不同剂量博莱霉素诱导 KM 小鼠肺纤维化模型的比较

目的：研究不同剂量博莱霉素（ BLM）诱导KM小鼠肺纤维化模型的病理变化,系统性分析KM小鼠肺组织不同时间点炎症反应、死亡率、转化生长因子－β1（ TGF－β1）和诱导型一氧化氮合酶（ iNOS）表达水平与肺纤维化的关系。方法 KM小鼠随机分为假手术组和模型低（2.5 mg／kg）、中（5 mg／kg）、高剂量（10 mg／kg）组。模型组小鼠气管内一次性滴注BLM,假手术组予等量生理盐水,分别于第7、14、28天取材,做肺组织HE、Masson染色,免疫组化法测TGF－β1,硝酸酶还原法测iNOs。结果各组均在手术过程中出现死亡,小鼠死亡高峰出现在8～14 d,总死亡率高剂量组明显高于中、低剂量组。 HE和Masson染色结果显示,模型低、中、高剂量组均导致了肺组织炎症反应,14 d炎症反应最强烈,中、高剂量比低剂量更明显,且两组在14 d开始出现肺纤维组织增生,高剂量比中剂量明显,28 d均出现典型肺纤维化,而低剂量组始终未见明显纤维化。模型组TGF－β1和iNOS均高表达,且中、高剂量组明显高于低剂量组。结论2.5 mg／kg BLM不能有效诱导KM小鼠肺纤维化,5 mg／kg和10 mg／kg均可诱导肺纤维化,但是10 mg／kg造模小鼠死亡率高,适合于短期造模,若需要典型的肺纤维化模型以5 mg／kg 28 d天取材较好;TGF－β1和iNOS水平与肺纤维程度有关。     

小剂量多次尾静脉注射与气管内滴注博来霉素致小鼠肺纤维化模型的比较研究

目的：与单剂量气管内滴药模型比较,研究小剂量多次尾静脉注射博莱霉素（bleomycin,BLM）致小鼠肺纤维化的特点与差异。方法：40只雄性ICR（Iastitute for Cancer Research）小鼠随机分为模型组I、模型组II和两个对照组,每组10只。模型组I尾静脉注射10mg／kgBLM均持续14d;模型组II于实验第一天气管内注入5mg／kg BLM,两对照组分别给与等量生理盐水,28aM处死并收集肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）。检测BALF细胞总数及蛋白含量、肺系数、羟脯氨酸（hydroxyproline,HYP）,观察肺组织病理改变。结果：1）两种给药方法均能使肺组织发生明显的炎性和纤维化反应,两模型组BALF细胞总数及蛋白含量、肺系数、HYP含量、肺间质损伤指数较两对照组均显著增加（P〈0．01）;2）模型组I病灶主要分布在胸膜下及血管周围,模型组II则主要分布在支气管和细支气管周围;3）模型组II病死率高于模型组I;4）模型组IIBALF蛋白含量高于模型组I（P〈0．05）;BALF细胞总数、肺系数、HYP含量、肺间质损伤指数两组间差异无统计学意义（p〉0．05）。结论：小剂量多次尾静脉注射与气管内滴入BLM都能成功制备肺间质纤维化动物模型,但两者纤维化形成的部位存在着一定的差异,小剂量多次尾静脉给药肺间质纤维化模型更接近特发性肺间质纤维化。     

