治疗性血管新生研究进展(文献综述)

基于内皮前体细胞 (EPC)移植的治疗性血管新生 ,成为血管内皮功能紊乱和缺血性疾病的新的治疗措施 ,从 2 0世纪 70年代Folkman提出血管生成的概念 ,经过内皮细胞生长因子基因导入的治疗性血管新生到内皮前体细胞移植治疗性血管新生 ,对血管新生的认识发生了明显的变化。本文回顾了EPC移植的基础研究和临床试验研究 ,并对治疗性血管新生的临床应用前景进行了展望。源于骨髓 /外周血 /脐带血的EPC移植有可能成为缺血性疾病治疗的手段     

血管内皮生长因子治疗下肢缺血性疾病的研究进展

单独使用血管内皮生长因子（VEGF）基因治疗下肢缺血性疾病的研究由来已久，目前尚无满意疗效。目前已证实血管内皮前体细胞（EPC）可定向分化血管内皮细胞并能形成新生血管，其中VEGF在EPC定向分化、体内动员、体外扩增及转染EPC后定向移植治疗周围缺血性疾病等过程中发挥重要作用。笔者对VEGF在基因治疗、细胞治疗和基因转染细胞治疗下肢缺血性疾病的研究进展综述如下。     

血管内皮祖细胞在整形外科方面的研究进展

自Asahara于1997年首次提出血管内皮祖细胞（endothelial progenitot cells,EPC）以来,有关EPC的研究日益增多。EPC是血管内皮细胞（endothelial cells,ECs）的前体细胞,又称为血管母细胞（angioblast）,不仅参与胚胎血管生成,而且EPC也参与出生后的血管新生过程,在治疗缺血性疾病、防止血管再狭窄及促进血管创伤愈合等过程中具有重要的治疗作用和广阔的临床应用前景。本文就目前有关EPC的来源、分化、动员、鉴定及其临床应用研究作一综述。     

血管内皮祖细胞研究进展及在整形外科的应用前景

血管内皮祖细胞(endothelialprogenitorcell ,EPC)是血管内皮细胞的前体细胞,亦称为成血管母细胞或血管内皮干细胞,1997年由Asahara等[1] 首次分离并证实人类出生后的外周循环血液中存在着能分化为血管内皮细胞的EPC ,它在成年机体的血管新生中起重要作用。这一重大发现,为揭开血管新生的机制提供了重要线索。目前,EPC在心血管及肢体缺血性疾病等领域的研究十分活跃,在整形外科领域,如皮瓣、组织扩张、损伤修复及组织工程等方面有着广阔的临床应用前景。1　EPC的来源胚胎期第13～15天,胚外造血启动,卵黄囊的胚外中胚层的一些间充质细…     

骨髓干细胞移植促进缺血肢体血管新生的研究

我们通过建立大鼠肢体缺血模型。采用骨髓内皮祖细胞(EPC)移植于缺血肢体，观察缺血组织血管新生及血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况，探讨自体骨髓干细胞移植在治疗肢体缺血性疾病中的价值。     

内皮祖细胞与损伤肾脏的修复

内皮祖细胞（endothelial progenitor cell,EPC）是成熟血管内皮细胞的前体细胞,属干细胞群体。EPC起源于骨髓的原始细胞,类似于胚胎期的成血管细胞（angioblast）。骨髓中的EPC增生后进入血液循环,某种因素影响下在病变部位黏附、增殖,参与生理性血管新生、器官再生修复和病理性血管新生。近年的研究发现,刺激骨髓动员EPC,使循环EPC的数量增加,是促进急、慢性肾脏损伤后修复的一种有效的手段,这给肾脏病患者的治疗带来了新的希望。     

