UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中奥拉帕利的浓度及其药动学研究

目的 建立一种具有高灵敏度和高选择性测定大鼠血浆中奥拉帕利药物浓度的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,并研究奥拉帕利在大鼠体内的药动学特征。方法 大鼠血浆样品采用乙腈沉淀法去除蛋白,色谱柱为Acquity UPLC BEH C₁₈柱 (2.1 mm×50 mm,1.7 μm),流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱。质谱采用电喷雾离子源,多反应监测正离子模式,奥拉帕利定量离子对为m/z 435.19→m/z 367.1。以50 mg·kg^-1奥拉帕利经大鼠灌胃给药后于不同时间点采集血样,利用建立的方法进行检测分析,并用DAS2.0软件计算药动学参数。结果 血浆中奥拉帕利在(0.6~1 821) ng·mL^-1内线性关系良好,定量限为0.15 ng·mL^-1,日内、日间精密度RSD均小于5.5%,准确度在95.4%~99.2%内,平均提取回收率为84.2%~96.0%,基质效应在91.4%~108.8%内。结论 建立的方法灵敏度高、结果准确,可用于大鼠血浆中奥拉帕利质量浓度的测定及其药动学研究。     

基于UPLC-MS/MS的芍药苷及其代谢产物在大鼠体内药动学研究

目的建立快速、灵敏、简便的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定大鼠血浆中芍药苷及其代谢产物芍药内酯苷的暴露量,并研究单次ig给予大鼠低、中、高剂量(20、60、120 mg/kg)的芍药苷水溶液后,芍药苷、芍药内酯苷在大鼠体内的药动学特征。方法以栀子苷为内标,血浆样品经甲醇(含0.1%甲酸)沉淀蛋白后,通过ACQUITY UPLC BEH-C_(18)柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相梯度洗脱,色谱运行时间为4.5 min。采用电喷雾离子源(ESI),负离子扫描模式,以多反应监测方式(MRM)进行定量测定。结果芍药苷、芍药内酯苷的标准曲线的线性范围均为2.00~400 ng/m L,定量下限均为2.00 ng/m L,2者日内和日间精密度RSD均小于9.10%。芍药苷在低、中、高3个剂量给药组中的t_(max)分别为(1.56±0.62)、(1.13±0.35)、(1.28±1.92)h,Cmax分别为(85.45±47.49)、(390.75±139.26)、(1 223.5±420.15)μg/L;其中芍药苷水溶液低、中剂量组未检测到代谢产物芍药内酯苷,芍药苷水溶液高剂量组芍药内酯苷的tmax为(1.81±0.53)h,C_(max)为(19.81±8.98)μg/L。结论本方法简便、准确、专属性强,适用于芍药苷和芍药内酯苷在大鼠体内的药动学研究。     

基于UPLC-MS/MS测定苦参酮在大鼠血浆中浓度及药动学研究

摘要: 目的 建立大鼠血浆中苦参酮UPLC-MS/MS测定方法,研究大鼠静脉、口服苦参酮后的体内药动学。方法 采用ACQUITY UPLC? HSS T3 C18 色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱,流速0.2 mL?min-1,待测血浆样品采用乙酸乙酯液液萃取法制备。MS/MS采用电喷雾离子化电离源(ESI),多反应离子监测(MRM),负离子方式检测,芦丁为内标。监测离子对分别为m/z 437.2→161.1 (苦参酮) 和 m/z 609.3→300.3 (芦丁)。DAS 2.0软件处理数据。结果 苦参酮在(0.1-1000) ng?mL-1的浓度范围内有良好的线性关系(R2=0.996 5);精密度 < 12.9%,准确度在-7.4%-11.7%之间,平均提取回收率>79.2%。苦参酮静脉给药后T1/2z 为(4.0±0.3) h,AUC0→∞为(0.64±0.26) μg ? mL-1 ? h,MRT0→∞为(3.0±0.4) h;口服后T1/2z为(5.6±2.1) h,Tmax为(1.7±1.2) h ,AUC0→∞为(1.4 ± 0.3) μg ?mL-1?h,MRT0→∞为(6.1±1.0) h;KR在大鼠体内的绝对生物利用度约10.7%。结论 所建立的UPLC-MS/MS分析方法简便、快速、灵敏、准确,可用于苦参酮大鼠体内药物动力学研究,苦参酮大鼠口服绝对生物利用度偏低。     