气管滴注PM2.5混悬液对肺纤维化小鼠的影响及新对叶百部碱的干预作用

为了研究PM_2.5混悬液对博来霉素（BLM）诱导的肺纤维化小鼠的影响以及新对叶百部碱（NTS）的干预作用,本实验采用析因实验设计研究了PM_2.5混悬液给药次数（每周1次或2次）和BLM剂量（1.5、3.0 U/kg）对小鼠肺纤维化模型的影响。小鼠于第0天经气管滴注1.5或3.0 U/kg的BLM;从第1天开始,小鼠每周1次或2次气管滴注5 mg/kg的PM_2.5混悬液;从第8天开始,给药组小鼠每天1次灌胃给予30 mg/kg的NTS直至21 d;21 d后观察肺组织病理切片的苏木精-伊红（HE）染色和Masson染色结果,计算小鼠肺系数、肺组织羟脯胺酸（HYP）含量和基于病理切片的HE炎性评分和胶原容积分数（CVF）。结果显示,对于单独滴注PM_2.5混悬液的小鼠,每周1次时只有HE炎性评分显著升高,每周2次时HYP和HE炎性评分增加但CVF无显著升高;而PM_2.5与BLM联合滴注的各组小鼠的CVF均显著增加;新对叶百部碱能够显著改善联合滴注小鼠的肺组织病理改变、减少胶原沉积,降低小鼠的CVF和α-SMA蛋白的表达,具有抑制肺纤维化的作用。本研究结果表明,单独滴注PM_2.5主要引起肺部炎症,即使多次给药引起肺纤维化的可能性也较小;但PM_2.5与BLM联合滴注则小鼠肺组织胶原沉积显著增加,大大加重了BLM引起的肺纤维化,提示PM_2.5对有呼吸系统疾病或基础性疾病的患者影响很大,而新对叶百部碱对联合滴注模型小鼠的肺纤维化具有明显的改善作用。     

丹参、川芎嗪联合应用对肺纤维化大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

观察丹参川芎嗪合剂腹腔注射给药对博来霉素（bleomycin,BLM）致肺纤维化大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mR—NA表达的影响。方法：健康成年SD雄性大鼠90只,随机分为生理盐水（NS）组,BLM组,地塞米松（D）组,丹参川芎嗪合剂小剂量（S）组,合剂中剂量（M）组,合剂大剂量（L）组,每组15只,后五组按照BLM5mg／kg气管内给药制备肺纤维化大鼠模型,NS组气管内灌注同体积的NS。24小时后S组、M组、L组分别腹腔注射丹参川芎嗪合剂药物,NS组、BLM组腹腔注射等体积的NS．连续给药至第7天．第14天,第28天后各组分别处死大鼠5只。取肺组织分别行HE和Masson染色,观察肺泡炎和肺纤维化情况并评分;实时荧光定量PCR（Real—time quantitative Polymerase Chain Reaction,Real Time PCR）测定肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达;血清用于肝、肾功能检测。结果：（1）各组大鼠血清旰、肾功能测定结果两两比较差异无统计学意义。（2）肺组织病理学观察提示：NS组各时间点大鼠未发现肺泡间隔水肿、炎性细胞浸润及肺组织纤维化的形成;BLM组第7天大鼠肺泡炎症改变明显,肺组织纤维化不明显,BLM组第14天、第28天大鼠肺泡结构破坏、间质增生,形成广泛纤维化,同时存在肺泡炎;D组有肺泡炎症改变,但是炎性细胞浸润程度较BLM组轻,纤维化程度和肺泡结构破坏也较BLM组轻;S组肺泡炎和肺纤维化程度均与BLM组类似。M组、L组第7天大鼠肺组织改变与BLM组大致相同;M组、L组第14天肺泡炎程度明显低于BLM组。M组、L组第14天、第28天肺纤维化程度明显低于BLM组（P〈0．05）。（3）实时荧光定量PCR检测肺组织I、Ⅲ型胶原mRNA表达：以NS组为参考标准,BLM组mRNA表达明显增多,D组相对于BLM组表达明显减少：S组与BLM组比较无明显差异,与D组比较其表达增多;M组、L组明显低于BLM组,与S组比较表达也明显减少（均P〈0．05）。结论：丹参川芎嗪合剂腹腔注射能够改善肺纤维化,且对肝、肾功能无明显毒副作用。     

