龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症的机制研究

目的:研究龟鹿二仙胶对成骨细胞I型胶原及TGF-β表达的影响,探索龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症的机制。方法:SD大鼠随机分为对照组、龟鹿二仙胶低剂量组、中剂量组、高剂量组、骨化三醇组,每天灌胃1次,持续7 d,末次给药2 h后腹主动脉采血,制成含药血清作用于大鼠成骨样细胞ROS17_2.8株。用MTT法及活细胞形态观察含药血清对成骨细胞增殖及凋亡的影响。用各组含药血清条件培养基培养成骨细胞,应用Western Blot法检测各组成骨细胞I型胶原及TGF-β蛋白表达水平,采用RT-PCR法检测各组成骨细胞I型胶原及TGF-βmRNA的表达。结果:(1)MTT结果显示:龟鹿二仙胶各组的成骨细胞无明显增殖。骨化三醇组的成骨细胞有明显增值(P<0.05)。细胞染色提示:骨化三醇组及龟鹿二仙胶组的成骨细胞无显著的凋亡。(2)RTPCR法结果显示:骨化三醇组与龟鹿二仙胶各组COL1A1及COL1A2mRNA的水平均有增加(P<0.01);龟鹿二仙胶中、高剂量组COL1A1及COL1A2mRNA水平增加较明显(P<0.05),龟鹿二仙胶高剂量组较中剂量组COL1A1及COL1A2mRNA水平增加不明显(P>0.05);骨化三醇组TGF-β1及TGF-β2mRNA水平无明显变化(P>0.05);龟鹿二仙胶各组TGF-β1及TGF-β2mRNA水平均有增加(P<0.01);且龟鹿二仙胶中、高剂量组TGF-β1、TGF-β2mRNA水平增加差异无统计学意义(P>0.05)。(3)Western blot结果提示:第24 h,龟鹿二仙胶高剂量组能使成骨细胞COL1A1及COL1A2蛋白合成增加(P<0.05)。第48 h,骨化三醇组、龟鹿二仙胶各组均能使成骨细COL1A1及COL1A2蛋白合成增加(P<0.01);龟鹿二仙胶高、中剂量组之间比较差异没有统计学意义(P>0.05);第24、48 h,骨化三醇组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成无明显变化(P>0.05);在24 h,龟鹿二仙胶高剂量组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成有显著增强(P<0.01),龟鹿二仙胶低剂量和中剂量组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成无明显变化(P>0.05);48 h,龟鹿二仙胶各组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成增加(P<0.01)。龟鹿二仙胶高中剂量组之间无显著差异(P>0.05)。结论:龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症机制可能通过调节细胞因子TGF-β,促进I型胶原的表达,为探讨中药促胶原形成治疗骨质疏松提供细胞及分子生物学依据。     

降铅Ⅰ号对低水平铅暴露仔鼠脑细胞凋亡的影响

目的探讨降铅Ⅰ号对低水平铅暴露仔鼠脑细胞凋亡的干预作用及神经行为改善的机制。方法成年Wistar大鼠按雌∶雄=2∶1比例交配后,随机分为正常组和实验组。从孕期第1天起,分别饮用蒸馏水和0.2%醋酸铅溶液,直至第21天仔鼠断乳,断乳仔鼠用于实验。实验组仔鼠随机分为铅模型组、EDTA对照组、降铅Ⅰ号低剂量组、降铅Ⅰ号中剂量组、降铅Ⅰ号高剂量组。正常组仔鼠作为空白组。各组给予相应干预。采用原子吸收分光光度石墨炉法测定血铅和脑铅含量,用Y迷宫观察用药后对仔鼠学习和记忆能力的影响。结果治疗后各治疗组仔鼠的血铅水平均显著低于铅模型组(P0.001);EDTA组、降铅Ⅰ号低剂量组的脑铅水平与铅模型组比较明显下降(P0.05),降铅Ⅰ号各组的脑铅水平与EDTA组比较无差异(P0.05);降铅Ⅰ号低剂量组的记忆保持率与空白组比较差异无统计学意义(P0.05)。降铅Ⅰ号低剂量组、降铅Ⅰ号高剂量组的记忆保持率高于铅模型组(P0.05,P0.001)。降铅Ⅰ号低剂量组的记忆保持率高于EDTA组(P0.01),降铅Ⅰ号低剂量组的记忆保持率高于降铅Ⅰ号中剂量组(P0.05);各治疗组较铅模型组海马凋亡标记指数均显著下降,差异显著(P0.05,P0.01)。结论降铅Ⅰ号能降低低水平铅暴露仔鼠的血铅和脑铅含量,明显改善低水平铅暴露仔鼠的学习记忆能力。     

