丙型肝炎患者抗—NS5抗体与α—干扰素疗效关系的研究

目的：探讨丙型肝炎患者IgG抗－NS5抗体与α-干扰素疗效的关系。方法：以重组HCV抗原及NS3、NS5区段多肽作为抗原,以ELISA法检测丙型肝炎患者α-干扰素治疗前血清IgG抗－NS3、抗－NS5、抗－HCV抗体及其滴度。结果：α－干扰素治疗有效组的抗－NS5抗体的阳性率为80％（8／10）,无效组为20％（2／10）,两组比较有显著差异（P＜0．05）;有效组抗－NS5抗体滴度显著性高于无效组（P＜0．05）;有效组和无效组抗－NS3、抗－HCV本阳性率及抗体的滴度无明显差异（P＞0．05）。结论：治疗前血清IgG抗-NS5抗体可以作为α-干扰素疗效的一个预测指标。     

丙型肝炎患者肝特异性自身抗体的研究

目的:检测丙型肝炎患者血清肝特异性自身抗体并分析其临床意义.方法:以HEP-2细胞、猴肝、大鼠胃和大鼠肾组织为抗原,采用间接免疫荧光法对67例丙型肝炎患者血清、32例甲型肝炎、50例其它疾病和30例正常人血清作抗核抗体、抗平滑肌抗体、抗线粒体抗体和抗肝肾微粒体抗体检测.结果:丙型肝炎患者自身抗体总阳性率为25.4%,均高于其余3组对照组(P＜0.05).自身抗体以低滴度为主,主要为抗核抗体.自身抗体的阳性与患者的性别无关(P＞0.05),与年龄有关(P＜0.05).结论:HCV感染能诱导自身免疫反应使患者血清出现多种自身抗体,检测其自身抗体及其滴度对丙型肝炎患者的治疗有一定的参考价值.     

丙型肝炎病毒核酸定量测定的临床价值

目的　研究丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)载量与抗-HCV含量以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平之间的相关性与符合性。方法　用FQ-PCR法检测128份怀疑HCV感染的血清中的HCV-RNA,同时检测ALT和抗-HCV。结果　128份样本中HCV-RNA阳性率为53.9%(69/128);抗-HCV阳性率为62.5%(80/128);ALT异常率为51.0%(65/128)。HCV平均载量为8.52×105 拷贝/ml血清。抗-HCV滴度和ALT异常随着HCV-RNA载量升高而增加。结论　用FQ-PCR法检测HCV-RNA可以确定(1)抗HCV与抗-HBs不同,不是中和抗体,(2)高滴度抗-HCV血清具有传染性。(3)抗-HCV滴度与HCV-RNA浓度之间呈正相关性r=0.952, P<0.001,且有符合性和互补性,(4)对慢性丙型肝炎长期抗-HCV阳性,若出现HCV-RNA阴性或阳性可以鉴别活动性、复制性程度,(5)是评价丙型肝炎抗病毒治疗效果的重要指标。     

干扰素治疗慢性丙型肝炎中出现反跳与干扰素抗体关系的研究

目的：探讨干扰素抗体与干扰素治疗慢性丙型肝炎临床疗效的关系。方法：用酶免疫法（EIA）检测41例应用干扰素治疗的慢性丙型肝炎患者治疗前及治疗不同时期血清中的干扰素总抗体,同时应用抗病毒中和生物鉴定法（ANB）检测干扰素中和抗体及其滴度。结果：应答伴反跳组干扰素中和抗体及总抗体的阳性率明显高于完全应答组（P＜0．05）,而安全应答组和无应答组间无显著性差异（P＜0．05）。干扰素中和抗体滴度与患者血清ALT水平间存在相关关系,且NA滴度＜1：800患者的完全应答率明显高于NA滴度≥1：800的患者（P＜0．05）。结论：干扰素抗体的产生可能是影响干扰素临床疗效的因素之一,以中和抗体对疗效的影响为主,中和抗体滴度,干扰素的疗效差。干扰素中和抗体的产生可能是临床应用干扰素治疗慢性丙型肝炎患者出现反跳的原因之一。     