不同剂量博来霉素滴鼻诱导C57BL/6 小鼠 肺纤维化模型的研究

目的 探讨以鼻腔滴注博来霉素（BLM）的方式诱导C57BL/6 小鼠肺纤维化模型的最佳方法。 方法 7 ～ 8 周龄雄性小鼠30 只,分为0.10 u BLM 组、0.25 u BLM 组、0.40 u BLM 组,每组8 只,麻醉后分 别一次性滴鼻0.10、0.25 及0.40 u BLM ;对照组6 只,给予等体积的磷酸盐缓冲液。观察并记录小鼠体重变 化与生存率,实验结束后处死小鼠。用甲醛固定肺组织,苏木精- 伊红染色评价肺组织炎症变化;Masson 染 色评价肺纤维化变化。结果 给药后小鼠体重逐渐下降,并在第8 和9 天再次上升,第14 天逐渐趋近于对照组, 第28 天BLM 组所有小鼠肺部组织产生纤维化。各组肺纤维化评分比较,差异无统计学意义（P >0.05）。但 给药0.25 与0.40 u BLM 的小鼠死亡率高,个体间差异较大,不利于实验样本的收集与数据的统计分析。 结论 0.10 u BLM 滴鼻给药是复制C57BL/6 小鼠肺纤维化模型便捷、理想的实验方法。     

曲古抑菌素A对博莱霉素致肺纤维化小鼠NF-κB表达的影响研究

目的观察曲古抑菌素A（TSA）对博莱霉素（BLM）诱导的肺纤维化小鼠核因子-κB（NF-κB）表达的影响。方法96只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、TSA早期干预组和TSA晚期干预组,各24只。模型组、TSA早期干预组和TSA晚期干预组小鼠均予以气管内滴注BLM（10mg/kg体重）溶液0.15ml诱导肺纤维化模型,对照组小鼠予0.9%氯化钠注射液0.15ml气管内滴注。建模后,TSA干预组分阶段（早期：第1~14天;晚期：第15~28天）予以TSA（40mg/kg体重）溶液腹腔注射,2次/周。模型组和对照组予以等体积二甲基亚砜腹腔注射作为溶媒对照。建模后第7、14、28天各组均随机分3批处死小鼠8只,留取右肺上叶组织行HE染色和Masson染色观察肺泡炎及肺纤维化程度,并行Szapiel评分,右肺中、下叶组织碱水解法检测羟脯氨酸（HYP）含量,免疫组化方法检测NF-κB表达水平。结果病理学检查比较,对照组小鼠肺泡结构正常,模型组小鼠肺组织在第7天出现出血、渗出等肺泡炎性改变,第28天出现明显肺纤维化。模型组小鼠肺组织各时点肺泡炎Szapiel评分、HYP含量、NF-κB表达水平均高于对照组（均P＜0.05）;TSA早期干预组小鼠各时点以上指标均低于模型组（均P＜0.05）,而TSA晚期干预组与模型组比较均无统计学差异（均P＞0.05）。结论早期应用TSA或能通过抑制NF-κB的表达发挥延缓肺纤维化的作用。     

两种方法注射环磷酰胺致小鼠白细胞减少症模型的比较

目的 观察小剂量多次注射和单次大剂量注射环磷酰胺(CTX)致白细胞减少症模型小鼠血细胞的变化.方法 取体重为20～22 g的SPF级雄性ICR小鼠120只,随机分为多次小剂量组、单次大剂量组、正常对照组,每组40只.多次小剂量组小鼠腹腔注射CTX 100 mg/kg,每日一次,连续3 d;单次大剂量组小鼠单次腹腔注射CTX 300 mg/kg,正常对照组注射等量生理盐水,观察用药后第3、5、7、9天的血细胞变化.结果 多次小剂量和单次大剂量注射CTX后白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和红细胞、血红蛋白和血小板显著降低(P＜0.01),但单次大剂量组小鼠的血细胞数上升较快,注射后第7天开始上升,第9天已接近或超过正常组,而多次小剂量组仍显著低于正常组(P＜0.01).结论 单次大剂量注射CTX建立的白细胞减少症模型血细胞变化大、上升快,模型不稳,而多次小剂量注射CTX建立的白细胞减少症模型的血细胞则能相对稳定在低水平状态,模型较为可靠,适合于升高白细胞药物的筛选和评价.     

