人源化小鼠模型研究及应用进展

研究人类复杂疾病的发病机制,筛选有效药物,需要理想的动物模型来进行大量的体内试验。小鼠是应用最为广泛的生物模型之一,但考虑到小鼠与人类在生理、病理等诸多方面存在差异,构建具有人类功能性基因、细胞或组织的人源化小鼠模型尤为重要。该文对人源化小鼠模型的研究概况及其在肿瘤、感染性疾病、自身免疫性疾病和代谢性疾病等方面的应用进行综述。     

红细胞人源化小鼠模型的构建及其临床应用研究进展Research progress in construction and its clinical application of humanized mouse model of red blood cells

红细胞人源化小鼠模型是一类能够稳定重建人红细胞的人源化小鼠，其对于人红细胞相关疾病临床前期研究起至关重要的作用。人源化小鼠模型的构建能够模仿人体免疫机能，在整体水平上反映人类生理和病理情况，探讨红细胞人源化小鼠模型的发展过程、构建方法及其在临床工作中的应用，可为后续优化该模型提供理论依据。现主要对人源化小鼠模型的发展、人源化小鼠人红细胞重建现状、人源化小鼠中人红细胞重建的影响因素、人红细胞相关疾病的研究和未来发展规划等几个方面进行综述。     

人源化小鼠模型构建和应用的研究进展

人源化小鼠是指带有功能性的人类基因、细胞或组织的小鼠模型,通常被用于人类疾病体内研究的活体替代模型,是利用转基因或同源重组的方法将人类基因"放置"在小鼠模型上所制备的模型,这类小鼠模型在模拟某些人类疾病时有效性较高。人源化小鼠模型在艾滋病、癌症、传染病和血液病研究领域等均有广泛的应用。具有人造血免疫系统组成的人源化小鼠模型已经被证明在解码人类疾病奥秘中具有巨大的优势和广泛的应用前景。本文从免疫系统人源化小鼠模型演变的历史过程、具体的分类方法及模型的应用等几个方面进行综述。     

免疫系统人源化小鼠模型的研究进展

动物模型是生物医学科学研究中所建立的具有人类模拟性表现的动物材料,作为实验假说和临床假说的实验基础,可以缩短研究时间,观察疾病的发生、发展或预防与治疗的全过程,并可在人为控制条件下进行各种实验研究,对各种疾病的相关机制研究有着重要意义。人类的生物医学研究主要受限于生物体复杂性,为了克服这个限制,基于可接受异种移植物的严重联合免疫缺陷(SCID)或重组激活基因(Ragnull)无效小鼠的免疫缺陷特征开发人源化小鼠模型,这些具有人体免疫力的小鼠模型已被广泛用于研究人类免疫生物学的基本原理以及人类疾病的复杂病理的潜在机制。这种方法是促进医学科学发展的重要途径之一,具有实用性和前瞻性。本文将对人源化小鼠模型的应用及研究进展进行综述。     

具有人红细胞重建的人源化小鼠模型构建和应用的研究进展

人源化小鼠是具有人类基因、细胞、组织和器官的小鼠。具有人造血免疫系统重建的人源化小鼠模型作为唯一能够活体研究人淋巴造血过程和人免疫应答的小动物模型,已经在感染、肿瘤、自身免疫病及异种/异体移植等领域的基础研究和药物开发中得到广泛应用。然而,普通人源化小鼠的外周血循环中人红细胞的重建缺陷严重限制了其在人红细胞相关疾病（如遗传性贫血和疟疾感染等）研究中的应用。因此开发具有高水平人红细胞稳定重建的人源化小鼠模型是该领域的难点之一。本文作者从人源化小鼠模型的基本情况、模型中人红细胞重建缺失的主要原因和制备具有人红细胞重建的人源化小鼠模型的可行方法等方面进行综述,并对其应用进行阐述。     

人源化小鼠人源细胞检测方法

目的人源化小鼠在人类疾病与再生医学研究中具有广泛应用,为获得一种理想的人源化小鼠检测方法,研究人特异性线粒体序列扩增作为人源化动物模型中人类DNA检测方法的可行性。方法设计人线粒体DNA特异性引物,并用该引物对人脐血造血干细胞嵌合体小鼠进行了检测。结果在人源化动物模型的人类DNA检测中,这种人线粒体DNA的PCR检测方法能够达到理想的特异性与灵敏性,是一种理想的嵌合体小鼠检测方法。结论获得了一种理想的人源化小鼠人源细胞检测方法。     

人源化鼠嵌合肝动物模型研究进展

动物模型是人类疾病研究、发病机制、药物研发的重要工具,对于困扰人类健康的肝脏疾病还没有理想的动物模型能有效地反映出人类疾病发病的机制。建立人源化鼠嵌合肝动物模型,对于研究人类肝脏疾病的发病机制、疫苗和药物的研发及疾病的诊治等方面都具有十分广阔的应用前景。     

