胆总管内无水酒精注射致胆道闭锁动物模型的建立

摘要：目的 应用胆总管无水酒精注射建立SD大鼠胆道闭锁模型 方法 将SD雄性大鼠随机分为实验组和对照组，在实验组中经静脉留置针插入胆总管注入无水酒精，对照组注入生理盐水。观察SD大鼠的生化及病理结果。 结果 在实验组中SD大鼠根据病理及生化检测分为肝功能持续恶化组和肝功能修复组，肝功能持续恶化组在8周以后生化明显高于对照组及肝功能修复组。在正常HE病理及SMA、MASON染色等方面也出现明显变化。结论 胆总管无水酒精注射诱导胆道闭锁模型是一种可靠的动物模型，此动物模型会帮助人们进一步研究胆道闭锁提供更多的研究手段。     

高糖高脂饮食诱导大鼠代谢综合征模型并发阿尔茨海默样变

目的 通过长期高糖高脂饮食导致动物出现代谢综合征合并阿尔茨海默(AD)样改变动物模型的研究。方法 将48只SD大鼠随机分为2组, 正常对照组(用普通饲料饲喂) 24只, 高糖高脂组(饲以高糖高脂饲料)24只, 连续喂养12 个月。于实验第 6、9、12月末观察动物体重、肾周和附睾或子宫周围脂肪重量并计算Lee指数; 检测血液中代谢综合征相关生化指标的变化;Western blotting测定海马Tau蛋白含量及其磷酸化水平;ELISA法检测海马Aβ的含量;HE染色观察脑组织病理改变。结果 与正常对照组相比, 各阶段高糖高脂组大鼠体重、内脏脂肪重量明显增加; 血清中FPG、TG、LDL等明显升高, HDL显著下降;海马Aβ、P-tau较对照组明显升高, 其差异有统计学意义;病理组织学显示模型组脑组织有明显的炎性浸润、小胶质细胞活化明显。结论 高糖高脂饮食诱导大鼠代谢综合征动物模型可并发AD样变, 可为老年痴呆动物模型的构建提供一个新的思路。     

miRNA-467b在痛性糖尿病神经病变中对TNF-α的调节作用

目的 探讨miRNA-467b在痛性糖尿病神经病变中对TNF-α的调节作用。方法 SD大鼠腹腔内注射链脲佐菌素建立痛性糖尿病神经病变（模型组,n=20）,空白组（n=20）注射生理盐水;模型组在建模完成后1周分为两组-实验组与对照组,每组10只大鼠,实验组注射人工合成的miRNA-467b,对照组注射等量的生理盐水,检测所有大鼠神经痛性状况与miRNA-467b、TNF-α表达水平。结果 模型组大鼠的机械痛和热痛的反应潜伏期相比空白组都减少（P<0.05）,并且实验组的机械痛和热痛的反应潜伏期也高于对照组（P<0.05）。模型组大鼠的miRNA-467b表达量相比空白组减少,TNF-α表达量上升,差异有统计学意义（P<0.05）;并且实验组的miRNA-467b、TNF-α mRNA表达水平与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。实验组大鼠的TNF-α蛋白表达量下降,与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）;同时模型组的TNF-α蛋白表达量高于空白组（P<0.05）。结论 痛性糖尿病神经病变中miRNA-467b呈现下调表达状况,可导致TNF-α表达上升,从而引起机械痛和热痛的产生。     

骨内单次注射小剂量辛伐他汀对大鼠心梗后血管新生的影响

目的 研究骨内局部单次注射小剂量辛伐他汀对大鼠心梗后血管新生和心功能的影响。方法 Wistar大鼠随机分为假手术组、心肌梗死模型组和骨内注射辛伐他汀组（n=12）。冠状动脉左前降支结扎建立大鼠心肌梗死模型。24 h后实验组左胫骨内单次注射辛伐他汀0.5 mg,4周后分别通过小动物超声心动图评价左室功能,三苯基氯化四氮唑（TTC）染色计算心肌梗死面积,免疫荧光染色检测局部血管新生情况。结果 超声心动图结果表明心肌梗死4周后左心室收缩功能明显下降,骨内注射辛伐他汀对大鼠心肌梗死后左心室功能未见明显改善;TTC染色发现骨内注射辛伐他汀组心肌梗死面积未见明显减少;免疫荧光染色显示,骨内注射辛伐他汀组心肌血管密度没有显著增加。结论 大鼠心梗24 h后骨内单次注射小剂量辛伐他汀（0.5 mg）,心肌梗死面积、血管新生及心脏功能无显著改善。     

