大鼠肺血管重塑动物模型的建立及HIF-1α在其中的作用

目的 探讨大鼠左全肺切除后是否导致肺血管重塑,以及低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在肺血管重塑中的作用。方法 切除大鼠左全肺建立动物模型,12周后检测平均肺动脉压(mPAP)和动脉血氧分压(PaO₂),在电镜、光镜下观察大鼠肺小血管结构改变,计算其肌型动脉(MA)、部分肌型动脉(PMA)、非肌型动脉(NMA)、中膜厚度(MTV)、中膜面积(MAV)及其百分比作为肺血管重塑指标。通过免疫组织化学法检测HIF-1α在肺动脉管壁的表达。结果 实验组mPAP、MA%、PMA%、MTV、MAV、MTV%和MAV%明显高于对照组(P<0.01),PaO₂、NMA%明显低于对照组(P<0.01)。实验组肺动脉壁HIF-1α的IOD值(26.47±4.16)明显高于对照组(6.12±2.14,P<0.01)。相关分析表明,HIF-1α的表达强度与PaO₂呈负相关,与MTV%和MAV%呈正相关。结论 通过大鼠左全肺切除可以建立肺血管重塑动物模型。低氧血症是大鼠左全肺切除后肺血管重塑的重要因素,HIF-1α在低氧导致的肺血管重塑过程中起着重要作用。     

大鼠左全肺切除致肺血管重塑的实验研究

【摘要】目的 探讨大鼠左全肺切除后是否导致肺血管重塑，以及低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)在肺血管重塑中的作用。方法 切除大鼠左全肺建立动物模型，12周后检测平均肺动脉压（mPAP）和动脉血氧分压（PaO2），在电镜、光镜下观察大鼠肺小血管结构改变，计算其肌型动脉（MA）、部分肌型动脉（PMA）、非肌型动脉（NMA）、中膜厚度(MTV)、中膜面积(MAV)及其百分比作为肺血管重塑指标。通过免疫组组化学法检测HIF-1α和VEGF在肺动脉管壁的表达。结果 实验组mPAP、MA%、PMA%、MTV、MAV、MTV％和MAV％明显高于对照组(P﹤0.01),PaO2、NMA%明显低于对照组(P﹤0.01)。实验组肺动脉壁HIF-1α及VEGF的IOD值(26.47±4.16，42.04±3.79)明显高于对照组(6.12±2.14，11.53±2.29)(P﹤0.01)。相关分析表明，HIF-1α及VEGF的表达强度与PaO2呈负相关，与MTV％及MAV％呈正相关，HIF-1α与VEGF的表达强度呈正相关。结论 通过大鼠左全肺切除可以建立肺血管重塑动物模型。低氧血症是大鼠左全肺切除后肺血管重塑的重要因素，HIF-1α与VEGF在低氧导致的肺血管重塑过程中起着重要作用。     

米力农联合高频震荡通气治疗新生儿缺氧性肺动脉高压的疗效 及对HIF-1α ET-1 HO-1水平的影响

目的 探究米力农联合高频震荡通气治疗新生儿缺氧性肺动脉高压的临床疗效,并研究其对患儿缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、内皮素-1(ET-1)、血红素氧合酶-1(HO-1)水平的影响。方法 选取2016年1月至2018年6月郑州市妇幼保健院收治的62例新生儿缺氧性肺动脉高压患儿为研究对象,将其按照随机数字表法分成观察组和对照组,每组各31例。对照组行高频通气治疗,观察组在对照组的基础上行米力农治疗。观察两组治疗的临床效果,比较两组患者治疗前后动脉血气水平,并采用PCR检测法检测HIF-1α、ET-1、HO-1水平的变化情况。结果 观察组总有效率为90.32%,高于对照组的64.52%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者HIF-1α、ET-1、HO-1治疗前后的差值分别为(573.62±86.21)pg/mL、(163.38±22.65)pg/mL、(75.48±17.46)ng/mL,高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者PaO₂、PaCO₂治疗前后的差值分别为(5.69±0.88)kPa、(2.42±0.54)kPa,高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 米力农联合高频振荡通气治疗新生儿缺血缺氧性肺动脉高压患儿疗效切确,可降低HIF-1α、ET-1、HO-1水平,改善患儿的动脉血气水平。     

