p16INK4a在妇科肿瘤中的研究进展

p16INK4a基因是直接作用于细胞周期,抑制细胞分裂的抑癌基因,在细胞周期中发挥重要负反馈调节作用.大部分恶性肿瘤中发现该基因表达缺失,但是在妇科肿瘤中p16INK4a基因的失活和表达却不尽相同,而且与妇科肿瘤的发生、发展及预后密切相关,本文对p16INK4a在妇科肿瘤中的研究进展加以综述.     

INK4/ARF基因座甲基化协同调控与非小细胞肺癌的关系

目的 分析INK4/ARF基因座甲基化状态与非小细胞肺癌临床病理特征的相关性及探讨基因座内各编码基因甲基化协同调控的可能性。 方法 临床收集81例非小细胞肺癌患者手术切除的配对癌灶及癌旁石蜡组织标本;采用甲基化特异性PCR（MSP）对石蜡组织标本DNA进行p16INK4a、p15INK4b及p14ARF基因甲基化检测并与临床病理特征进行相关性分析。结果 癌灶组织中的p16 INK4a基因甲基化在鳞状细胞癌中的分布明显高于腺癌（P<0.01）,并与肿瘤大小密切相关（P<0.05）。癌灶组织中p16INK4a与p15INK4b基因甲基化状态密切相关（P<0.05）;结论 INK4/ARF基因座启动子区甲基化与非小细胞肺癌发生、发展相关;p16INK4a与p15INK4b基因甲基化状态的关联提示INK4/ARF基因座可能存在表观协同调控方式。     

胃癌中p16INK4a和RB基因甲基化状况及其表达

目的:研究胃癌组织中p16INK4a和视网膜母细胞瘤易感基因(RB)启动子区域的甲基化状况,并探讨基因异常甲基化与蛋白表达及其临床病理指标的关系.方法:采用甲基化特异性PCR方法对81例胃癌和10例正常胃黏膜中p16INK4a和RB启动子区域甲基化状况进行检测,并采用免疫组织化学方法对p16INK4a和视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)表达情况进行相应检测.结果:胃癌中p16INK4a和RB基因的甲基化率分别为37%(30/81)和42%(34/81);胃癌p16INK4a蛋白和pRb表达阳性率分别为54%(44/81)和90%(73/81).10例正常胃黏膜中均未检测到p16INK4a和RB异常甲基化,而且其相应蛋白表达均为阳性.p16INK4a甲基化状况与其蛋白表达有相关性,但p16INK4a甲基化状态与肿瘤分化程度、淋巴结转移、性别及年龄均不相关.RB甲基化状态与pRb表达、肿瘤分化程度、性别及年龄无相关性,但与淋巴结转移相关.结论:p16INK4a和RB异常甲基化是胃癌细胞常见的分子事件,可能参与了胃癌的发生发展过程.RB异常甲基化与胃癌淋巴结转移相关,提示RB甲基化检测对于分析胃癌淋巴结转移情况可能有一定参考价值.p16INK4a基因启动子区域高甲基化是其蛋白表达抑制的重要机制.     

甲状腺增生性疾病中p16INK4a基因甲基化及其表达

目的 研究甲状腺增生性疾病中p16~(INK4a)基因的甲基化状况及其与表达之间的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测45例甲状腺增生性疾病(15例甲状腺乳头状癌,17例甲状腺腺瘤,13例结节性甲状腺肿)样本中p16~(INK4a)蛋白的表达;采用甲基化特异性PCR检测p16~(INK4a)基因的甲基化状况.采用RT-PCR检测其中10例甲状腺增生性疾病(3例甲状腺乳头状癌,5例甲状腺腺瘤,2例结节性甲状腺肿)中p16~(INK4a) mRNA的表达.结果 45例甲状腺增生性疾病样本中,8例检测到p16~(INK4a)基因异常甲基化,19例p16t~(INK4a)蛋白表达阳性;p16~(INK4A)基因异常甲基化与其蛋白表达之间呈负相关(r=-0.293 4,P=0.038 7).10例甲状腺增生性疾病样本中,5例检测到转录产物;p16~(INK4A)基因异常甲基化与其转录水平之间呈负相关(r=-0.6547,P=0.04).结论 p16~(INK4a)基因甲基化与p16~(INK4a)基因失活有关,但并不与失活完全一致;p16~(INK4a)基因甲基化可能在甲状腺增生性疾病中起作用.     