人干细胞实验动物嵌合体模型的研究进展

动物模型是疾病研究、发病机制、药物治疗的必要工具,目前一些困扰人类健康的重大疾病如艾滋病、乙型肝炎等因为还没有能反映人类疾病发病机理的理想动物模型。人干细胞是能在体外长期培养的、高度未分化的全能细胞系,亚全能细胞系和分化的干细胞等。如果能将人的干细胞成功移植入实验动物体内形成人源化嵌合体动物,有希望为艾滋病、肝炎等的研究制备适当的模型。人类干细胞在动物中的移植研究中主要的实验动物是绵羊,小鼠等,本文介绍了人干细胞在动物体内移植的研究进展。     

抗体药物研究进展

抗体作为药物用于疾病治疗已有很长历史，其间曾几经周折，但随着抗体立体结构的阐明和分子生物学技术的发展，人们可以利用DNA重组技术进行鼠抗体人源化改造、构建合成或半合成抗体库及噬菌体抗体库，从中获得人源抗体，甚至利用转基因小鼠获得人源抗体。同时人们也可以利用分子生物学技术改良抗体性能，使之有效地到达靶部位，或提高抗体的亲和力，或提高抗体的效应功能。因此，在对疾病发生机制进一步了解的基础上，治疗性抗体前景看好，它们将在人类疾病的治疗中发挥重要作用。     

多发性骨髓瘤小鼠模型构建的研究进展

多发性骨髓瘤(MM)是一种浆细胞肿瘤，随着其小鼠模型的不断优化创新，相关基础研究发展迅猛。基于人源细胞与免疫缺陷鼠的人源化小鼠模型在评估药物疗效、探索耐药机制与观察肿瘤-骨髓微环境相互作用等方面得到持续发展。近年来，基于鼠源细胞或基因编辑技术的同源小鼠模型在MM发病机制研究与药物开发方面也开始被广泛应用；此外，建立稳定的靶向脏器损伤模型正在成为MM小鼠模型未来发展的重要攻坚方向之一。本文综述了各类MM小鼠模型的特点及其应用的研究进展。     

白细胞衍生趋化因子2在肝脏疾病中的作用及研究进展

肝脏是人体重要的新陈代谢和解毒器官,当受到各种致病因素侵袭时,肝脏正常的生理生化功能受到影响,从而导致肝脏疾病。白细胞衍生趋化因子2（leukocyte cell-derived chemotaxin-2,LECT2）是一种主要由肝细胞分泌的碱性蛋白,在人体的各个系统中有着诸多重要功能,如控制和调节免疫系统、改变葡萄糖代谢、促进骨骼生长、控制细胞周期和分裂等。不同疾病状态下LECT2水平变化的临床意义是不同的。在不同类型的肝病患者中,血清和肝组织中LECT2水平与肝功能下降、病理分期密切相关。大量的动物研究和体外实验表明,LECT2的异常表达导致代谢紊乱、肝脏炎症、纤维化及肿瘤的发生。本文通过复习近几年国内外的相关文献,对LECT2的分子概念及其与肝脏疾病的发生发展、侵袭转移等之间的关系进行综述,以探讨LECT2是否可作为治疗不同肝病的潜在靶点。     

人造血干细胞人源化小鼠的疝气表型分析

目的 研究成年雄性人源化小鼠个体出现疝气症状的原因和对人源化小鼠的影响.方法 利用显微注射法构建人造血干细胞人源化小鼠,对疝气表型特征、小鼠行为、生理和病理变化进行了研究.结果 2月龄雄性人源化小鼠出现直接性疝气症状,腹股沟区致密结缔组织结构减少可能是疝气形成的主要原因.疝气小鼠同时伴有耐力和运动协调性下降,但疝气对小鼠的繁殖系统无显著影响.结论 雄性人造血干细胞人源化小鼠具有显著的疝气症状,其发生机理有待进一步研究.     

Alb-cre/DTR小鼠可诱导性肝损伤模型的建立

[摘要] 目的 建立Alb-cre/DTR双转基因小鼠模型并进行相关表型分析,在此基础上建立可诱导性肝损模型,可用于肝脏疾病的相关研究。方法 将引进的Alb-cre和DTR小鼠扩繁后,通过杂交的方式获得双转基因小鼠。提取小鼠尾部组织DNA,利用PCR方法进行基因型鉴定。在双转基因小鼠上腹腔注射白喉毒素,之后在不同时间点进行称重、采血,检测血清ALT、AST水平。 结果 将Alb-cre和DTR小鼠杂交、筛选后获得了Alb-cre/DTR双转基因小鼠,对该小鼠使用0.625ng/g剂量的白喉毒素,可使小鼠血清中ALT与AST水平显著升高,解剖小鼠后观察到肝脏整体变白,HE染色结果显示肝细胞明显坏死。 结论 Alb-cre和DTR小鼠杂交是繁育Alb-cre/DTR小鼠的较好方法,且PCR方法能够鉴定该小鼠,并能建立特异性肝损小鼠模型。     