一氧化氮供体型联苯双酯衍生物ZK14对大鼠肝纤维化的治疗作用

目的： 研究新型一氧化氮供体型联苯双酯衍生物（ZK₁₄）对大鼠肝纤维化的治疗作用。方法： 腹腔注射CCl₄制备大鼠肝纤维化模型,ZK₁₄以20 mg/kg及10 mg/kg剂量给大鼠连续灌胃给药4周,观察对大鼠血液一氧化氮、肝组织一氧化氮合酶、肝功能生化指标、肝纤维化生化指标、肝病理组织学的影响。结果： 与肝纤维化模型组相比,ZK₁₄（20 mg/kg）对大鼠的肝纤维化指标和肝脏病理分级有明显改善作用,并对肝功能有保护作用。结论： 一氧化氮供体型联苯双酯衍生物ZK₁₄对CCl₄诱导的大鼠早期肝纤维化有较好的治疗作用。     

肥大细胞在大鼠肠易激综合征内脏高敏感形成中的作用

目的构建肠易激综合征动物模型,探讨肥大细胞在肠易激综合征动物模型内脏高敏感形成中的作用。方法36只雄性SD大鼠,随机分成对照组、实验组1、实验组2。实验组大鼠腹腔内注射免疫诱导剂,对照组大鼠腹腔注射生理盐水;2周后3组动物分别行气囊直肠扩张,腹部撤离反射（Abdominal withdrawal reflex,AWR）评分;在直肠球囊扩张前实验组2予以腹腔注射肥大细胞膜稳定剂;断颈法快速处死后取回盲部及结肠标本,行肥大细胞甲苯氨兰改良染色,分析3组大鼠肠道粘膜肥大细胞定量数据。结果3组SD大鼠直肠气囊扩张AWR评分结果显示,在注入扩展气体3ml及5ml时,AWR评分实验组1（2.50±0.52、3.91±0.28）、实验组2（2.33±0.49、3.33±0.49）均显著高于对照组1.25±0.45、2.33±0.49（P〈0.01、P〈0.01）;5 ml时实验组1和实验组2AWR分值存在差异（P〈0.05）;3组SD大鼠肠道粘膜HE染色未见明显异常,肥大细胞染色显示,对照组回盲部及结肠在粘膜固有层和粘膜下层肥大细胞数（2.83±0.38、1.58±0.51）明显少于实验组1（6.66±0.65、4.17±0.72）及实验组2（6.58±0.99、4.00±0.72）,两实验组均显著高于对照组（P〈0.01、P〈0.01）。结论肥大细胞参与了IBS动物模型内脏高敏感性的形成。     

丹参对野百合碱所致肺动脉高压大鼠的保护作用

[目的] 观察丹参（SMB）对野百合碱（MCT）所致肺动脉高压（PAH）大鼠的保护。[方法] 将30只健康雄性SD大鼠随机分为3组：正常对照组、PAH组、SMB组。PAH 组和SMB组大鼠一次性项背部皮下注射野百合碱（50 mg/kg）建立PAH模型,于制模后3周SMB组开始给予腹腔注射SMB[（200 mg/（kg·d）],正常对照组不做任何处理,2周后观察大鼠肺小动脉病理改变。[结果] SMB组肺小动脉管壁中膜厚度、中膜厚度与外径的比值、管壁面积与血管总面积、管腔面积与血管总面积与PAH组、对照组比较有统计学差异（P<0.05）.[结论] 丹参能部分逆转肺血管结构重建,有效降低肺动脉高压,从而修复野百合碱诱导的肺损伤。     

