多发性硬化实验动物模型研究进展述评

实验性自身免疫性脑脊髓炎（expermiental automimune encephalomyelitis,EAE）是多发性硬化的实验动物模型,经过近2个多世纪的发展,已可以在猴、大鼠、小鼠等动物制备EAE模型,在同一种品系动物采用不同免疫抗原制备的EAE模型在敏感性和临床特点具有多样性。本研究就EAE的发展史和目前不同品系实验动物、不同抗原制备EAE模型的特点做一述评,对未来EAE模型的发展前景进行探讨。     

细胞凋亡与多发性硬化

多发性硬化(MS)是一种以中枢神经系统(CNS)脱髓鞘病变为特征的自身免疫性疾病，细胞凋亡在通过清除活化T细胞而进行的自身免疫调节及脑内组织细胞(少突胶质细胞、巨噬细胞和小胶质细胞等)损伤、修复中起重要作用。笔者就MS和实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的细胞凋亡及其临床意义作一综述。     

基质金属蛋白酶在多发性硬化中的研究进展

基质金属蛋白酶(MMPs)是一类蛋白水解酶家族,几乎能降解细胞外基质所有成分。MMPs在组织修复、生长、免疫应答和细胞分化中发挥重要作用。MMPs表达水平的变化与多发性硬化(MS)和实验性自身免疫性脑脊髓炎的发病及病情进展密切相关,MMPs在MS中的作用越来越受到关注。因此,对MMPs的研究有助于阐明MS的发病机制,并为MS的预防和治疗提供新的思路。     

多发性硬化免疫学与治疗学研究新进展

本文介绍了多发性硬 化的免疫学研究和治疗探索,包括:病因学,自身免疫炎症机制,粘附分子,细胞因子,Ⅰ型干扰素免疫调节和细胞因子疗法等方面的新进展。     

神经干细胞在多发性硬化症动物模型中的研究进展

多发性硬化症是一种由自身反应性免疫细胞攻击中枢神经系统引起的多灶性脱髓鞘和轴突损伤的疾病。神经干细胞移植是一种被日渐关注的新型治疗手段,其优势在于它不仅可以发挥免疫抑制功能,而且可以促进受损神经细胞的修复和再生。实验性自身免疫性脑脊髓炎作为一种实验动物模型被广泛用于研究多发性硬化症。本文针对近几年国际上对神经干细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎模型中的研究加以总结,期望会对多发性硬化症的治疗提供新的研究思路。     

骨桥蛋白与多发性硬化

骨桥蛋白(OPN)是一种多效性的结合蛋白,可作为致炎因子参与多种自身免疫性疾病发病。OPN在不同临床类型多发性硬化(MS)患者血浆中的水平有所不同,OPN在损伤过程中不同程度的表达与疾病的严重程度密切相关,且在动物模型实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)研究中同样发现,OPN是发病关键因子之一。OPN在MS及其EAE发病机制中起着重要作用,可能与OPN作为一种免疫应答的诱导物,影响Th1/Th2平衡,调节IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子α等细胞因子的释放有关。研究OPN的作用将有助于MS发病机制的探索,并且为临床治疗提供新思路。     

甲基强的松龙联合降纤酶治疗多发性硬化的体会

目的 探讨甲基强的松龙联合降纤酶(defibrase)对多发性硬化(multiple sclerosis,MS))的疗效. 方法 选择复发型多发性硬化的患者16例,随机分为A(试验组)、B(对照组)2组各8例,均给予甲基强的松龙治疗,同时A组静脉滴注降纤酶,首次10AU (单位),以后维持剂量为5AU,隔日注射,通常疗程为一周,用前用100 ml以上生理盐水稀释,静脉点滴1小时以上.分别于治疗前及治疗后2周时对患者进行中国卒中量表(CSS)及日常生活活动能力(ADL)评分. 结果 治疗2周后CSS评分,与治疗前比较试验组显著下降(分别22.09±9.2、10.11±5.5,P<0.001);对照组也明显下降(25.11±6.4、17.41±7.4,P<0.02);ADL评分,与治疗前比较,A、 B组均上升(分别38.25±17.5与78.15±20.4、36.15±16.4,P<0.02与55.82±18.5, P<0.001).治疗2周后,2组间比较,试验组组CSS评分明显低于对照组,ADL评分显著高于B组(均P<0.05).不良反应2组均较少. 结论 甲基强的松龙联合降纤酶治疗MS方便实用,疗效好,降纤酶其强大而又可靠的降低血浆纤维蛋白原,血液黏度和血小板凝聚等作用,所起到的神经保护作用,对MS患者非常有益.     

