腺垂体的组织化学与免疫组化观察

应用免疫组化对腺垂体细胞进行分型能较好地反映各型激素细胞形态与功能的统一关系,观察结果表明免疫组化 PAP 法敏感特异且重复性强,效果明显优于普通组织化学染色。嗜酸性细胞包括 GH 和 PRL 细胞。嗜碱性细胞包括 R 细胞(含 ACTH)和 S 细胞(含 TSH,LH,与 FSH)。部份滤泡上皮细胞可含有各种不同的激素物质,沪泡上皮多嫌色性。     

AOM所致大鼠结肠癌形成过程中垂体远侧部ACTH阳性细胞免疫组织化学观察

目的观察氧化偶氮甲烷（azoxymethane，AOM）所致大鼠结肠癌形成过程中，大鼠脑垂体远侧部ACTH细胞的免疫组织化学变化并探讨其意义。方法用断乳SD（Sprague Dawley）雄性大鼠30只，分为AOM实验组和盐水对照组。用AOM（15mg／kg）每周腹腔注射，连续2周，诱导大鼠结肠癌的形成。分别于实验第10、30、34周取材，用免疫组织化学、图像分析法观察大鼠实验性结肠癌形成过程中脑垂体远侧部ACTH阳性细胞的变化。结果亚甲基蓝染色光镜下观察，可见AOM腹腔注射的大鼠结肠黏膜出现异常隐窝（aberrant crypt，Ac）和异常隐窝灶（aberrant crypt foci，ACF）。免疫组织化学显示，与同期正常对照组相比，对照组大鼠垂体远侧部ACTH阳性细胞阳性反应显著性增强（P〈0．01）。结论在大鼠实验性结肠癌形成过程中脑垂体远侧部ACTH细胞可能参与了机体抗肿瘤的内分泌调节。     

动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者康复期垂体功能不全的临床研究

目的观察动脉瘤性蛛网膜下腔出血（aSAH）患者康复期腺垂体激素水平变化,探讨其垂体功能不全发生率及发生类型。方法选取aSAH患者47例,出血后12个月行GOSE评分评估预后,同期应用化学发光免疫分析法检测患者生长激素（GH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、促甲状腺素（TSH）、生殖激素[血清泌乳素（PRL）、促卵泡生成素（FSH）、促黄体生成素（LH）、雌二醇及睾酮]。结果 GOSE评分预后良好32例,预后不良15例（死亡2例）。预后良好的32例患者中腺垂体激素水平异常者13例（40.6%）,其中单纯GH、ACTH、TSH及生殖激素水平低下分别为4、1、1、4例,GH合并生殖激素低下2例,GH合并ACTH低下1例;预后不良13例患者中腺垂体激素水平异常者6例（46.2%）,其中单纯GH、ACTH及生殖激素水平低下分别为2、1、1例,GH合并生殖激素低下1例,GH合并ACTH低下1例。预后良好患者与不良患者腺垂体激素水平异常发生率的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 aSAH患者康复期垂体功能不全发生率较高,以单一激素水平低下为主,表现为疲劳困倦、记忆力下降、抑郁等神经精神症状,但不影响神经功能预后。     

人垂体腺瘤细胞原代培养的纯化及其激素的表达与分泌

 【目的】探讨原代培养垂体腺瘤的细胞纯化方法及其激素表达与分泌的特点。【方法】采用三种原代培养方法对垂体腺瘤细胞进行培养，方法Ⅰ为目前常用的垂体瘤细胞培养方法，方法Ⅱ结合使用右旋颉氨酸（D-valineDMEMD-valine）培养液，方法Ⅲ采用反复贴壁法结合DMEMD-valine培养液培养。观察其细胞形态变化和生长特征，放射免疫法测定不同培养时间培养液中相应激素的水平。免疫组织化学染色法检测培养细胞生长激素（growthhormone，GH）、泌乳素（prolactin，PRL）的表达。【结果】3种方法均能成功培养出垂体腺瘤细胞，呈圆形或椭圆形，其纯度随培养时间的延长逐渐下降，培养第20天其平均纯度分别为40％，46％，96％。方法Ⅲ明显高于方法Ⅰ和方法Ⅱ，差异具有显著性意义（P〈0．01）；培养液中均含有相应激素。且3种方法的激素分泌量没有统计学差异（P〉0．05）；腺瘤细胞分别呈GH，PRL阳性表达，成纤维细胞表达Ⅰ型胶原。【结论】方法Ⅲ可得到纯度达95％以上的人垂体腺瘤细胞，纯化后的细胞可分别呈GH和PRL阳性表达并具有良好的激素分泌功能，为进一步研究人垂体腺瘤的发病机理、药物治疗和颅外移植等方面奠定了实验基础。     

