葛根素对脑缺血大鼠神经元凋亡及脑源性神经营养因子的影响

目的观察葛根素（Pue）对局灶脑缺血大鼠脑源性神经营养因子（BDNF）表达的影响,进一步探讨葛根素的神经保护作用。方法制作大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,30只SD雄性大鼠被随机分为假手术组、缺血组、Pue治疗组。应用TTC染色观察梗死体积,TUNEL染色检测凋亡细胞数,免疫组化方法观察Pue治疗组及脑缺血组BDNF阳性细胞数,并进行图像分析。结果与假手术组相比,缺血组及Pue治疗组BDNF阳性细胞均显著增加。且Pue治疗组阳性细胞数又显著高于缺血对照组（P〈0.05）。结论Pue的神经保护作用可能与其能提高内源性BDNF的表达水平有关。     

阿司匹林预处理对大鼠局灶性脑缺血Bcl-2、Bax表达的影响

目的 探讨阿司匹林预处理对缺血性脑损伤的保护作用机制.方法 选用健康雄性sD大鼠,随机分为假手术组、缺血对照组和阿司匹林预处理组.以线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉(middle cerebral artery occlusion,MCAO),制成局灶性脑缺血模型.术后24 h用免疫组化SABC法染色,分别统计大脑皮质每高倍镜视野Bcl-2、Bax呈阳性表达的细胞数.结果 阿司匹林顸处理组每高倍镜视野Bcl-2阳性细胞数为(48.50±10.44),与缺血对照组(19.63±3.52)比较明显增加,差异具有显著性(P<0.01);阿司匹林预处理组每高倍镜视野Bax阳性细胞数为(5.50±1.14),与缺血对照组(27.1±5.08)比较明显减少(P<0.01).结论 阿司匹林预处理对随后的局灶缺血性脑损伤具有保护作用,其保护作用机制可能与提高Bcl-2表迭、抑制Bax表达而减少细胞凋亡有关.     

吸烟对大鼠局灶性脑缺血半暗带内细胞凋亡及Fos蛋白表达的影响

目的 探讨吸烟对脑缺血半暗带内细胞凋亡和Fos蛋白表达的影响.方法 雄性Wistar大鼠48只,随机分为假手术组、吸烟组、缺血组、吸烟+缺血组,每组12只.吸烟组和吸烟+缺血组大鼠连续吸烟12周,吸烟量为20支/d.假手术组、缺血组大鼠不吸烟.12周后,缺血组和吸烟+缺血组大鼠建立大脑中动脉栓塞模型.红四氮唑(TTC)染色确定脑缺血半暗带位置,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组织化学检测Fos蛋白表达水平.结果 TTC染色证实缺血半暗带位于大脑矢状裂至外侧裂上1/3的皮质组织.假手术组、吸烟组、缺血组和吸烟+缺血组的凋亡细胞数分别为2.54±0.37、20.65±3.26、17.07±2.92和44.92±4.67.与假手术组相比,吸烟组和缺血组的凋亡细胞数均明显增加(P<0.05).吸烟+缺血组凋亡细胞数增加更为明显,高于吸烟组和缺血组(P<0.05),吸烟和缺血对于增加脑细胞凋亡表现协同作用(P<0.05).假手术组仅见大脑皮质个别散在分布的Fos蛋白阳性细胞.与假手术组相比,吸烟组、缺血组和吸烟+缺血组的Fos蛋白阳性细胞数量显著增加,平均灰度值显著降低(P<0.05),吸烟+缺血组上述变化最为显著.结论 吸烟增加缺血时脑细胞Fos蛋白表达水平,增加凋亡细胞的数量,加重缺血半暗带脑组织的损伤.     

雌激素对去卵巢大鼠局灶性脑缺血神经细胞凋亡及Bcl-2表达的影响

目的:探讨雌激素对大鼠局灶性脑缺血神经细胞凋亡与Bcl-2表达的影响.方法:雌性Wistar大鼠30只均于脑缺血手术前7 d切除双侧卵巢,随机等分为假手术组、手术对照组及雌激素用药组.采用大脑中动脉阻断制成局灶性脑缺血模型.缺血2 h再灌注24 h后断头取脑,应用TUNEL染色及SP免疫组织化学方法观察并测定梗死灶体积、凋亡细胞数及Bcl-2的表达.结果:假手术组未发现脑梗死灶和凋亡细胞及Bcl-2阳性细胞.雌激素用药组较手术对照组脑梗死体积缩小((59.32±8.95)mm3 vs(96.93±11.63)mm3,P＜0.05),凋亡细胞数减少((96±12)个vs(126±9)个,P＜0.05);Bcl-2表达增强(P＜0.05).结论:雌激素通过上调Bcl-2的表达抑制脑细胞凋亡,具有脑保护作用.     

