去氢骆驼蓬碱诱导急性白血病Jurkat细胞凋亡及其机制

目的本研究旨在研究去氢骆驼蓬碱体外诱导Jurkat细胞凋亡及其可能机制。方法采用MTT法测定去氢骆驼蓬碱对Jurkat细胞的生长抑制作用;用光学显微镜检、琼脂糖凝胶电泳检测去氢骆驼蓬碱诱导Jurkat细胞凋亡;应用蛋白印迹法检测去氢骆驼蓬碱诱导Jurkat细胞凋亡过程中bcl-2与ICAD的表达变化情况。结果去氢骆驼蓬碱对Jurkat细胞有明显的生长抑制作用,其增殖抑制作用与诱导细胞凋亡有关;bcl-2与ICAD在Jurkat细胞中均有表达,且随药物浓度的增高表达量逐渐降低。结论去氢骆驼蓬碱可诱导Jurkat细胞凋亡,bcl-2与ICAD在去氢骆驼蓬碱诱导Jurkat细胞凋亡的信号传导途径中可能是重要的调控因子。     

去氢骆驼蓬碱诱导白血病细胞凋亡的实验研究

目的：研究去氢骆驼蓬碱对白血病细胞的作用及其机制。方法：采用MTT法测定去氢骆驼蓬碱对各白血病细胞的生长抑制作用;以U937、HL-60为作用细胞,用琼脂糖凝胶电泳检测去氢骆驼蓬碱诱导白血病细胞凋亡的作用;应用蛋白印迹法检测去氢骆驼蓬碱诱导白血病细胞凋亡过程中Bcl-2表达的变化情况。结果：去氢骆驼蓬碱对白血病细胞有明显的生长抑制作用,其对各白血病细胞抑制率无明显差异,其增殖抑制作用与诱导细胞凋亡有关;Bcl-2在白血病细胞中有表达,并随药物浓度的增高表达量逐渐降低。结论：去氢骆驼蓬碱可诱导白血病细胞凋亡,其作用与降低Bcl-2表达有关。     

骆驼蓬总生物碱中骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱及其代谢产物大鼠体内药代动力学研究

目的研究骆驼蓬总生物碱中骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱及其活性代谢产物骆驼蓬醇和骆驼蓬酚在大鼠体内的药代动力学特征。方法口服骆驼蓬总生物碱(140 mg/kg)及静脉注射骆驼蓬碱与去氢骆驼蓬碱的混合溶液(均为3.3 mg/kg),采集不同时间点的血浆,采用UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬醇、骆驼蓬酚的血药浓度,并计算药代动力学参数。结果灌胃和静脉给药后,在血浆中检测到骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬醇和骆驼蓬酚,但骆驼蓬酚的血药浓度在24 h时未下降而未能计算药动参数。静注给药后,骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬醇的t1/2e分别为2.554、3.116、1.899 h,MRT分别为1.700、1.311、1.880 h,AUC0-t为373.1、2033.0、8.914 ng·h/mL。口服总生物碱后骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬醇的Cmax分别为347.6、184.5、32.7 ng/mL,Tmax分别为3.200、1.150、0.300 h,t1/2e分别为6.994、5.625、21.912 h,MRT分别为8.588、9.791、27.780 h,AUC0-t为2 755.5、1 202.8、129.8 ng·h/mL。口服总生物碱后骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的绝对生物利用度分别为63.22%和4.96%。结论口服总生物碱后骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱均可迅速吸收并迅速代谢,骆驼蓬碱与去氢骆驼蓬碱相比较,具有更高的生物利用度,代谢产物骆驼蓬醇和骆驼蓬酚与原型骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱相比较,消除速率相对较慢。此外,静注给药后,体内去氢骆驼蓬碱的初始血药浓度明显高于骆驼蓬碱。     

醋制骆驼蓬可行性研究

目的本文探讨骆驼蓬全草醋与红酒炮制品中骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱的含量变化,为醋制骆驼蓬的可行性提供参考。方法采用HPLC法测定骆驼蓬各炮制品中骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱含量。结果传统新疆红酒煮制骆驼蓬其骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱含量最低,20%、30%、40%醋液煮制骆驼蓬中骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱含量均低于生品药材(P<0.01)。结论醋与红酒制骆驼蓬均可有效降低其生物碱含量,醋亦可作为骆驼蓬减毒炮制的辅料选择。     

