刺梨黄酮对辐射损伤骨髓细胞周期的影响

目的研究刺梨黄酮(FRT)对辐射损伤骨髓细胞周期的影响。方法取小鼠骨髓细胞制成单细胞悬液,分为空白对照组、辐射组、辐射+50 mg·L~(-1)FRT干预组(50 mg·L~(-1)FRT干预组)、辐射+100 mg·L~(-1)FRT干预组(100 mg·L~(-1)FRT干预组)。空白对照组不加干预;辐射组给予6 Gyγ射线照射;50、100 mg·L~(-1)FRT干预组先在骨髓细胞悬液加入相应量的FRT,使FRT终浓度分别为50、100 mg·L~(-1),2 h后给予6 Gyγ射线照射。经细胞固定、碘化丙啶染色后,进行流式细胞仪检测。结果与空白对照组比较,辐射组照射后6、12 h,G_1期、S期细胞比例均降低(P<0.05),G_2期细胞比例均增高(P<0.05),且辐射后12 h G_1和S期细胞比例低于6 h时(P<0.05),G_2期细胞比例显著高于6 h时(P<0.05)。与辐射组比较,50、100 mg·L~(-1)FRT干预组的G_1、S期细胞比例均增高(P<0.05),G_2期细胞比例均减少(P<0.05),且辐射后6、12 h,100 mg·L~(-1)FRT干预组G_1和S期细胞比例高于50 mg·L~(-1)FRT干预组(P<0.05),G_2期细胞比例低于50 mg·L~(-1)FRT干预组(P<0.05)。结论 FRT可以降低辐射后骨髓细胞G_2期的细胞比例及增高G_1、S期的细胞所占比例,对γ射线所致骨髓细胞损伤有一定防护作用,且在一定浓度范围内防护效果呈浓度依赖性。     

电离辐射对γ—干扰素产生的影响

本实验对大剂量(0.5～8.0Gy)和小剂量(25～250 mGy)X射线照射后,C_(57)BL/6小鼠脾细胞γ-干扰素(IFNγ)产生的变化进行了观察,结果表明:全身大剂量单次照射后,脾细胞IFNγ的产生随照射剂量增高呈直线性下降,D_(37)=1.91Gy,以照射后1～4天下降最显著;离体大剂量单次照射后脾细胞IFNγ产生的变化规律与整体照射相似,但辐射敏感性较整体照射低,D_(37)=4.18～4.87Gy;小剂量照射后脾细胞IFNγ的产生未见减少,相反在75和100 mGy组出现明显的刺激作用。     

Time-effect of adaptive response of mouse thymocyte apoptosis and cell cycle progression induced by low dose radiation

目的 :观察低剂量辐射 (LDR)诱导胸腺细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的基本规律。方法 :用 X射线照射昆明系雄性小鼠 ,其诱导剂量 (D1)及其后攻击剂量 (D2 )分别是 75m Gy和 1.5Gy。D1和 D2 间隔时间分别是 3、6、12、2 4和 6 0 h。D2 照射后 18h胸腺细胞培养 4、2 0和 4 4 h用流式细胞仪检测胸腺细胞凋亡小体 (TAB)和细胞周期进程的变化。结果 :当 D1和 D2 间隔 3、6和 12 h,在 D2 照射后胸腺细胞培养 4和 2 0 h,D1+ D2 组 TAB百分数明显低于 D2 组 (P<0 .0 5) ,G0 / G1和 G2 + M期细胞百分数也不同程度地低于 D2 组 ,而 S期细胞百分数却明显高于 D2 组 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1)。结论 :D1和D2 分别是 75m Gy(剂量率 ,12 .5m Gy/ min)和 1.5Gy(剂量率 ,0 .2 87Gy/ min) ,D1和 D2 间隔 3～ 12 h,在小鼠全身照射后其胸腺细胞培养 4和 2 0 h可诱导细胞凋亡和细胞周期进程的适应性反应。     