高压氧对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑神经细胞凋亡及bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨高压氧对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑神经细胞凋亡及bcl-2蛋白表达的影响.方法:选取健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为假手术组(10只)、缺血对照组(25只)及缺血再灌注加高压氧治疗组(HBO组,25只).采用动脉线栓法制成大脑中动脉(MCA)局灶性脑缺血再灌注模型.用四氮唑染色观察局灶性脑缺血再灌注后120 h各组大鼠脑梗死灶的大小,应用TUNEL法及免疫组化方法检测缺血3 h再灌注6 h、24 h、48 h、72 h、120 h大鼠脑组织神经细胞凋亡及bcl-2蛋白的表达.结果:假手术组未发现脑梗死灶,凋亡细胞及bcl-2蛋白表达阴性.HBO组缺血再灌注后120 h大鼠梗死灶体积(15.9±4.2)明显小于缺血对照组(26.8±4.9)(P＜0.01);HBO组大鼠再灌注24 h,48 h,72 h各时点凋亡指数均低于缺血对照组,bcl-2蛋白表达均高于缺血对照组(P＜0.05).结论:脑缺血再灌注后凋亡细胞增多,bcl-2蛋白表达增强,高压氧治疗可以上调bcl-2蛋白的表达,抑制脑神经细胞凋亡,具有脑神经保护作用.     

脂肪组织来源的神经干细胞移植对大鼠局灶性脑缺血细胞凋亡及Caspase-3蛋白表达的影响

目的 探讨人脂肪组织来源的神经干细胞移植对大鼠局灶性脑缺血细胞凋亡及Caspase-3蛋白表达的影响.方法 线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)2 h再灌注模型.60只健康雄性SD大鼠随机分为4组:正常组(6只),假手术组(6只),缺血对照组(24只)和移植治疗组(24只).后两组又分为缺血2 h再灌7、14、21和28 d组(各6只).体外培养脂肪基质细胞,诱导分化为神经干细胞.造模成功后24h,移植治疗组经尾静脉移植人脂肪组织来源的神经干细胞悬液(细胞浓度为2×106/mL),缺血对照组经尾静脉注射生理盐水,假手术组不做任何处理.TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化SABC法检测Caspase-3表达.结果 与缺血对照组比较,移植治疗组各时间点(7、14、21和28 d)的细胞凋亡数均明显减少(均P<0.01),Caspase-3蛋白表达均明显减少(均P<0.01).结论 脂肪组织来源的神经干细胞可能通过下调Caspase-3蛋白表达,减少局灶性脑缺血细胞凋亡,对脑缺血再灌注损伤后的神经细胞起保护作用.     

胰岛素样生长因子-1对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及Bcl-2,Bax蛋白表达的影响

目的研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及Bcl-2,Bax蛋白表达的影响,探讨IGF-1对脑缺血再灌注损伤的保护作用机制.方法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型.30只Wistar雄性大鼠被随机分为假手术组、缺血组及IGF-1治疗组.于缺血10min后经尾静脉给予IGF-1 10μg,应用TTC染色观察梗死灶体积,应用免疫组化染色和TUNEL法检测Bcl-2,Bax蛋白表达及神经凋亡细胞.结果与缺血组比较,IGF-1治疗组梗死体积明显减少(P＜0.01),凋亡细胞数明显减少(P＜0.01),Bcl-2蛋白表达明显升高(P＜0.01),Bax蛋白表达明显降低(P＜0.01).结论IGF-1通过增加Bcl-2蛋白表达,减少Bax蛋白表达,减少神经细胞凋亡,对脑缺血再灌注损伤起保护作用.     