骨髓细胞移植治疗肢体缺血的研究进展

严重的慢性缺血性疾病临床治疗相当棘手 ,“治疗性的血管新生”是很有前景的治疗方案 ,即应用血管生长因子或其基因 ,促进缺血组织周围的血管新生和侧肢循环建立 ,改善局部组织供血。新近研究表明 ,这种血管生长因子的促血管新生作用 ,其实质是通过动员骨髓中血管内皮的前体细胞—内皮祖细胞(EPC) ,向缺血组织游走并分化为内皮细胞 (EC) ,而发挥其血管新生效应[1] 。这种骨髓来源的EPC有望在不久的将来成为重症缺血性疾病新的治疗靶点 ,已迅速成为国内外的研究热点。一、内皮祖细胞与血管新生1.内皮祖细胞的起源和分布 :胚胎时期的血管…     

含内皮祖细胞的组织工程皮肤体外构建及裸鼠移植研究

目的构建含内皮祖细胞（EPC）和成纤维细胞的组织工程复合皮，初步研究EPC在组织工程皮肤移植中促血管发生的作用。方法采用免疫磁珠法从人脐血中分离培养CD133＋血管内皮祖细胞，以聚羟基乙酸（PGA）为真皮基质，接种EPC和成纤维细胞，其上覆盖表皮细胞膜片，构建组织工程复合皮，覆盖裸鼠背部全层皮肤缺损创面。结果EPC和成纤维细胞能均匀贴附于PGA支架纤维材料上，并逐渐伸展为梭形或多极状。裸鼠移植实验表职，实验组创面愈合早于对照组，可见EPC参与大量新生小血管形成，真皮支架5周完全降解。结论EPC参与血管重建，具有促进血管新生，加速缺血组织血管化的作用。应用PGA＋纤维蛋白凝胶，制备含EPC和成纤维细胞的活性真皮替代物，具有良好的生物相容性、降解特性。     

人脐血内皮祖细胞体内促进血管重建的实验研究

目的：通过观察人脐血内皮祖细胞（EPC）在裸鼠体内缺氧状态下分化成内皮细胞的现象，初步研究其促进血管重建的作用。方法：根据EPC表面标记CD133，采用免疫磁珠法分离培养EPC。设计EPC裸鼠成瘤实验，观察瘤体内血管增生情况；将荧光标记的EPC注射于裸鼠腹部皮瓣中，观察EPC参与皮瓣血管重建情况；将EPC接种于聚羟基乙酸（PGA）中，移植于裸鼠皮下，观察EPC参与血管重建。结果：原代EPC贴壁后呈梭形，从第7天开始数量明显增加，呈克隆状生长。透射电镜观察到成熟内皮细胞最具特征性的细胞器——weibel-Palade小体。裸鼠成瘤实验：抗人vWF免疫荧光显示大量EPC参与肿瘤血管生成；裸鼠皮瓣实验：荧光标记EPC参与裸鼠皮瓣血管生成；PGA移植实验：抗人vWF免疫酶组织化学染色显示EPC参与血管生成。结论：EPC参与血管重建，具有促进血管新生，加速缺血组织血管化的作用。     

内皮祖细胞的研究进展

内皮祖细胞是血管内皮细胞的前体细胞，在生理和病理条件下能够修复损伤的血管内皮细胞，对维持血管内皮细胞的完整性极其重要。1997年，Asahara等人首次分离并证实成年人外周血中存在着能分化为血管内皮细胞的内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPC），并在体内证实了其生成血管的能力。近年来，内皮祖细胞移植在心脑血管疾病，创伤愈合等血管类疾病的治疗中展现出广泛的应用前景。     

血管内皮祖细胞制备血管瘤动物模型的探索研究

目的 探索研究通过移植人外周血管内皮祖细胞至裸鼠皮下来构建一种新型的血管瘤动物模型.方法 分离培养人外周血管内皮祖细胞,与基质胶混匀后移植到裸鼠皮下,按随机分组情况每周给细胞移植组分别注射血管内皮生长因子、雌二醇和生理盐水,定期观察记录新生组织的生长状况.结果 细胞移植后可见新生组织内血管增殖明显,呈血管瘤样改变.注射血管内皮生长因子和雌二醇组与注射生理盐水组相比,体积和血管密度明显偏大.结论 血管内皮祖细胞注射至裸鼠皮下后具有较强的促进血管新生的能力,通过移植人外周血管内皮祖细胞可望构建与人血管瘤相近的动物模型.     