红景天苷注射剂的制备及其在大鼠体内药动学研究

 目的 制备红景天苷注射剂并研究其在大鼠体内的药动学。方法 以高纯度红景天苷为原料,通过对活性炭用量以及灭菌条件的选择,确定了红景天苷注射剂的制备工艺。按照《中国药典》要求,对注射剂进行质量研究和稳定性考察。通过对大鼠尾静脉给药,用高效液相色谱法测定血药浓度,获得红景天苷的药-时曲线,并利用DAS 3.0计算其在大鼠体内的药动学参数。结果 注射剂工艺中活性炭用量为0.1% （1 000 mL注射液中含1 g活性炭）;灭菌温度为115 ℃,时间为30 min,该工艺制得的红景天苷注射剂为无色澄明液体,红景天苷含量在标示量的90%～110%内。稳定性结果显示,红景天苷注射剂在加速实验6个月内、长期实验12个月内稳定。建立了血药浓度的HPLC分析方法,其最低检测浓度为0.05 μg·mL^-1,最低定量浓度为0.2 μg·mL^-1。红景天苷血药浓度在0.5～400.0 μg·mL^-1内线性关系良好（r=0.999 9）,平均回收率大于95%;药动学结果显示,消除半衰期为7.6 min,表观分布容积为324.0 mL·kg^-1,清除率为32.0 mL·min^-1·kg^-1。结论 红景天苷注射剂的制备工艺可行,成品质量合格、稳定;红景天苷在大鼠体内半衰期短,清除率较大,适宜制成注射剂作为临床急救用药。     

UPLC-MS/MS法测定咳速停糖浆中3种兴奋剂类生物碱

目的建立同时测定咳速停糖浆中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱以及磷酸可待因3种有效成分的量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法。方法用Agilent Zorbax RRHD Eclipse Plus C18(50 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以甲醇-0.1%甲酸的水溶液为流动相,体积流量0.30 mL/min。在电喷雾电离(ESI)正离子模式下,采用的是多重反应监测模式(MRM)进行检测。结果盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱以及磷酸可待因的线性范围分别为0.001 6⁴.5 mg/L、0.000 84.5 mg/L、0.000 8⁴.8 mg/L、0.0044.8 mg/L、0.004².0 mg/L;检出限分别为0.8μg/L、0.4μg/L、1.2μg/L;3种成分的加样回收率为91.1%2.0 mg/L;检出限分别为0.8μg/L、0.4μg/L、1.2μg/L;3种成分的加样回收率为91.1%¹04%;相对标准偏差均不大于2.6%。结论该方法简便、准确、快速、灵敏度高,已成功地用于实际的样品分析。     

LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中红景天苷和酪醇及其药物动力学研究

目的 建立大鼠血浆中红景天苷及其苷元酪醇的测定方法,并研究其药物动力学。方法 取大鼠10只灌胃给予红景天苷100 mg·kg-1,检测给药前和给药后24 h内红景天苷及酪醇的血浆浓度,并计算其药动学参数。采用液相色谱-串联质谱法,以水杨苷为内标,色谱柱为Alltima C18,流动相:甲醇-水(80 ∶ 20),等度洗脱,流速为0.3 mL·min-1,柱温为40 ℃,电喷雾负离子源,红景天苷、酪醇和水杨苷的选择检测离子质荷比(m/z)分别为299.2→119.6,137.1→119.0和285.1→122.9。结果 红景天苷和酪醇检测浓度的线性范围分别为50～5000(r=0.9991)、5～500(r=0.9994) ng·mL-1,最低检测限分别为6.25,2.5 ng·mL-1;药动学参数:红景天苷的t1/2β为(5.67±0.84) h,Cmax为(3914.7±915.8),AUC0→24 h为(8434.2±213.8) ng·h·mL-1;酪醇的t1/2β为(6.24±0.91) h,Cmax为(289.3±44.6) ng·mL-1,AUC0→24 h为(1236.7±73.4) ng·h·mL-1。结论 本方法专属性强、灵敏度高、准确性好,可用于红景天苷和酪醇的血药浓度测定,红景天苷和酪醇在大鼠体内的药动学符合二室模型特征。     

基于代谢组学的黑老虎果实发育过程中花青苷组分动态分析

[目的]对黑老虎三个不同发育时期果实中的花青苷组分进行定性和定量分析,探讨花青苷组分、含量与黑老虎发育过程中果实色泽的关系。[方法]通过超高效液相色谱-串联质谱技术建立靶向代谢组学检测方法,分析黑老虎果实中花青苷成分的动态变化。[结果]黑老虎果实发育过程的幼果期（S1）、转色期（S2）和着色期（S3）,果实颜色分别是绿色、淡红色和紫红色,而花青苷的总含量由S1时期未检测出花青苷,增加到S2和S3时期的（6.35±0.83）μg/g和（152.45±18.62）μg/g。代谢组学分析结果表明,黑老虎果实中有17种花青苷组分,其中矢车菊素3-O-芸香糖苷、矢车菊素3-O-葡萄糖苷和飞燕草素3-O-葡萄糖苷为黑老虎果实中的主要花青苷组分,分别占总花青苷含量的51.48%（含量为56.97μg/g）、29.83%（含量为32.13μg/g）和10.50%（含量为10.36μg/g）。[结论]本研究鉴定了黑老虎果实不同发育时期花青苷的类别和含量,对黑老虎果实色泽形成的研究和进一步开发利用提供了科学依据。     

HPLC-MS/MS测定血浆中的牡荆素及其大鼠体内药动学研究

目的:建立高效液相色谱-质谱/质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定血浆中牡荆素的方法,并用于大鼠药动学研究。方法:采用Capcell Pak C18柱(50 mm×2.0 mm,I.D.,5μm),柱温25℃,流动相为甲醇∶水(95∶5,0.1%甲酸),流速为0.2 mL/min。用负离子电喷雾电离源,多反应方式检测,选择监测的离子反应为m/z 431～311(牡荆素)和m/z 269～225(大黄素,内标)。结果:牡荆素在0.5～2 000 ng/mL线性关系良好,相关系数为0.9960,最低定量限为0.5 ng/mL。加样回收率76.1%～89.0%,日内日间精密度RSD均小于11%。结论:该方法分析速度快、操作简单、灵敏度高,可用于大鼠血浆中牡荆素的浓度测定及药动学研究。     