~(60)Coγ射线对HeLa细胞端粒酶活性的影响

目的　探讨γ射线对人宫颈癌细胞系HeLa端粒酶活性的影响。方法　不同剂量的γ射线照射HeLa细胞后 2 4、72、12 0h ,用TRAP ELISA法检测端粒酶的活性。结果　γ射线照射后细胞能增加端粒酶的活性。较低剂量(0 .5～ 1.5Gy)γ射线照射后 2 4h ,端粒酶的活性呈剂量依赖式增加 ;2～ 3Gy时增加的幅度减低 ;而较高剂量 (4 12Gy)γ射线照射时 ,又呈剂量依赖式增加。与照射后 2 4h相比 ,在较高剂量 (4 12Gy)照射后 72及 12 0h ,酶的活性呈剂量依赖式减少。结论　HeLa细胞受γ射线照射后 ,端粒酶活性增加 ;不同剂量范围 ,增加幅度不同。     

低剂量辐射诱导Lewis细胞适应性反应的观察

目的了解低剂量辐射对Lewis细胞适应性反应的影响及其可能机制。方法体外培养Lewis细胞,分为假照组(D0组)、低剂量照射组(D1组)、高剂量照射组(D2组)、低剂量+高剂量照射组(D1+D2组),D0组不照射,D1组给予75 mGyγ射线照射,D2组给予2 Gyγ射线照射,D1+D2组给予75 mGy+2 Gyγ射线照射(低剂量与高剂量照射时间间隔为8 h)。照射后10 d行GIEMSA染色,计算细胞存活分数;用流式细胞仪检测照射后30 min9、0 min3、h6、h、12 h2、4 h4、8 h细胞周期比例。结果 D2组和D1+D2组的细胞存活分数明显低于D1组,差异有显著性(F=115.70,q=7.17、8.03,P<0.01),D2组与D1+D2组比较差异无显著性(P>0.05)。D1组与D0组比较、D2组与D1+D2组比较细胞照射后30 min~48 h G1期差异无显著性(P>0.05);D2组、D1+D2组与D0组和D1组比较照射后6 h即出现G1期阻滞,48 h仍未恢复正常,差异有显著性(F=107.78~150.92,q=7.14~15.21,P<0.01)。各组不同时间S期和G2/M期比较差异无显著性(P>0.05)。结论低剂量辐射不能诱导体外培养的Lewis细胞产生适应性反应,其机制可能与细胞周期调控有关。     

电离辐射对Jurkat T细胞周期进程的影响

目的：探讨电离辐射诱导Jurkat T细胞损伤过程中细胞周期进程的变化规律。方法：采用流式细胞术 (FCM) 检测低剂量（0.075 Gy）和较大剂量（0.5、1.0、2.0、4.0及6.0 Gy）X射线照射后Jurkat T细胞周期进程变化的时间-效应关系和剂量-效应关系。结果：时间-效应关系研究发现,2.0 Gy X射线照射后Jurkat T细胞相继发生S期延迟和G₂期阻滞,S期细胞百分率于照射后立即增加(P<0.001),而G₂+M期细胞百分率照射后8 h开始显著增加（P<0.001）。剂量-效应关系研究发现,75 mGy低剂量X射线照射即可诱导Jurkat T细胞发生S期延迟（P<0.001）和G₂期阻滞（P<0.05）;0.5~6.0 Gy较大剂量X射线照射后,Jurkat T细胞发生S期延迟和G₂期阻滞。与假照组相比较,G₀/G₁期细胞百分率显著降低（P<0.001）,在0.5~6.0 Gy内具有剂量依赖性,而S期和G₂+M期细胞百分率显著升高（P<0.05或P<0.001）。结论：X射线照射可以改变Jurkat T细胞周期进程,诱导其相继发生S期延迟和G₂期阻滞,在0.5~6.0 Gy内具有剂量依赖性。     