p16基因在肿瘤中的作用研究进展

<正>近年来,研究发现了Cyclins(周期素)-CDKs(周期素依赖性激酶)-CDKIs(CDKs抑制因子)细胞周期网络调控系统,同时亦发现肿瘤形成主要是G1/S转换失调。在肿瘤的发生机制中,CDK与Cyclin有可能作为癌基因,而CDKI有可能作为抑癌基因起作用。CDKIs是细胞周期的关键性调节因子,在许多环节中起“刹车”(brakes)作用。p16基因是CDKI基因家族中率先被克隆出来的,p16又称MTS-1、CDKN2A、INK4a,是一个G1期特异性细胞周期调节基因,当其功能丧失时,细胞生长失控导致肿瘤形成。目前发现,p16在人类肿瘤和细胞系中存在广泛而频繁的缺失和突变。     

P14ARF与肿瘤

INK4a/ARF基因编码有两个独立的蛋白,即p16INK4a和p14ARF.其中p14ARF对MDM2-p53通路具有关键性调控作用.在人类的很多肿瘤中发现p14ARF基因位点存在改变.随着国内外研究的增多,p14ARF成为肿瘤研究的热点,本文将对p14ARF的结构、抑癌机理及其功能失活机制作一综述.     

p16~(INK4a)基因在CLD新生鼠肺成纤维细胞中的动态表达

目的 探讨p16~(INK4a)基因在高氧致慢性肺疾病(CLD)新生鼠肺成纤维细胞中的动态表达.方法 足月新生SD大鼠于生后12 h内分别持续吸入0.85高氧和空气,于3,7,14,21 d随机处死动物后,进行肺成纤维细胞的原代培养,应用流式细胞仪测细胞周期;免疫组化、Western blot法检测p16~(INK4a)蛋白表达;real-time PCR法检测p16~(INK4a) mRNA含量变化.结果 生后3 d时2组p16~(INK4a)蛋白及mRNA的表达无明显差异(P>0.05),生后7 d时高氧组表达开始减少(P<0.05),14 d、21 d明显减少(P<0.01).结论 高氧可下调肺成纤维细胞p16~(INK4a)基因的表达,使得其抑制细胞增殖的作用减弱,肺成纤维细胞过度增殖,最终导致肺纤维化的发生.     

Bmi-1基因研究进展

Bmi-1基因是多梳基因(Pc G)家族中重要的调控基因,参与调控细胞的增殖与分化,在维持正常干细胞的自我更新及多向分化的过程中起着重要作用。作为原癌基因,在人体的许多肿瘤中Bmi-1蛋白的表达水平是上升的,它可以阻断细胞周期蛋白p16INK4a和p14ARF抑制细胞增殖的作用,从而促进细胞转化和肿瘤形成。而Bmi-1与c-myc协同则可在多种肿瘤的发生、发展过程中发挥重要作用。     

p16INK4a蛋白在宫颈疾病中的表达特点及其与HPV感染的关系

目的 研究伴有高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus,hr-HPV)感染及无hr-HPV感染的宫颈癌(cervical cancer,CC)、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈炎中p16INK4a蛋白表达水平的变化及意义,探讨宫颈癌及癌前病变中p16INK4a蛋白表达与HPV感染的相关性.方法 应用免疫组化方法检测126例宫颈疾病(CC 40例,CIN 67例和宫颈炎19例)组织中p16INK4a蛋白的表达,其中,hr-HPV( )宫颈疾病89例(CC 32例,CIN 48例和宫颈炎9例),hr-HPV(-)宫颈疾病37例(CC 8例,CIN 19例和宫颈炎10例),进行半定量分析及统计学检验.结果 40例CC中,p16INK4a全部阳性表达;48例hr-HPV( )和19例hr-HPV(-)CIN中,p16INK4a阳性表达分别为39例和12例;9例hr-HPV( )和10例hr-HPV(-)宫颈炎组织中,p16INK4a阳性表达均为4例.hr-HPV( )或hr-HPV(-)宫颈炎、宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中p16INK4a蛋白表达水平均依次升高.CC和CIN中p16INK4a蛋白表达与hr-HPV感染相互间无显著相关性(P＞0.05).结论 细胞周期抑制蛋白p16INK4a在CC及癌前病变中过表达,且与hr-HPV感染无关,提示p16INK4a蛋白在宫颈癌的发生、发展中所起的作用和作用机制可能与其在其他恶性肿瘤中不同.检测p16INK4a蛋白表达有助于CC的早期诊断.     

p14~(ARF)和p16~(INK4a)蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及其临床意义

