热疗联合化疗对Raji细胞的体外抑制及Bcl-2表达的作用

目的：观察热疗联合阿霉素对人B细胞淋巴瘤细胞系Raji的体外增殖的抑制作用、凋亡及Bcl-2表达的影响。方法：MTT法确定阿霉素的工作浓度，以该浓度进行化疗或与热疗的联合，选择温度40℃、41℃及42℃，体外作用于Raji细胞。作用前及48h采用台盼蓝拒染法检测肿瘤细胞的存活率；MTr法检测肿瘤细胞增殖的抑制作用；流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡及Bcl-2表达。观察热疗联合阿霉素的抗肿瘤效果。结果：作用48h IC50的药物浓度作为实验的工作浓度。单纯40℃、41℃及42℃热疗60min对Raji细胞系有抑制作用（P〈0．01），热化疗组对Raji细胞有明显的抑制作用（P〈0．01），均随着温度的增高而增强。流式细胞仪检测细胞凋亡及Bcl-2的表达，热疗组、化疗组及热化疗组的细胞凋亡率均较对照组显著升高，各组之间差异均有非常显著性意义（P〈0．01）；Bcl-2蛋白的表达则下降，各组之间差异也有非常显著性意义（P〈0．01）。结论：热疗联合阿霉素能增强对Raji细胞的体外抑制作用：提高肿瘤细胞的凋亡率，下调Bcl-2蛋白的表达。     

热疗联合阿霉素对K562/AO2细胞株凋亡及Bcl-2表达的影响

目的：观察热疗联合阿霉素对耐药慢性髓系白血病细胞株K562／AO2的体外增殖抑制作用、凋亡及Bcl-2表达的影响。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT法）确定阿霉素的工作浓度，以该浓度进行化疗或与热疗联合治疗，分别选择温度40，41和42℃，体外作用于K562／AO2。采用MTT法检测对肿瘤细胞增殖的抑制作用；流式细胞仪检测细胞凋亡及Bcl-2表达。观察热疗联合阿霉素的抗肿瘤效果。结果：作用48h后IC50为53μg／ml，以此为实验的工作浓度。单纯热疗60min对K562／AO2细胞有抑制作用（P〈0．01），并随温度增高而增强；单纯化疗对K562／AO2细胞也有抑制作用；各热化疗组对K562／AO2均有明显的抑制作用（P〈0．01），随着温度的增高而增强。流式细胞仪检测细胞凋亡及Bcl-2的表达，热疗组、化疗组及热化疗组的细胞凋亡率均较对照组显著升高，各组之间差异有统计学意义（P〈0．01）；Bcl-2蛋白的表达下降，各组之间的差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：热疗联合阿霉素能增强对K562／AO2细胞的体外抑制作用，提高肿瘤细胞的凋亡率，下调Bcl-2蛋白的表达。     

表阿霉素和阿霉素对原代乳腺癌的体外敏感性研究

目的 了解表阿霉素和阿霉素在体外对乳腺癌、癌旁组织和正常乳腺组织的杀伤作用。方法 取得不同患者的乳腺癌、癌旁和正常乳腺组织标本，采用胶原酶消化法获取乳腺原代细胞，应用原代体外培养和MTT法检测化疗药物在不同浓度下对乳腺原代细胞的杀伤率。结果 在1倍PPC（血药浓度）时表阿霉素对乳腺癌原代细胞的体外肿瘤杀伤作用强于阿霉素（P〈0．01）；对正常的乳腺原代细胞，表阿霉素和阿霉素的体外杀伤作用明显下降（P〈0．01），而且表阿霉素弱于阿霉素（P〈0．01）。结论 对于原发乳腺癌患者，表阿霉素不但治疗效果优于阿霉素，而且对肿瘤组织具有更高的选择性，可以作为乳腺癌治疗的一线药物。     