原花青素对局灶性脑缺血后凋亡基因Fas表达的影响

目的 探讨原花青素(Procyanidins,PC)对局灶性脑缺血大鼠脑组织中凋亡基因Fas表达的影响.方法 随机将30只大鼠均分为假手术组、模型组、PC-1组(50 mg/kg)、PC-2组(100 mg/kg)和PC-3组(200 mg/kg).各组术前2周及1 h灌胃给予相应药物后以线栓法制备持续性局灶性脑缺血模型,24 h后断头取脑观察脑组织形态,并用免疫组化SABC法染色,统计大鼠海马CAl区每高倍镜视野Fas阳性表达率[阳性细胞数/(阳性细胞数+阴性细胞数)×100%].结果 ①脑组织病理变化:PC各剂量组与模型组相比,海马CA1区神经细胞存活数明显增多[(75.3±4.1)/HP、(76.3±5.0)/HP、(82.5±7.1)/HP,(62.8±6.8)/HP,P<0.01].②免疫组化结果显示PC组可以下调Fas阳性表达率,与模型组比较有显著性差异(P<0.01).结论 PC对局灶缺血性脑损伤具有保护作用,其保护作用机制可能与抑制Fas活性,从而减少细胞凋亡有关.     

应用bcl-2基因及GDNF治疗大鼠脑缺血的研究

目的 观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)与bcl-2基因对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤(CIRI)的影响.方法 取健康Wistar大鼠40只,采用Longa改良栓线法制成大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,缺血2 h后再灌注,随机分4组:对照组、bcl-2组、GDNF组、bcl-2+GDNF组,于再灌注3 h后经侧脑室注射GDNF 10μl、经颈动脉注射pLXSN-bcl-2质粒10μg,MCAO后3d(n=5),14 d(n=5),通过免疫组化染色检测bcl-2蛋白和GDNF的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况.结果 bcl-2+GDNF组bcl-2蛋白表达与GDNF表达水平均较其他组表达明显增加(P<0.05),bcl-2组、GDNF组较对照组明显增加(P<0.05);脑内细胞凋亡GDNF+bcl-2组较其他组明显减少(P<0.05),bcl-2组、GDNF组较对照组明显减少(P<0.05).结论 bcl-2基因和GDNF可能通过减少神经细胞凋亡,促进bcl-2与GDNF蛋白表达,增强对局灶性缺血脑组织的保护能力,加速中枢神经损伤的修复;bcl-2基因与GDNF协同作用,促使神经细胞在脑内的凋亡进一步减少,从而避免脑缺血再灌注后脑细胞进一步损伤.     

米诺环素对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡的抑制作用

目的 观察米诺环素对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡的影响.方法 30只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为假手术组、氯化钠溶液组、预处理组、大剂量组、小剂量组,每组6只.采用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型.采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学、Hoechst染色、磁共振T2加权像等方法,了解米诺环素对缺血后细胞凋亡的影响.结果 假手术组可见少量半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3阳性细胞,氯化钠溶液组缺血灶周围可见大量caspase-3阳性细胞.与假手术组相比,氯化钠溶液组的caspase-3光密度值显著升高(P＜0.01);与氯化钠溶液组相比,预处理组、大剂量组、小剂量组的caspase-3光密度值均显著降低(P值分别＜0.05、0.01).假手术组大鼠大脑皮层只有少量凋亡细胞,氯化钠溶液组大鼠脑缺血灶周围可见大量凋亡细胞.与假手术组相比,氯化钠溶液组的细胞凋亡率显著降低(P＜0.01);与氯化钠溶液组相比,预处理组、大剂量组、小剂量组的细胞凋亡率均显著升高(P值均＜0.01).与氯化钠溶液组相比,预处理组、大剂量组、小剂量组的相对脑缺血体积均显著缩小(P值分别＜0.05、0.01).与假手术组相比,氯化钠溶液组白细胞介素-1β转化酶(ICE)的表达显著升高(P＜0.05);与氯化钠溶液组相比,预处理组、大剂量组、小剂量组ICE的表达均显著降低(P值均＜0.05).结论 米诺环素能抑制缺血后细胞凋亡.     