参芝通络胶囊对大鼠长期毒性的实验研究

目的 考察参芝通络胶囊对大鼠的长期毒性，为临床用药提供依据。方法 SD大鼠随机分为对照组和参芝通络胶囊高、中、低剂量组（4、2、1 g/kg）。ig给药13周，除观察一般状况外，检测体质量、血液学指标、血液生化指标，解剖计算内脏系数并进行病理组织学检查。剩余大鼠停止给药，恢复2周后进行上述相同指标检测。结果 参芝通络胶囊各剂量组对大鼠一般状况、体质量、血液学指标、血液生化指标、内脏系数和病理组织学无明显影响，恢复期大鼠上述各指标与对照组比较无明显差异。结论 在确定的临床使用剂量下，参芝通络胶囊长期服用无明显毒性。     

可溶性Jagged1对大鼠静脉桥狭窄的抑制作用

目的 研究可溶性Jagged 1对大鼠静脉桥狭窄的抑制作用。 方法 成年SD大鼠随机分为正常组、实验组和对照组,每组16只。转染sJag1到实验组SD大鼠中。实验组和对照组中将大鼠颈外静脉移植至颈总动脉建立静脉桥移植模型,而正常组颈外静脉原位吻合。分别于术后第7、14、21、28天收集移植静脉,行HE染色后分别观察中层厚度和PCNA阳性指数,用Western blot法测定sJag1、Notch1和SM MHC、SM22α蛋白的表达。 结果 对照组静脉桥明显狭窄,但实验组静脉桥狭窄明显被抑制。sJag1蛋白在实验组处于高表达状态。对照组Notch蛋白的表达明显增高,而实验组中sJag1却能有效抑制Notch蛋白的表达。静脉桥移植后收缩型蛋白SM22和SM MHC表达明显降低,而sJag1能够促使其表达回复。 结论 可溶性Jagged1可以有效抑制静脉桥狭窄的发生。     

参芝通络胶囊对大鼠长期毒性的实验研究

目的 考察参芝通络胶囊对大鼠的长期毒性，为临床用药提供依据。方法 SD大鼠随机分为对照组和参芝通络胶囊高、中、低剂量组（4、2、1 g/kg）。ig给药13周，除观察一般状况外，检测体质量、血液学指标、血液生化指标，解剖计算内脏系数并进行病理组织学检查。剩余大鼠停止给药，恢复2周后进行上述相同指标检测。结果 参芝通络胶囊各剂量组对大鼠一般状况、体质量、血液学指标、血液生化指标、内脏系数和病理组织学无明显影响，恢复期大鼠上述各指标与对照组比较无明显差异。结论 在确定的临床使用剂量下，参芝通络胶囊长期服用无明显毒性。     

抗TNF单抗和头孢噻甲羧肟对急性胆道感染肝损害的保护作用

本实验在大鼠急性胆道感染模型上，检测了血中肿瘤坏死因子、内素及谷丙转氨酶含量。了肝脏的病理变化，并与在抗ＴＮＦ单克隆抗体及头孢噻甲羧肟影响下和血液ＴＮＦ?ＥＴ、ＡＬＴ和肝脏病理变化相比较。结果显示：急性胆道感染组血中ＴＮＦ、ＥＴ和ＡＬＴ较假手术组显著升高，肝脏病理变化明显，而ＴＮＦ－ｍＡｂ和头孢噻甲羧肟治疗组血中ＴＮＦ、ＥＴ及ＡＬＴ胶胆道感染组显著下降，肝脏病理变化较轻。     

大鼠自体原位肝移植术中肝外胆道不同部位对缺血再灌注损伤耐受性的比较

目的:观察大鼠移植肝的肝外胆道不同部位对缺血再灌注损伤的耐受性,为肝移植术中胆管吻合部位的选择奠定基础。方法:30只SD大鼠随机分为3组:Ⅰ组(假手术组,n=6)、Ⅱ组(胆道缺血1 h再灌注1 h组,n=12)、Ⅲ组(胆道缺血1 h再灌注2 h组,n=12)。对肝门部胆管、胆总管近端及远端的上皮细胞行凋亡(TUNEL法)检测、病理形态学评分和超微结构的定量分析,比较肝外胆道不同部位对缺血再灌注损伤的耐受性。结果:Ⅱ组肝移植大鼠肝门部胆总管上皮细胞凋亡率、病理形态学评分明显高于胆总管近端和胆总管远端(P<0.05),后二者间无统计学差异,提示肝门部损伤较重。肝门部线粒体平均体积(V)高于胆总管远端、近端,胆总管远端高于近端(P<0.05);肝门部微绒毛面积密度(AMV)低于胆总管远端、近端,胆总管远端低于近端(P<0.05),提示肝门部损伤最重,胆总管近端最轻。Ⅲ组肝移植大鼠肝外胆道肝门部损伤最重,胆总管远端次之,胆总管近端最轻(P<0.05)。结论:大鼠肝移植术中肝外胆道不同部位对缺血再灌注损伤的耐受性存在差异,其中胆总管近端耐受性最好,其可能是肝移植术中胆管吻合的合适部位。     