多发性硬化动物模型的复制

目的复制慢性复发性实验性变态反应性脑脊髓炎(CrEAE)的动物模型。方法采用豚鼠脊髓匀浆及完全福氏佐剂,对6周龄雌性Hartley豚鼠颈后皮内一次性致敏,对照采用用生理盐水代替脊髓匀浆。致敏后每日进行致残程度评分,并称取体重。结果模型组100%的动物发病,83.3%的动物在2月内有复发,2月内平均发病次数为2.0±0.63次。对照组无一发病。结论本研究成功地复制了CrEAE豚鼠模型,是目前较好的多发性硬化动物模型。     

树突状细胞的免疫调控与多发性硬化发病机制的研究进展

树突状细胞(DC)是初始T细胞的惟一启动者,主要通过三类信号调整效应T细胞的分化。作为免疫调控的关键因素之一,DC对促进多发性硬化(MS)的发病具有重要作用。本文综述了MS中枢神经系统中致病性DC的特点,各型MS外周DC的异常变化,以及DC在诱导实验性变态反应性脑脊髓炎中的作用。     

适用于MR成像的多发性硬化大鼠模型的研究进展

多发性硬化(MS)是中青年非外伤性致残的最常见原因,但是MS的发病机制迄今尚不完全明了.核磁共振成像(MRI)是目前诊断、监测MS的重要手段.实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)是公认的研究人类MS的动物模型,MRI为EAE模型的评估提供直接、客观的影像学依据.理想的EAE大鼠模型不仅有助于开展对MS的防治、发病机理、相关药物开发等多方面的研究,而且为MRI提供合适的研究平台,对MS早期诊断、病情的监测和评价提供重要线索.     

小胶质细胞在Cuprizone所致髓鞘脱失动物模型中的双重性作用

小胶质细胞(microglia)是中枢神经系统(CNS)中固有的免疫监视细胞,是CNS的重要组成部分,构成CNS的第一道免疫防线。小胶质细胞活化是许多CNS疾病的重要病理特征之一,其在多发性硬化(MS)的发病过程中扮演重要角色。MS是以炎症反应、髓鞘脱失和轴突损伤为主要特征的CNS疾病,MS患者及实验动物脑内均可见活化的小胶质细胞,其作用机制复杂,具有致炎和抗炎双重作用。一方面小胶质细胞可通过促进吞噬、轴突再生、释放神经营养因子等作用促进髓鞘的再生修复;另一方面小胶质细胞还可通过释放炎性因子、自由基、蛋白酶等对神经元和胶质细胞发挥毒性作用。Cuprizone(双环己酮草酰二腙)所致髓鞘脱失动物模型是研究髓鞘再生修复的理想模型,了解小胶质细胞的双重性对于理解MS的发生发展,寻找疾病治疗靶点具有十分重要的理论和实际意义。在此本文对小胶质细胞在cuprizone所致髓鞘脱失动物模型中的双重性作用做一综述。     

α-硫辛酸对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠模型干预的初步研究

目的 研究α-硫辛酸(α-LA)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠模型干预的有效性,探讨α-LA临床治疗多发性硬化的可能性.方法 Wistar大鼠30只,其中22只制作EAE模型,分为α-LA干预组(11只)及免疫组(11只),另8只为非免疫组.α-LA干预组大鼠于免疫当天开始每天1次腹腔注射α-LA(100 mg/kg),至实验28 d结束处死日止;免疫组及非免疫组大鼠每天腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液.对各组大鼠进行神经功能缺损评分、病理学及免疫组织化学检查.结果 α-LA干预组的EAE发病率为5/11,显著低于免疫组的9/11(P<0.01).α-LA干预组大鼠免疫后第14天及第16～28天的神经功能缺损评分显著低于免疫组(P值均<0.05).α-LA干预组大鼠脑组织切片脱髓鞘病灶数为(3.85±1.21)个,脊髓组织切片病灶数为(4.26±2.65)个,均显著少于免疫组的(9.09±5.61)和(14.45±5.10)个(P值均<0.05).免疫组织化学髓鞘碱性蛋白(MBP)染色也显示,α-LA干预组病理切片的髓鞘松散、脱失明显轻于免疫组.结论 α-LA能显著改善EAE大鼠的神经功能,干预EAE的发病.     