高血流性肺动脉高压模型大鼠建立及病理生理改变

目的 建立大鼠颈总动脉与颈外静脉吻合高血流性肺动脉高压模型。方法 健康雄性SD大鼠45只分为分流组、结扎组和假手术组(n=15)。12 周后检查大鼠一般状态;超声心动图观察心脏情况、心排量及分流通畅情况;右心导管检查右心室收缩压,抽血气分析计算肺循环/体循环血流量比值(Qp/Qs); 右心室肥厚指数;肺组织HE染色及弹力纤维EVG染色。统计数据采用SPSS 16.0软件,对各组数据进行单因素方差验分析。结果 各组体重增加未见明显差异,吻合通畅率84.6%。分流组大鼠心脏明显增大,与假手术组、结扎组相比心排量明显增加[(309.8±33.1)mL/min·kg比(245.6±31.9)mL/min·kg,(240.8±30.9)mL/min·kg相比,P<0.05];分流组Qp/Qs 为2.16±0.38,右心室收缩压增加至(35.8±4.9)mmHg。分流组右心室肥厚指数0.3263±0.0342,比其它两组增加明显。与假手术组相比,分流组肺动脉中膜厚度明显增加[(22.3±1.7)% 比(10.6±1.7)%, P<0.05]。结论 大鼠颈总动脉与颈外静脉吻合法可以建立良好的高肺血流肺动脉高压模型。     

低氧抑制人脐静脉血管内皮细胞miR-26a的表达

目的 观察低氧对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）miR-26a及PTEN/AKT/VEGF通路相关因子表达的影响。方法 分常氧组和低氧组培养48h。荧光定量RT-PCR和Western blot法检测miR-26a及PTEN/AKT/VEGF通路相关因子的表达。结果 RT-PCR结果显示低氧组HUVEC中miR-26a和PTEN的相对表达量为0.42±0.02和0.62±0.03,显著低于常氧组的1.00±0.34和1.00±0.35（P<0.05）。Western blot法检测结果显示,与常氧组相比,乏氧组HIF-1、VEGF和AKT蛋白表达明显升高,PTEN 蛋白明显降低（P<0.05）。结论 低氧抑制HUVEC miR-26a的表达并继发下游PTEN/AKT/VEGF因子的序贯反应,可作为创面改善缺血状态治疗的新靶点。     

低氧大鼠肺内血管内皮细胞生长因子表达与肺血管重建的关系

目的　了解低氧性肺动脉高压时肺内血管内皮生长因子 (VEGF)与肺血管重建的关系。方法　将 2 0只雄性 Wistar大鼠分为低氧性肺动脉高压组 (n=10 )和对照组 (n=10 )两组 ,肺动脉高压组以常压低氧建立大鼠肺动脉高压模型。以微导管法测定各组大鼠肺动脉压 ,采用免疫组织化学染色法检测模型大鼠肺内 VEGF的表达 ,对肺组织切片进行图象分析。结果　低氧 3周后 ,肺动脉高压组大鼠形成明显的肺动脉高压 ,肺小动脉壁细胞数增多 ,管壁增厚和管腔狭窄 ,管壁厚度占外径的百分比 (WT%)为 31.4%± 2 .6 %,管壁面积占血管总面积的百分比 (WA%)为 5 2 .8%± 3.4%,分别与正常对照组 16 .0 %± 1.8%和 2 8.7%± 2 .3%相比明显升高 (P<0 .0 1) ;肺小动脉内膜的 VEGF免疫阳性染色在低氧大鼠组为 2 .5 1± 0 .2 5 ,与正常对照组 1.2 7± 0 .15相比明显增强 (P<0 .0 1) ,低氧大鼠组 VEGF免疫阳性染色强度与 WT%和 WA%呈明显正相关 (r分别为 0 .792和 0 .785 ,P <0 .0 1)。结论　低氧所致 VEGF的合成增多在低氧性肺血管重建和肺动脉高压的发病过程中起一定的作用。     

肺内和肺外源性ARDS患者行肺保护性通气临床资料对比研究

目的 比较肺保护性通气对肺内和肺外源性急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者的临床疗效,为不同类型急性呼吸窘迫综合征治疗提供依据。方法 选取2014年2月~2015年12月笔者医院收治的47例肺内源性急性呼吸窘迫综合征患者作为内源组,同期47例肺外源性急性呼吸窘迫综合征患者作为外源组。两组均在常规治疗的基础上进行非保护性通气策略治疗。综合比较两组患者呼吸力学指标、血气分析值、住院时间等差异。结果 两组患者RM前,RM后1、2、6、12h,Ppeak、Pplat、Pmean等指标比较差异均无统计学意义（P>0.05）;RM后30min,内源组Ppeak、Pplat、Pmean水平分别为48.95±4.17cmH₂O（1cmH₂O=0.098kPa）、38.45±4.18cmH₂O、15.85±2.97cmH₂O,均比外源组高（P<0.05）;行肺保护性通气策略后30min,内源组SaO₂、PaO₂、SaO₂/FiO₂等动脉血气指标均低于对照组P<0.05）;肺保护性通气策略后1、2、6、12h,两组SaO₂、PaO₂、SaO₂/FiO₂等动脉血气指比较差异无统计学意义（P>0.05）;内源组、外源组患者住院时间分别为14.96±3.85天、15.41±3.72天,两组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 肺保护性通气策略在治疗内源性和外源性急性呼吸窘迫综合征均有明显疗效;在改善改善呼吸力学指标和动脉血气值等方面,对外源性急性呼吸窘迫综合征效果更好。     