龟鹿二仙胶对去势大鼠骨骼肌Akt蛋白表达的影响

目的:探讨龟鹿二仙胶对去势大鼠骨骼肌Akt蛋白表达的影响。方法:40只6月龄SD大鼠随机分为假手术、模型组、龟鹿二仙胶组、雌激素组各10只,假手术组、模型组灌胃生理盐水,龟鹿二仙胶组给予龟鹿二仙胶颗粒剂灌胃,雌激素组给予戊酸雌二醇。治疗12周后活体骨密度(BMD)检测,同时检测骨骼肌Akt蛋白、mRNA表达。结果:模型组BMD明显低于假手术组(P0.05),龟鹿二仙胶组和雌激素组高于模型组(P0.05);模型组蛋白Akt、p-Akt表达量明显低于假手术组(P0.05);而龟鹿二仙胶组和雌激素组高于模型组(P0.05);模型组Akt1 mRNA表达量明显低于假手术组(P0.05),而龟鹿二仙胶组和雌激素组明显高于模型组(P0.05)。结论:龟鹿二仙胶对去势大鼠有明显的治疗作用,能改善BMD,提高骨骼肌Akt蛋白和基因的表达量。     

龟鹿二仙胶巴布剂治疗结直肠癌化疗后不良反应的临床效果

目的:探讨龟鹿二仙胶巴布剂治疗结直肠癌化疗后不良反应的临床效果。方法:回顾性分析2014年10月至2016年10月直肠癌患者实施化疗80例临床案例,按治疗方案不同,将其分为龟鹿二仙胶巴布剂组和单一化疗组,各40例。单一化疗组采用FOLFIRI方案化疗及对症治疗,而龟鹿二仙胶巴布剂组在单一化疗组的基础上加用龟鹿二仙胶巴布剂治疗。统计分析2组患者治疗前后中医症状积分、外周血细胞及T细胞亚群的变化。结果:化疗后7 d,2组患者中医症状总分均有明显提高,差异有统计学意义(P0.05),而化疗后14 d,龟鹿二仙胶巴布剂组中医症状总分明显低于单一化疗组,差异有统计学意义(P0.05);化疗后7 d,2组患者白细胞和中性粒细胞均较化疗前明显下降,差异有统计学意义(P0.05),而化疗后14 d,单一化疗组白细胞和中性粒细胞均较化疗前明显下降,差异有统计学意义(P0.05),而龟鹿二仙胶巴布剂组基本恢复到化疗前水平,且明显高于单一化疗组,差异有统计学意义(P0.05),而化疗前后2组患者血小板无明显变化;化疗后7 d,龟鹿二仙胶巴布剂组患者CD4~+及CD4~+/CD8~+有轻微的升高,而单一化疗组有轻微下降,龟鹿二仙胶巴布剂组明显高于单一化疗组,差异有统计学意义(P0.05);龟鹿二仙胶巴布剂组CD8+8明显低于单一化疗组,差异有统计学意义(P0.05)。化疗后14 d,龟鹿二仙胶巴布剂组CD4~+及CD4~+/CD8~+明显高于单一化疗组,而CD8~+明显低于单一化疗组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:龟鹿二仙胶巴布剂治疗结直肠癌化疗患者,能有效改善化疗后骨髓抑制等不良反应,以及对患者体力及免疫力有促进作用。     