热疗联合化疗对K562/AO2细胞体外作用的实验研究

本研究观察热疗联合阿霉素对耐药慢性髓系白血病细胞系K562/AO2体外增殖的抑制作用、诱导凋亡及对Bcl-2及P-gp表达的影响。以MTT法确定阿霉素的工作浓度进行化疗,以40、41和42℃体外加热K562/AO2。加热前及加热后48小时采用台盼蓝拒染法检测肿瘤细胞的存活率,MTT检测肿瘤细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡、Bcl-2及P-gp表达,观察热疗联合阿霉素的抗肿瘤效果。作用48小时的IC50值作为实验的工作浓度。结果表明：与单纯培养相比,40、41和42℃热疗60分钟对K562/AO2细胞有明显地抑制作用（p〈0.01）,并随温度增高而增强;热疗＋化疗组在40、41和42℃时,K562/AO2增殖抑制明显（p〈0.01）,随着温度的增高而增强。热疗组、化疗组及热疗＋化疗组的细胞凋亡率均较对照组显著升高,各组之间均有显著性差异（p〈0.01）;Bcl-2蛋白及P-gp的表达均下降,各组之间也有显著性差异（p〈0.01）。结论：热疗联合阿霉素能增强对K562/AO2细胞的体外抑制作用,提高肿瘤细胞的凋亡率,下调Bcl-2及P-gp的表达。     

热化疗联合对人肺腺癌耐药细胞株A549／DDP作用及其机制的实验研究

目的 观察热化疗联合对人肺腺癌耐药细胞株A549／DDP的影响及其机制，为临床上应用热化疗联合治疗非小细胞肺癌提供理论依据。方法 CCK-8法检测A549、不同温度下A549／DDP细胞对顺铂的敏感性；流式细胞仪分析热疗对A549／DDP细胞周期分布的影响；RT-PCR检测热疗对A549／DDP细胞ERCC1表达的影响。结果 亲代人肺腺癌细胞株A549对顺铂的敏感性明显高于耐药细胞株ASg9／DDP，不同温度加热后A549／DDP细胞对顺铂的敏感性均有提高；热疗尤其是热化疗后G2／M期细胞明显增多，G0／G1期细胞明显减少（P〈0．01）；热疗后A549／DDP细胞ERCC1mRNA表达未见明显改变。结论 热疗能提高人肺腺癌耐药细胞株A549／DDP对顺铂的敏感性，热化疗具有协同作用。热化疗协同作用机制可能主要是诱导细胞周期阻滞，抑制细胞增殖，和DNA修复基因ERCC无直接相关性。     

阿霉素加热化疗对人肝癌细胞耐药模型-7721/Adm多药耐药性的影响

目的 探讨阿霉素（ＡＤＭ）化疗与４３℃加热化疗对人肝癌细胞－７７２１（以下简称７７２１细胞）和耐药人肝癌细胞模型－７７２１／Ａｄｍ（以下简称７７２１／Ａｄｍ细胞）的细胞毒作用。方法 以体外培养的人肝癌细胞－７７２１和我们培养建立的人肝癌细胞模型－７７２１／Ａｄｍ为研究对象,采用水浴加温法,体外细胞毒试验（ＭＴＴ法）,观察ＡＤＭ化疗与加热化疗对细胞的生长抑制规律的影响;采用流式细胞技术检测加热对７７２１细胞和７７２１／Ａｄｍ细胞内阿霉素浓度的影响。结果 （１）７７２１／Ａｄｍ细胞对阿霉素的敏感性明显低于７７２１细胞;（２）加热可以明显提高两种细胞对阿霉素的敏感性;（３）流式细胞检测显示加热可明显提高这两种细胞内的阿霉素的浓度,尤其是７７２１／Ａｄｍ细胞内的阿霉素浓度。结论 加热可以显提高人肝癌细胞－７７２１和耐     