人垂体腺瘤细胞原代培养的纯化及其激素的表达与分泌

【目的】探讨原代培养垂体腺瘤的细胞纯化方法及其激素表达与分泌的特点。【方法】采用三种原代培养方法对垂体腺瘤细胞进行培养，方法Ⅰ为目前常用的垂体瘤细胞培养方法，方法Ⅱ结合使用右旋颉氨酸（D-valineDMEMD-valine）培养液，方法Ⅲ采用反复贴壁法结合DMEMD-valine培养液培养。观察其细胞形态变化和生长特征，放射免疫法测定不同培养时间培养液中相应激素的水平。免疫组织化学染色法检测培养细胞生长激素（growthhormone，GH）、泌乳素（prolactin，PRL）的表达。【结果】3种方法均能成功培养出垂体腺瘤细胞，呈圆形或椭圆形，其纯度随培养时间的延长逐渐下降，培养第20天其平均纯度分别为40％，46％，96％。方法Ⅲ明显高于方法Ⅰ和方法Ⅱ，差异具有显著性意义（P〈0．01）；培养液中均含有相应激素。且3种方法的激素分泌量没有统计学差异（P〉0．05）；腺瘤细胞分别呈GH，PRL阳性表达，成纤维细胞表达Ⅰ型胶原。【结论】方法Ⅲ可得到纯度达95％以上的人垂体腺瘤细胞，纯化后的细胞可分别呈GH和PRL阳性表达并具有良好的激素分泌功能，为进一步研究人垂体腺瘤的发病机理、药物治疗和颅外移植等方面奠定了实验基础。     

雌激素受体在人类多激素型垂体腺瘤中的表达

目的 研究人类多激素型垂体腺瘤中雌激素受体(ER)在分泌不同类型激素的垂体腺瘤细胞中的表达,探讨多激素型垂体腺瘤中分泌特定类型激素的垂体腺瘤细胞与ER阳性细胞的关系。方法 采用免疫组织化学双标法检测33例多激素型垂体腺瘤标本中垂体激素合并ER表达的情况,即分别检测每1例标本中PRL ER、GH ER、ACTH ER、PSH ER、FSH ER和LH ER的表达情况。结果 33例多激素型垂体腺瘤标本中有22例(66．67％)表达ER,其中：PRL ER双标染色阳性标本10例、IH ER双标染色阳性标本9例、FSH ER双标染色阳性标本7例、GH ER双标染色阳性标本2例,33例标本的ACTH ER和TSH ER的双标染色均为阴性。结论 多激素型垂体腺瘤中,分泌：PRL、IH或FSH的垂体腺瘤细胞可表达ER;分泌ACTH或TSH的垂体腺瘤细胞不表达ER;分泌GH的垂体腺瘤细胞是否表达ER可能与该垂体腺瘤是否同时分泌PRL有关。ER很可能在多激素型垂体腺瘤PRL、IH及FSH腺瘤细胞的发生、发展过程中发挥作用。     

癌症患者腺垂体激素分泌功能的变化研究

目的 研究癌症患者腺垂体激素分泌功能的变化。方法 用放射免疫法[fj-2008ps1]测定171例癌症患者与46例正常对照组的泌乳素(PRL)，生长激素(GH)，促卵泡生成激素(FSH)，促黄体生成激素(LH)和促甲状腺激素(TSH)的血清水平。结果 癌症患者组与正常对照组比较患者血清PRLGH，LH和FSH均增高，但TSH无显著差异；肿瘤转移组与非转移组比较则无显著差别；不同脏器恶性肿瘤间垂体激素水平也无显著差异。结论 癌症患者腺垂体激素分泌功能亢进，除TSH水平变化不显著外，其他4种垂体激素水平皆升高显著，这有助于我们了解癌症患者的机体变化。     