治疗性血管新生与下肢缺血性疾病的研究进展

动脉硬化闭塞症、糖尿病动脉闭塞症及血栓闭塞性脉管炎是临床上最常见的肢体缺血性疾病,通常的治疗方法有人工血管或自体血管搭桥及介入治疗。但对于严重的慢性下肢缺血致远端流出道不良的患肢,上述方法往往无能为力,为此有学者提出了动脉静脉化、交感神经切除术等方法,但由于两者疗效的不确切,20世纪末有学者提出了治疗性血管新生的概念。近年来,基于内皮祖细胞(EPC)的骨髓来源细胞移植已成为治疗性血管新生的研究热点。本文将对治疗性血管新生在下肢缺血性疾病中的应用作一综述。     

内皮祖细胞的生物学特征及应用研究进展

成年人的外周血、骨髓和脐带血中存在一类能分化为成熟内皮细胞（endothelial cell,EC）的前体细胞,这种细胞参与新生血管的形成和血管再生,类似于胚胎期的成血管细胞,称为内皮祖细胞（endothelial progenitor cell,EPC）.它不仅参与胚胎时期的血管生成,而且在出生后微血管新生、损伤血管内皮修复和功能维持中仍有着重要的作用.     

血管内皮祖细胞促进游离移植脂肪颗粒组织存活的实验

目的探讨血管内皮祖细胞（endothelial progenitor cell，EPC）移植促进游离移植的脂肪颗粒组织的血管新生，提高移植脂肪颗粒组织存活率。方法体外分离、培养人脐血中EPCs，然后与来自人体的脂肪颗粒组织混合移植于裸鼠背部。结果脐血中分离培养的EPCs表达血管内皮细胞生长因子受体（KDR）及细胞表面标记CD34、CD133，EPCs与脂肪颗粒组织混合移植到裸鼠3个月后，EPCs整合到缺血部位新生血管中，与对照组的脂肪颗粒组织存活率分别为（89．3±6．8）％、（42．2±2．5）％（P〈0．05），而且实验组与对照组脂肪颗粒组织周边区毛细血管密度差异有统计学意义（P〈0．05）。术后3个月2组脂肪颗粒组织周边区的EPCs密度分别为（95．2±10．5）个／mm^2、0个／mm^2（P％O．05）。结论体外培养的脐血EPCs移植体内可促进游离移植的脂肪颗粒组织的血管新生，提高存活率。     

内皮祖细胞在血管新生及相关疾病中的作用

血管新生与多种难治性疾病的发生和发展过程密切相关,其失衡可致血管新生相关疾病。内皮祖细胞(EPC)在血管新生及疾病进展中发挥重要作用,深入研究其具体作用和分子机制将为血管新生相关疾病带来曙光。笔者就EPC在血管新生相关疾病中的作用和分子机制作一综述,以期为临床疾病的防治提供新的思路和研究方向。     

靶向血管治疗增生性瘢痕的实验研究

目的 探讨靶向血管治疗烧伤后增生性瘢痕的可行性和方法。方法 通过建立增生性瘢痕的裸鼠移植模型，使用不同剂量血管内皮生长因子(VEGF)的单克隆抗体，进行瘢痕内注射治疗，观察瘢痕Ⅰ型、Ⅲ型胶原和血管的量以及其超微结构的变化。结果 靶向血管治疗3周后，增生性瘢痕的体积明显减小，瘢痕胶原、血管明显减少，瘢痕内大量成纤维细胞坏死、凋亡，代之成熟的纤维细胞，失去了典型增生性瘢痕的特征。结论 血管内皮生长因子可能对增生性瘢痕中的大量血管新生起支持作用，大量血管对增生性瘢痕的胶原合成可能起着促进作用，针对VEGF的靶向血管治疗可能是治疗增生性瘢痕的的一种有意义的方法。     