伊立替康联合热疗抑制人大肠癌细胞LOVO体外增殖作用的研究

目的：探讨伊立替康联合热疗体外抑制人大肠癌细胞增殖的效果，以确定联合方案是否具有协同效应。方法：使用四甲基偶氮唑蓝（Mar）法测定单独或联合应用伊立替康与热疗对人大肠癌LOVO细胞体外增殖的抑制作用，使用流式细胞仪检测不同方案对LOVO细胞凋亡率的影响。根据Veleriote法判断热化疗联合的作用效果；透射电镜观察细胞形态。结果：与伊立替康化疗或单纯热疗作用相比．伊立替康与43℃热疗联合后对LOVO细胞增殖有显著的抑制作用（P〈0．01），24h时流式细胞仪检测LOVO细胞的凋亡情况发现，热疗组、化疗组和热化疗组细胞凋亡率均较对照组显著升高（P〈0．01）。结论：伊立替康与热疗联合对LOVO细胞的增殖抑制具有明显的协同作用，这可能与细胞凋亡的增多有关。     

热疗提高RPMI 8226细胞对阿霉素敏感性的实验研究

本研究探讨热疗对多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226化疗敏感性的影响及其可能机制。用MTT法确定阿霉素的工作浓度。RPMI8226细胞分为对照组、热疗组(42℃)、化疗组(ADM)、热化疗组(42℃+ADM)并分别对其进行相应的处理。48小时后采用台盼蓝拒染法检测各组细胞的存活率,MTT检测热疗对肿瘤细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测细胞周期、凋亡率、细胞内阿霉素浓度和细胞表面P-gp蛋白的表达情况。以作用48小时的1/4IC50值作为实验的工作浓度。结果表明,热疗促进G0/G1期细胞进入S期和G2/M期;热疗组和热化疗组细胞表面P-gp蛋白表达减低;热化疗组细胞内的ADM浓度明显增加。结论 :热疗与阿霉素联合对RPMI8226细胞增殖有明显的抑制作用。热疗通过降低细胞表面P-gp蛋白的表达水平和增加细胞内阿霉素的药物浓度,提高RPMI8226细胞对化疗的敏感性。     

顺铂与热疗联合对胃癌细胞系体外增殖抑制作用的研究

目的 研究顺铂与热疗联合对2株胃癌细胞系SGC-7901和BGC-823细胞体外增殖的影响。方法 使用MTT法测定细胞增殖，确定顺铂的工作浓度。并以该浓度进行化疗或与热疗联合，计算24h和48h时的细胞生存率，根据Veleriote法判断热化疗联合24h或48h的作用效果；24h时流式细胞仪检测BGC-823细胞的调亡情况。结果以24h时ICA0-IC50的药物浓度作为试验的工作浓度，确定CDDP对SGC-7901和BCK3-823细胞的工作浓度分别为5μg／mL和1μg／mL。单纯的43℃热疗60min在24h时对2个细胞系均有抑制作用（P〈0．05），在48h时没有显著抑制作用。CDDP5μg／mL化疗或与热疗联合在24h和48h时对SGC-7901细胞均有显著的抑制作用（P〈0．01），C73DP5μg／mL与热疗联合作用24h时呈叫显的协同作用，在48h时呈次加作用。CDDP1μg／mL化疗或与热疗联合在24h和48h时均对BGC-823细胞都有显著的抑制作用（P〈0．01），CDDPμg／mL与热疗联合作用24h和48h均呈明显的协同作用；24h时流式细胞仪检测BGC＋823细胞的凋亡情况发现，CDDP化疗组和热化疗组细胞凋亡率均较对照组显著升高（P〈0．01）。结论 CDDP5μg／InL与43℃热疗60min联合在24h时对SCiC-7901细胞的增殖抑制具有明显的协同作用，在48h时里次加作用；CDDPμg／mL与43℃热疗60min联合BGC-823细胞的增殖抑制在24h和48h时均呈明显的协同作用，这可能与细胞凋亡的增多有关。     