辐射诱导性自杀基因在胰腺癌细胞中的表达

目的 利用辐射敏感的早期生长反应基因1(Egr-1)启动子驱动单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-TK),观察其在胰腺癌细胞中的表达效果.方法 以细菌内同源重组法构建含绿色荧光蛋白(GFP)做标志基因的TK基因的腺病毒载体pAdEgr-1-TK,转染人胰腺癌细胞系PC-3 60Co-γ射线照射后,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量分析各不同照射剂量组TK基因的mRNA表达.Western印迹法分析60Co-γ射线照射后转染pAdEgr-1-TK细胞中TK蛋白质的表达量.结果 重组腺病毒载体pAdEgr-1-TK转染胰腺癌细胞系PC-3,不同剂量60Co-γ射线照射后,经RT-PCR半定量分析,TK mRNA表达结果分别为0 Gy(67.3±2.1)%、5 Gy为(89.3±1.0)%、7.5 Gy为(114.7±5.7)%、10 Gy为(140.5±3.1)%、15 Gy为(134.5±4.0)%、20 Gy为(117.4±3.4)%,各照射组TKmRNA表达均明显高于对照组0 Gy(均P<0.01),尤以剂量为10.0 Gy时最为显著.Western印迹分析结果分别为0 Gy为(5.4±0.7)%,5 Gy为(7.6±0.9)%,7.5 Gy为(21.5±1.5)%,10 Gy为(35.7±1.4)%,15 Gy为(32.1±1.2)%,20 Gy为(28.8±1.5)%,60Co-γ射线照射可明显提高转染pAdEgr-1-TK细胞中TK的蛋白质表达量,且蛋白质表达量与辐射剂量呈正相关性.结论 放射敏感性启动子Egr-1基因可驱动TK自杀基因在胰腺癌细胞中高效表达.     

60Co-γ射线致大鼠睾丸间质细胞结构及睾酮合成功能的损害

目的探讨不同剂量60Co-γ射线致大鼠睾丸间质细胞结构及睾酮合成功能急性损伤的程度。方法雄性SD大鼠60只,采用随机数字表法平均分为5组(n=12):正常对照组(A组);60 Co-γ射线双侧睾丸局部照射组有4个剂量组:剂量4 Gy+4 Gy(B组);剂量6 Gy+6 Gy(C组);剂量2 Gy+10 Gy(D组);剂量6 Gy+8 Gy(E组),分次照射时间间隔为24 h。照射完成48 h后应用ELISA法检测循环血中促黄体激素(luteinizing hormone,LH)、睾酮(testosterone,T)水平;应用光学显微镜观察睾丸间质细胞的结构变化;应用RT-PCR技术检测睾丸间质细胞类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)和细胞色素P450侧链裂解酶(P450scc)的mRNA水平。结果 60Co-γ射线照射组(B、C、D、E组)较正常组(A组)血清LH显著升高(P<0.05),T显著降低(P<0.05);光镜下见照射致睾丸间质细胞缩小,数目减少,细胞质减少,细胞核皱缩,染色质浓集、深染;睾丸组织中StAR、P450scc的mRNA水平显著低于正常组(P<0.05)。结论 60Co-γ射线对睾丸间质细胞结构及合成睾酮功能有明显损伤作用,且损伤程度不仅与照射总剂量呈正相关性,也与单次照射的最大剂量有关。     