霉酚酸酯对小鼠肺纤维化的治疗作用

目的 探讨霉酚酸酯(mycophenolate mofetil,MMF)对博莱霉素(bleomycin,BLM)诱导的小鼠肺纤维化模型的治疗作用.方法 将36只C57BL/6小鼠完全随机分为6组:正常对照组、MMF对照组、BLM模型组及MMF干预组(分为低、中、高剂量组),每组6只.实验第1天BLM模型组、MMF干预组经气管注入BLM(6 mg/kg),正常对照组、MMF对照组则注入等量生理盐水.从实验第2天开始MMF干预组分别给予低、中、高剂量(20、60、100 mg/kg)MMF,2周后处死所有小鼠,收集肺脏标本;HE、Masson染色在组织形态学上观察肺纤维化病变情况,Aschcroft法评分;RT-PCR检测COLA1及COLA2的mRNA表达水平;免疫组化法检测肺组织TGF-β1的蛋白表达.结果 BLM诱导的肺纤维化模型构建成功.MMF高剂量干预组较BLM模型组纤维化程度减轻,COLA1、COLA2 mRNA表达及TGF-β1蛋白表达明显降低(P＜0.01);低、中剂量组与BLM模型组间,MMF对照组与正常对照组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MMF能有效减轻BLM诱导的肺纤维化病变,其机制可能与下调促纤维化细胞因子TGF-β1相关.     

柴胡皂甙d对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的治疗作用及机制研究

目的 探讨柴胡皂甙d(SSd)抗小鼠肺纤维化的作用及其机制.方法 180只小鼠按随机数字表法分5组.其中4组为博来霉素(BLM)诱导肺纤维化模型组(气管内注射BLM 5 mg/kg),分为单纯造模组(BLM组)、地塞米松(DXM)干预组(DXM组)、SSd干预组(SSd组)和SSd+DXM联合干预组(SSd+DXM组),每组40只;造模后1 h,后3组小鼠分别腹腔注射DXM 5 mg/kg(0.1 ml)、SSd 1.8 mg/kg(0.18 ml)、SSd+DXM(0.1ml+0.18ml),BLM组腹腔注射0.28 ml生理盐水,每天1次,连续28 d.另1组为正常对照组(NC组,20只),同时间按同样方法注入0.28 ml生理盐水.给药第3、7、14、28天每组各处死5只小鼠,取肺组织行常规组织病理学检查,检测肺组织中羟基脯氨酸(HYP)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量;取外周血检测SOD和MDA含量.造模的4组每组各20只小鼠用于观察自然生存状况.结果 SSd可明显提高肺纤维化小鼠存活率(SSd组和SSd+DXM组存活率均为80.0%,BLM组为50.0%,P<0.05),并显著减轻小鼠肺泡炎和肺纤维化程度.DXM组、SSd组和DXM+SSd组肺组织HYP含量给药第14、28天明显低于BLM组(P<0.05),血清及肺组织MDA含量给药第3、7、14天明显低于BLM组(P<0.05,P<0.01),血清SOD含量给药第3、7、14天、肺组织SOD含量给药第3、7天明显高于BLM组(P<0.05,P<0.01).结论 SSd有很明显的抗肺纤维化作用,其作用机制可能与抗脂质过氧化作用有关.     

不同剂量的地龙提取物对肺纤维化小鼠肺组织波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白表达水平及纤维化程度的影响

目的 探讨不同剂量的地龙提取物对肺纤维化小鼠肺组织波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白表达水平及纤维化程度的影响。方法 将90只C57雄性小鼠分为空白组、模型组、高剂量组、中剂量组和低剂量组,每组18只。除空白组外,其余4组通过腹腔注射百草枯建立肺纤维化模型。建模后1周,分别给予高剂量组、中剂量组、低剂量组小鼠灌服80 mg/(kg·d)、40 mg/(kg·d)、20 mg/(kg·d)的地龙提取物,给予空白组和模型组灌服等量的生理盐水,干预14 d。于建模后第14天、第21天和第28天,检测各组小鼠肺组织波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白表达水平;建模后第21天,采用HE染色法和Masson染色法分别观察小鼠肺组织纤维化及胶原沉积情况。结果 建模后第14天、第21天及第28天,模型组小鼠肺组织的波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白表达水平均高于空白组(均P<0.05);建模后第21天、第28天,高剂量组、中剂量组、低剂量组小鼠肺组织的波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白表达水平均低于模型组(均P<0.05);建模后第28天,高剂量组小鼠肺组织的波形蛋白表达水平低于低剂量组,且α-平滑肌肌动蛋白表达水...     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。