自身免疫反应在丙型肝炎病变过程中的作用和影响分析

目的探讨自身免疫反应在丙型肝炎病变过程中的作用和影响。方法采用间接免疫荧光法和免疫印迹法对129例丙型肝炎、25例自身免疫性肝炎及30例健康体检者血清中抗核抗体、抗线粒体抗体、抗可提取性核抗原抗体、抗肝抗原抗体进行检测;观察丙型肝炎病变及治疗前后的自身抗体的变化;探讨自身抗体与Hcv-RNA、肝功能指标之间的关系。结果丙型肝炎患者血清自身抗体总阳性率为44.19%,明显高于健康对照者(P0.01),但低于自身免疫肝炎患者(P0.01);自身抗体以单项和双项阳性及1:160的低滴度抗体为主。丙型肝炎患者中,自身抗体总阳性率按照急性、慢性、丙型肝炎后肝硬化和丙型肝炎后原发性肝癌组依次升高,慢性丙型肝炎明显高于急性肝炎(P0.05);丙型肝炎后肝硬化和丙型肝炎后原发性肝癌两组均高于慢性丙型肝炎(P0.05),但两者之间差异无统计学意义(P0.05)。自身抗体阳性的丙型肝炎患者丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、谷氨酰转肽酶等肝功能损害指标明显高于阴性患者(P0.01)。结论自身免疫反应在丙型肝炎的发生、发展和转归过程中发挥了极为重要的作用。     

血清IFN-α、aCL和抗β2-GPⅠ抗体与系统性红斑狼疮患者血小板减少的相关性

【摘要】 目的 探讨血清干扰素α（IFN-α）、抗心磷脂抗体(aCL)和抗β2糖蛋白Ⅰ(β2-GPI)抗体与系统性红斑狼疮（SLE）患者血小板减少的相关性。 方法 选取2018年1月～2019年6月在我院门诊及住院就诊的系统性红斑狼疮患者65例,其中血小板减少SLE患者20例(PLT＜100×10 9/L,A组),无血小板减少组45例(101×10 9/L～370×10 9/L,B组),选取同期16例脾功能亢进(HS)患者为疾病对照组(C组),选取同期我院体检中心的健康体检者60人(D组)。酶联免疫吸附（ELISA）法检测四组血清IFN-α水平、抗aCL抗体、抗β2-GPI抗体和抗双链DNA抗体滴度,免疫比浊法检测CRP、补体C3和C4。 结果 A组SLE患者血清IFN-α水平、aCL和抗β2-GPI总抗体滴度均显著高于其余三组(均P＜0.01),B组显著高于C和D组(P＜0.05);A组抗dsDNA抗体滴度、CRP浓度和SLEDAI显著高于B组(均P＜0.01),补体C3和C4显著低于B组(均P＜0.01);血清IFN-α水平与aCL和抗β2-GPⅠ总抗体滴度呈显著正相关(r=0.754,0.814,均P＜0.01),IFN-α水平、aCL和抗β2-GPI总抗体滴度均与血小板呈显著负相关(r=-0.651,-0.717,-0.688,均P＜0.01)。 结论 SLE患者体内IFN-α水平、aCL和抗β2-GPⅠ总抗体滴度均与血小板呈负相关,提示IFN-α、aCL和抗β2-GPⅠ抗体与血小板减少有关。     

干扰素中和抗体的产生与难治性丙型肝炎的相关性

目的探讨干扰素中和抗体（NA）的产生与难治性丙型肝炎的相关性。方法纳入102例初治慢性丙型肝炎患者,根据治疗效果分为难治性丙型肝炎组和对照组,用酶联免疫吸附法检测治疗前及治疗不同时期血清中的干扰素总抗体,同时应用抗病毒中和生物鉴定法检测干扰素NA。结果 44例难治性丙型肝炎患者中有12例出现干扰素NA阳性,对照组干扰素NA的阳性率明显低于难治性丙型肝炎组（P〈0.05）。聚乙二醇化干扰素α-2a和干扰素α-1bNA阳性率差异无统计学意义。结论干扰素NA的产生可能是导致难治性丙型肝炎产生的因素之一。     

