雷公藤制剂抗蛋白尿疗效及其对肝脏、肾脏的影响

目的 观察雷公藤制剂对阿霉素肾病大鼠蛋白尿的治疗作用及对肝脏、肾脏的影响.方法 采用分次尾静脉注射阿霉素建立阿霉素.肾病模型,将SPF级纯系SD大鼠分为正常组、模型组、雷公藤多苷组、雷公藤水提物组、雷至胶囊低剂量组、雷至胶囊中剂量组、雷至胶囊高剂量组,分别留取各组第0、2、3、4、5周尿标本,第5周末处死大鼠.检测大鼠白蛋白、甘油三酯、胆同醇及转氨酶含量;光镜、电镜观察肾组织病理形态学变化.结果 模型组尿蛋白量逐渐增加,与模型组、雷公藤多苷组、雷公藤水提物组相比,雷至胶囊各剂量组第4、5周的尿蛋白均明显降低;模型组血白蛋白明显降低,甘油三酯,胆固醇明显升高,与模型组比较各治疗组白蛋白、甘油三酯、胆固醇均明显改善;雷公藤多苷组转氨酶水平明显高于其他组.结论 从疗效或药物安全性方面雷至胶囊均优于其他雷公藤制剂,体现了减毒增效的效果.     

稳肾颗粒对肾间质纤维化大鼠MMP-9/TIMP-1比值及Ets-1表达的影响

目的观察稳肾颗粒对肾间质纤维化大鼠基质金属蛋白酶-9(MMP-9)/金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)比值及逆转录病毒E26转录因子1(Ets-1)表达的影响,初步探讨其抗肾间质纤维化的作用机制。方法将30只大鼠随机分为正常组、模型组、治疗A组和治疗B组。除正常组外,其余组均采用腺嘌呤干预建立肾间质纤维化大鼠模型,造模第22天起,治疗B组给予稳肾颗粒干预直至第42天;造模第29天起,治疗A组给予稳肾颗粒干预直到第42天。第43天处死大鼠,留取标本观察病理。Real time-PCR法检测肾组织中Ⅳ型胶原(ColⅣ)、MMP-9、TIMP-1和Ets-1 mRNA表达量。结果稳肾颗粒可以改善模型鼠肾功能,促进细胞外基质(ECM)降解,下调ColⅣ,上调MMP-9/TIMP-1比值,增加Ets-1表达。结论稳肾颗粒可能通过调节Ets-1蛋白表达而改善降解酶系统的功能紊乱,促进ECM降解,减少ECM沉积,改善肾间质纤维化。     

虫草肾茶胶囊对5/6肾切除大鼠残肾组织MMP-2与TIMP-1表达的影响

目的:观察虫草肾茶胶囊对5/6肾切除大鼠残肾组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)与基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。方法:取雄性Wistar大鼠60只,采用5/6肾切除法制作肾脏纤维化模型,随机分为5组:正常组、假手术组、模型组、治疗组、对照组。治疗组给予虫草肾茶胶囊(0.47g.kg-1.d-1)灌胃,对照组给予福辛普利钠片(7.5mg.kg-1.d-1)灌胃,其余各组给予等量的蒸馏水灌胃,1次/d。连续给药8周后处死大鼠,检测24h尿蛋白定量、血清肌酐、尿素氮、血清白蛋白、血清总蛋白、总胆固醇、三酰甘油等指标。用RT-PCR法检测肾组织MMP-2、TIMP-1的表达。结果:虫草肾茶治疗组的24h尿蛋白定量、BUN、Scr、Chol、LDL低于模型组(P<0.05,P<0.01),TP、Alb高于模型组(P<0.01)。治疗组与对照组明显增加了残肾组织MMP-2的表达(P<0.01),抑制了TIMP-1的表达(P<0.05),两组间比较无统计学差异。结论:虫草肾茶胶囊通过减少尿蛋白,升高TP、Alb水平,降低BUN、Scr、Chol、LDL水平,增加肾组织MMP-2的表达,下调TIMP-1的表达,起到改善肾脏纤维化的作用。     