针刺预处理对大鼠局灶性脑缺血的抗细胞凋亡作用

目的:探讨针刺预处理对大鼠局灶性脑缺血的抗细胞凋亡作用. 方法: 利用大脑中动脉线栓法制作局灶性脑缺血模型,实验动物随机分为假手术组(Sham),单纯缺血再灌注组(I/R),针刺预处理后缺血再灌注组(EA I/R),其中EA I/R组缺血前行百会穴重复电针刺激(30 min/d×5 d). 行TTC染色观察脑梗死体积,利用免疫组化及TUNEL法观察缺血周边区域Bcl-2蛋白表达及神经细胞凋亡的情况. 结果:与I/R 组相比,EA I/R组脑梗死体积明显缩小(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达显著增加(P<0.01),神经元的凋亡数目明显减少(P<0.01). 结论:针刺预处理可以减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤,可能是通过促进Bcl-2蛋白的表达,减少神经元的凋亡来实现的.     

胶质细胞源性神经营养因子对局灶性脑缺血大鼠海马区环氧酶2表达的影响

目的 观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对局灶性脑缺血再灌注损伤(CIPI)大鼠海马环氧酶2(COX-2)表达的影响.方法 大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,立体定位下侧脑室注射GDNF,观察模型对照组、生理盐水组、GDNF组大鼠海马COX-2表达.结果 GDNF组海马COX-2表达明显减少,与模型对照组、生理盐水组比较差异显著(P<0.05).结论 GDNF可能通过减少海马COX-2表达,增强对局灶性缺血脑组织的保护能力,加速中枢神经损伤的修复.     

腺苷预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后胶质源性神经营养因子表达的影响

目的观察腺苷预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注后胶质源性神经营养因子表达的影响。方法制作大鼠大脑中动脉缺血2h后再灌注损伤模型。SD大鼠60只，随机分为假手术组（F组）、缺血再灌注组（IR组）、腺苷预处理组（AP组），依术后处死动物时间的不同，每组再分为4个亚组2、6、24、72h组（F26,24,72h，IR2、6、24、72h，AP2、6、24、72h），每个亚组5只动物。结果用免疫组化法检测脑缺血再灌注组织中胶质源性神经营养因子（GDNF）表达。结果F组GDNF阳性细胞表达极弱，IR组和AP组在脑缺血再灌注后2h在缺血半暗带周围出现GDNF弱阳性表达，6h后GDNF阳性细胞表达增多，24h GDNF阳性细胞表达达到高峰，72hGDNF阳性细胞表达开始减少。AP各亚组GDNF阳性细胞数与F和IR各相应亚组GDNF阳性细胞数比较差异有统计学意义（P〈0．05），IR各亚组GDNF阳性细胞数与F各相应亚组GDNF阳性细胞数比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论腺苷预处理能显著增强大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后神经细胞的蛋白合成和分泌功能、增加脑组织中胶质细胞源性神经营养因子的表达。     

新生大鼠脑白质损害时神经胶质细胞凋亡与神经营养因子GDNF的表达变化

目的 探讨新生大鼠脑白质损害时神经胶质细胞凋亡与内源性胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的变化.方法 实验组和对照组各45 只大鼠分别于缺氧缺血后30 min、1 h、4 h、12 h、1 d、3 d、7 d、14 d及21 d处死,免疫组化(SP)法检测GDNF,TUNEL法测定细胞凋亡.结果 新生大鼠脑白质损害时,细胞凋亡在缺氧缺血后3 d达到高峰,与对照组比较,在4 h、12 h、1 d、3 d、7 d均有统计学意义(均P<0.05).实验组GDNF表达在缺氧缺血后7 d 达到高峰,与对照组相比,在3、7、14 d有统计学意义(P<0.05).结论 新生大鼠脑白质损害时,GDNF于细胞凋亡的高峰时间开始表达,与此同时,细胞凋亡逐渐减少.表明在缺氧缺血所致的新生大鼠脑白质损害时,内源性GDNF的表达升高可能通过抑制细胞凋亡来发挥保护作用,并对后期的神经修复起一定作用.     

