树鼩驯养繁殖实验动物标准及丙型肝炎动物模型技术平台建设的探讨

目前用于生物医学研究的树鼩大多数来源于野生捕获,由于个体间的差异较大,其实验结果的均匀性和可重复性较差,亟待解决树鼩人工饲养设施条件、繁殖关键技术、动物质量标准等一系列基础科学问题.许多文献报道了树鼩与其他实验动物比较,在肝病研究中具有巨大的开发应用潜力,在丙型肝炎动物模型研究中,亟待解决丙型肝炎病毒(HCV)细胞培养体系、HCV病毒感染剂量与感染途径、HCV病毒对树鼩体外、体内感染后病毒核酸检测、抗体检测和病理检测等技术方法的建立及动物模型评价标准问题.本文就上述问题系统性地进行初步报道,旨在为树鼩早日实现实验动物化和丙型肝炎疾病研究中应用提供科学依据.     

树鼩丙型肝炎动物模型研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)感染是全球关注的公共健康问题之一。只有建立稳定可靠的HCV感染模型,才能更好地研究HCV感染慢性化和致癌的机制,从而推动丙型肝炎疫苗的研制和抗丙型肝炎药物的筛选。HCV宿主范围特别狭窄,只有人和黑猩猩对其易患。目前有一些体内和体外的实验结果初步显示,树鼩是目前继黑猩猩之后唯一能感染HCV的动物。该文对HCV感染树鼩动物模型的研究进展予以行综述。     

病毒性肝炎树鼩动物模型研究与建模策略

病毒性肝炎是由肝炎病毒引起的肝脏疾病。在我国,病毒性肝炎高度流行,其中又以乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)和丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)危害较大。动物模型是研究疾病感染与发病机制,及进行药物与疫苗研究的必要工具,目前病毒性肝炎实验动物模型的研究已取得长足的发展,主要集中于病毒在动物体内的感染特性及发病规律方面。本文仅就病毒性肝炎动物模型,尤其乙型、丙型肝炎树鼩动物模型的研究及建模策略进行综述。     

丙型肝炎病毒感染模型的研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)自然宿主范围很窄,建立理想的实验模型便成为研究其生物学特征及进行药物筛选和疫苗效果评价的关键之一。本文就近年来在HCV感染模型这方面的研究进展作一综述。     

诺如病毒及其疫苗的研究进展

诺如病毒（Norovirus,NoVs）是引起世界各地急性胃肠炎的主要病原体,由于该病毒分子进化快、剂量感染低、持续排毒久、传播途径多等原因导致其流行较为严重,据世界卫生组织（WHO）统计,每年有超过1亿人感染诺如病毒,并且引起数万人死亡,是严重危害全球公共卫生的主要病原体之一,因此对于该病毒及其疫苗的研究刻不容缓。迄今,研究者们已经克服了技术障碍,在诺如病毒生物学等方面的研究已取得较为显著的成果,开发了诺如病毒检测的滴液微流体技术、开展了人类诺如病毒体外培养、诺如病毒恒河猴动物模型建立、NoVs病毒样颗粒疫苗研究等,为今后的诺如病毒及疫苗研发奠定重要的研究基础。但是,由于诺如病毒存在着基因多样性、难以体外培养、缺乏有效的动物模型等问题,使得其疫苗的研发目前仍处于瓶颈期。本文在介绍NoVs病原学和流行病的基础上,着重从病毒感染检测方法、体外培养、动物模型、疫苗研发进展等几个方面对诺如病毒的研究现状进行全面综述和展望。     

人肠道病毒动物模型的研究进展及其应用现状

人肠道病毒(HEV)分为A、B、C、D四个种群，包括一百多个血清型。HEV流行广泛，其感染可引起手足口病、脑炎、急性弛缓性麻痹、心肌炎等多种临床疾病，甚至死亡。但目前尚无特异性抗HEV药物，已应用于临床的灭活EVA71疫苗、PV疫苗仅可预防EVA71、PV感染，对其他型别的HEV无预防作用。动物模型是HEV致病机制研究、疫苗研发及抗病毒药物筛选评价的重要工具。本文综述了HEV动物模型的最新研究进展及其应用现状。     

SARS冠状病毒感染Lewis大鼠模型的建立

目的 通过观察SARS-CoV感染Lewis大鼠后,病理学、免疫学以及病毒的复制与外排情况变化,探讨其能否作为有效的SARS动物模型.方法 SARS病毒感染9只Lewis大鼠,在感染后不同时间安乐死动物,应用光镜对动物的各脏器进行病理观察研究;用病毒分离和RT-PCR方法检测病毒外排与复制的情况;用ELISA法检测动物产生特异性抗体情况.结果 在SARS-CoV感染Lewis大鼠后,肺组织出现一定的与人类SARS疾病相似的病理改变,在动物体内可检测到活病毒或病毒核酸,并可检测到特异性IgG抗体的存在.结论 Lewis大鼠出现了特异的免疫反应及特征性病理改变,可做为灵长类SARS动物模型的有益补充用于SARS发病机理及疫苗的研发等.     