X射线对Jurkat和EL-4细胞周期进程的影响

目的：探讨较大剂量X射线照射对Jurkat和EL-4 2种T淋巴细胞周期进程的影响。方法：采用碘化丙啶（PI）荧光标记及流式细胞术（FCM）分别检测2.0 Gy X射线照射后不同时间点（0、4、8、16、24和48 h）Jurkat与EL-4细胞周期进程变化的时间-效应关系和1.0、2.0和4.0 Gy不同剂量X射线照射后两者的剂量-效应关系。结果：与各时间点对应的假照组比较,2.0 Gy X射线照射后Jurkat细胞G₀/G₁期和S期细胞百分率降低（P<0.01）,G₂+M期细胞百分率增高（P<0.01）,于照射后24 h变化最为显著;EL-4细胞G₂+M期细胞百分率于照射后4 ~ 8 h增高（P<0.01）,G₀/G₁期细胞百分率于照射后8 ~ 48 h增高（P<0.05或P<0.01）,S期细胞百分率于照射后8 ~ 24 h降低（P<0.01）。1.0 ~ 4.0 Gy X射线照射后16 h,随着剂量的增加,与假照组比较,Jurkat细胞G₀/G₁期和S期细胞百分率降低（P<0.05或P<0.01）,G₂+M期细胞百分率增加（P<0.01）;随着剂量的增加,与假照组比较,EL-4细胞G₀/G₁期细胞百分率升高（P<0.01）,S期细胞百分率降低（P<0.01）,G₂+M期细胞百分率仅在4.0 Gy X射线照射后显著增高（P<0.01）。结论：1.0 ~ 4.0 Gy X射线照射可以改变Jurkat与EL-4细胞周期进程,诱导Jurkat细胞发生G₂期阻滞,EL-4细胞发生G₁期和G₂期阻滞。     

X射线对BGC-803胃癌细胞凋亡及Survivin蛋白表达的影响

目的分析X射线对BGC-803胃癌细胞凋亡及Survivin蛋白表达的影响。方法将BGC-803胃癌细胞分为对照组、实验组;实验组分别给予1、2、5 Gy X射线照射。流式细胞仪检测各组细胞凋亡及Survivin蛋白表达情况。结果随着X射线剂量增大,BGC-803细胞凋亡率增大;在2 Gy、5 Gy组,随X射线照射时间延长,细胞凋亡率增大,而1 Gy组无明显改变。大剂量(5 Gy)X射线引起BGC-803胃癌细胞Survivin蛋白表达增加,而小剂量X射线(1 Gy、2 Gy组)对BGC-803胃癌细胞Survivin蛋白表达无显著影响。结论 X线辐射引起BGC-803胃癌细胞凋亡具有辐射剂量、时间依赖性;大剂量X射线照射使Survivin蛋白表达增加,可能与细胞周期、DNA同源重组修复有关。     

低剂量辐射诱导遗传损伤适应性反应的时间效应

利用小鼠生殖细胞为实验材料，观察低剂量辐射诱导遗传损伤适应性反应的时间效应。结果表明：以５０ｍＧｙＸ射线为Ｄ１剂量，然后在不同间隔时间照射Ｄ２（１．５ＧｙＸ射线），其间隔时间在２４ｈ内的不同时间照射Ｄ２，精原细胞和初级精母细胞染色体畸变率下降，出现明显的适应性反应，以３～６ｈ为最佳；以５０ｍＧｙ×４的多次照射和慢性小剂量６０Ｃｏγ射线照射（累积剂量为１．１０Ｇｙ）为Ｄ１剂量，在照射后４０ｄ仍可出现适应性反应现象。说明，单次急性照射的适应性反应持续时间较短；而多次照射和慢性照射适应性反应持续时间较长。     

Study on the mechanism of cytogenetic adaptive response induced by low dose radiation.

Pre-exposure of human lymphocytes to low dose radiation (D1) could induce a cytogenetic adaptive response expressed as a decrease of chromatid aberrations caused by subsequent large dose radiation (D2). There are two possible explanations for its mechanism, i.e., activation of enzymatic processes by D1 facilitating repair of chromosomal damage and induction of protective proteins by D1 reducing the number of chromosomal aberrations. The results here showed: (1) the cytogenetic adaptive response could be enhanced by hyperthermia (41 degrees C and 43 degrees C) and suppressed by hypothermia (4 degrees C); (2) hyperthermia (41 degrees C) alone could also induce the cytogenetic adaptive response; (3) the cytogenetic adaptive response could be inhibited by cycloheximide--an inhibitor of protein synthesis; (4) supernatant from cultured lymphocytes treated with D1 failed to show the protective effect. The results imply that the cytogenetic adaptive response is not only related to the activation of repair enzymes, but also to the induction of protective proteins.