龟鹿二仙胶对雷公藤多苷诱导弱精子症大鼠精子线粒体结构和功能及SLC22A14表达的影响

目的：研究龟鹿二仙胶对雷公藤多苷(GTW)诱导弱精子症(AZS)大鼠精子线粒体结构和功能及溶质载体家族22成员14(SLC22A114)表达的影响。方法：60只SD大鼠随机分为正常组,模型组,龟鹿二仙胶低、中、高剂量组、五子衍宗丸组,各10只;除正常组外,各组均给予GTW40 mg·kg^-1·d^-1连续灌胃4周造模AZS大鼠模型;造模结束后正常组、模型组给予0.9%氯化钠溶液灌胃4周,龟鹿二仙胶低、中、高剂量组分别给予龟鹿二仙胶混悬液0.25、0.50、1.00 g·kg^-1·d^-1,五子衍宗丸组给予1.00 g·kg^-1·d^-1五子衍宗丸混悬液,灌胃4周;采用HE染色观察睾丸组织形态;计算机辅助精子分析检测大鼠精液质量;流式细胞术分析检测精子线粒体膜电位;透射电镜观察精子线粒体结构;实时荧光定量聚合酶链式反应和蛋白免疫印迹法检测精子线粒体SLC22A114蛋白及mRNA表达。结果：龟鹿二仙胶可减轻AZS大鼠模型睾丸组织病理损伤,改善精液质量,且龟鹿二仙胶...     

两种剂型龟鹿二仙胶对于腺嘌呤诱导肾阳虚型少弱精子症大鼠的干预作用＊

目的 探究两种剂型龟鹿二仙胶对于腺嘌呤诱导肾阳虚型少弱精子症大鼠的干预作用。方法 32只8周龄SD大鼠，体质量200 g-220 g，随机分4组，分别为空白组（Control）、模型组（Model）、龟鹿二仙胶饮片膏组（GLEX_T）、龟鹿二仙胶颗粒膏组（GLEX_G），每组8只；空白组灌胃等体积蒸馏水，其余4组给与腺嘌呤混悬液灌胃，连续灌胃30天；从31天起，空白组及模型组灌胃等体积蒸馏水，龟鹿二仙胶饮片膏组予龟鹿二仙胶饮片膏灌胃，龟鹿二仙胶颗粒膏组予龟鹿二仙胶颗粒膏灌胃，连续灌胃至60天。每日灌胃剂量10 mL?kg^-1。给药完毕后处死，检测血清性激素（T、E2、FSH、LH）、精液参数（精子活力、活率、密度）和睾丸HE染色实验。结果 龟鹿二仙胶饮片膏组与龟鹿二仙胶颗粒膏组都能调节性激素分泌、改善大鼠精液参数（P < 0.01，P < 0.05），且在干预效果上无显著差异（P > 0.05）；龟鹿二仙胶饮片膏组与龟鹿二仙胶颗粒膏都对大鼠睾丸组织有保护作用。结论 两种剂型龟鹿二仙胶对于腺嘌呤诱导肾阳虚型少弱精子症大鼠有干预作用且疗效相近，可能与其对下丘脑-垂体-睾丸轴的调控、内分泌激素的改变，睾丸组织的保护有关。     