41 298例住院患者血液感染性指标检测结果分析及临床意义

目的通过对住院患者乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎抗体(抗-HCV)、人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)及苍白密螺旋体抗体(抗-TP)血液感染性指标进行检测,为预防和避免医院交叉感染及医疗纠纷的发生提供依据。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2014年1月‐2016年12月本院41 298例住院患者进行HBsAg、抗-HCV、抗-HIV及抗-TP检测,以了解患者的感染状况。结果在41 298例患者中ELISA法检出HBsAg、抗-HCV、抗-TP、抗-HIV阳性样本3 862例(9.35%),各年度感染性指标总阳性率比较差异无统计学意义(P0.05);男性患者感染性指标总阳性率高于女性,比较差异有统计学意义(P0.05),且男性HBsAg、抗-HCV、抗-TP、抗-HIV各单项指标阳性率高于女性;随年龄增长,3组年龄段患者感染性指标总阳性率呈增加趋势,三组比较差异有统计学意义(P0.05);在合并多项感染患者中,以乙型肝炎+丙型肝炎最多。结论住院患者治疗前感染性指标存在一定比例的阳性率,HBsAg阳性率最高,抗-HCV、抗-HIV及抗-TP较低,男性感染性指标总阳性率高于女性,年龄≥60岁患者感染指标阳性率较高。     

慢性丙型肝炎患者采用α2b干扰素治疗前后PBMC内HCV-RNA的变化

目的:探讨α 2b干扰素对慢性丙型肝炎(丙肝)患者的治疗效果.方法:采用国产α 2b干扰素(300 MU/d)治疗,3个月为一疗程,共2个疗程,并设常规治疗组(Vit C、门冬氨酸)为对照.于疗程结束后分别检测患者PBMC内HCV-RNA和血清内HCV-RNA、抗-HCV.结果:α 2b干扰素治疗组2个疗程后慢性丙肝患者PBMC、血清内HCV-RNA和抗-HCV转阴率分别为42.31%、57.69%、65.38%，常规治疗组慢性丙肝患者PBMC、血清内HCV-RNA和抗-HCV转阴率分别为13.64%、22.73%、27.27%.两组差异均有显著性(P＜0.05～P＜0.01).结论:α 2b干扰素对血清及PBMC内HCV-RNA具有肯定的治疗作用，其疗效优于常规治疗组，但对PBMC内HCV-RNA的疗效似有比抗血清内HCV-RNA和抗-HCV疗效弱的趋势.     

抗α-fodrin抗体在干燥综合征诊断中的意义

目的α-胞衬蛋白(α-fodrin)抗体在干燥综合征(SS)诊断中的意义及与临床表现的相关性。方法以重组人类α-fodrin为包被抗原,酶联免疫吸附试验定量测定35例原发性干燥综合征(pSS)、20例继发性干燥综合征(sSS)、52例其他结缔组织病(CTD)、40名正常人血清中的抗α-fodrin抗体。结果抗α-fodrin IgA型和IgG型抗体检测阳性率在pSS,sSS患者分别为62.86%、45.71%及45.01%、35.00%,在其他结缔组织病和对照组阳性率分别为28.85%、17.31%及5%、5%;pSS中抗α-fodrin IgA,IgG抗体高于其他CTD组,差异有显著性(P<0.01),其余各组间比较阳性率差异无显著性(P>0.05);55例SS患者抗α-fodrin IgA和IgG抗体敏感性高于SSB(P<0.05);IgG型抗体敏感性低于SSA(P<0.05),抗α-fodrin IgA抗体敏感性高于α-fodrin IgG抗体(P<0.05);抗α-fodrin IgG型特异性高于SSA(P<0.05);抗α-fodrin抗体的出现与口干症、眼干症、猖獗龋齿相关(P<0.05);与腮腺肿大、肺间质纤维化、肾小管酸中毒、肺动脉高压、血小板数量的发生率无相关性(P>0.05)。结论①抗α-fo-drin抗体对pSS,sSS的诊断有一定意义。②抗α-fodrin抗体与SS患者的口眼干燥等临床表现有明显关系,但与脏器损害无相关性。③抗α-fodrin抗体可用于SS的筛选。     