医源性胆管损伤的预防和处理

目的：总结医源性胆管损伤的经验及教训，提出预防措施。方法：回顾性总结分析1990－2000年处理的医源性胆管损伤的情况。结果：因病理性因素手术误伤8例，因医务人员思想麻痹大意损伤4例，因先天性胆道解剖变异损伤3例。术中发现9例，及时解决；4例术后行二次手术；2例将“T”管短臂与胆总管缝扎在了一起，拔管致胆总近损伤，均经非手术（引流、止血、抗生素）治疗。15例全部治愈。结论：医源性胆管损伤的原因是多方面的，手术者责任心强，术中谨慎仔细，考虑全面，是减少医源性胆管损伤的重要环节。一旦发现胆管损伤，应及时修复，尽早处理。     

胆汁损伤胃黏膜的实验研究

目的 通过大鼠实验模型探讨胆汁对胃黏膜的损伤作用.方法 SD大鼠分成4组:十二指肠胃反流(DGR)组、DGR 胆管结扎(BDL)组、BDL组、对照组.术后12周处死大鼠,观察胃黏膜损害及病理组织学改变,电子显微镜硝酸镧标记观察胃黏膜细胞间的紧密连接.结果 DGR组比去除胆汁的DGR出现胃黏膜的充血、小凹超常增生和黏膜细胞间的紧密连接受损程度严重.结论 在十二指肠胃反流所致胃黏膜的损伤中,去除胆汁可使胃黏膜的损伤减轻,胆汁是胃黏膜损伤的重要因素.     

结扎阻塞性黄疸大鼠肝动脉对肝细胞凋亡影响

目的 通过比较阻塞性黄疸大鼠行胆肠内引流时,切断肝固有动脉与不切断肝固有动脉动物模型的血清胆红素、肝脏病理形态学改变,以及肝细胞凋亡率改变,初步探讨阻塞性黄疸大鼠行胆肠内引流时结扎或切断肝固有动脉的安全性和可行性及其机制.方法48只雄性SD大鼠,随机分为A、B、C、D4组.结扎大鼠胆总管,建立阻塞性黄疸模型,7d后行胆...     

四氯化碳、酒精与四氯化碳联合、胆管结扎致SD大鼠肝纤维化病理学比较

目的 研究四氯化碳、酒精与四氯化碳联合、胆管结扎致SD大鼠肝纤维化模型肝脏的病理学改变,初步探讨肝纤维化发病机制.方法 四氯化碳组SD大鼠以3 mg/kg的剂量(首次剂量加倍)皮下注射50％四氯化碳(四氯化碳∶橄榄油=1∶1),每周2次,连续注射6周;酒精与四氯化碳联合组SD大鼠每日按照10 mL/kg剂量灌服酒精混合物(酒精∶吡唑∶玉米油=10 mL∶25 mg∶2 mL),同时每周2次按0.3 mL/kg剂量给予腹腔注射四氯化碳:橄榄油(1∶3),连续造模60 d;胆管结扎组大鼠按10 mg/kg体重腹腔注射3％戊巴比妥钠麻醉,腹部皮肤消毒,无菌操作沿腹部正中线剪开腹腔,分离出胆管,在胆管近端和远端2处结扎胆管,28 d后结束实验.试验结束后麻醉动物,解剖取动物肝脏组织,用10％福尔马林固定,进行病理学检查.结果 四氯化碳致SD大鼠肝纤维化模型表现为弥漫性脂肪肝、肝炎、肝纤维化;酒精与四氯化碳联合致SD大鼠肝纤维化模型表现为酒精性脂肪肝、肝炎、肝纤维化;胆管结扎致SD大鼠肝纤维化模型表现为胆管增生、肝炎、肝纤维化.结论 这3种方法都可以引起大鼠肝脏发生纤维化,其中胆管结扎致SD大鼠肝纤维化造模方法适合于临床胆汁淤积所致肝纤维化的模型建立,其它两种方法适合于化学性、病毒性肝炎引起的肝纤维化模型的建立,可根据不同的实验目的选择不同的方法构建相应的动物模型.     