解毒通络保肾胶囊对糖尿病大鼠肾脏超微结构的影响

目的观察中药解毒通络保肾胶囊对糖尿病(DM)大鼠肾脏超微结构的保护作用。方法将实验动物分为正常对照组、DM组、罗格列酮治疗组和解毒通络保肾胶囊治疗组。检测各组第12周的血糖、肾功能、尿白蛋白等变化。光镜、电镜下观测肾内纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)和基质金属蛋白酶抑制物-2(TIMP-2)蛋白表达水平。结果解毒通络保肾胶囊治疗组较DM组血糖水平显著降低(P<0.01),尿白蛋白明显减少(P<0.05),尿素氮和血肌酐水平下降,肾脏肥大指标改善(P<0.01);明显降低TIMP-2蛋白表达;FN和ColⅣ蛋白表达亦低于DM组(P<0.01)。结论解毒通络保肾胶囊对DM大鼠肾脏超微结构病变有保护作用,其机制可能与改善糖代谢,减少细胞外基质的积聚有关。     

黄芪当归合剂对间质纤维化肾脏中细胞外基质降解系统的调控作用

目的:深入研究黄芪当归合剂抑制肾脏纤维化的作用机制。方法:Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、单侧输尿管梗阻模型组和黄芪当归合剂治疗组(14 g.kg-1.d-1)。在治疗后的第3,7,10天观察各组纤维化程度,测定纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及活性PAI-1,t-PA的表达,检测基质金属蛋白酶(MMP-9,MMP-2)及组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)活性。结果:黄芪当归合剂明显减轻输尿管梗阻导致的肾间质纤维化。在各时间点,模型组总PAI-1及活性PAI-1的表达较假手术组明显增高,而经黄芪当归合剂治疗后PAI-1表达及活性较模型组显著降低;模型组中t-PA仅在第3天时增高,同时黄芪当归合剂治疗组较模型组明显降低。整个观察期中模型组和黄芪当归合剂治疗组的MMP-2,9活性均较假手术组明显增高,但2组间无统计学差异;模型组的TIMP-1活性在第7天和第10天时显著增高,而黄芪当归合剂治疗组较模型组显著降低。结论:黄芪当归合剂可以改善肾组织PAs/PAIs及MMPs/TIMPs系统的失衡而减少细胞外基质的积聚,可能是其抑制肾间质纤维化的机制之一。     

雷至胶囊对嘌呤霉素氨基核苷肾病的减毒增效作用

目的:探讨雷至胶囊(雷公藤多苷10 mg.kg-1+女贞子、墨旱莲4 g.kg-1)在治疗嘌呤霉素氨基核苷(PAN)肾病的减毒增效作用。方法:80只雄性大鼠随机分为8组:空白组、模型组、雷至胶囊高、低剂量组、雷公藤多苷高、低剂量组、雷公藤甲素组和缬沙坦组,每组10只。颈静脉注射PAN 100 mg.kg-1建立PAN肾病模型。空白组颈静脉注射等量生理盐水。其余各治疗组造模后第2天开始每日分别ig给药,持续10 d。第11天,处死大鼠,摘取肝肾,用于光镜、免疫荧光及透射电镜检测。结果:一般情况:模型鼠第5天尿量减少、腹水,而浮肿不明显,体重下降。第7～10天腹水明显,24 h尿蛋白增加,死亡率30%(3/10)。病理改变:模型鼠肾小管上皮细胞变性,电镜下,可见足细胞足突融合、消失,而空白组足细胞结构正常。各药物治疗组24 h尿蛋白、血生化、血红蛋白均有不同程度改善,各治疗组血尿素氮轻度升高(P<0.05)。雷至胶囊及雷公藤多苷10 mg.kg-1组降蛋白尿、改善贫血、降低AST疗效优于其余各组,电镜下,雷至胶囊高剂量组足突融合减轻,足突明显恢复。结论:雷至胶囊可能通过降低PAN肾病大鼠蛋白尿、改善贫血、降低AST、减轻足细胞足突融合及肾小管上皮细胞变性等发挥减毒增效作用。     