基因或干细胞移植治疗缺血性冠心病:新世纪的挑战

基因和骨髓干细胞移植是治疗缺血性冠心病的一种新方法。细胞移植的新概念、新的研究方法为未来心血管疾病的治疗和研究提供了令人兴奋的可能性。新近的细胞移植合并基因治疗可能是此领域的革命性进展。实验和初步临床资料证实，基因或者骨髓干细胞移植能产生巨大的生物学效应，使心脏生成新生血管或者心肌细胞，改善心肌血液供应，增加心脏功能或者代谢功能。尽管仍有许多问题需要解决，血管内皮生长因子或者骨髓干细胞移植是安全的，特别适合那些弥漫性血管病变不宜进行外科干预或者PTCA的患者，但仍有必要设计具有机械终点及临床终点的大规模随机、双盲、安慰剂对照试验，进行深入研究。     

VEGF165基因转染骨髓源性血管内皮祖细胞的体外实验研究

目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）转染骨髓源性血管内皮祖细胞（endothelial progenitor cell，EPC）后，EPC分泌VEGF及活性以及EPC特性的影响。方法体外获取大鼠骨髓，分离单个核细胞，经培养，鉴定为EPC。用脂质体介导pcDNA3．0-hVEGF165转染，转染后EMSA法测培养上清VEGF蛋白水平，培养上清液对ECV304细胞生长的影响，以评价VEGF蛋白活性，MTY法评价转染对细胞活性的影响，免疫细胞化学检测EPC表达VEGF、vWF（血友病因子）、VEGF—R2（血管内皮生长因子受体2）的变化。结果转染后的第7天表达的VEGF蛋白浓度达1280pg／ml，转染对EPC的增殖无影响，表达VEGF、vWF、VEGF—R2的比率随时间而逐渐升高，至第7天时分别为88．52％、82．65％和95．97％。结论VEGF转染的EPC能表达一定浓度有功能的VEGF蛋白，能帮助EPC保持内皮细胞特性，向成熟内皮细胞分化。     

内皮祖细胞在下肢缺血性疾病治疗中的研究现状

干细胞是一类具有自我复制和多向分化潜能的细胞。其中,骨髓干细胞是近几年干细胞移植领域的主要研究对象,临床常用的骨髓干细胞有骨髓单个核细胞群(BM-MNC)、AC133阳性细胞群、间充质干细胞(MSC)和内皮祖细胞(EPC)等。下肢缺血性疾病是血管外科常见的致残性疾病,有着高发生率、高致残率和高死亡率。近年来,基于内皮祖细胞(EPC)的骨髓干细胞移植已成为治疗此类疾病的新方法。本文将对EPC在下肢缺血性疾病治疗中的发展现状作一综述。     

人脐血来源内皮祖细胞促进裸鼠皮瓣存活的实验研究

目的将内皮祖细胞（endothelial progenitor cell，EPC）引入皮瓣缺血组织中，初步研究其生物学特性及在皮瓣缺血组织中促血管发生的作用。方法采用免疫磁珠法从人脐血中分离培养CD133＋内皮祖细胞，将体外扩增的EPC局部注射于裸鼠超长皮瓣模型中，观察EPC转归及参与皮瓣血管重建的情况；通过观察皮瓣坏死面积及微血管增生情况，评价EPC在皮瓣缺血组织中再血管化能力。结果EPC组皮瓣坏死面积明显小于空白组（P〈0．05）、真皮下层组织灌流量大于对照组（P〈0．05）；荧光示踪及免疫组织化学染色证实EPC参与皮瓣血管重建。结论EPC参与血管重建，具有促进血管新生，加速缺血组织血管化的作用。