骆驼蓬子中去氢骆驼蓬碱对照品的制备研究

目的:建立骆驼蓬子中去氢骆驼蓬碱对照品的制备分离方法。方法:通过AB-8大孔树脂柱色谱分离,重结晶,HPLC制备色谱分离纯化,从骆驼蓬子的70%乙醇提取物分离得到一个化合物,通过NMR、M S等波谱方法鉴定该化合物为去氢骆驼蓬碱,经TLC,HPLC-UV,HPLC-ELSD及MS联用等技术检验其纯度。结果:从骆驼蓬子中制备分离的去氢骆驼蓬碱对照品,质量分数98%。结论:本法所得的去氢骆驼蓬碱对照品符合中药化学对照品的相关技术要求,为药材骆驼蓬子和含骆驼蓬子的成方制剂的质量控制及药效物质基础研究提供化学对照品。     

5种生物碱胃癌多药耐药逆转剂的筛选及机制研究

目的研究骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱对肿瘤细胞多药耐药性(MDR)的逆转作用及机制。方法以胃癌亲本细胞系SGC-7901和MDR细胞系SGC-7901/VCR为细胞模型,采用MTT法检测上述5种生物碱的细胞毒活性及对MDR的逆转效果;用流式细胞仪检测MDR逆转效果最好的贝母素乙对肿瘤细胞内阿霉素(ADR)蓄积的影响;Western blotting法检测P-糖蛋白(P-gp)的表达;Hoechst荧光染色和细胞免疫荧光法检测贝母素乙诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡情况。结果骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱均能不同程度地抑制SGC-7901和SGC-7901/VCR细胞的增殖,在非毒剂量下贝母素乙能够显著提高SGC-7901/VCR细胞对ADR的敏感性及细胞内ADR的浓度,降低P-gp表达。贝母素乙联合5-氟尿嘧啶(5-FU)给药可诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡,凋亡细胞cleaved caspase-3呈高表达。结论贝母素乙具有作为胃癌MDR逆转剂的潜力,其逆转耐药的机制可能与下调P-gp表达和诱导细胞凋亡有关。     

骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的质谱裂解途径研究

目的：研究去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的质谱裂解机制。方法：两者用HPLC进行分离后,在正离子模式下,得到去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的质谱图。结果：解析了去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱多级质谱碎片,主要发生RDA裂解、-CH,和-OH等自由基丢失,吲哚环稳定。结论：本研究丰富了去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的质谱裂解机制,为B-咔啉类生物碱的成分研究提供依据。     

骆驼蓬研究现状

骆驼蓬又叫骆驼蒿、苦苦菜、臭草、臭牡丹,为蒺藜科植物骆驼蓬属多年生草本植物的全草,是西北地区重要的民族、民间药。现代药理研究发现其含有多种生物碱,生物碱基本骨架为生物碱基,包括β-咔波啉类和喹唑啉类,其中β-咔波啉类有骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、去甲氧基骆驼蓬碱等。骆驼蓬生物碱具有抗肿瘤相关作用。本文对其药用进行系统总结,并为骆驼蓬进一步研究提出建议。     

超临界二氧化碳萃取骆驼蓬种子脂肪油与去氢骆驼蓬碱工艺的实验

骆驼蓬种子为蒺藜科Zygophyllaceae植物骆驼蓬Pega-num harmaL的种子,在我国产于新疆、内蒙古、甘肃、宁夏等地区,用于治疗咳嗽气喘、风湿性关节炎、癫痫和精神病[1,2]。现用于治疗肿瘤、消化性溃疡、银屑病[3,4,5]。去氢骆驼蓬碱为其主要有效成分,具有抗肿瘤、抗包虫、抗菌等作用[1,3]。骆驼蓬种子脂肪油中脂肪族化合物占绝对优势,其中脂肪酸量明显较高[6],具有镇痛消炎等作用[7]。鉴于骆驼蓬种子的水溶性提取物有致突变作用[8],传统工艺水蒸气蒸馏法提取不合理。我们选择了超临界二氧化碳来萃取骆驼蓬种子脂肪油与去氢骆驼蓬碱,对其工艺…     

去氢骆驼蓬碱脂质体对人宫颈癌Hela细胞增殖作用研究

目的:探讨去氢骆驼蓬碱脂质体对人宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用。方法:将去氢骆驼蓬碱单体制备成脂质体形式并对其进行结构表征;采用细胞毒性试验CCK-8法检测去氢骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱脂质体对Hela细胞增殖的体外抑制作用。结果:去氢骆驼蓬碱脂质体的粒径分布集中,去氢骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱脂质体对Hela细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为3.83μg·m L-1和2.84μg·m L-1。结论:去氢骆驼蓬碱脂质体形式可以增加其抗宫颈癌肿瘤活性。     