定量组织速度成像评价阿霉素心脏毒性左心室功能的变化与心肌细胞凋亡相关性的研究

目的研究定量组织速度成像（QTVI）评价阿霉素心脏毒性左心室功能的变化与心肌细胞凋亡的相关性。 方法42只兔分成4组：B组10只，每周静脉注射阿霉素2mg／kg，注射2周；C组10只，同样方法给予阿霉素4周；D组12只同样方法给予阿霉素8周；A组（对照组）10只，注射同等剂量生理盐水8周。12周后对4组兔心脏进行QTVI参数测定，同时检测凋亡心肌细胞以及Bcl-2、Bax蛋白的表达。 结果C组和D组二尖瓣环平均收缩期峰值速度（Vs）、收缩期加速度（a）和舒张期峰值速度（Ve）明显减低（P〈0．01）。A组B组未见凋亡心肌细胞，C组D组心肌细胞凋亡指数明显升高（P〈0．01）。C组D组Bcl-2蛋白表达明显低于A组（P〈0.01），Bax蛋白表达明显高于A组（P〈0．01），Bcl-2／Bax明显低于A组（P〈0．01）。B组各参数无变化（P〉0．05）。 结论心肌细胞凋亡可能是阿霉素心脏毒性左心室功能减低的机制之一。     

A Km mutant of arylsulfatase A

Semi-micro techniques are presented for the genotyping of galactokinase and galactose-1-phosphate uridyltransferase. Radioactive assays are used to quantitate the levels of enzyme activity, while agarose gel electrophoresis is used to type the variants of galactose-1-phosphate uridyltransferase. All three methods can be performed on 1 ml whole blood, making the procedures ideal for use in confirmation of galactosemia or galactokinase deficiency in newborn screening programs.     

A_3亚型报告1例

1 病例简介 患者,男,55岁.2002年5月无明显原因出现乏力、面色苍白、走路活动时心跳加快等症状.2002年7月、12月先后在北京天坛医院和北医人民医院诊治,并确诊为骨髓增生异常综合征(MDS-RA).在此期间,患者接受中西医治疗,均未输血和化疗.2003年5月来本院急诊科就诊,血常规检查结果:RBC 2.02×1012/L,Hb 45g/L,Plt 62×109/L.接诊医生为患者申请悬浮红细胞2U,在交叉配血和血型复核时,发现ABO血型正、反定型不一致,正定型为"O"型,反定型为"A"型.遂将患者血液标本送至北京市红十字血液中心进一步鉴定,报告为A3亚型,建议患者输O型洗涤红细胞.至2004年6月,患者输入O型洗涤红细胞15U,无不良反应发生.     

RHD845A/1227A基因型个体家系调查分析

本研究对1例RHD845A/1227A基因型个体进行家系调查分析,并分析他们的遗传特性。通过盐水法和间接抗人球蛋白试验（IAT）检测RH（D）抗原,PCR—SSP法检测RHD1227A和RHD845A等位基因以及RHD合子型,基因测序方式分析RIHD基因编码区序列。研究结果表明：血清学检测发现1例RH（D）抗原盐水法检测阴性、IAT法检测阳性样本,经RHD基因编码序列分析发现,RHD第845位与第1227位均出现G／A碱基杂合现象,推测该个体基因型可能为RHD845A／1227A。家系调查显示,先证者父亲为RHD阴性,母亲为RHD阳性。PCR-SSP检测结果显示,父亲携带RHDl227A等位基因,基因型为RHD845A／RHD-;母亲携带RHD845A等位基因,基因型为RHD845A／RHD＋,证明先证者分别从父亲和母亲遗传RHD1227A和RHD845A等位基因,基因型为RHD845A／1227A。结论：经过家系调查分析发现了1例罕见的RHD845A／1227A基因型个体。根据家系调查证明,RHD845A和RHD1227A等位基因分别由遗传获得,而非由个体基因变异形成。     

A Cost-Benefit Analysis of A Community Free Clinic

Uninsured patients lacking access to primary and preventive care continues to be an issue. The purpose of this analysis is to describe operating costs surrounding a nurse-driven freestanding community clinic and to calculate quality of life benefits using clinically preventable burden scores. A retrospective records review of patients (n = 200) receiving care at a free clinic were used. Annual costs were $387,252. The benefit gained in quality-adjusted life years is estimated to be 57.47–203.94 yielding a return on investment ranging from $1,200,264-$8,948,184. Free clinics have sustained cost savings over time. Policies addressing this form of care are imperative.     