基于UPLC-MS/MS分析技术的姜黄素纳米粒大鼠体内药动学研究

目的研究磷脂酰丝氨酸(PS)修饰的姜黄素纳米粒(Cur-m NLC)在大鼠体内的药动学特点,并与无PS修饰的姜黄素纳米粒(Cur-NLC)及游离姜黄素(Cur)溶液在大鼠体内的药动学特征进行比较。方法 SD大鼠ip给予Cur-m NLC、Cur-NLC和Cur溶液(剂量以Cur计均为10 mg/kg),于给药后不同时间点大鼠眼眶取血,采用UPLC-MS/MS法测定血浆中Cur的量,并采用DAS软件计算其药动学参数。结果 Cur溶液组、Cur-NLC组和Cur-m NLC组的达峰浓度(Cmax)分别为(29.453±1.146)、(20.045±0.818)、(15.865±0.409)μg/L,平均滞留时间(MRT0~∞)分别为(18.196±1.456)、(18.196±1.456)、(89.252±12.049)h,Cur-m NLC的药时曲线下面积(AUC0~∞)为(933.014±106.766)μg·h/L,分别是Cur溶液[(362.193±17.574)μg·h/L]和Cur-NLC[(632.026±145.224)μg·h/L]的AUC0~∞的2.58倍和1.48倍。结论与Cur溶液组相比,Cur-NLC和Cur-m NLC组大鼠血浆Cmax值较低,但Cur-NLC和Cur-m NLC中药物清除比游离药物组慢;与Cur-NLC相比,Cur-m NLC具有更好的缓释作用,极大提高了Cur的生物利用度。     

HPLC-MS/MS测定大鼠血浆中的芍药苷及其药动学研究

目的：建立HPLC-MS／MS分析方法测定大鼠血浆中的芍药苷含量，并用于研究当归对赤芍主要有效成分芍药苷的药动学影响。方法：质谱检测方式一：多反应离子监测，选择监测的离子为m／z450～m／z327（芍药苷）和m／z388～m／z225（栀子苷）。大鼠分别灌胃赤芍煎液和赤芍及当归煎液，芍药苷剂量均为294．78mg&#183;kg^-1。HPLC-MS／MS法测定芍药苷的血药浓度，并计算芍药苷药动学参数。结果：单独服用赤芍煎液时芍药苷的主要药动学参数分别为Cmax（1．55&#177;0．53）mg&#183;L^-1，Tmax（0．9&#177;0．3）h，t1/2（1．51&#177;0．63）h，MRT（3．08&#177;0．74）h，AUC0→T（4．68&#177;0．85）mg&#183;h^-1&#183;L^-1。同时服用当归煎液和赤芍煎液时芍药苷的Cmax，Tmax，t1/2,MRT，AUC0→T，分别为（0．93&#177;0．42）mg&#183;L^-1。，（1．5&#177;0．8）h，（3．08&#177;1．79）h，（5．19&#177;1．95）h，（3．36&#177;0．56）mg&#183;h-1&#183;L^-1。两组药动学参数中，MRT，Cmax和AUC0→T具有显著性差异（P〈0．05）。结论：当归能显著影响赤芍主要有效成分芍药苷的药动学。     

UPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中异荭草素, 野黄芩苷和木犀草苷及其药代动力学研究

目的:建立利用UPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中异荭草素、野黄芩苷和木犀草苷等3种黄酮的分析方法,并研究大鼠静脉注射3个剂量的注射用复方荭草后的药代动力学特征。方法:血浆样品采用酸化后甲醇沉淀蛋白,采用WatersAcquity BEH C18色谱柱,流动相为0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应离子监测(MRM)。结果:3种黄酮成分在大鼠血浆中线性关系良好,提取回收率78.56%～101.91%,日内、日间精密度和准确度良好,各物质在大鼠体内的平均滞留时间均较短(<22 min)。结论:该方法特异、快速、准确和灵敏,可用于注射用复方荭草在大鼠体内的药动学研究。     

氘代替代物结合UPLC-MS/MS同步检测去卵巢大鼠血浆中22种内源性大麻素

该文旨在建立一种超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同步检测去卵巢大鼠血浆中22种内源性大麻素类物质的新方法。首先血浆样品经固相小柱(SPE柱)萃取,然后利用UPLC-MS/MS进行检测。采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以0.1%乙酸溶液为流动相A,乙腈-异丙醇(9∶1)溶液为流动相B,进行梯度洗脱,采用正离子多反应离子监测模式,以氘代试剂作为对照品的替代物计算回收率,同步定量22种内源性大麻素。其中,22种内源性大麻素类物质的线性相关系数均大于0.99,定量限(LOQs)为0.089 6~1.965 2 nmol·L~(-1);5个氘代替代物的相对回收率为11.40%~129.9%;重复性考察结果显示,RSD均小于8.0%。所建立的方法,可以用于去卵巢大鼠血浆样品中PGF2αEA,AEA等多种内源性大麻素类物质的定性与定量分析,验证了该方法的可行性及实用性。总之,该方法灵敏度高、重复性好、实用性强,可以用于大鼠血浆样品脂质代谢组学研究。     