     

低剂量辐射离体照射诱导脾细胞免疫适应性反应的研究

目的：观察低剂量辐射离体照射能否诱导小鼠脾细胞的免疫适应性反应。方法：采用3H-TdR掺入法。结果：未发现0．025～0．075Gy低剂量辐射明显降低6h后0．75Gy或1．0Gy攻击剂量所致脾细胞丝裂原反应（ConA或LPS）的损伤作用，而整体实验中上述照射条件则能诱导免疫适应性反应。结论：说明整体调节在诱导小鼠脾细胞丝裂原反应的适应性中可能起重要作用。     

Mechanism of cytogenetic adaptive response induced by low dose radiation

Cytogenetic observation on human lymphocytes indicated that pre-exposure of 10, 50 and 75 mGy X-rays could induced the adaptive response. Experimental results with different temperature treatment showed that the adaptive response induced by low dose radiation could be enhanced by 41 degrees C and 43 degrees C, but inhibited by 4 degrees C in addition the treatment by 41 degrees C for one hour could also cause the adaptive response as did low dose radiation. Results showed that adaptive response induced by low dose radiation (10 or 50 mGy X-rays) could be eliminated by the protein synthesis inhibitor, implying that the adaptive response is related with the metabolism of cells, especially with the production of certain protective proteins.     

辐射对淋巴细胞RNA、蛋白质合成的影响及其诱导的适应性反应

目的　观察电离辐射对淋巴细胞ＲＮＡ、蛋白质合成的影响及其诱导的适应性反应。方法　采用体外培养的淋巴细胞,经丝裂原ＰＨＡ刺激后,　１４Ｃ－ ＵＲ、　３Ｈ－ Ｔｙｒｏｓｉｎｅ 双标记掺入法观察０ ．５ ～８ ．０Ｇｙ　γ射线照射后,ＲＮＡ和蛋白质合成速率的变化及低剂量（Ｄ１ ＝４ ．８ｃＧｙ） 照射后相继攻击剂量（Ｄ２） 照射,淋巴细胞所表现的适应性反应。结果　体外培养的淋巴细胞随着照射剂量的增加,ＲＮＡ 和蛋白质合成速度下降,并表现出对低剂量辐射诱导的适应性反应。结论　电离辐射可致淋巴细胞ＲＮＡ、蛋白质合成速度下降,但低剂量辐射可诱导淋巴细胞的适应性反应     

Immunological adaptive response induced by low dose X-rays

目的：研究低剂量电离辐射能否诱导免疫适应性反应。方法：采用单克隆抗体免疫荧光标记技术，流式细胞术检测 Ｔ Ｃ Ｒ／ Ｃ Ｄ３ 受体。采用３ Ｈ Ｔｄ Ｒ 掺入法测定胸腺细胞自发增殖率及丝裂原诱导的脾细胞增殖率。采用 Ｃ Ｔ Ｌ Ｌ 依赖株检测 Ｉ Ｌ ２ 活性。结果：证明免疫适应性反应的最佳诱导剂量为００２５～０１ Ｇｙ，最佳攻击剂量为１０～１５ Ｇｙ，最佳诱导时间为６～１２ ｈ。结论：低剂量辐射能诱导免疫适应性反应。     

Adaptive response of thymocyte apoptosis induced by X-irradiation with 75 mGy

目的：本研究观察胸腺细胞凋亡小体（TAB）以评价低剂量辐射诱导的胸腺细胞凋亡的适应性反应。方法：实验用X射线全身照射Kunmin雄性小鼠，诱导剂量75mGy（D1），攻击剂量1．5或2．0Gy（D2），D1和D2间隔6h，D2照后20h检测TAB百分数。结果：D1+D2组TAB百分数明显低于D2组（P＜0．05）。此外，将75mGy照射的脾细胞外液加入2Gy照射的胸腺细胞悬液中，在培养72h明显低于2Gy照射组（P<0．05）。结论：低剂量辐射（75mGy）可改变免疫细胞的外环境，降低其凋亡，并且可诱导其后大剂量（1．5或2．Gy）照射的小鼠胸腺细胞凋亡的适应性反应。     