人类乙型肝炎病毒感染旱獭模型研究进展

旱獭肝炎病毒(woodchuck hepatitis virus,WHV)是继人类乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)之后发现的另一个嗜肝DNA病毒。旱獭慢性感染WHV可逐步发展重型肝炎和肝癌,与人类感染HBV发展过程极为相似。最初WHV病毒学和发病机制研究来自于捕获的、自然感染WHV的野生野旱獭,由于其饮食、寄生虫感染、环境毒性、WHV感染源和感染进程等背景资料,给研究带来障碍。目前,一些实验室已经在室内成功饲养、繁殖旱獭,实验动物化的旱獭在WHV和肝癌研究中显示出优势:可以给新生旱獭接种、感染WHV,培育慢性WHV旱獭携带者。实验研究已经发现WHV可导致肝癌,与流行病学和HBV是人类肝癌诱因的分子病毒学研究研究结果一致。慢性WHV旱獭携带者是人类HBV慢性感染的抗病毒治疗的临床前评估最有价值的动物模型,可以用于侯选抗病毒药物评估以及实验疫苗、免疫调节剂治疗和预防HBV感染性疾病的后遗症的安全性和有效性研究。本文综述了WHV分子病毒学特征、旱獭及其他动物自然感染嗜肝DNA病毒情况,以利于研究人类HBV。     

空肠弯曲菌感染动物模型的研究进展

空肠弯曲菌是一种全球关注的人兽共患病原菌,感染后可引起人和动物多种疾病。动物模型是开展致病机理、疫苗评价和药物开发等研究的基础。空肠弯曲菌由于培养条件苛刻以及感染实验动物的疾病相似性、经济性和重复性等因素,仍缺乏良好的感染动物模型,其致病机理迄今尚不清楚。本文对已报道的空肠弯曲菌感染实验动物模型进行综述。     

发热伴血小板减少综合征病毒动物感染及动物模型

发热伴血小板减少综合征病毒（severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV）是我国2009年发现的一种新型布尼亚病毒。蜱虫是其重要储存宿主及传播媒介,野生动物和家畜均存在自然感染。α/β干扰素受体基因敲除的免疫缺陷小鼠是理想的实验动物模型。本文综述了SFTSV的动物感染及动物模型的研究成果,为SFTSV自然流行的控制以及动物实验提供依据。     

树鼩肝炎动物模型的研究进展

肝炎的的大范围流行已成为国内外关注的重要公共卫生问题之一。甲肝、乙肝虽已有疫苗，但不能忽视未来由于病毒变异所带来的威胁。丙肝目前尚未发现非常有效的疫苗，且丙肝的病理学机制也尚未完全清晰，主要原因是缺乏理想的动物模型。树胸属于低等灵长类动物。研究发现，他对很多人类疾病易感，所以建立肝炎树胸动物模型成为现在肝炎研究的一个热点。本文介绍了各型肝炎主要是甲、乙、丙型肝炎研究中建立树胸动物模型的自内外进展情况及存在的问题。     

丙型肝炎病毒研究模型的现状与未来

在过去较长时间内,由于缺少合适的丙型肝炎病毒研究模型,对丙肝病毒感染机制、生活周期和致病机制的研究进展较为缓慢。对丙肝病毒的认识不足严重阻碍了相关预防性疫苗和治疗药物的研制。近年建立的丙肝病毒全基因体外培养系统是一项重大突破,这将促进人们对丙肝病毒的全面认识和丙型肝炎防治药物的开发。     

糖尿病动物模型研究进展

综述糖尿病动物模型研究进展,并对目前科研中常用的糖尿病动物模型制备方法、机制进行综述,并简略评价其优缺点。目前国内外糖尿病动物模型的制备方法很多,各有其特点,大体可以分为实验性糖尿病动物模型、自发性糖尿病模型等。其研究的不断进展,为深入探讨糖尿病病因、病机及其药物治疗提供了借鉴。     

Hepatitis C in childhood

The prevalence of hepatitis C virus (HCV) infection is relatively low in childhood. Blood transfusion has been the principal route of acquisition in children but vertical transmission is gradually occupying primacy in the developed world. The risk of vertical transmission increases with higher maternal viraemia and human immuno-deficiency virus (HIV) co-infection but current international guidelines do not suggest avoidance of vaginal delivery and breastfeeding to minimise the risk of vertical transmission. The diagnosis of perinatal transmission is different from that in older child or adult and detection of HCV-RNA is essential. Although the natural history of HCV infection in children is not well characterised, almost 50-80% will progress to chronic hepatitis among vertically infected and blood transfusion acquired hepatitis C cases. Children have a lower viral load, lower ALT values and milder histological derangement as compared to adults with chronic hepatitis C cases. Experience of treatment of chronic hepatitis C in children is limited and still evolving. Few patients achieve spontaneous remission and progression to a more severe liver disease might occur in adult life. Here, the natural history, diagnosis and management of HCV infection in children are discussed with special emphasis on features which are different from adults.     