丙型肝炎病毒标志物测定的临床应用

目的 :探讨丙型肝炎病毒 (HCV)感染者血清及初乳中该病毒标志物存在状况。　方法 :对 2 44份 HCV感染者、33份对照血清和 35份 HCV特异性 Ig G抗体阳性的产妇、41份健康产妇的初乳进行 HCV四种标志物测定。抗HCV- Ig G、Ig M和 GOR抗体采用间接 EL ISA法 ,HCV C33抗原采用双抗体夹心 EL ISA法。　结果 :抗 HCV- Ig G、抗 HCV- Ig M、HCV C33和抗 GOR抗体四种标志物在慢性活动性丙型肝炎组检出率最高 ,分别为 10 0 .0 %、85 .7%、46 .4%和 6 4.3% ;急性输血后丙型肝炎组检出率为 6 6 .7%、10 0 .0 %、2 2 .9%和 42 .9% ;慢性稳定性丙型肝炎组为 94.1%、2 6 .5 %、17.6 %和 5 2 .9% ;血透患者组为 6 2 .6 %、31.3%、4.8%和 45 .6 %。血清抗 HCV Ig G阳性组初乳为 17.1%、2 .9%、8.5 %和 37.1%。血清和初乳对照组除 1例献血员血清抗 HCV- Ig G阳性外 ,其余均为阴性结果。　结论 :除抗 HCV- Ig G外 ,抗 HCV- Ig M、HCV C33和 GOR抗体三种标志物在 HCV感染的相关疾病组中 ,有一定的阳性检出率 ,均可作为 HCV感染的标志 ,可用于 HCV感染后的实验室诊断。     

抗HCV NS3抗原单克隆抗体的研制与初步鉴

目的：为研制抗丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ３抗原单克隆抗体,用于检测丙肝患者血清中的ＨＣＶＮＳ３抗原。方法：用基因工程表达的ＨＣＶ非结构区ＮＳ３蛋白与鼠血清白蛋白交联后,免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,用杂交瘤技术获得能分泌单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的细胞株。结果：获得有实用价值的两株ＭｃＡｂ。两株ＭｃＡｂ与免疫抗原有较强的抗原－抗体反应,与ＨＣＶＮＳ４、ＮＳ５及核心区Ｃ３３肽、ＣＰ９、ＣＰ１０抗原无反应性,在竞争ＥＬＩＳＡ中,对ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性血清有较好的抑制作用。结论：用基因工程表达的ＨＣＶ非结构区ＮＳ３蛋白,能够制备出有实用价值的单克隆抗体。     

丙型肝炎病毒抗体单片段检测与总抗体检测的比较研究

目的 通过对国产HCV抗体分片段酶联免疫检测试剂与进口第三代抗-HCV检测试剂检测丙型肝炎病毒抗体的研究来了解丙肝病毒抗体单片段检测的意义。方法 采用国产基因重组表达的丙型肝炎病毒不同区(C、NS3、NS4、NS5)特异性抗原分别包被酶标板，以间接EIA法检测75例丙肝患血清中不同区特异性抗体。并以Ab—bott公司第三代抗-HCV试剂进行总抗体检测，同时做HCV—RNA检测。结果 75例血清中HCV不同区抗原片段NS3、HCV～C、NS4、NS5的抗体检出率分别为93．3％(70／75)、92．0％(69／75)、70．7％(53／75)、64．0％(48／75)。含2个片段以上的抗体检出率为94．7％(71／75)；抗-HCV总抗体的检出率为98．7％(74／75)；HCV—RNA检出率为77．4％(58／75)。结论 HCV不同区抗原片段的抗体检出率有差别，NS3、HCV—C检出率较高，其次为NS4、NSS。两种试剂有较好的相关性，HCV抗体单片段试剂可作为检测丙型肝炎病毒抗体的补充试剂，单独片段抗体阳性具有一定意义，动态观察NS3、NS4抗体水平可预测IFN的治疗效果。     