模拟高原环境下高原肺水肿大鼠模型的建立

目的 在人工实验舱模拟高原环境下,探讨建立高原肺水肿大鼠模型的条件。方法 Wistar大鼠,雌雄各半,随机分为5组：空白对照组、低氧24 h组、低氧48 h组、低氧72 h组、低氧7 d组,测定大鼠肺组织含水量,肺组织中TNF-α、IL-6含量及病理改变。结果 与正常对照组相比,低氧24、48、72 h组大鼠肺组织含水量依次为（81.58±0.86）%、（82.13±0.57）%、（82.21±0.88）%,高于正常对照组（78.72±0.52）%,肺组织中IL-6依次为（329.30±133.58）、（323.92±127.42）、（506.29±197.19）pg/mL,TNF-α依次（221.08±20.26）、（208.05±20.33）、（244.63±51.53）pg/mL,高于正常对照组IL-6（187.26±69.49）pg/mL,TNF-α为（91.81±22.24）pg/mL。低氧7d组肺组织含水量（81.47±0.65）%、肺组织中IL-6（241.33±83.60）pg/mL、TNF-α（109.99±31.98）pg/mL,均显著低于低氧72h组,病理学结果显示72h组肺组织有炎性细胞浸润,肺泡壁有明显的充血和水肿。结论 模拟海拔5000 m环境,建立大鼠肺水肿模型的较好的时间为72 h。     

姜黄素磷脂复合物在大鼠体内的药代动力学评价

目的 通过对大鼠口服灌胃给药,评价姜黄素磷脂复合物在SD大鼠体内的药物代谢动力学性质。 方法 制备姜黄素磷脂复合物,以姜黄素作为对照,检测两者在水中的溶解度和体外累计溶出率;取SD大鼠12只,经口服灌胃给予姜黄素磷脂复合物或姜黄素混悬液后,不同时间点于大鼠眼底静脉丛取血,采用高效液相色谱法（HPLC）测定血浆中姜黄素的浓度。 结果 姜黄素磷脂复合物的溶解度、累计溶出率分别为0.150 g/L、68.04%,较姜黄素（0.057 g/L、50.68%）均有所增加。姜黄素磷脂复合物和姜黄素的药代动力学参数分别如下：C_max为（74.34±5.57） μg/L和（61.64±4.29） μg/L,T_max为（0.17±0） h和（0.25±0） h,AUC_0-t为（637.38±30.04） μg·h·L^-1和（172.41±31.66） μg·h·L^-1,AUC_0-∞为（857.80±223.69） μg·h·L^-1和（191.08±43.27） μg·h·L^-1。日内及日间精密度、回收率符合测定要求。 结论 姜黄素磷脂复合物混悬液与姜黄素相比吸收速度快,消除速率慢。     

基质金属蛋白酶9及其组织型抑制因子1在高血压大鼠血液及组织中的变化

目的 探讨肾血管性高血压大鼠（RHR） 血清、脑及血管组织中基质金属蛋白酶9（MMP-9） 和组织型基质金属蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）的表达以及血压与两者的关系。方法 雄性SD大鼠80只随机分成RHR组（40只） 和假手术组（40只）。RHR组采用双肾-双夹法制作高血压大鼠模型,鼠尾测压仪测定血压。根据Longa 5评分法和病理学结果确定脑卒中;Western blot和免疫组化测定脑组织和血管中MMP-9和TIMP-1的表达,双抗体夹心ELISA 检测血清MMP-9和TIMP-1水平。结果 与假手术组比较,RHR组大鼠术后2、4、6、8、10、12 周血压均明显升高[（157±9.0）比（128±7.0）,（176±10.0）比（122±6.0）,（194±8.0）比（117±6.5）,（202±12.0）比（124±8.0）,（218±15.0）比（126.±8.5）,（224±20.0）比（129.±9.0） mmHg,均P < 0.05];术后12周,RHR大鼠血清MMP-9高于假手术组[（783.4±109.79）比（573.4±109.59）ng/mL,P < 0.05];而RHR大鼠血清TIMP-1低于假手术组[（313.02±83.9）比（976.19±191.1） pg/mL,P < 0.05]。同时,RHR大鼠脑组织和血管MMP-9的表达均明显高于假手术组 （均P < 0.05）,而TIMP-1的表达则均明显低于假手术组（均P < 0.05）。Pearson相关分析显示收缩压与血清、脑及血管组织中的MMP-9水平均呈正相关（r=0.557,r=0.774和r=0.661,均P < 0.05）,而与TIMP-1水平均呈负相关（r=-0.481,r=-0.535和r=-0.685,均P < 0.01）。结论 肾血管性高血压大鼠血清、脑和血管组织中MMP-9表达升高,而TIMP-1表达降低。两者在血液和组织中的变化趋势保持一致,血压的升高与血液和组织中MMP-9的升高和TIMP-1的降低相关。