目的 探讨p14ARFF和p16INF4a蛋白在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及其与临床病理参数的关系.方法 应用免疫组化SP法检测57例PTC、21例甲状腺乳头状微小癌(PTMC)和40例甲状腺腺瘤中p14ARF和p16INK4a蛋白的表达情况.结果 p14ARF和p16INK4a蛋白在PTC组的表达阳性率显著低于腺瘤组及PTMC组,差异有统计学意义(分别为P<0.01和<0.05).p16INK4a慨蛋白在PTMC组的阳性率明显低于腺瘤组,差异有统计学意义(P<0.05).PTC组中,p14ARF蛋白表达与淋巴结转移成负相关;p16INK4a蛋白表达与肿瘤复发成负相关,与临床分期成正相关.结论 p14ARF和p16INK4a可能参与了PTC的发生和发展,可作为临床判定其生物学行为的辅助指标.     

p16INK4A和细胞凋亡

1 p16INK4Ap16INK4A是一个重要的细胞周期调节因子,它是细胞周期蛋白依赖激酶抑制子(CDKIs)之一。CDKs、CDKIs与CD-Ks的正调控因子cyclins之间的相互作用,通过对细胞周期各检验点的调控,控制着细胞周期的进程。p16INK4A通过与CDK4/6结合引起CDK4/6构象改变抑制cyclinD-CDK4/6的     

p16INK4a、FGF-2和D2-40与宫颈癌浸润转移的关系

目的探讨肿瘤抑制基因p16INK4a、成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)和D2-40在CIN3、微小浸润癌、宫颈浸润癌中的表达及其在宫颈癌浸润转移中的作用。方法采用免疫组化学方法,检测35例CIN3、13例微小浸润癌及62例宫颈浸润癌中p16INK4a、FGF-2和D2-40蛋白的表达情况。结果 p16INK4a在微小浸润癌中的过表达率明显高于CIN3(P<0.01);FGF-2在CIN3、微小浸润癌和宫颈浸润鳞癌中的阳性率分别为51.43%、53.85%、76.92%,差异有统计学意义(P<0.05);FGF-2的表达强度与宫颈病变的发展程度呈正相关(P<0.01)。p16INK4a和FGF-2的阳性强度与宫颈癌淋巴结转移呈正相关(P<0.01或P<0.05),FGF-2与宫颈癌浸润深度有关,二者均与宫颈癌的肿瘤大小、组织学分级、临床分期无相关性;D2-40的阳性反应与临床病理因素无相关性。p16INK4a、FGF-2的表达和D2-40阳性反应之间无相关性(P>0.05)。结论 p16INK4a异常表达可能有助于诊断微小浸润癌,其阳性强度与宫颈癌淋巴结转移正相关;检测FGF-2在宫颈活检组织中的表达,对评估宫颈病变的发展以及宫颈癌浸润和转移的情况有重要的临床参考价值。     

103例非小细胞肺癌p16INK4a蛋白表达及其临床意义

目的研究p16INK4a蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义.方法应用免疫组织化学S-P方法检测103例NSCLC癌组织标本中p16INK4a蛋白表达,同时以20例肺部炎症病变组织做对照.结果 103例标本中,p16INK4a阳性表达58例,阴性表达45例,表达阴性率为43.69%,其中鳞癌、腺癌、肺泡癌中p16INK4a表达阴性率分别为58.82% (20/34)、39.39% (13/33)、33.33% (12/36),且鳞癌与肺泡癌之间p16INK4a表达阴性率差异有显著意义(P<0.01).临床Ⅲ Ⅳ期病例p16INK4a蛋白表达阴性率为60.71%,明显高于临床Ⅰ Ⅱ期病例(35.14%),差异有显著性意义(P<0.05).结论 p16INK4a蛋白表达异常在肺鳞癌中常见,提示p16INK4a蛋白表达异常在肺鳞癌的发生、发展中起重要作用,它有可能成为预测肺癌患者病程进展的指标之一.     

hrHPV-DNA和p16~(INK4a)蛋白在宫颈病变中的表达

目的了解hrHPV-DNA载量及p16INK4a蛋白的表达,探讨hrHPV-DNA和p16INK4a蛋白与宫颈病变的关系,为宫颈癌早期诊断以及预测宫颈病变进展提供可靠的检测指标。方法利用第二代杂交捕获法检测hrHPV-DNA载量,采用免疫化学方法检测p16INK4a蛋白,运用检验与Spearman等级相关研究HPV-DNA和p16INK4a与宫颈病变的关系。结果随着活检分级升高,hr HPV阳性率和p16INK4a阳性表达率增高(P<0.05);正常或慢性宫颈炎中hr HPV阳性率、p16INK4a阳性表达率、HPV(+)/P16(+)表达率低于在CIN1、CIN2、CIN3、SCC中的表达(P<0.05);等级相关性分析在HPV(+)/P16(+)与活检分级呈正相关,在HPV(-)/P16(-)与活检分级呈负相关(P<0.05)。结论 hrHPV-DNA和p16INK4a蛋白均可以作为宫颈癌早期诊断的标志物。联合检测hrHPV-DNA和p16INK4a蛋白可以预测宫颈病变的进展。     