应用MOG—TrxA建立小鼠EAE动物模型的新方法

目的探索利用基因工程生产的少突胶质细胞糖蛋白-硫氧还融合蛋白（MOG—TrxA）免疫C57BL／6（H-2b）小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）动物模型的方法。方法利用实验室已经重组成功的携带pET32（a）-MOG—TrxA质粒的大肠杆菌BL21和携带pET32（a）-TrxA质粒的空载大肠杆菌BL21分别诱导大量表达MOG—TrxA和TrxA,并利用蛋白金属螯合亲和层析纯化,超滤法浓缩除盐,Bradford法蛋白定量,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。利用制备的MOG—TrxA抗原免疫C57BL／6（H-2b）小鼠诱导EAE动物模型,以TrxA免疫动物作为对照组,以脊髓匀浆（SCH）免疫动物作为阳性对照组,以临床评分、体重变化、HE染色和Kluver—Barrera髓鞘染色评分等指标,评价模型的质量。结果MOG—TrxA组动物在临床评分、HE染色病理评分和Kluver—Barrera髓鞘染色病理评分等指标与TrxA组相比明显增高,体重明显下降,数据差异均有统计学意义（均P〈0．01）,与SCH组相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论利用基因工程制备的MOG—TrxA免疫C57BL／6（H-2b）小鼠能成功建立慢性非缓僻型EAE动物模型。     

2- BFI对EAE大鼠中枢神经系统内小胶质细胞及MCP-1的影响

目的：观察2-（2-苯并呋喃基）-2-咪唑啉[2-（-2- benzofuranyl）-2- imidazoline,2- BFI]对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠中枢神经系统内小胶质细胞及MCP-1的影响,并探讨其保护EAE大鼠的作用机制。方法50只雌性SD大鼠随机分为EAE组、2- BFI低剂量组、2- BFI中剂量组、2- BFI高剂量组及对照组,每组10只,采用豚鼠脊髓匀浆免疫诱导SD大鼠建立EAE模型,观察每组大鼠发病情况并进行临床症状评分;采用HE染色和LFB髓鞘染色观察中枢神经系统的病理变化,对其炎症浸润程度加以评分;用免疫组化法测定脑干中激活的小胶质细胞及MCP-1阳性细胞数量。结果与EAE组比较,大、中、小剂量2- BFI干预组大鼠EAE发病率下降,临床症状减轻,潜伏期延长,中枢神经系统内炎性细胞浸润减少,2- BFI中剂量组在EAE临床症状和病理学改变方面差异有统计学意义（P＜0.05）;免疫组化结果显示,与EAE组比较,2- BFI中剂量组的活化的小胶质细胞数及MCP-1阳性细胞数均减少（P＜0.05）。结论中剂量2- BFI对EAE大鼠具有神经保护作用,其作用机制可能与2- BFI抑制小胶质细胞的激活,减少MCP-1的表达有关。     

辛伐他汀对实验性变态反应性脑脊髓炎和多发性硬化单个核细胞增殖的影响

目的 研究他汀类药物对致敏实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）模型及多发性硬化（MS）患者单个核细胞增殖的影响,以及与人重组干扰素β1a（INFβ-1a）的协同作用.方法 （1）建立EAE模型,取其脾脏制成单个核细胞悬液,分别予ConA、LPS及MOG刺激,同时予不同浓度辛伐他汀、INFβ-1a进行干预,3H-TdR掺入法检测辛伐他汀对单个核细胞增殖的影响及两者协同作用.（2）根据McDonald（2005年）诊断标准,收集确诊为MS的患者15例,要求在近期均未行特殊免疫治疗,分离外周血单个核细胞,同上进行药物干预及检测.结果 （1）辛伐他汀以剂量依赖的方式抑制了致敏EAE小鼠脾单个核细胞的增殖;常规剂量的辛伐他汀对致敏EAE小鼠脾单个核细胞增殖有明显抑制作用,低剂量的两药联用对经ConA、MOG致敏的EAE小鼠脾单个核细胞抑制增殖作用增强,与阴性对照组相比,差异均有统计学意义（P＜0.05或0.01）.（2）辛伐他汀以剂量依赖的方式抑制了致敏MS患者外周血单个核细胞的增殖;常规剂量的辛伐他汀对致敏MS患者外周血单个核细胞增殖均有明显抑制作用,与阴性对照组相比,差异有统计学意义（P＜0.05或0.01）;低剂量的辛伐他汀与不同剂量INFβ-1a联用具协同作用.结论 他汀类药物是有效的免疫调节剂,不仅调节异常的细胞免疫及体液免疫,还可协同INFβ-1a抑制致敏的单个核细胞增殖.     

新生儿高胆红素血症动物模型研究进展

目前多种方法可建立新生儿高胆红素动物模型,如通过腹腔或静脉注射胆红素方法、利用基因缺陷动物模型、利用注射化学药物特殊的作用,以及延髓直接注射胆红素的方法等,为更好的利用动物模型进行高胆红素血症及所导致的核黄疸、听觉障碍等的病因、发病机制及治疗的研究,本文对新生儿高胆红素血症各类动物模型构建方法、应用和优缺点进行综述,以期为新生儿高胆红素血症模型的研究提供参考。