UPLC-MS/MS同时测定银丹心脑通软胶囊中7种活性成分及药代动力学研究

该文采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS),建立大鼠血浆中槲皮素(QCT)、山柰酚(KMF)、异鼠李素(ISR)、银杏内酯A(GA)、银杏内酯B(GB)、银杏内酯C(GC)、白果内酯(BB)7种成分的分析方法。同时,探讨单次灌胃给药银丹心脑通软胶囊后上述7种成分在大鼠体内的药代动力学特征。方法学考察结果表明,7种化合物线性关系良好(r≥0.997 1),日内、日间精密度和准确度的RSD均小于11%,基质效应和回收率分别为93.28%~103.6%和72.43%~95.77%,样品室温放置6,12 h,-20℃反复冻存和-20℃长期冻存后基本稳定,其RSD均在11%以下,方法学考察符合生物样品分析要求。大鼠灌胃银丹心脑通软胶囊后,上述7种成分的血浆药代动力学参数如下:Cmax(45.02±11.28),(49.90±13.82),(27.85±8.38),(76.31±18.19),(76.54±15.43),(35.35±10.28),(48.70±12.34)μg·L~(-1);tmax(0.33±0.11),(0.50±0.23),(0.33±0.14),(0.75±0.29),(1.0±0.35),(1.5±0.23),(0.75±0.50)h;该研究建立的UPLC-MS/MS方法适于对大鼠口服银丹心脑通软胶囊后的槲皮素、山柰酚、异鼠李素、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C和白果内酯的药代动力学研究。     

UPLC-MS/MS测定青蒿素代谢抑制剂猫眼草黄素及大鼠血浆药代动力学研究

目的: 建立UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中青蒿素代谢抑制剂猫眼草黄素(chrysosplenetin,CHR)的体内分析方法,并考察其药代动力学参数. 方法: 血浆样品以乙腈沉淀蛋白;采用Shim-pack XR-ODS C₁₈ 色谱柱(2.0 mm ×100 mm,2.2 μm),以地西泮为内标,流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液(87:13);质谱条件为电喷雾离子源(ESI源),正离子模式检测;样品分析时间为2 min. 结果: CHR在5~5 000 μg·L^-1线性良好(r=0.999 3),提取回收率为69.0%~81.2%,日内、日间精密度和准确度符合要求.CHR口服吸收差,存在双峰甚至多峰现象;静脉注射消除半衰期短,低、中、高剂量组t_1/2分别为(17.01±8.06),(24.62±4.59),(28.46±4.63) min. 结论: 该方法特异、快速、灵敏,可用于CHR药代动力学分析.     

UPLC-MS/MS测定醒脑静口服制剂中3种环烯醚萜在大鼠脑中含量及其脑药动力学研究

为了建立UPLC-MS/MS同时测定大鼠脑中栀子苷、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷酸灵敏可靠的分析方法,并对这3种环烯醚萜苷在脑中风大鼠口服醒脑静后的脑药动力学进行研究。该实验中脑浆样品沉淀蛋白2次;采用Acquity BEH C₁₈柱,流动相为乙腈-1%甲酸-水梯度洗脱,质谱采用电喷雾电离源（ESI）,多反应监测（MRM）进行负离子检测,样品分析时间为3.5 min。结果表明3种环烯醚萜苷成分在大鼠脑中的线性关系良好,提取回收率在99.6%~114.3%,日内、日间精密度和准确度良好,稳定性等均符合要求。各物质在中风大鼠脑中的t_1/2和MRT相似,栀子苷与京尼平龙胆双糖苷有双峰现象,而栀子苷酸为单峰。表明该方法特异灵敏、准确可靠,可用于醒脑静口服制剂的脑药动力学研究。     