p16INK4a在宫颈病变中的研究进展

宫颈癌严重威胁女性健康和安全,是导致女性死亡的主要恶性肿瘤之一。近年来我国宫颈癌的发病率正以每年2%～3%的速度增长,因此早期诊断对于预防和治疗宫颈癌具有决定性的意义。p16INK4 a是近年来发现的肿瘤抑制基因,是一种细胞周期蛋白D依赖性激酶的抑制剂,研究表明p16INK4 a的表达与宫颈癌的发生发展密切相关。目前宫颈癌筛查中的细胞学检查及hr-HPV检测方法都具有一定的局限性,寻求新的筛查方法已成为研究热点。p16INK4 a的检测技术易于普及、操作简便,不仅能提高宫颈癌的早期诊断率、预测宫颈癌的发生发展,且较HC-Ⅱ检测更能区分是否存在病变,从而降低传统宫颈癌筛查的假阳性率及假阴性率,提高筛查的灵敏度和特异度,为宫颈癌的筛查开辟了新途径,值得进一步深入研究。     

p16^INK4a在宫颈病变中的研究进展

宫颈癌严重威胁女性健康和安全,是导致女性死亡的主要恶性肿瘤之一。近年来我国宫颈癌的发病率正以每年2%～3%的速度增长,因此早期诊断对于预防和治疗宫颈癌具有决定性的意义。p16INK4 a是近年来发现的肿瘤抑制基因,是一种细胞周期蛋白D依赖性激酶的抑制剂,研究表明p16INK4 a的表达与宫颈癌的发生发展密切相关。目前宫颈癌筛查中的细胞学检查及hr-HPV检测方法都具有一定的局限性,寻求新的筛查方法已成为研究热点。p16INK4 a的检测技术易于普及、操作简便,不仅能提高宫颈癌的早期诊断率、预测宫颈癌的发生发展,且较HC-Ⅱ检测更能区分是否存在病变,从而降低传统宫颈癌筛查的假阳性率及假阴性率,提高筛查的灵敏度和特异度,为宫颈癌的筛查开辟了新途径,值得进一步深入研究。     

松花粉对人胚肺二倍体成纤维细胞p16及p21基因表达的影响

[目的]研究松花粉对衰老细胞(2BS)内细胞周期蛋白激酶抑制剂p16INK4a及p21WAF1基因mRNA表达的影响。[方法]2BS细胞从28代开始培养,随机分成年轻对照组(30代)、衰老模型组(56代)、松花粉中剂量(120mg/dl)组(56代)、松花粉高剂量(240mg/dl)组(56代)。流式细胞术分析细胞周期,检测G1期比例;半定量RT-PCR法测定p16INK4a、p21WAF1mRNA的表达。[结果]衰老模型组细胞出现典型的细胞体积增大,形态不规则;松花粉处理组细胞,体积回缩,形态趋于规则。G1期细胞比例松花粉中剂量组(72.73%±1.76%)和高剂量组(64.15%±0.87%)较衰老模型组(81.33%±3.43%)显著下降(P<0.05)。细胞周期蛋白激酶抑制剂p16INK4amRNA的表达量在松花粉中剂量组(0.3483±0.0078)和高剂量组(0.3222±0.0055)较衰老模型组(0.3974±0.0078)表达灰阶明显下调。p21WAF1mRNA的表达量在松花粉中剂量组(0.7692±0.1749)和高剂量组(0.4451±0.0363)较衰老模型组(1.1767±0.2782)。[结论]松花粉具有改善细胞衰老的作用,其分子机制可能与下调衰老细胞内细胞周期蛋白激酶抑制剂p16INK4a及p21WAF11mRNA的表达从而改善衰老细胞G1期阻滞有关。     