加味龟鹿二仙胶汤对Lewis肺癌小鼠C-myc表达及免疫系统影响

目的:研究加味龟鹿二仙胶汤对Lewis肺癌小鼠C-myc表达及免疫系统的影响。方法:选取无特定病原体级SD雄性小鼠60只为研究对象,对所有的小鼠Lewis肺癌造模成功后,将小鼠随机分为模型组、胸腺肽组、加味龟鹿二仙胶汤低、中、高剂量组,每组12只小鼠。对模型组小鼠灌胃生理盐水,胸腺肽组小鼠注射胸腺肽,同时灌胃等量生理盐水,加味龟鹿二仙胶汤低、中、高剂量组小鼠分别灌胃等量但含生药量不同的加味龟鹿二仙胶汤,观察记录各组小鼠抑瘤率、肺转移灶数目和T细胞表达水平等指标。结果:加味龟鹿二仙胶汤低剂量组、中剂量组和高剂量组对小鼠肺癌均有抑瘤作用,其中中剂量组抑瘤率最高,为54.93%,肿瘤重量较小,与模型组小鼠相比差异有统计学意义(P0.05);加味龟鹿二仙胶汤低剂量组、中剂量组和高剂量组对小鼠肺癌肺转移病灶均有抑制作用,其中中剂量组抑瘤率最高,为53.21%,与模型组小鼠相比差异有统计学意义(P0.05);模型组C-myc呈高阳性表达,加味龟鹿二仙胶汤低剂量组、中剂量组和高剂量组小鼠肺癌组织C-myc呈低阴性表达,与胸腺肽组小鼠比较,差异无统计学意义(P0.05),与模型组小鼠比较,差异有统计学意义(P0.05);治疗前,各组小鼠CD_3~+、CD_4~+、CD_4~+/CD_8~+、CD_8~+表达水平无明显差异,随着治疗的进行胸腺肽组和加味龟鹿二仙胶汤低、中、高剂量组小鼠,其CD_3~+、CD_4~+、CD_4~+/CD_8~+表达水平逐步升高,CD_8~+表达水平降低,且治疗后加味龟鹿二仙胶汤中剂量组小鼠CD_3~+、CD_4~+、CD_4~+/CD_8~+表达水平升高程度高于其他组小鼠,CD_8~+表达水平降低程度高于其他组小鼠,差异有统计学意义(P0.05)。结论:加味龟鹿二仙胶汤尤其是中剂量对肺癌有明显的抑瘤作用,能够有效的降低C-myc表达,同时提高CD_3~+、CD_4~+、CD_4~+/CD_8~+表达水平,降低CD_8~+表达水平。     

加味龟鹿二仙胶汤联合顺铂对小鼠Lewis肺癌PI3K/AKT/mTOR通路的影响

目的观察加味龟鹿二仙胶汤联合顺铂对小鼠Lewis肺癌组织、骨髓组织PI3K/AKT/mTOR信号通路的双重调控作用机制。方法建立气阴两虚型C57BL/6J小鼠Lewis肺癌模型,随机分为正常对照组,模型对照组,加味龟鹿二仙胶汤组(中药组),顺铂组,顺铂+加味龟鹿二仙胶汤低、中、高剂量组(顺铂+中药低剂量组、顺铂+中药中剂量组、顺铂+中药高剂量组,即联合组),每组20只,干预21 d。观察小鼠肿瘤体积、测定瘤重、抑瘤率及骨髓有核细胞计数,Western blot检测各组移植瘤组织及骨髓组织中PI3K、p-AKT、mTOR的蛋白表达。结果药物干预后,与模型对照组比较,除中药组外,顺铂组、联合组肿瘤体积增长均减慢,瘤质量均明显下降(P<0.01);与模型对照组比较,中药组小鼠骨髓有核细胞计数显著升高(P<0.01)。移植瘤组织中,顺铂组、联合组PI3K、p-AKT蛋白表达较模型对照组明显降低(P<0.01);中药组、顺铂组、联合组mTOR蛋白表达较模型对照组明显降低(P<0.05或P<0.01);骨髓组织中,中药组PI3K、p-AKT和mTOR蛋白表达较模型对照组明显升高(P<0.01),联合组随剂量增加PI3K、p-AKT和mTOR蛋白表达较顺铂组升高(P<0.05)。结论加味龟鹿二仙胶汤与顺铂联用可以显著抑制肿瘤体积增长,增强抗肿瘤作用,提高抑瘤率,对化疗所致骨髓有核细胞降低有保护作用,且呈剂量依赖性效应。通过下调肺癌组织中mTOR的蛋白表达和上调骨髓组织中PI3K、p-AKT、mTOR的蛋白表达发挥双重调控作用。     