丙肝蛋白芯片用于病毒性肝炎血清流行病学调查

目的 用蛋白芯片技术确证ELISA法初筛抗-HCV阳性结果,观察HCV不同功能区抗体在不同地区低危人群中的检出率差异.方法 将HCV混合抗原,核心区抗原,NS3,NS4,NS5区抗原分别固定于同一玻片载体上制作蛋白芯片,选取48例2001年浙江省病毒性肝炎血清流行病学调查丙肝抗体ELISA法初筛阳性血清,用芯片检测不同功能区抗体.结果 48例初筛阳性血清用蛋白芯片检测有15例不同功能区抗体均为阴性,33例均有1～4种抗体阳性,抗C、抗NS3、抗NS4、抗NS5总检出率分别为51.5%、51.5%、48.5%和57.6%.其中舟山、衢州、温州、绍兴地区抗C检出率分别为53.3%、33.3%、44.4%、66.7%,抗NS3检出率分别为33.3%、100%、55.6%、66.7%,抗NS4检出率分别为60.O%、0%、33.3%、66.7%,抗NS5检出率分别为66.7%、0%、44.4%、83.3%.结论 HCV不同功能区抗体在不同地区低危人群中的分布存在差异,使用蛋白芯片检测低危人群中的HCV抗体,具有较高的特异性.     

血透患者血清庚型肝炎病毒RNA及抗体检测

目的:了解血透患者庚型肝炎病毒(HGV)感染率及与其他肝炎病毒重叠感染的情况。方法:收集57份血透患者血清标本,根据HGV RNA保守片段5′非编码区序列,设计了两对引物,采用逆转录巢式PCR扩增HGV RNA,以及EIA法检测HGV IgG抗体。同时还检测了HBV DNA及HCV IgG抗体。结果:57份标本中,4份HGV RNA阳性(7.0％),2份HGV IgG抗体阳性(3.5％)。HGV RNA与HGV IgG抗体呈“分离”现象。4份HGV RNA阳性标本中2份为HBV DNA阳性,2份为HCV IgG抗体阳性;其中1份标本HBV DNA和HCV IgG抗体均为阳性。结论:血透患者HGV感染率高于健康献血员和正常人群,HGV可与HBV和HCV重叠感染。     

RELATIONSHIP BETWEEN LOAD OF HCV RNA AND ANTIBODIES AGAINST REGIONAL SPECIFIC PROTEINS OF HCV IN SERUM

Objective To study whether HCV RNA load is related to the antibodies against regional specific proteins of HCV. Methods 69 serum samples were detected for HCV RNA load by Real time fluorescent PCR. Anti-HCV and the antibodies against regional specific proteins of HCV were detected by EL1SA. Results The positive rates of anti-C and anti-NS3 were remarkably higher than those of anti-NS4 and anti-NS5. We divided the serum samples into two groups on the basis of load of HCV RNA, there was no statistical significance between A and B group in the positive rate as well as the antibody reactivity of HCV anti-C, anti-NS3 , anti-NS4 and anti-NS5. From the distribution of different combined patterns, we could conclude that the pattern IV was superior to others in both of the two groups. Conclusion There are remarkable differences in different antibodies against the regional specific proteins of HCV. The positive rates and the antibody reactivity of anti-C, anti-NS3, anti-NS4, anti-NS5 are not related to the HCV viral load. The E1A-3 which conclude C, NS3, NS4, NS5 proteins could enhance the sensitivity of detection HCV.     

Selection and application of serotypical synthetic peptides derived from hepatitis C virus NS5A region