“Radiation Hormesis”中的剂量率效应

为了揭示不同剂量率Ｘ射线低剂量全身照射对低剂量辐射兴奋效应（ＲａｄｉａｔｉｏｎＨｏｒｍｅｓｉｓ）的影响，采用不同剂量率（１２．７ｍＧｙ／ｍｉｎ和０．２Ｇｙ／ｍｉｎ）对Ｂａｌｂ／ｃ小鼠进行低剂量全身照射，研究了低剂量辐射兴奋效应中的剂量率效应。结果表明：采用不同剂量率Ｘ射线照射同一剂量时，所引起的生物效应不同。剂量率为１２．７ｍＧｙ／ｍｉｎ时，脾细胞３Ｈ－ＴｄＲ参入量对ＣｏｎＡ的反应性明显增强，尤其以７６．７ｍＧｙ和１０５．５ｍＧｙ照射组最为显著（Ｐ＜０．０１），表现出明显的辐射免疫兴奋效应。而剂量率为０．２Ｇｙ／ｍｉｎ时，在１０５．５ｍＧｙ以内，脾细胞３Ｈ－ＴｄＲ参入量对ＣｏｎＡ的反应性无明显变化。该结果提示：高剂量率低剂量全身照射不能引起低剂量辐射兴奋效应。     

CROSS-RESISTANCE INDUCED BY LOW DOSEX-RAYS OR LOW CONCENTRATION OF MMCIN SOMATIC AND GERM CELLS

<正> It was reported that low concentration of MMC as Dl could induce an adaptive response in human lymphocytes in vitro. When mice were exposed to 10 or 50 mGy X-rays , the bone marrow or germ cells exhibited less frequencies of chromatid aberration induced by 0. 5,2. 5 or 5. 0 mg/kg of MMC as D2 in vivo condition. The present study was for the first time to examine the cross-resistance between the radiation and chemical mutagens in vivo condition in both somatc and germ cells.     

INVOLVEMENT OF THE Ca^2＋-PROTEIN KINASE C AND ADENYLATE CYCLACE SIGNAL PATHWAYS IN THE ACTIVATION OF THYMOCYTES IN RESPONSE TO WHOLE-BODY IRRADIATION WITH LOW DOSE X-RAYS

Objective. To study the molecular mechanism of the stimulatory effect of low dose radiation(LDR) on T cell activation. Methods. Thymocytes from Kunming mice exposed to whole-body irradiation(WBI) with different doses of X-rays were analyzed for the changes in signal molecules of the phospholipase C-phos-phatidylinositol biphosphate(PLC-IP2) and G protein-adenylate cyclase(AC) pathways. Results. It was found that[Ca^2 ]i increased in response to doses within 0. 2 Gy which was most marked after 0. 075 Gy and the increase was accentuated in the presence of Con A. The changes in CD3 and cal-cineurin (CN) expression of the thymocytes followed the same pattern as the alterations in [Ca^2 ]i after LDR. The expression of α,β1 and β2 isoforms of protein kinase C(PKC) was all up-regulated after 0. 075 Gy with the increase in PKC-β1 expression being most marked. The cAMP/cGMP ratio and PKA activity of the thymocytes was lowered after low dose radiation and increased after doses above 0. 5 Gy in a dose-de-pendent manner, thus giving rise to J-shaped dose-response curves. The Ca antagonist TMB-8 and cAMP stimulant cholera toxin suppressed the augmented thymocyte proliferation induced by LDR. Conclusion. Data presented in the present paper suggest that activation of the PLC-PIP2 signal path-way and suppression of the AC-cAMP signal pathway are involved in the stimulation of the thymocytes fol-lowing WBI with low dose X-rays.