降铅Ⅰ号对低水平铅暴露仔鼠血铅及海马一氧化氮合酶的影响

目的：观察降铅Ⅰ号对低水平铅暴露仔鼠的血铅及学习记忆能力的影响并探讨其作用机制。方法：选用Wistar大鼠仔鼠50只,随机分成5组,每组10只,为模型组、EDTA对照组和降铅Ⅰ号低剂量、中剂量和高剂量治疗组。喂0.2%醋酸铅的去离子水造模后,每组均随机选取2只仔鼠,检测血铅及海马一氧化氮合酶（NOS）活性的变化。其余仔鼠给药30天后,再检测以上指标。所有大鼠进行Y迷宫实验观察降铅Ⅰ号对铅中毒大鼠学习记忆能力的影响。结果：降铅Ⅰ号治疗30天后,各治疗组血铅水平都较模型组下降,海马NOS活性除低剂量组外,其余各组都有升高,差异有显著性（P〈0.05）。Y迷宫实验显示,降铅Ⅰ号治疗组的记忆保持率高于模型组,疗效以中、高剂量组为优,与低剂量组比较,差异也有显著性（P〈0.05）。结论：降铅Ⅰ号有较强的驱铅及改善学习记忆能力的作用。升高海马NOS活性可能是其改善学习记忆能力,减轻铅神经毒性的作用机制之一。     

龟鹿二仙胶加减治疗肌萎缩侧索硬化的临床观察

目的：观察运用龟鹿二仙胶加减治疗肌萎缩侧索硬化症的临床疗效。方法：将28例确诊肌萎缩侧索硬化症患者随机分为两组,试验组15例,采用力如太联合龟鹿二仙胶加减并配合中医药传统疗法治疗;对照组13例,单用力如太治疗。对于两组患者分别运用中医证候评分和ALSFRS-R量表行疗效评价,并观察不良反应。结果：治疗组中医症候临床积分下降明显,有统计学意义（P<0.05）;治疗后两组ALSFRS-R量表评分仍都在下降,但治疗组下降幅度小于对照组（P<0.05）。结论：力如太联合龟鹿二仙胶加减配合中医药传统疗法治疗肌萎缩侧索硬化安全有效,可缓解肌萎缩侧索硬化患者言语不利、流涎、吞咽困难、肢体无力等症状,并能在一定程度延缓ALS病程进展的速度,疗效优于单用西药。     

略述《内经》色诊

《内经》是一部医学全书,它素被尊为"医书之祖",《内经》中的色诊学说,内容丰富,论述甚详,是望诊部分的中坚内容。通过对《内经》中色诊内容的整理,概述色诊内容,主要包括望色之神、望色之常、望色之异、五色主病、望色之位、望色之变等。     

论正胰腺脏位 还十二指肠腑名

长期以来,大凡认真研读过《黄帝内经》(以下简称《内经》)脏腑理论的中医学者,都会因文中既提"十二藏",又述"五藏六府",以及将一个不具备"藏而不泄"之"脏"功能的"心包"列于脏位。将无"满而不能实","传化物而不藏"之"腑"功能的"三焦"给以腑名,而时有困惑。近年来,随着糖尿病患者,胰腺癌患者及十二指肠球部溃疡等患者的大量涌现。胰腺和十二指肠作为脏腑功能的显现,越来越受到重视。笔者根据《内经》,关于脏与腑功能的界定标准,及现代解剖学,生化学所见,结合长期的临床实践之需求,提出了将人体"胰腺"取代无脏功能的"心包"以正其脏位。并将与胰腺有密切生理关系的十二指肠取代三焦,作为与胰腺相表里的腑。这样就将"五藏六府",正式升级为"六脏六腑"。即:肺与大肠、胰与十二指肠、心与小肠、脾与胃、肝与胆、肾与膀胱,以合《内经》"十二藏"之说。经过如此传承精华与守正创新,则可使《内经》的脏腑理论得以进一步完善。既符合了人体内客观真实的脏腑生理结构状况,而且对中医临床的脏腑辨证论治,提供了理论依据。     