急性脑血管病并发多器官功能衰竭患者腺垂体分泌功能研究

对167例急性脑血管病（ACVD）患者血清泌乳素（PRI）、生长激素（GH）促黄体生成素（LH）、促滤泡成熟激素（FSH）、促甲状腺素（TSH）及血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）水平进行了动态观察。结果发现：ACVD患者PRL、GH、ACTH、TSH、LH、FSH水平均显著高于对照组；ACVD并发多据官功能衰竭（MOF）患者PRL、GH、FSH水平显著高于ACVD疾病各组；随ACVD病程不同，6种激素水平也相应改变，1周时水平最高．2周后逐渐恢复；ACYD并MOF重型患者（MOF积分＞4分）PRL、GH水平显著高于轻型患者（MOF积分≤4分）。结果提示PRL、GH可能参与了ACVD并MOF的病理生理过程。     

腺垂体细胞分类染色法改进的体会

采用组织化学技术,显示垂体的腺垂体前叶各类细胞,其结果表明腺垂体前叶有五种类型的细胞：（1）生长激素细胞桔黄色;（2）催乳激素细胞桔红色;（3）促甲状腺激素细胞深蓝色;（4）促性腺激素细胞紫红色;（5）促肾上腺皮质激素细胞浅蓝色或灰蓝色。各类细胞染色鲜艳,结构清晰,便于观察。对于教学、科研和临床诊断方面有十分重要的实际意义。     

海洛因依赖对大鼠垂体β-内啡肽表达的影响

目的：探讨海洛因依赖对大鼠垂体远侧部β-内啡肽（β-endrophin,β-EP）表达的影响。方法：成年雄性SD大鼠55只,随机分为正常对照组、盐水对照组及海洛因依赖组;皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于模型建立的第10、17、24、31、38天取垂体组织,应用免疫组织化学SABC法、图像分析法观察大鼠垂体远侧部β-内啡肽表达。结果：与正常对照组和盐水对照组比较,海洛因依赖组大鼠垂体远侧部β-EP免疫反应明显减弱,平均灰度值增高（P〈0.05）。结论：在海洛因依赖期间,垂体远侧部β-EP表达减少,提示海洛因依赖使内源性阿片样物质的产生受到抑制。     

大白鼠脑垂体促生长激素细胞的免疫组织化学观察

用免疫组织化学方法对出生后1天,1、2、3周,1及3月的Wistar种大白鼠脑垂体远侧部的促生长激素(GH)细胞的发育分化进行了观察。生后第1天,在脑垂体远侧部前下端出现极少数的GH细胞,分泌颗粒细小,被染成棕褐色或黄褐色。GH细胞在第1周时增多,在远侧部的前下方形成半月状区域。2、3周时更多,并向中央区伸延。1月时分散至远侧部全区,但反应强阳性的细胞,在前半部尤其是边缘区明显地多,而后半部则甚少,但巳达中间部附近。至3月末,GH细胞更多,散在于远侧部各处,并能分出反应强、中等和弱三种类型细胞,反映其机能状态的不同。随机体发育,GH细胞渐多,形态与机能分化逐步完善。     