肾络宁对膜性肾病小鼠基质金属蛋白酶-9及白介素-10的影响

目的:观察辛通畅络法肾络宁对膜性肾病(MN)模型小鼠基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)、白介素-10 (IL-10)的影响。方法:实验Balb/c小鼠采用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)诱导膜性肾病模型,分为模型组、肾络宁组和MMP-9基因敲除组,另设空白对照组,其中基因敲除组于造模前行MMP-9基因敲除。实验以肾络宁为治疗药物,于实验第0周、第6周末检测各组小鼠尿蛋白,血清IL-10、MMP-9的变化情况。结果:治疗6周后,模型组和肾络宁组、基因敲除组小鼠均出现不同程度的尿蛋白排泄量增加,其中肾络宁组、基因敲除组较模型组小鼠尿蛋白排泄量减少;MMP-9基因敲除组小鼠MMP-9表达显著降低,肾络宁组和模型组有不同程度升高,其中肾络宁组MMP-9表达较模型组降低;模型组、肾络宁组、基因敲除组IL-10表达均匀不同程度降低,肾络宁组、基因敲除组高于模型组(P﹤0.05)。结论:肾络宁对MN模型小鼠具有减少尿蛋白排泄的作用,其机制可能与调节IL-10及MMP-9的表达相关。     

中药对肾小球硬化大鼠MMP-9、TIMP-1及TGF-β1mRNA表达的影响

目的 探讨肾络癥积中药复方对肾小球硬化大鼠细胞外基质降解调控系统MMP-9、TIMP-1及TGF-β1mRNA的影响.方法 采用切除单侧肾脏同时尾静脉注射阿霉素的方法,建立肾小球硬化大鼠模型,检测各组大鼠24小时尿蛋白定量,ELISA法检测基质金属蛋白酶(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制物(TIMP-1)的表达,计算M...     

肾衰保肾胶囊改善腺嘌呤诱导大鼠肾间质纤维化的机制初探

目的:研究拟从肾衰保肾胶囊对慢性肾间质纤维化大鼠细胞外基质积聚的影响的角度探讨肾衰保肾胶囊保护肾功能的机制。方法:Wistar大鼠60只随机分为空白对照组、模型对照组、肾衰保肾胶囊低剂量组(0.324 g.kg-1.d-1)和肾衰保肾胶囊高剂量组(1.296 g.kg-1.d-1),采用腺嘌呤ig复制慢性肾间质纤维化大鼠模型,各组分别给药8周,检测大鼠肾功能、病理变化,采用免疫组化法检测肾组织中的I型胶原(ColⅠ)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)及纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)的表达。结果:肾衰保肾胶囊能够改善模型大鼠肾脏纤维化程度,降低血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、血尿酸(UA)水平,降低肾组织中的ColⅠ,TIMP-1及PAI-1蛋白表达,升高MMP-1蛋白表达,与模型组比较有显著性差异(P<0.01,P<0.05)。结论:肾衰保肾胶囊可能是通过增加MMP-1表达及减少TIMP-1,PAI-1的表达来减少模型大鼠肾组织中I胶原的积聚,进而发挥减轻肾间质纤维化保护肾功能的作用。     

雷至胶囊对阿霉素肾病大鼠足细胞分子Podocalyxin蛋白的影响

目的 研究雷至胶囊对阿霉素肾病大鼠肾脏podocalyxin表达的影响,探讨其保护足细胞的作用机制.方法 采用分次尾静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病模型,将实验动物分为模型组、雷公藤多苷组、雷至胶囊组及正常组,第5周末处死大鼠,光镜、电镜观察肾组织病理形态学变化;West-Blot的方法检测肾皮质中podocalyxin的表达.结果 与模型组相比,用药组24h尿蛋白、血脂明显降低,同时podocalyxin蛋白表达明显提高,透射电镜显示足细胞足突病变不同程度改善;雷至胶囊组以上指标改善明显优于雷公藤多苷组.结论 podocalyxin与蛋白尿和足细胞形态密切相关;雷至胶囊保护足细胞机制之一是恢复肾小球足细胞podocalyxin的表达.     