A comparative study of A1 pulley compliance

Background

Trigger finger is most common in the ring finger, but the reason for this is not known. We hypothesized that the compliance of the A1 pulley might be one of the factors responsible for this phenomenon. The purpose of this study was therefore to compare the compliance of the normal A1 pulley of the thumb, index, middle, ring and little fingers using human cadavers.

Methods

Eight normal thumbs, index, middle, ring and little fingers from eight fresh frozen human hand cadavers were used in this experiment. The compliance of the A1 pulley was measured by the resistance when passing a tapered metal rod through the A1 pulley. The slopes of the linear region of radial force/increasing area ratio curve were calculated and analyzed.

Findings

The mean slope of the linear region of the radial force/increasing area ratio curve was significantly different among the five digits (p < 0.05). Post hoc analysis indicated that the mean slope for the middle finger A1 pulleys was larger than the thumb and little finger A1 pulleys (p < 0.05).

Interpretation

The findings did not support our clinical hypothesis that A1 pulley stiffness would parallel the relative frequency of trigger finger by digit.     

Potential Therapeutic Applications of Adenosine A2A Receptor Ligands and Opportunities for A2A Receptor Imaging

Adenosine A_2A receptors (A_2ARs) are highly expressed in the human striatum, and at lower densities in the cerebral cortex, the hippocampus, and cells of the immune system. Antagonists of these receptors are potentially useful for the treatment of motor fluctuations, epilepsy, postischemic brain damage, or cognitive impairment, and for the control of an immune checkpoint during immunotherapy of cancer. A_2AR agonists may suppress transplant rejection and graft‐versus‐host disease; be used to treat inflammatory disorders such as asthma, inflammatory bowel disease, and rheumatoid arthritis; be locally applied to promote wound healing and be employed in a strategy for transient opening of the blood–brain barrier (BBB) so that therapeutic drugs and monoclonal antibodies can enter the brain. Increasing A_2AR signaling in adipose tissue is also a potential strategy to combat obesity. Several radioligands for positron emission tomography (PET) imaging of A_2ARs have been developed in recent years. This review article presents a critical overview of the potential therapeutic applications of A_2AR ligands, the use of A_2AR imaging in drug development, and opportunities and limitations of PET imaging in future research.     

酶联免疫吸附试验底物A中受氢体的比较研究

目的提高酶联免疫吸附试验的灵敏度.方法选择过氧化氢、过氧化脲分别作为底物A中的受氢体,用酶联免疫法确定其最佳工作浓度,进行灵敏度、精密性、稳定性的比较.结果过氧化脲在酶联免疫吸附试验中的灵敏度略高于过氧化氢.结论过氧化脲比过氧化氢更适宜作底物A中的受氢体.     

Analysis of the structure and activity of A and A,B immunoglobulin A monoclonal antibodies

A study of the serologic activity and molecular structures of three spleen-derived mouse IgA monoclonal human blood group-specific supernatants was undertaken; this was part of an evaluation of these monoclonals as blood typing reagents. The monoclonal antibodies were eluted through a precalibrated size-exclusion column, and fractions were analyzed by immunoblotting, heavy and light chain-specific enzyme-linked immunosorbent assay, and liquid- and solid-phase serologic tests. Results indicated that one of the supernatants (anti-A specificity) contained tetrameric and monomeric forms of IgA, while the other two (anti-A,B specificity) contained three higher polymeric forms (1000-4000 kDa) and one dimeric form. The tetrameric and polymeric forms showed red cell agglutinating activity, whereas the dimeric and monomeric forms did not. All forms contained heavy and light chains. The monomeric anti-A showed specific binding to appropriate red cells in a solid-phase assay, but the dimeric anti-A,B fractions did not. Purified fractions stored at 4 degrees C did not show any equilibration toward other forms, which indicated that the molecules are stable once secreted. The use of such antibodies as blood grouping reagents requires careful monitoring to ensure that high proportions of nonagglutinating molecular weight forms are not produced, as they could compromise the performance of the reagent by binding to red cell antigen in competition with the agglutinating forms.