亚硒酸钠对实验性胃癌大鼠垂体ACTH、GH和TSH细胞的影响

目的:观察亚硒酸钠在大鼠实验性胃癌发生过程中对垂体远侧部ACTH细胞、GH细胞和TSH细胞的免疫组织化学影响。方法:用断乳雄性Wistar大鼠62只,分正常对照组、N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)实验对照组、MNNG低硒组和MNNG高硒组。43周时取大鼠垂体和胃组织。用免疫组织化学ABC法显示垂体ACTH细胞、GH细胞和TSH细胞,结果进行图像分析。结果:MNNG实验对照组和加硒组均有数只大鼠胃浆膜面出现肿块,且光镜下显示为肠上皮化生,其中加硒组的肠化生率明显高于实验对照组(P<0.05)。图像分析结果显示,MNNG实验组、低硒组、高硒组大鼠垂体远侧部ACTH阳性细胞的平均光密度(MOD)分别为0.0623±0.02024、0.0680±0.08948和0.0574±0.01949;GH阳性细胞MOD分别为0.0380±0.01311、0.0415±0.01559和0.0293±0.01323;TSH阳性细胞数MOD分别为0.0943±0.18606、0.1272±0.05389和0.1044±0.04166。结论:在实验性大鼠胃癌形成过程中,低剂量亚硒酸钠组的大鼠腺垂体远侧部ACTH、GH和TSH阳性细胞反应增强;而高剂量亚硒酸钠的作用则完全相反。     

垂体腺瘤激素水平与手术疗效相关性研究

目的探讨垂体腺瘤激素水平与手术疗效相关性。方法分析2002年8月~2014年2月于我院就诊的419例垂体腺瘤患者的临床资料,分别测定术前、术后催乳素和生长激素水平,评估两种激素水平与手术疗效的关系。结果术前血清PRL水平与垂体泌乳腺瘤术后疗效显著相关（P〈0.01）,随着术前血清催乳素水平的增高,患者术后疗效更差;而术前血清生长激素水平与垂体生长激素腺瘤术后疗效无相关性（P〉0.05）;术后无残留的垂体腺瘤患者术后血清催乳素和生长激素较术前显著降低（P〈0.05）,而术后有残留的腺瘤患者血清激素水平变化不显著（P〉0.05）,经方差分析,垂体泌乳腺瘤和生长激素腺瘤的两组患者组间、不同时点以及组间与不同时点的交互作用差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论术前血清PRL水平可作为判断患者术后疗效的指标,临床上手术切除肿瘤时需尽量避免瘤体残留。     

T1-2期乳腺癌患者腋窝淋巴结生发中心和窦组织细胞增生与淋巴结转移的关系

目的 探讨T1-2期乳腺癌患者腋窝淋巴结生发中心增生（GH）和窦组织细胞增生（SH）与淋巴结转移的关系.方法 选取104例T1-2期乳腺导管癌患者,HE染色法检测腋窝淋巴结GH和SH情况以及腋窝淋巴结转移、癌细胞分化、癌周浸润和淋巴管浸润情况,免疫组织化学染色法检测乳腺癌组织雌激素受体、孕激素受体、p53、C-erb-B2和增殖细胞核抗原的表达,分析GH、SH及其他临床病理特征的关系以及GH和SH与淋巴结转移的关系.结果 32例（31%）患者有腋窝淋巴结转移,GH和SH均阳性者、GH和SH仅1个阳性者以及GH和SH均阴性者的淋巴结转移率分别为21%、73%和81%.GH和SH均阳性者与GH和SH均阴性者以及GH和SH仅1个阳性者淋巴结转移阳性的比例差异有统计学意义（P=0.017,P=0.041）.SH表现与p53表达相关（P=0.037）,GH表现与SH表现相关（P=0.000）.结论 T1-2期乳腺癌SH的发生与乳腺癌组织p53表达相关,而GH的发生与SH的发生相关.SH和GH同时发生可抑制乳腺癌淋巴结的转移,提示预后较好;而SH或（和）GH阴性提示较高的术后复发可能,需加强术后辅助化疗.     