辛通畅络法对膜性肾病小鼠基质金属蛋白酶-9及肿瘤坏死因子-ɑ 的影响

目的:观察辛通畅络法中药复方肾络宁对膜性肾病(MN)模型小鼠基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:实验Balb/c小鼠采用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)诱导膜性肾病模型,分为模型组、肾络宁组和MMP-9基因敲除组,另设空白对照组,其中基因敲除组于造模前行MMP-9基因敲除。实验以以中药复方肾络宁为治疗药物,于实验第0周、第6周末检测各组小鼠尿蛋白,血清MMP-9、TNF-α的变化情况。结果:治疗6周后,模型组和肾络宁组、基因敲除组小鼠均出现不同程度的尿蛋白排泄量增加,其中肾络宁组、基因敲除组较模型组小鼠尿蛋白排泄量减少;MMP-9基因敲除组小鼠MMP-9表达显著降低,肾络宁组和模型组有不同程度升高,其中肾络宁组MMP-9表达较模型组降低;模型组、肾络宁组、基因敲除组TNF-α表达均匀不同程度升高,肾络宁组、基因敲除组低于模型组。结论:辛通畅络法中药复方肾络宁对MN模型小鼠具有减少尿蛋白排泄的作用,其机制可能与调节TNF-α及MMP-9的表达相关。     

冬虫夏草干预肾小球硬化进展的实验研究

目的:用冬虫夏草对进行性肾小球硬化大鼠模型干预治疗,观察其对细胞外基质的影响并探讨其作用机制。方法:实验大鼠随机分为三组。模型组、冬虫夏草组分别行5/6肾切除制备进行性肾小球硬化模型,每天灌胃给予冬虫夏草(2.5 g/kg)水提取液,进行干预治疗;模型组和正常对照组给予等量的自来水。末次术后4周、9周分别测定大鼠24 h尿蛋白定量;观察肾脏病理变化,用免疫组织化学检测肾组织胶原Ⅳ、纤维连接蛋白(FN)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)。结果:冬虫夏草能降低肾小球硬化指数,减少胶原Ⅳ、FN表达;减少尿蛋白排泄;增加肾组织MMP-2表达,减少TIMP-1和TIMP-2的表达。结论:冬虫夏草能够减少5/6肾切除大鼠尿蛋白排泄量;调节MMP/TIMP之间的平衡;减轻肾小球硬化大鼠细胞外基质的积聚,延缓肾小球硬化的进展。     

赤芍川芎有效部位对兔动脉粥样硬化基质金属蛋白酶的影响

目的 观察芎芍胶囊（XSC,赤芍川芎有效部位）对兔动脉粥样硬化模型中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)表达水平的影响。     

水蛭对局灶节段性肾小球硬化大鼠肾脏MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响

目的:观察水蛭对局灶节段性肾小球硬化(FSGS)模型大鼠肾脏基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)蛋白表达的影响.方法:采用单侧肾切除术后两次尾静脉注射阿霉素建立大鼠FSGS模型.实验动物分为正常组、假手术组、模型组、水蛭组4组.分别于给药后4周、8周末采用免疫组化二步法检测实验大鼠...     