骆驼蓬子生物碱化学成分研究

目的 研究骆驼蓬Peganum harmala子醇提液酸溶碱沉后总生物碱的化学成分。方法 采用多种色谱技术进行分离纯化,通过MS、NMR及合成等方法对化合物结构进行鉴定,并以CCK-8法测定部分化合物对人结肠癌HCT116细胞的体外抗肿瘤活性。结果 从骆驼蓬子总生物碱中分离得到了12个化合物,分别为1-甲基-2-甲氧甲基-7-甲氧基-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-2-盐酸盐（1）、对苯二甲酸二(2-乙基)己酯（2）、鸭嘴花酮碱（3）、鸭嘴花碱（4）、harmalanine(5)、去氢骆驼蓬碱（6）、哈尔满（7）、哈尔酚（8）、norharmane(9)、骆驼蓬碱（10）、四氢骆驼蓬碱（11）、骆驼蓬酚（12）。体外抗肿瘤实验表明,化合物5的24 h半数抑制浓度（median inhibition concentration,IC50）为（36.41±1.91）μmol/L。结论 化合物1为新化合物,命名为氮杂缩醛去氢骆驼蓬碱A,化合物2为骆驼蓬植物中首次分离得到,而较强共轭系统的化合物5具有潜在的抗癌活性。     

反相高效液相色谱法测定骆驼蓬总碱片中去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的含量

 目的：建立RP-HPLC法测定骆驼蓬总生物碱片中去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱含量的方法。方法：以甲醇-0.01 mol·L-1硫酸铵溶液-二乙铵(60∶40∶0.4,用磷酸调pH至(3.8±0.1)为流动相，进样量20 μl，分别在320，372 nm处用RP-HPLC法测定去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的含量。结果：去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱分别在浓度为2～25 μg·ml-1的范围内与峰面积成良好的线性关系。方法的回收率分别为(101.8±1.8)%和(101.3±1.4)%。结论：该法简便，准确，可靠。     

大孔吸附树脂法富集提取废液中骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱

 目的 研究大孔树脂富集骆驼蓬中总生物碱提取后废液中骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的最佳工艺条件。方法 用HPLC测定生物碱含量,以骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的吸附量和解吸率为考察指标,对6种不同类型的树脂（LSA-8b、LSA-5b、XDA-1、LSA-21、LSA-10、D101）进行评价。考察药液pH值、吸附流速、吸附温度、洗脱流速等参数对骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的吸附和洗脱效果的影响。结果 LSA-5b对骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱具有较好的富集能力,最佳富集工艺条件：吸附pH值为9,吸附温度为30 ℃,上样流速为3.5 BV（倍柱体积）·h-1,骆驼蓬碱饱和吸附量为32.34 mg·g-1;最佳的洗脱溶剂为体积分数为70%乙醇,最佳洗脱流速为1.5 BV·h-1,洗脱用量为16.7 BV,骆驼蓬总生物碱洗脱率达86.3%。结论 在确定的工艺条件下,体积分数70%的乙醇洗脱液中骆驼蓬总生物碱的含量提高了10倍。     

HPLC-MS法测定去氢骆驼蓬碱在人肝微粒体中代谢产物

目的:测定人肝微粒体中去氢骆驼蓬碱的代谢产物。方法:以去氢骆驼蓬碱为研究对象,采用高效液相色谱-离子阱-质谱系统分析去氢骆驼蓬碱经肝微粒体代谢的代谢产物。结果:去氢骆驼蓬碱在人肝微粒体中经Ⅰ相代谢后产物主要为哈尔酚。结论:哈尔酚为首次报道的代谢产物,本研究利用液质联用技术阐明了去氢骆驼蓬碱的体内代谢产物,为进一步研究奠定了基础。     

犬静脉注射盐酸去氢骆驼蓬碱的体内药物动力学

目的：研究盐酸去氢骆驼蓬碱在犬体内的药物动力学。方法：通过股静脉采集静脉注射给药后12h内的血样，采用高效液相色谱法测定血浆中盐酸去氢骆驼蓬碱药物浓度。结果：盐酸去氢骆驼蓬碱在犬体内符合二室模型，消除半衰期为2．054h。结论：盐酸去氢骆驼蓬碱在犬体内分布快、半衰期短。     