艾司西酞普兰对抑郁模型大鼠海马胶质细胞源性神经营养因子及细胞凋亡相关因子表达的影响

目的 探讨艾司西酞普兰对抑郁模型大鼠海马胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)及细胞凋亡相关因子表达的影响.方法 雄性SD大鼠按随机数字表分为对照组(A)、对照加药组(B)、抑郁组(C)和抑郁加药组(D),以慢性轻度不可预见性的应激结合孤养建立抑郁动物模型,应激同时B、D组予艾司西酞普兰(10 mg/kg)干预,A、C组予等体积生理盐水灌胃处理,共28 d.TUNEL法检测海马细胞凋亡情况,用实时荧光PCR方法检测海马GDNF、Bax、Bcl-2、Caspase3 mRNA的表达.结果 ①与A组[(12.0±1.83)个]比,C组[(19.3±1.77)个]海马细胞凋亡数显著增加(P＜0.01),而B组[(11.9±1.91)个]细胞凋亡数无明显差异(P＞0.05);与C组比,D组[(12.7±1.77)个]细胞凋亡数显著减少(P＜0.01).②与A组比,C组海马GDNF、Bcl-2 mRNA表达减少(P＜0.01),Bax、Caspase3 mRNA表达增加(P＜0.01);与C组比,D组GDNF、Bcl-2 mRNA表达增加(P＜0.01),Bax、Caspase3 mRNA表达降低(P＜0.01).结论 艾司西酞普兰可改善抑郁大鼠的抑郁行为及预防海马细胞凋亡,其机制可能是通过增加海马GDNF mRNA的表达,上调Bcl-2及下调Bax、Caspase3 mRNA的表达有关.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤时SB202190的保护作用

目的:研究SB202190对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响,探讨SB202190在脑缺血保护中的作用及可能机制.方法:采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型.雄性SD大鼠.随机分成5组:空白对照组、假手术组、缺血再灌注组、给药组及溶媒组.每组6只大鼠,给药组及溶媒组分别侧脑室注射p38MAPK特异性抑制剂SB202190及1%DMSO.各组分别进行大鼠神经功能的行为学评分:Nissl染色观察缺血区细胞形态变化;免疫组化检测Bcl-2、Bax阳性神经元变化.结果:缺血再灌注后24 h大鼠神经功能评分显著低于假手术组,有统计学差异(P<0.05),给药组大鼠神经功能评分显著高于缺血再灌注组,有统计学差异(P<0.05).而溶媒组神经功能评分与缺血再灌注组相比无统计学关差异(P>0.05).再灌注后24 h镜下可见大部分细胞萎缩,胞浆减少,胞核浓染,细胞间隙增大.给药组与缺血再灌注组相比再灌注后24 h细胞形态较好,坏死程度较轻.免疫组化检测结果:空白对照绀及假手术组可见极少数Bcl-2、Bax阳性细胞散在分布,两组间无统计学差异(P>0.05);再灌注后24 h可见大量Bax阳性细胞,与假手术组相比有统计学差异(P<0.05),而Bcl-2阳性细胞无明显变化(P>0.05);与缺血再灌注组比较给药组再灌注后24 h Bax阳性细胞明显减少.有统计学差异(P<0.05),Bcl-2阳性细胞与缺血再灌注组比较明显增多,有统计学差异(P<0.05).结论:p38MAPK特异性抑制剂SB202190可以改善大鼠局灶性脑缺血冉灌注后产生的神经功能缺损症状及神经细胞形态学改变:SB202190能改变局灶性脑缺血再灌注后Bcl-2及Bax的表达,这可能是SB202190抗细胞凋亡的机制之一.     

替勃龙对大鼠脑缺血再灌注后神经元凋亡的影响

目的:研究雌激素对缺血性脑损害的神经保护作用是否与抗神经元凋亡有关。方法:30只雌性成年SD大鼠,随机分为假手术组(sham),手术对照组(OVX),替勃龙组\[0.25 mg/(kg·d)\];采用大鼠大脑中动脉闭塞制成局灶性脑缺血模型。在缺血2 h、再灌注24 h后立即断头取脑,应用2,3,5-三苯基氯化四唑(TTC)染色观察脑梗死体积,TUNEL法检测凋亡细胞,链酶菌抗生物素蛋白过氧化物酶(SP)法检测抗凋亡基因Bcl-2、细胞凋亡诱导因子Bax和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶caspase-3的表达。结果:替勃龙用药组较手术对照组脑梗死体积显著缩小(P<0.05),TUNEL阳性细胞数减少(P<0.01),Bcl-2阳性细胞增多(P<0.01),Bax及caspase-3阳性细胞减少(P<0.01)。结论:替勃龙可抑制去卵巢大鼠局灶性脑缺血再灌注时神经细胞凋亡,具有神经保护作用。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后P-erk表达及神经元凋亡的变化