鼠巨细胞病毒感染C57BL/6小鼠急性肝炎动物模型的建立与鉴定

目的：建立鼠巨细胞病毒（MCMV）感染C57BL/6小鼠急性肝炎模型并对其感染特点进行分析及鉴定。方法：将24 只C57BL/6小鼠随机分为阴性对照组（n =12）及病毒感染组（n =12），病毒感染组腹腔注射1.0×106 PFU（200 μL）MCMV悬液，阴性对照组注射等体积小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）悬液。于感染后第3天和第7天取外周血分离血清检测谷丙转氨酶（ALT）及谷草转氨酶（AST）。同时进行肝组织病毒分离、组织病理学及MCMV IE和M55基因、细胞因子白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的检测。结果：病毒感染组肝组织匀浆病毒分离均为阳性，肝炎发生率为100%。在感染后第3天即发生肝炎病理改变，病毒感染组血清ALT及AST较阴性对照组明显升高（P ＜0.01）；病毒感染组肝脏HE染色第3天可见局灶性炎性细胞浸润及肝脏点灶状坏死，持续至第7天，Ishak评分较阴性对照组明显升高（P ＜0.01）；在感染后第3天病毒感染组肝组织内可检测到MCMV IE及M55基因，且在感染后第7天仍可测得IE基因；感染后第3天及第7天病毒感染组炎性细胞因子IL-6、TNF-α及IL-1β mRNA表达水平明显升高（P ＜0.05）。 结论：成功建立MCMV感染C57BL/6小鼠急性动物肝炎模型，其感染表现主要集中在急性感染前期。     

直接抗病毒药物治疗丙型肝炎合并透析患者的临床应用

丙型肝炎病毒（HCV）感染在慢性肾功能不全患者中较常见，尤其是在进行透析的患者中，HCV感染较普通患者的风险极大增加，同时还会导致肝细胞癌及肝硬化的发病率明显升高。近年来直接抗病毒药物（DAAs）在慢性丙型肝炎的治疗中取得了较好的疗效及安全性，本文通过总结DAAs在丙型肝炎合并透析患者中的应用进展，发现对于基因1~6型HCV合并透析患者，推荐使用G/P方案；由于索磷布韦（SOF）经肾脏代谢，在重度肾损害人群中的血药浓度较高，因此SOF组合方案并不推荐用于丙型肝炎合并透析患者的治疗。     

乙型肝炎病毒与丙型肝炎病毒重叠感染重症化探讨

目的:探讨HBV、HCV重叠感染时,病毒之间的相互关系及对病情转归的影响。方法:用ELISA法检测180例患者乙肝病毒血清学指标(HBV-M)和丙肝病毒抗体(抗-HCV),用PCR和RT-PCR体外扩增法检测HBV-DNA和HCV-RNA。结果:HBV、HCV重叠感染LC和HCC的发生率远远高于单纯HBV或HCV感染,HBV、HCV重叠感染患者中HBV-DNA和HBsAg的阳性率明显低于单纯HBV感染者。结论:HBV重叠感染HCV后,对肝细胞的损害加重,重叠感染患者病情的发展及转归可能主要与HCV有关,是HBV、HCV作用相互叠加的结果。     

丙型肝炎病毒体外细胞转染模型的研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)自1989年由美国学者Choo等首次从受感染的黑猩猩血清中分离得出,学者们对HCV体外培养体系进行了大量相关研究。从HCV动物模型到细胞模型,从HCV细胞感染模型到转染模型,从HCV亚基因组复制子到全基因组细胞培养体系,期望找到一种能够支持HCV体外复制的稳定可行的培养体系,来研究HCV复制机制和致病机制,尽早开发出新的抗HCV药物和有效的疫苗。     

小干扰RNA(siRNA)对小鼠乙型肝炎病毒复制和表达影响的实验研究

目的建立小鼠急性乙型肝炎病毒感染的动物模型,并在此基础上观察小干扰RNA(siRNA)对小鼠乙型肝炎病毒复制和表达的影响。方法用水动力学方法,向小鼠尾静脉注射1.5倍的HBV真核表达质粒pHBV1.5建立小鼠急性乙型肝炎病毒感染模型,明确感染后,再将其与针对乙型肝炎病毒核心区的siRNA表达载体(psiHBV4)共注射,于注射后第6天取血测血清HBsAg,HBeAg(MEIA),通过RT-PCR检测肝组织HBVC区mRNA转录子的水平。同时设立PBS对照组,空载体对照组和无关干扰对照组。结果注射后第6天血清中HBsAg,HBeAg在pHBV1.5感染组中高表达。psiHBV4干扰组中HBeAg的表达受到了明显的抑制,与感染组比较差异有显著性(P<0.01),RT-PCR显示肝内HBVCmRNA水平亦明显降低。而无关干扰对照组则无相应的干扰作用。结论RNAi能特异,高效的抑制小鼠体内HBV的复制和表达,同时通过水动力学方法,成功建立了小鼠急性乙型肝炎病毒感染的动物模型,为进一步研究乙型肝炎病毒奠定了基础。