水平明显降低,且无论URSA患者或者是正常对照组,蜕膜中各因子的表达均高于外周血中的表达,外周血TNF-α、IL-2水平明显升高,而IL-6和IL-10水平要明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:蜕膜中各因子的表达均高于外周血中的表达提示妊娠过程的主要免疫反应部位是"母-胎界面",Treg细胞比例、Treg细胞因子和Th2型因子IL-6、IL-10水平可能参与妊娠的维持,调控"母-胎界面"局部免疫耐受。对于复发性流产的发病过程具有一定的影响作用。     

精子DNA单双链损伤与精子浓度的关系研究

目的:研究男性不育患者精子浓度与精子DNA单双链损伤的关系,探讨少精症的发生机制。方法:研究对象为120例男性不育患者,年龄25~40岁之间,根据世界卫生标准进行精液常规检测分析精子的浓度、活力等,利用双尾彗星试验分析精子DNA单双链损伤指数。结果:120例男性不育患者根据精子浓度分为三个研究组,即组1(精子浓度10×10~6m L~(-1))、组2(精子浓度20×10~6m L~(-1))和组3(精子浓度20×10~6m L~(-1)),每组40例。三组之间年龄、精子活力及精子畸形率没有统计学差异;组1精子DNA损伤指数(DFI)为(59.48±15.21)%,单链损伤指数(SSB-DFI)为(25.86±11.86)%,SSB占所有损伤精子的比率(SSB-DFI/DFI)为(43.31±13.72)%,双链损伤指数(DSB-DFI)为(31.93±10.21)%,DSB占所有损伤精子的比率(DSB-DFI/DFI)为(53.85±10.27)%;组2精子DNA损伤指数(DFI)为(34.02±1.77)%,单链损伤指数(SSB-DFI)为(26.71±3.45)%,SSB占所有损伤精子的比率(SSB-DFI/DFI)为(78.59±9.78)%,双链损伤指数(DSB-DFI)为(8.37±3.04)%,DSB占所有损伤精子的比率(DSB-DFI/DFI)为(21.40±9.79)%;组3精子DNA损伤指数(DFI)为(20.77±2.43)%,单链损伤指数(SSB-DFI)为(20.44±2.39)%,SSB占所有损伤精子的比率(SSB-DFI/DFI)为(98.44±2.87)%,双链损伤指数(DSB-DFI)为(1.32±0.61)%,DSB占所有损伤精子的比率(DSB-DFI/DFI)为(1.55±2.87)%。三组间SSB-DFI无显著差异(P0.05),SSB-DFI/DFI在组1、组2和组3间随精子浓度升高而逐渐升高(P0.05),DSB-DFI随精子浓度升高而逐渐下降(P0.05),DSB-DFI/DFI随精子浓度升高而逐渐下降(P0.05)。精子SSB-DFI及SSB-DFI/DFI与其他精液常规参数均无相关关系(P0.05),精子DSB-DFI及DSB-DFI/DFI与精子浓度呈负相关(P0.05)。结论:精子DSB-DFI和DSB-DFI/DFI水平越高,精子浓度就越低,精子DNA双链损伤可能是精子浓度低的真正原因。     

不育症患者性激素水平与精子DNA完整性相关性研究

目的:研究男性不育症患者性激素中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(TTE)水平与精子DNA完整性之间的相关性。方法:选取该院收治男性不育症患者75例作为研究对象,测定血清性激素中FSH,LH,TTE的含量,进行分组分析,并行精子DNA碎片率检测(DFI),分析三种性激素水平与精子DFI之间相关性。结果:对男性不育症患者血清中FSH、LH、TTE三种性激素进行Spearman相关分析可知,患者血清FSH水平与LH水平呈正相关(r=0.510,P0.001);多元线性回归分析显示,FSH、LH及TTE与DFI呈负相关(R~2=0.899,F=132.898,P0.001)。结论:血清性激素FSH、LH与TTE水平较低可能导致精子DNA损伤程度增加,对男性不育症的诊治有一定指导意义。     

不育患者年龄与精液常规参数及精子DNA完整性的关系研究

目的 探讨年龄对不育患者精液常规参数及精子DNA完整性的影响.方法 选取2015年9月至2019年7月江西省萍乡市妇幼保健院生殖健康科诊治的852例男性不育患者作为研究对象.对其精液检验数据进行回顾性分析.精液质量正常患者纳入正常组(n=339),精液质量异常患者纳入异常组(n=513).比较所有患者、正常组、异常组中...     

核因子-kB、性激素与PCOS患者糖脂代谢的相关性

目的探讨血清中核因子-kB(NF-kB)和性激素水平与多囊卵巢综合征(PCOS)患者糖脂代谢的关系。方法选取2018年3月至2019年3月山东省龙口市人民医院诊治的56例PCOS患者作为研究对象。将这56例患者设为观察组,依据体质量指数(BMI)是否≥25 kg/m^2,再将受检者分为两个亚组,PCOS中肥胖者记为观察A组(n=26)、PCOS中非肥胖组记为观察B组(n=30),选取同期行孕期检查的健康孕妇30例为对照组。测定静脉血液中NF-kB、生殖激素水平以及血糖指标、血脂指标的相关性;使用皮尔逊(Pearson)相关系数分析各因素之间的相关性。结果观察A组患者血脂指标[低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)]、血糖代谢功能指标[空腹胰岛素(FIN)、稳态胰岛素评价指数(HOMA-IR)]均显著高于观察B组,数据差异具有统计学意义(P<0.05);观察B组患者4项指标均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察A组患者血清中NF-Kb、促黄体生成素与促卵泡生成激素比值(LH/FSH)均高于观察B组和对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),观察B组2项数据显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);Pearson分析显示,观察A组和B组患者NF-kB指标与TG、LDL-C、FINS、LH/FSH有相关性,P<0.05;观察A组中NF-kB与MOHA-IR有相关性,差异具有统计学意义(P<0.05);观察A组患者NF-kB与LH/FSH存在相关性;血脂指标方面,观察A组和B组中LH/FSH与TC、TG、LDL-C、HDL-C、FIN和HOMA-IR指标均密切相关。结论核因子-kB以及性激素可能共同参与到PCOS发生和病情进展中,可以为临床诊断,治疗提供指导。     

复发性阴道念珠菌病念珠菌的菌种及药敏分析

目的：了解复发性外阴阴道念珠菌病(RVVC)临床分离菌株及其对几种常见抗真菌药物的敏感性：方法：分别采用念珠菌显色培养基和ROSCO纸片扩散法进行RVVC念珠菌菌种鉴定和药敏试验。结果：62株阳性标本中,分离出白念珠菌47株(75．81％),热带念珠菌4株(6．45％),光滑念珠菌2株(3．23％),克柔念珠菌5株(8．06％),其他念珠菌4株(6．45％)．62株念珠菌对4种常用的抗真菌药物,即两性霉素B、酮康唑、氟康唑和伊曲康唑的敏感率分别为：100．00％(62／62)、88．71％(55／62)、96．77％(60／62)、95．16％(59／62)。结论：RVVC的主要致病菌仍是白念珠菌,但非白念珠菌所占比例呈上升趋势：RVVC分离菌株对咪唑类抗真菌药物仍有较高的敏感率。