肾康注射液对慢性马兜铃酸肾病模型大鼠肾间质纤维化的拮抗作用

目的 研究肾康注射液对慢性马兜铃酸肾病(CAAN)模型大鼠肾间质纤维化的拮抗效应.方法 雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和干预组,每组6只.于0、1、4、8、12周末分别检测体质量、尿糖、24 h尿蛋白定量和肌酐清除率(Ccr);第12周末处死大鼠留取肾组织,行Masson染色观察肾间质纤维化程度;并用逆转录实时定量聚合酶链反应和免疫组织化学方法检测肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)和Ⅰ型胶原(Col 1)mRNA及蛋白表达.结果 与对照组比较,模型组和干预组大鼠体质量明显减轻(P<0.01),但干预组大鼠体质量明显高于模型组,12周末时存在显著差异(P<0.05).与对照组相比,模型组大鼠24 h尿蛋白定量显著上升(P<0.01),Ccr显著下降(P<0.01);12周时肾间质纤维化面积显著增加(P<0.01);肾组织内上述各检测指标的mRNA及蛋白表达均显著上调(P<0.01).与模型组相比,干预组大鼠各时间点Ccr均显著升高(P<0.01);第12周时24 h尿蛋白定量及肾间质纤维化面积均显著降低(P<0.05、0.01);上述高表达的mRNA及蛋白指标均被显著抑制(P<0.05).结论 肾康注射液可能通过抑制肾组织促细胞外基质(ECM)合成因子(TFG-β1、CTGF)及抗ECM降解因子(TIMP-1、PAI-1)生成,而改善CAAN的肾间质纤维化及肾功能.     

嘌呤霉素肾病模型肾组织微小RNA的差异性表达及雷至胶囊的干预作用

目的:观察嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)肾病模型鼠肾组织微小RNA(microRNAs,miR-NAs)差异性表达的特征及其与足细胞裂隙膜(slid diaphragm,SD)关键结构分子nephrin,podocin和骨架蛋白synaptopodin表达的关系;阐明雷至胶囊(Leizhi capsule,LZC)在体内通过调控模型鼠肾组织miRNAs差异性表达而改善足细胞nephrin,podocin,synaptopodin表达,减少蛋白尿的机制.方法:将50只雄性Wistar大鼠随机分为空白组(A)、模型组(B)、雷至胶囊组(C,5 mL·kg-1·d-1)、雷公藤多苷组(D,10mL·kg-1 ·d-1)和缬沙坦(E,7.5 mL· kg-1·d-1)组.除A组外,其余各组大鼠一次性经颈静脉注射PAN(100 mg·kg-1)而建立PAN肾病模型.造模后第2天灌胃给药,A,B组大鼠用生理盐水干预,共10 d.造模前及造模后第3,9天称量各组大鼠体重,并检测24h尿蛋白排泄量(urinary protein ration,Upro).造模后第11天,处死全部大鼠,采集血液和肾组织,观察血清生化指标血清白蛋白(albumin,Alb),血清肌酐(serum creatinine,Scr),血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN),肾小球超微结构(足细胞足突形态)以及肾组织dicer酶,nephrin,podocin,synaptopodin表达;同时,借助生物芯片(biochip)技术,分析肾皮质miRNAs差异性表达的特征,并且,借助荧光实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)验证mo-miR-23a,rno-miR-300-3p,rno-miR-24,rno-miR-30c等的差异性表达量.结果:在PAN诱导下,模型鼠出现蛋白尿、肾功能减退、低白蛋白血症、足细胞足突融合;在模型鼠肾组织中,dicer酶影响足细胞nephrin,podocin,synaptopodin表达;上调rno-miR-23a,mo-miR-300-3p表达,下调mo-miR-24,rno-miR-30c表达;差异性表达的miRNAs包括rno-miR-24,rno-miR-30c,rno-miR-23a,rno-miR-300-3p等.雷至胶囊能改善PAN肾病模型鼠的一般情况、蛋白尿、血清BUN、足细胞足突融合;还能减少模型鼠肾组织dicer酶表达,增加足细胞nephrin,podocin和synaptopodin表达;减弱在模型鼠肾组织中上调的rno-miR-23a,rno-miR-300-3p,增强在模型鼠肾组织中下调的rno-miR-24,rno-miR-30c等.结论:PAN在体内通过dicer酶/miRNAs差异性表达途径而影响模型鼠肾组织miRNAs表达,干预足细胞nephrin,podocin,synaptopodin表达,破坏足细胞结构和功能,产生蛋白尿;雷至胶囊可以减少PAN肾病模型鼠蛋白尿,其机制可能是干预dicer酶/miRNAs差异性表达途径,调控足细胞nephrin,podocin,synaptopodin表达,改善足细胞的结构与功能.     