目的 研究磷酸化细胞外信号调节激酶(phospho-excelluar signal-regulated kinase,P-erk)在局灶性脑缺血再灌注中的作用. 方法 建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型;HE染色观察脑组织形态病理学变化;免疫组化法检测大鼠脑缺血再灌注不同时间磷酸化ERK的表达;TUNEL染色检测神经元凋亡. 结果在脑缺血再灌注大鼠检测到磷酸化ERK在梗死中心灶和缺血半暗带都存在阳性表达,于再灌注6 h达到峰值,12 h后逐渐下降;而凋亡细胞于再灌注24 h开始有明显的阳性细胞增加,48 h细胞凋亡达到高峰(P<0.01). 结论 局灶性脑缺血再灌注后磷酸化ERK表达增加,提示缺血再灌注损伤可能导致ERK活性上调,参与缺血后神经细胞凋亡和非程序性死亡过程.     

金纳多注射液对局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及相关蛋白的动态影响

目的:研究金纳多注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响.方法:建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型.60只Wistar雄性大鼠被随机分为假手术组、缺血组和金纳多治疗组.缺血组和金纳多治疗组分别在脑缺血再灌注后6,12,24,48 h处死,应用免疫组化染色及原位细胞凋亡检测脑组织Bcl-2、Bax蛋白表达及凋亡细胞数.结果:缺血组和金纳多治疗组凋亡细胞数于脑缺血再灌注后24h达高峰,金纳多治疗组各时点凋亡细胞数均明显少于缺血组(P＜0.01).缺血组和金纳多治疗组Bcl-2表达于脑缺血再灌注后12 h达高峰,金纳多治疗组各时点Bcl-2蛋白表达均明显高于缺血组(P＜0.01).缺血组和金纳多治疗组Bax蛋白表达于脑缺血再灌注后24h达高峰,金纳多治疗组各时点Bax蛋白表达均明显低于缺血组(P＜0.01).结论:金纳多注射液可能通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,对脑缺血再灌注损伤起保护作用.     

人参皂苷Rg1对成年大鼠脑缺血海马区神经干细胞的影响

目的:观察人参皂苷Rg1对成年大鼠脑缺血后海马区神经干细胞增殖分化的影响,探讨其促进神经细胞再生的作用.方法:将60只Wistar大鼠随机分为假手术组、单纯缺血组及人参皂苷Rg1治疗组.用Longa线栓法制作大鼠脑中动脉闭塞模型.通过腹腔注射5-溴脱氧尿苷(BrdU)的方法标记神经干细胞,用免疫单标及双标免疫荧光技术观察人参皂苷Rg1对局灶性脑缺血后海马区BrdU,BrdU/β-Ⅲ型微管蛋白(Tuj-1)和BrdU/波形蛋白(Vimentin)免疫活性的影响,并计数作定量分析.结果:免疫组织化学染色显示脑缺血后海马区存在BrdU阳性细胞.单纯缺血组7 d(28.4±3.0)时,与同组1 d(12.7±1.2),3 d(20.3±2.7)相比较,差异具有统计学意义(P<0.01),且缺血7 d后阳性细胞达高峰,14 d(17.2±1.2)时可见BrdU阳性细胞急剧减少.应用人皂苷Rg1后BrdU阳性细胞数明显增多,人参皂苷Rg1治疗组1 d(15.1±1.5),3 d(27.2±3.3),7 d(37.1±4.2),14 d(23.6±2.7)与同时间点单纯缺血组相比差异均具有统计学意义(P<0.01);人参皂苷Rg1治疗组BrdU/Tuj-1,BrdU/Vimentin阳性细胞数分别为(14.3±0.5),(15.1±0.5)个/视野,较单纯缺血组(7.2±0.3),(8.9±0.4)个/视野明显增多(P<0.01).结论:人参皂苷Rg1能诱导海马区神经干细胞增殖、分化,提示其具有促进神经神经细胞再生的作用.