酒精性肝病啮齿动物模型建立的研究进展

酒精性肝病（alcoholic liver disease, ALD）是全世界最常见的肝脏疾病之一,由于长期酗酒引起肝脏发生一系列病理改变,最终导致肝脏疾病的发生,且发病率逐年上升。目前,酒精性肝病的发生机制及病理研究已经取得了显著进展,但ALD的相关机制并未研究透彻,需要通过改进目前现有的动物模型或建立一种新的更全面的ALD动物模型去模拟人类ALD。ALD的实验动物模型,特别是啮齿类动物,已被广泛用于模拟人类ALD,理想的酒精性肝病啮齿动物模型将有效地模拟酒精对人类肝脏的方方面面。但到目前为止,常用的动物模型都存在一定缺陷,还没有一个完整的动物模型能够模拟人类ALD。本文对ALD发病机制、ALD啮齿动物模型建立的相关方法及其影响因素进行了综述,为相关科研人员建立ALD啮齿动物模型提供理论依据。     

免疫重建荷人卵巢癌严重联合免疫缺陷鼠腹腔移植模型的建立

目的：建立免疫重建的荷人卵巢小鼠腹腔移植模型。方法：用人外周血淋巴细胞（PBL悬液腹腔注射建立有免疫功能的严重联合免疫缺陷（SCID）鼠模型3只;用人PBL和人卵巢癌细胞株SKOV3细胞腹腔注射建立免疫重建荷人卵巢癌SKOV3 SCID鼠模型3只,观察其生物学、免疫学特性。结果：每组免疫重建小鼠成瘤比例为3／3。免疫重建均检测到人IgG 存在,与未重建组比较差异有显著意义（P＜0．05）;免疫重建荷瘤鼠主要成瘤在腹腔,分布于肝下素、腹膜、横膈、肠系膜等部位,与未重建组比较,成瘤减少;原代移植瘤细胞形态、CA125表达与SKOV3细胞相似,但透射电镜观察到早期细胞凋亡表现;组织学观察到成片淋巴细胞浸润。结论：免疫重建荷人卵巢癌SCID鼠腹腔移植模型已初步建立,本模型较好地模拟了在免疫功能情况下人卵巢癌腹腔播散的生物学行为,为卵巢癌治疗的临床前研究提供了较理想动物模型。     

EMT对纤维化无贡献，何如肿瘤？

2010年3月在《肝脏病学》（Hepatology）上刊登了一篇题为“在小鼠肝纤维化过程中肝细胞片没有发生表皮问质细胞转化现象”的文章、经过仔细研读这篇文献．我们发现作者的试验结果中体内试验与体外试验结果不一致．采取的纤维化小鼠动物模型单一,并且间质细胞分子标志物a—SMA染色阴性,这一结果与我们前期研究结果相反。针对以上三点问题我们提出疑问和自己的见解,得到了编辑的肯定．撰写的Correspondence在2010年4月的《Hepatology》杂志上发表。     

肝脏疾病患者血浆胍类化合物含量的变化

作者采用安息香为柱前荧光衍生剂的高效液相层析法检测几种肝病患者血浆中胍类化合物的含量。结果表明,血浆中胍基乙酸在肝硬化等重症肝病时显著升高,在其它肝病时未见明显变化;血浆中其它胍类化合物在几种肝病时均未见明显的改变。肝病时血浆胍类化合物的变化与其它常见肝功能指标的变化没有显著相关性。     

裸鼠皮下人肝癌种植瘤模型的建立

目的：建立裸鼠皮下人肝癌种植瘤模型。方法：BLBA/c裸鼠颈背部皮下注射人肝癌SMMC-7721细胞悬液5×10^6个/（0.2ml·只）,观察肿瘤生长情况,10周处死。瘤组织作病理及电镜检查;取种植裸鼠周围血作甲胎蛋白（AFP）的检测,随机抽出10只未行处理的BLBA/c雄性裸鼠作对照;用免疫组化法检测肿瘤微血管密度（MVD）,取正常非瘤组织作对照。结果：种植裸鼠周围血甲胎蛋白（AFP）为（528.35±12.48）ng/ml,对照组为（135.37±9.27）ng/ml,两组比较,有显著性差异（P〈0.05）;种植裸鼠平均每中倍视野中的微血管数为（32.45±2.38）个。对照组为（9.16±1.21）个,两组比较,有显著性差异（P〈0.05）。该模型具有类似人原发性肝癌的形态学特征。结论：成功建立了人肝癌裸鼠皮下种植瘤模型。