Background   Numerous studies have reported a relationship between hepatitis C virus (HCV) genotype and the response to interferon therapy. Despite high sensitivity and specificity, genotyping methods can be performed only on HCV RNA positive samples. Serotyping might be a rapid and cost effective method for determining HCV genotypes, especially in patients with previously undetectable HCV RNA. In this study, an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) method for HCV serotyping with the genotype specific, synthetic peptides derived from HCV nonstructural 5a (NS5A) region was developed.
Methods  Based on 45 sequences, representing HCV genotypes 1-6 from Genebank, we synthesised 305 overlapping 30-mer peptides within NS5A region at positions 2182-2343 of HCV. All peptides for antigenic reactivity were tested by enzyme immunoassay with 69 human sera with antiHCV positive representing genotype 1-6. Forty hepatitis C patient sera were serotyped using serotype specific, synthetic peptides and genotyped by sequencing analysis.
Results  The correspondence of amino acids in HCV NS5A region with amino acids in positions 2182-2343 was very low among different genotype peptides. The highly conserved sequences were residues 2182-2211(R1), 2272-2301 (R7) and 2302-2331 (R9): the highly variable 2212-2241 (R3) and 2257-2286 (R6). Using 305 peptides, antigenic regions were located in R3, R7 and R9. Eighteen peptides from highly conserved region representing genotypes 1 to 6 showed broad immunoreactivity with sera containing antibody to all HCV genotypes. Immunoreactivity of the peptides from highly variable region was stronger with similar genotype sera.  Twelve unique peptides showed highly, genotype specific, reactivity with types 1 and 3 sera. Type 2 genotype specific peptides had cross reaction with type 3 serum. No type 4, 5 or 6 specific peptides were selected. The serotyping results showed high agreement with sequencing analysis.   
Conclusions  The major antigenic regions in HCV NS5A region were at 2212-2241(R3), 2272-2301(R7) and 2302-2331(R9).  Eighteen peptides from highly conserved region show genotype independent, immunoreactivity, useful for antiHCV antibody test. Twelve peptides from highly variable region show genotype 1 and 3 dependent immunoreactivity, useful for determining HCV serotype, especially for patients with previously undetectable HCV RNA.

     

HBV、HCV重叠感染血清病毒标志物变化及与临床的关系

目的 :探讨 HBV、HCV重叠感染时 ,病毒之间的相互作用及其与临床的关系。方法 :应用 EL ISA法检测30例 HBV、HCV重叠感染患者血清病毒标志物 ;应用 PCR法检测 HBV DNA及 HCV RNA。结果 :与单纯 HBV或HCV感染患者相比 ,重叠感染患者 HBe Ag、HBV DNA、HCV RNA阳性率明显降低 ,抗 - HBe阳性率明显升高 ,HBs Ag、抗 - HBc Ig G及抗 - HCV平均几何滴度也明显降低 ,部分患者 HBs Ag阴转。重叠感染患者 TBil及 AST/AL T比值明显高于单纯感染者 ,尤以抗 - HBe阳性者明显。结论 :HBV、HCV感染同一宿主时存在相互干扰、相互抑制 ,且较单纯感染患者病情重。重叠感染时抗 - HBe阳性不能做为病情恢复的判定指标     

血清抗HCV—IgM检测的临床意义

目的：检测血后病毒性丙型肝炎患者，活动期慢性丙型肝炎患者，稳定期慢性丙型肝炎患者，血液透析患者，献血员及健康人群血清中抗ＨＣＶ－ＩｇＭ，观察抗ＨＣＶ－ＩｇＭ与肝细胞损伤的关系，方法：自建的检测ＨＣＶ－ＩｇＭ的ＥＬＩＳＡ法，结果：健康人群的血清抗ＨＣＶ－ＩｇＭ的阳性率显著低于其他组（Ｐ〈０．０１，Ｐ〈０．００５），输血后丙肝炎患者及活动期慢性丙型肝炎患者血清抗ＨＣＶ－ＩｇＭ的阳性率显著高于其他组。其     

类风湿关节炎患者血清抗EB病毒抗体的临床研究

目的研究ＥＢ病毒感染与类风湿关节炎的临床关系。方法以Ｂ９５－８细胞为抗原底物,用间接免疫荧光法检测血清中抗ＩｇＡＥＢ病毒壳抗原抗体（抗ＩｇＡ／ＶＣＡ抗体）。以免疫印迹法检测血清中抗ＩｇＧＥＢ病毒Ｚ蛋白抗体（抗ＩｇＧ／Ｚ抗体）。结果类风湿关节炎患者血清中抗ＩｇＧ／ＶＣＡ抗体阳性率２１．９％,明显高于正常人及其他风湿病患者。抗ＩｇＧ／Ｚ抗体仅在抗ＩｇＡ／ＶＣＡ抗体阳性时出现。结论抗ＩｇＡ／ＶＣＡ抗体的检测对类风湿关节炎的诊断有一定临床意义。类风湿关节炎患者体内的ＥＢ病毒可能处于激活状态。