垂体特异转录因子pit-1在垂体瘤中的表达及意义的实验研究

目的 检测垂体特异转录因子pit-1在垂体腺瘤中的表达，研究Pit-1与激素水平、肿瘤侵袭性的关系。以探讨Pit-1在垂体瘤发病机制中的作用。方法 根据术前激素水平、临床表现及术后病理诊断确定腺瘤类型，依影像学表现、术中所见及硬膜病检结果判断对肿瘤侵袭性分级，用免疫组化和RT-PCR分别测定Pit-1蛋白和pit-1mRNA的表达。结果 Pit-1在GH腺瘤、PRL腺瘤、GH／PRL混合腺瘤中均有表达。与对照组相比，中、高度表达者占此3种腺瘤的78．8％（26／33），无功能腺瘤及ACTH腺瘤中无Pit-1蛋白的表达。pit-1mRNA在全部的GH腺瘤、PRL腺瘤、GH／PRL混合腺瘤和50％（5／10）的无功能腺瘤中有表达，在ACTH腺瘤组中无表达。GH、PRL、GH／PRL混合腺瘤组间pit-1mRNA的表达量差异无显著性，此3组均显著高于无功能腺瘤组（P〈0．05）。GH、PRL腺瘤组中pit-1mRNA的表达量与其各自术前的激素水平呈显著正相关。在表达pit-1mRNA的腺瘤中，侵袭性组高于非侵袭性组。结论 Pit-1的表达与垂体腺瘤的表型、功能有关，与某些激素（GH、PRL）水平、肿瘤的侵袭性呈正相关，在某些类型（GH、PRL、GH／PRL）的垂体瘤发病机制中起重要作用。     

生麦芽生物碱对高泌乳素血症模型大鼠激素水平的影响

目的 研究生麦芽生物碱对高泌乳素血症（HPRL）模型大鼠泌乳素（PRL）、雌二醇（E2）、孕酮（P）等激素的影响,初步明确生麦芽回乳作用的有效部位。方法 选用雌性未孕Wistar大鼠,背部皮下注射盐酸甲氧氯普胺注射液制备HPRL模型。造模成功后,各组均胃饲给予相应的药物治疗,连续20 d。末次给药后取血,应用ELISA法检测血清中PRL、E2、P、促卵泡激素（FSH）、促黄体生成素（LH）的含量,观察生麦芽不同提取部位对HPRL大鼠各激素水平的影响。结果 与模型组比较,生麦芽生物碱高、低剂量组大鼠血清PRL水平明显下降（P＜0.01）,高剂量组还可升高E2、P水平（P＜0.05或P＜0.01）。结论 生麦芽生物碱对HPRL模型大鼠有保护作用,其作用机制可能与其对PRL、E2、P激素水平的调节作用有关。     

AOM所致大鼠结肠癌形成过程中脑垂体远侧部TSH阳性细胞免疫组织化学观察

目的:观察氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)所致大鼠结肠癌形成过程中,大鼠脑垂体远侧部促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)细胞的免疫组织化学变化并初探其意义。方法:用断乳SD(Sprague Dawley)雄性大鼠30只,分为AOM实验组和对照组。实验组用AOM(15 mg/kg)每周腹腔注射,连续2周,诱导大鼠结肠癌的形成。分别于实验第10,30,34周取材,用免疫组织化学、图像分析法观察大鼠实验性结肠癌形成过程中,脑垂体远侧部TSH阳性细胞的变化。结果:亚甲基蓝染色光镜下观察,可见AOM腹腔注射的大鼠结肠黏膜出现异常隐窝(aberrantcrypt,AC)和异常隐窝灶(aberrant crypt foci,ACF)。免疫组织化学显示,与同期正常对照组相比,实验组大鼠垂体远侧部TSH阳性细胞阳性反应显著性减弱(P<0.05)。结论:在大鼠实验性结肠癌形成过程中,脑垂体远侧部TSH细胞变化可能与机体肿瘤的发生有关。     

不孕症患者性激素及抗体水平的研究

目的探讨不孕症患者性激素水平及免疫抗体水平。方法用免疫发光法检测130例不孕症患者及70例健康对照组血清促黄体生成素（LH）、促卵泡生成素（FSH）、雌二醇（E2）、孕酮（P）、泌乳素（PRL）、睾酮（T）水平;用酶联免疫吸附法测定抗子宫内膜抗体IgG、IgM和抗精子抗体IgG、IgM水平。结果不孕症组患者抗子宫内膜抗体、抗精子抗体阳性率为32.3%（42/130）,明显高于对照组的8.6%（6/70）（P〈0.05）;不孕症组E2、P水平低于对照组（P〈0.05）,FSH、LH、PRL、T水平高于对照组（P〈0.05）;免疫抗体IgM阳性组的LH、FSH、PRL、T水平明显增高,E2、P水平明显降低（P〈0.05）。结论不孕症与抗子宫内膜抗体和抗精子抗体及性激素分泌紊乱有一定关联。