UPLC-MS/MS同时测定大承气汤大鼠血浆中9种活性成分的含量

该研究建立了大鼠血浆中大承气汤9种活性成分同时测定的UPLC-MS/MS方法。采用Aglient C₁₈色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）进行色谱分离,利用甲醇-5 mmol·L^-1甲酸铵流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1。实验过程血浆的前处理不仅考察了甲醇、乙腈等有机溶剂蛋白沉淀法,同时考察了液-液萃取法中不同萃取溶剂、不同涡旋时间、萃取次数及不同体积萃取溶剂等因素对各活性成分回收率的影响。最终确定以布洛芬为内标,采用乙酸乙酯液-液萃取法进行血样前处理,N₂吹干复溶,离心后上清液进行UPLC-MS/MS分析,在电喷雾电离（ESI）负离子模式下,采用多重反应监测模式进行检测。大黄素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚、厚朴酚、和厚朴酚、橙皮苷及橙皮素的线性范围分别为0.33~660,0.40~792,0.41~827,0.34~680,0.45~907,0.46~927,0.43~867,0.34~683,0.39~787 μg·L^-1,且线性关系良好;提取回收率均>69.39%;日内和日间的RSD<15%。该方法符合生物样品分析的要求,可用于研究大鼠灌胃大承气汤后,血浆中该9种活性成分的同时测定,为其量-效物质基础提供了理论依据。     

UHPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中6种木脂素类成分及其药代动力学研究

目的建立利用UHPLC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中Gomisin D、Gomisin E、五味子醇甲、五味子甲素、Gomisin R和五味子乙素6种木脂素的分析方法,并研究大鼠灌胃给予五味子提取物后的药代动力学特征。方法采用Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应离子监测(MRM)。结果大鼠血浆中6种木脂素成分的校正曲线线性关系良好,日内、日间精密度和准确度符合要求,提取回收率75.76%⁸8.82%。结论该方法简便、快速、灵敏、稳定,适用于五味子提取物的体内分析,为其进一步研究奠定基础。     

UPLC-MS/MS-ESI assay for simultaneous determination of magnolol and honokiol in rat plasma: Application to pharmacokinetic study after administration emulsion of the isomer

Ethnopharmacological relevance

Magnolia officinalis is one of the commonly used in traditional Chinese medicine for the treatment of fever, chronic bronchitis and stomach ailments. Magnolol and honokiol are isomers with hydroxylated biphenol compound in the extract of Magnolia officinalis. This study aims to determine the isomers in rat plasma and evaluate their pharmacokinetic pattern after administration emulsion.

Materials and methods

Sprague Dawley male rats received either an intravenous (i.v.25, mg/kg) or oral (50 mg/kg) dose of the emulsion of the isomer. A sensitive and specific ultra-performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS) method was developed for the investigation of the pharmacokinetics of magnolol and honokiol in rats. Kaempferol was employed as an internal standard.

Results

The plasma samples were deproteinized with acetonitrile, the post-treatment samples were analyzed on an Agela C₁₈ column interfaced with a triple quadrupole tandem mass spectrometer in negative electrospray ionization mode. Acetonitrile and 5 mmol/L ammonium acetate buffer solution (65: 35, v/v) was used as the mobile phase at a flow rate of 0.2 mL/min. Following oral administration of emulsion to rats, magnolol attained mean peak plasma concentrations of 426.4±273.8 ng/mL at 1.20 h, whereas honokiol reached peak plasma concentrations of 40.3±30.8 ng/mL at 0.45 h. The absolute bioavailability of magnolol and honokiol is 17.5±9.7% and 5.3±11.7%. By comparison, the AUC_0–∞ of magnolol was 5.4 times higher than that of honokiol after intravenous administration, but AUC_0–∞ of magnolol was about 18-fold higher than honokiol after oral administration.     