p27kip1和 p16INK4A 基因在鼻咽癌组织中的甲基化表达及意义

目的探讨 p27kip1和 p16INK4A 基因启动子区甲基化在鼻咽癌早期诊断和治疗中的作用.方法采用甲基化特异性PCR 方法对54例鼻咽癌组织(观察组)和20例正常鼻咽上皮组织(对照组)的 p27kip1和 p16INK4A 基因启动子区甲基化状态进行检测及对比分析.结果观察组患者 p27kip1和 p16INK4A 基因启动子区甲基化检出率分别为62.96%(34/54)和46.30%(25/54),两者同时甲基化19例,总检出率为74.1%(40/54);对照组均未检测到 p27kip1和 p16INK4A 基因启动子区甲基化;两组间差异有统计学意义(P<0.01).p27kip1和 p16INK4A 基因启动子甲基化与鼻咽癌患者年龄、性别、T 分期、N 分期、TNM 分期、病理类型等临床特征均无相关性(P >0.05).鼻咽癌患者 p27kip1基因甲基化与 p16INK4A 基因甲基化无明显相关关系(r=0.2507,P >0.05).结论鼻咽癌中 p27kip1基因甲基化可能是其基因表达调节的一种重要方式,p27kip1和 p16INK4A 基因甲基化具有肿瘤特异性,为鼻咽癌早期事件,有望成为早期分子生物学诊断的标志物,将来还可能作为去甲基化基因治疗的靶点.     

p16INK4a蛋白可作为乳腺癌特异性分子标志

目的探讨p16INK4a 蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法收集2014 年~2015 年间手术切除的132 例乳腺癌标 本,采用罗氏全自动免疫组化染色仪进行免疫组织化学染色,检测ER、PR、Her-2、Ki67、CK5/6、和p16INK4a表达,并按照不同 表达模式进行结果判读和分子分型,观察p16INK4在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌免疫表型、分子亚型及临床指标的相关性。 结果132例浸润性乳腺癌中Luminal A型58例、Luminal B型32例、Her-2型21例、basal-like（BLBC）型12例、Normal-like型9 例。p16INK4a蛋白表达阴性（0）、弱阳性（1+）、阳性（2+）和强阳性（3+）表达样本分别占总数的5.30%（7/132）、11.36%（15/132）、 30.30%（40/132）、53.03%（70/132）。按照p16INK4a表达强度,将阴性（0）和弱阳性（1+）病例合并为阴性组（≤1+）、将阳性（2+） 和强阳性（3+）病例合并为阳性组（≥2+）,p16INK4a 阴性（≤1+）表达率为16.67%（22/132）、p16INK4a 阳性（≥2+）表达率为 83.33%（110/132）。按照构成比进行统计分析,发现p16INK4a蛋白的表达强度除在不同年龄分组中具有统计学差异（P<0.05） 之外,与ER、PR、Her-2及分子分型和是否存在转移之间均无统计学差异（P>0.50）。结论p16INK4A代偿性高表达是浸润性乳 腺癌细胞周期异常的主要机制,且p16INK4A可作为浸润性乳腺癌细胞特异性的分子标志,采用IHC技术检测p16 INK4a 的表 达不仅为乳腺癌诊断提供了一种重要方法,也为乳腺癌的机制研究提供有价值的信息。     

CIN和宫颈浸润癌组织中p16INK4a蛋白表达检测的意义

目的 研究p16INK4a蛋白表达在宫颈浸润癌前病变(CIN)和宫颈浸润癌组织中的意义.方法 应用免疫组化技术对68例CIN和36例宫颈浸润癌病变组织中p16INK4a蛋白表达进行检测.结果 CIN组中p16INK4a蛋白表达阳性率为39.7%(27/68),其中CIN Ⅰ为24.0%(6/25),CIN Ⅱ为36.4%(8/22),CIN Ⅲ为61.9%(13/21).CIN组中p16INK4a蛋白表达阳性率3组间的差别有统计学意义(P=0.03).宫颈浸润癌组织中p16INK4a蛋白表达阳性率为66.6%(24/36).CIN组中p16INK4a蛋白表达阳性率低于宫颈浸润癌组,差别有统计学意义(P=0.009).p16INK4a蛋白阳性表达率依次为宫颈浸润癌＞CIN Ⅲ＞CIN Ⅱ＞CIN Ⅰ,差异有统计学意义(P=0.004).正常宫颈上皮和宫颈糜烂组中未发现有p16INK4a蛋白表达阳性细胞.p16INK4a蛋白过度表达现象( ～ )在CIN为23.5%(16/68),宫颈浸润癌为61.1%(22/36),两组间差别有统计学意义(P=0.0001).CIN组中p16INK4a蛋白过度表达现象分别为CIN Ⅲ(47.6%)＞CIN Ⅱ(18.2%)＞ CIN Ⅰ(8.0%),3组间的差别有统计学意义(P=0.005).p16INK4a蛋白过度表达现象在CIN Ⅲ和宫颈浸润癌明显要多于CIN Ⅱ和CIN Ⅰ.结论 p16INK4a蛋白表达的检测可能作为在CIN人群中筛选高危个体的标志物.尤其是有过度表达现象出现时的意义更大.