“夹脊”电针对兔退变腰椎间盘组织中基质金属蛋白酶13和基质金属蛋白酶组织抑制因子1表达的影响

目的:研究"夹脊"电针对兔退变的腰椎间盘中基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)和基质金属蛋白酶组织抑制因子1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)表达的影响,探讨夹脊电针治疗腰椎间盘退行性病变的作用机制。方法:36只清洁级成年新西兰大白兔随机分为正常组、假手术组、模型组和电针组,每组9只。采用克氏针横穿椎体后椎体间加压法复制椎间盘退变模型。电针组针刺L 4、L 5"夹脊"穴28d。各组于第1、28、56天应用Western blot方法检测椎间盘组织中MMP-13蛋白的表达,免疫荧光技术检测椎间盘组织中TIMP-1蛋白的表达。结果:建立模型后,MMP-13蛋白表达增强(P0.01);电针进行干预后可降低MMP-13的表达(P0.01)。TIMP-1在荧光激发下,胞质清晰,可见红色荧光,其中各组第1天和正常组、假手术组的第28、56天均呈现强阳性,模型组第56天阳性细胞最少、红色荧光最弱(P0.01),而电针组在第56天阳性细胞升高(P0.01)。结论:电针"夹脊"穴可以通过降低椎间盘组织中MMP-13和增强TIMP-1的表达,纠正基质合成与分解代谢失衡,达到防治椎间盘退变的效果。     

化纤胶囊对肺纤维化大鼠模型肺组织TIMP-1及MMP-2 mRNA表达的影响

目的探讨化纤胶囊对肺纤维化模型大鼠肺组织TIMP-1及MMP-2mRNA表达的影响。方法将Wistar大鼠分为正常组、模型组、中药组(化纤胶囊)、激素组(泼尼松),观察28d。分别于第7、14、28天处死动物,检测组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)及基质金属蛋白酶(MMP-2)mRNA蛋白在肺组织的表达,并与模型组进行比较。结果药物组第14、28天TIMP-1、MMP-2mRNA蛋白表达均低与模型组。结论化纤胶囊对TIMP-1、MMP-2mRNA在肺内的异常高表达有抑制作用。     

肺纤方对博莱霉素大鼠肺纤维化模型基质金属蛋白酶1、2及组织金属蛋白酶抑制剂1、2的影响

目的:观察肺纤方抗大鼠肺纤维化肺基质重建的作用。方法:气管内注入博莱霉素制造大鼠肺纤维化模型,观察造模后14、28、45d模型组、假手术组、肺纤方组、泼尼松组血清基质金属蛋白酶1、2及其抑制物组织金属蛋白酶抑制剂1、2的变化。结果:肺纤方可以显著降低血清基质金属蛋白酶1、2及组织金属蛋白酶抑制剂1、2。结论:肺纤方具有抗大鼠肺纤维化基质重建作用。     

肾复康Ⅱ号胶囊对IgA肾病大鼠血清醛固酮及肾内小动脉病变的影响

目的:观察肾复康Ⅱ号胶囊对IgA肾病(IgAN)肾内小动脉病变大鼠醛固酮诱导的血管内皮细胞生长因子(VEGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)、人基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达,探讨肾复康Ⅱ号胶囊对IgAN小动脉病变的防治机制.方法:将70只健康雄性SD大鼠分为空白组、模型组、治疗组(肾复康组)、中药对照组(黄葵组...