论保健按摩的繁荣对推拿学发展的影响

本文分析了保健按摩的繁荣给推拿学发展所带来的利与弊,认为保健按摩的繁荣普及提高了全社会对推拿的认知度,扩大了推拿的社会影响力,"倒逼"医院设置推拿科室或推拿治疗项目,增加了就业平台,壮大了推拿队伍,但部分民众、医务工作者和政府管理部门人员对推拿不全面、不正确的认知观,导致愿意学习推拿和从事推拿专业工作的高素质人才减少,对部分推拿医务工作者自尊心、自信心、成就感、成功感和荣誉感等带来负面影响,并大大降低了推拿学科的严肃性,提出如何正确对待、界定保健按摩在推拿学科中的地位和作用是推拿学界无法回避的现实问题,必须认真加以正视和思考,否则将不利于推拿学科的健康发展。     

五脏神识系统的形成

目的：系统研究中医五脏相关学说。方法：从发生学角度,结合《内经》、道家学说探讨中医五脏神识系统建立的理论与实践问题。结果：五脏神识系统是在胚胎时期的脑髓中,元神与脑髓共同作用、发生分化而形成的。元神分化出心神,再由心神分化出五神等各种神识元素;脑髓分化出心肾等五脏,五神、五脏分化完成后,五神入藏于五脏,从而形成了五脏神识系统。结论：脑为元神化生神识元素、脏腑之处所,心神为五脏神识系统的主宰。     

对部分分娩女婴产妇实施心理护理的体会

目的：预防与治疗因分娩女性婴儿导致情绪受到刺激,因而引起平衡、调节系统的崩溃,同时促发心理疾病、精神病及躯体病.方法：通过护士的语言、行为、表情、姿势等改变产妇的不良心理状态.结果：预防产后并发症的发生并促进机体的康复.     

略论太平惠民局的成立对宋代医药发展的影响

本文就宋代太平惠民局的成立对宋代医药学发展的影响做了相关论述。认为太平惠民局的成立促进了《太平惠民和剂局方》的成书。制定了药物炮制规范,对当时医生诊疗疾病处方用药带来很大便利。但生产的成药也存在弊端,这也从一定程度上推动了新的医学流派的产生。     

调和脾胃在失眠治疗中的运用

失眠症为临床常见病症,且多与脾胃功能失调有关,在治疗上也常采取健脾、和胃、疏肝等法。本文就脾胃失调引起失眠的病因病机,调和脾胃的治法方药运用等方面作一阐述。     

海南青牛胆挥发油化学成分的研究

海南青牛胆 (ＴｉｎｏｓｐｏｒａｈａｉｎａｎｅｎｓｉｓＨ .Ｓ .ＬｏｅｔＺ .Ｘ .Ｌｉ)系防己科青牛胆属植物 ,为一新种。民间用以治疗关节疼痛和筋骨损伤。主要含有甾酮类、生物碱等化合物。为探讨海南青牛胆中挥发油成分 ,对其藤茎进行了挥发油的研究 ,通过ＧＣ ＭＳ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ进行测定分析 ,从中共鉴定出 2 0个化合物。1　材料及样品的制备原材料采集于海南省文昌市龙楼乡 ,经海南师范学院钟义教授鉴定为海南青牛胆 (ＴｉｎｏｓｐｏｒａｈａｉｎａｎｅｎｓｉｓＨ .Ｓ .ＬｏｅｔＺ .Ｘ .Ｌｉ)。取该植物藤茎经切片、干燥 ,粉碎成…     

方证相对论研究的关键问题与思考

中医学以间接致思的思维方式探求人体生理、病理及防病治病规律，开展方证研究也应遵循中医学的本原思维模式。方随证出，因证变化而药物组成变化是方证对应的一般规律，称之为“方证相对论”。方证对应理论体系是非线性的、多维的、开放的复杂系统，其研究内容应体现当代医学最新成就。从中药分子水平开展方剂配伍规律研究，阐明方剂作用机理以求得方证的最佳对应和变化规律，应是方证研究深化的客观要求和关键所在。