胆囊切除术后胆总管结石患者ENBD冲洗术的疗效

目的探讨胆囊切除术后胆总管结石ENBD患者鼻胆引流管冲洗的方法及效果。方法观察组采用第一管冲洗液打入20mL,抽出15mL,在冲洗过程中始终保持胆管处于有少量冲洗液的状态,以避免胆管被抽空时患者产生疼痛感。结果观察组引流效果肯定,导管冲洗时患者的舒适度及患者的接受程度明显优于对照组（P〈0．01）。结论此方法提高了导管冲洗时患者的舒适度及患者的接受程度,减轻了患者冲洗导管时的恐惧心理,减轻了患者的痛苦。     

恶性梗阻性黄疸实验模型建立及评价

目的 建立SD大鼠肝癌侵袭胆管所致恶性梗阻性黄疸模型,初步评价其临床应用价值。方法 用Walker-256瘤株近肝门部肝实质内接种,致高位胆管浸润转移造成狭窄,引起梗阻性黄疸。结果 本实验模型所致梗阻性黄疸表现及肝功能变化为慢性渐进性发展过程,病理切片光镜检查显示肝脏、胆管有癌细胞浸润和转移、同时肝内有不同程度的胆汁淤积表现。结论 此实验模型稳定、可重复、成功率为73．3％,其梗阻性黄疸表现特点与临床恶性梗阻性黄疸病人症状极其相似,对研究恶性梗阻性黄疸的病理生理机制及治疗具有一定指导价值。     

Biliary atresia--translational research on key molecular processes regulating biliary injury and obstruction

Biliary atresia is the most common cause of pathologic jaundice in young infants and results from the obstruction of the extrahepatic bile ducts by an inflammatory and fibro-obliterative process. Although the pathogenesis of the disease is multifactorial, recent patient- and animal-based studies began deciphering the molecular pathways involved in biliary injury and duct obstruction. Using large-scale genomics and immunostaining of livers from children with biliary atresia, investigators have discovered unique molecular signatures of dominant proinflammatory cytokines at the time of diagnosis. To study hypotheses generated from these patient-based studies, the anatomical and inflammatory profiles of a mouse model of rotavirus-induced biliary atresia were analyzed and found to share striking similarities with the human profiles. Then, using these mice in mechanistic studies, interferon-gamma (IFNgamma) has been shown to regulate the biliary tropism of lymphocytes to the biliary system, and to play a critical role in the inflammatory obstruction of extrahepatic bile ducts. The ability to combine human studies with a laboratory model of neonatal biliary injury and obstruction opens a new era of opportunities to advance the field of biliary atresia, and to develop new therapeutic strategies to improve long-term outcome with the native liver of children with biliary atresia.     

TGF-β1在梗阻性黄疸大鼠胆总管中的表达

目的:探讨TGF -β1在梗阻性黄疸大鼠胆总管中的表达.方法:监测对照组(假手术组)、梗阻性黄疸大鼠1天、7天、15天、23天、30天共计5个时间点取大鼠梗阻段胆管壁的炎症水肿程度及转化生长因子β1(TGF-β1)在胆道损伤后不同时期的表达强度.结果:胆总管完全梗阻的情况下,随着时间的增加,胆管壁炎症水肿程度在术后初期逐渐增加,23天达到高峰,后逐渐下降.胆管壁的TGF -β1表达量在30天内逐渐增加.结论:胆道损伤后,7天内胆道炎性水肿程度迅速增加,如不行手术干预,胆道狭窄程度会逐渐加重,直至23天后才有所缓解,但随着瘢痕的增生胆管壁会逐渐加厚,导致胆道壁永久性狭窄.