不同产地的骆驼蓬总生物碱类化合物含量变化研究

目的:建立骆驼蓬中去氢骆驼蓬碱的含量测定方法,并对不同产地骆驼蓬药材进行含量测定。方法:采用紫外分光光度法测定总生物碱类化合物的含量,以去氢骆驼蓬碱为对照品,检测波长为252nm。结果:去氢骆驼蓬碱检测浓度的线性范围为0.00192～0.01008mg.mL-(1r=0.998);平均加样回收率为99.6%,RSD=0.80%(n=9)。不同地区的骆驼蓬中总生物碱类化合物含量有一定差异。结论:本法专属性强,重现性好,结果准确可靠,可作为骆驼蓬的质量控制方法。结果表明昌吉人工种植区、乌市水墨沟公园外东侧野生药材中生物碱含量较高。本试验可为骆驼蓬的种植和采收的研究奠定基础。     

骆驼蓬提取物、去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱抗人低密度脂蛋白氧化的作用

骆驼蓬Peganum harmala L.的主要成分为生物碱。作者研究了该植物种子甲醇提取物及其主要成分去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱体外对Cu2 诱导的低密度脂蛋白(LDL)氧化变性的抑制作用及对自由基的清除能力。将新鲜的骆驼蓬种子在甲醇-水溶液(40∶60)中浸泡过夜,得到的提取物冻干、浓缩。去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱从该提取物中分离与精制。收集12位年龄在20~25岁的健康志愿者的血浆,制备LDL。将CuSO4和LDL一起培养育进行Cu2 介导的LDL氧化反应,再分别加入不同质量浓度(0、50、100、200μg/mL)的骆驼蓬提取物及10μmol/L去氢骆驼蓬碱或骆驼蓬碱…     

骆驼蓬总碱提取纯化工艺及其对铝致痴呆小鼠作用的研究

目的 优选出新疆骆驼蓬种子中骆驼蓬总碱的提取工艺并且研究其对铝致老年痴呆小鼠的预防和治疗作用.方法 以骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱总含量为工艺优选指标,采用均匀试验设计优选新疆骆驼蓬种子中骆驼蓬总碱的提取工艺与纯化工艺.小鼠腹腔注射AlCl3溶液100mg/kg,通过Y型迷宫进行测试,检测小鼠记忆能力,评价去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬总碱对三氯化铝造成的老年痴呆小鼠的预防和治疗作用.结果 骆驼蓬总碱提取工艺的优化结果为加入种子用量4倍的30％乙醇量为提取溶剂,连续提取7 h,浓缩干燥得干浸膏,加干浸膏4倍量0.5％盐酸为纯化溶剂,氨水调pH值为9,超声10 min,得骆驼蓬总碱.去氢骆驼蓬碱、驼蓬总碱组与模型组比较有明显差别(P＜0.01),与空白组没有差别.说明去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬总碱对铝制老年痴呆小鼠有治疗作用.从死亡率分析来看,骆驼蓬总碱对小鼠有较好的保护作用.结论 验证试验表明优化提取工艺稳定、合理、可行.动物实验表明,骆驼蓬总碱对铝制老年痴呆有治疗作用.     

去氢骆驼蓬碱调控FOXD3-AS1 对肺癌A549 细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨去氢骆驼蓬碱对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响及可能的作用机制。方法:不同浓度(0.175、0.35、0.7 ng/mL)的去氢骆驼蓬碱作用A549细胞24 h后,细胞计数试剂盒-8 (CCK-8)和克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测细胞核增殖抗原Ki67和半胱天冬酶-3(Caspases3)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测叉头框转录因子D3的反义RNA 1 (FOXD3-AS1)基因表达水平。转染FOXD3-AS1小干扰RNA至A549细胞,上述相同方法观察下调FOXD3-AS1表达对A549细胞增殖、凋亡及Ki67和Caspases3蛋白表达的影响。结果:去氢骆驼蓬碱作用A549细胞后,细胞存活率、克隆形成数及Ki67蛋白和FOXD3-AS1的表达均降低(P0.05),而细胞凋亡率和Caspase3蛋白表达均升高(P0.05)。下调FOXD3-AS1表达后,A549细胞存活率、克隆形成数及Ki67蛋白表达均降低(P0.05),细胞凋亡率和Caspase3蛋白表达均升高(P0.05)。下调FOXD3-AS1表达且同时使用去氢骆驼蓬碱作用A549细胞后,细胞存活率、克隆形成数及Ki67蛋白表达均降低(P0.05),凋亡率和Caspase3蛋白表达均升高(P0.05)。结论:去氢骆驼蓬碱可能通过下调FOXD3-AS1表达抑制肺癌A549细胞增殖并促进细胞凋亡。     

骆驼蓬碱治疗胃癌的药理研究

近年相关文献分析结果表明骆驼蓬是具有抑制癌细胞生长的药物,骆驼蓬碱是其主要有效生物碱之一,其通过抑制胃癌细胞增殖、诱导细胞凋亡等而起到治疗胃癌的作用。