An HPLC-MS/MS method for the quantitative determination of platy-codin D in rat plasma and its application to the pharmacokinetics of Platycodi Radix extract简

AIMS： To develop an HPLC-MS/MS method for the quantification of platycodin D （PD） in rat plasma, and to acquire the main pharmacokinetic parameters of PD after oral administration of pure PD or of Platycodi Radix extract （PRE） containing PD. METHOD： Plasma samples were pretreated with solid-phase extraction using an Oasis HLB SPE cartridge. Madecassoside was used as the internal standard （IS）. Chromatographic separation was achieved on an ODS column （100 mm x 2.1 mm i.d., 3.5 μm） with a mobile phase consisting of acetonitrile/water （30 ： 70, V/F） containing 0,1 mmol·L-1 ammonium acetate at a flow rate of 0.25 mL.min-1. The detection was performed on a triple quadruple tandem mass spectrometer using an electros- pray ionization （ESI） source with a chromatographic rtm time of 3.0 rain. The detection was operated by multiple reaction monitoring （MRM） of the transitions of m/z 1 223.6→469.2 for PD and of m/z 973.6→469,2 for madecassoside （IS）, respec- tively. RESULTS： The calibration curve was linear from 5 to 2 000 ng.mL-1 （re 〉0.99） with a lower limit of quantification （LLOQ） of 5 ng.mL^-1. The intra- and inter-day precision （relative standard deviation, RSD） values were below 15% and the accuracy （relative error, RE） was from -15% to ＋15% at three quality control （QC） levels. Plasma concentrations of PD were deter- mined for 24 h after i.v. administration of PD, and oral administration of PD and PRE, respectively. The absolute oral bioavailability of PD in rats was found to be （0.48 ± 0.19）% when administered PD, and to be （1.81 ± 0.89）% when adminis- tered PRE. CONCLUSION： The developed HPLC-MS/MS method was successfully applied to assess the pharmacokinetic parameters and oral bioavailability of PD in rats after administration of PD and Platycodi Radix extract.     

Beagle犬口服雷公藤片血浆中雷公藤红素LC-MS/MS测定及药动学研究

建立Beagle犬血浆中雷公藤红素的LC-MS/MS检测方法,用于Beagle犬口服雷公藤片的药代动力学研究。血浆样品经二氯甲烷提取,色谱条件为Phenomenex Luna C8色谱柱(2.0 mm×50 mm,3μm),流动相为甲醇-乙腈异丙醇溶液(1∶1)-0.1%甲酸15∶55∶30;多反应监测(MRM)雷公藤红素([M+H]+,m/z 451.3/201.1)和内标泼尼松龙([M+H]+,m/z 361.1/147.1);DAS 1.0软件对雷公藤红素药-时曲线进行拟合,并计算药代动力学参数。在0.680 0~136.0μg·L-1,雷公藤红素与内标的峰面积比值与浓度的线性关系良好,定量限为0.680 0μg·L·(-1),日内日间精密度小于6.15%,提取回收率为50.42%~51.65%。Beagle犬口服雷公藤片(1片/kg),血浆中雷公藤红素经时变化符合一室模型(w=1/cc),主要药动学参数分别为Cmax(35.64±9.540)μg·L~(-1),Tmax(2.62±0.69)h,T1/2(2.93±0.29)h,CL(0.308±0.056)L·kg~(-1)·h~(-1),AUC0-12(131.16±31.94)μg·L·h~(-1),AUC0-∞(142.83±37.57)μg·L·h~(-1)。建立的LC-MS/MS分析方法准确灵敏,适于雷公藤片中雷公藤红素药代动力学研究。