养阴解毒方对人肺腺癌耐药细胞PC9/R信号蛋白AKT磷酸化及PTEN表达影响研究

目的:研究养阴解毒方对人肺腺癌耐药细胞PC9/R信号蛋白AKT磷酸化及抑癌基因PTEN的表达影响。方法:选择吉非替尼获得性耐药细胞株PC9/R,采用血清药理学的方法,研究养阴解毒方及其结合吉非替尼的体外增殖抑制作用,流式细胞术法检测对PC9/R的细胞凋亡及周期的影响;Western-blot法检测PC9/R细胞株的PI3K/Akt信号通路中的关键激酶Akt磷酸化和PTEN表达。结果:养阴解毒方对耐药株PC9/R有增殖抑制作用,并有量效关系,低剂量组联合吉非替尼抑制PC9/R效果最优(P0.01),增效作用明显(Q值均0.85);养阴解毒联和吉非替尼组较吉非替尼单药组可明显提高PC9/R细胞凋亡的能力,有显著统计学意义(P0.01),养阴解毒方组及联合用药组对PC9/R细胞S期均较吉非替尼单药细胞周期缩短(P0.01);养阴解毒方组与联合用药组均比单药吉非替尼能够明显抑制PC9/R的p-AKT活化位点Thr308和Ser473的磷酸化,有统计学意义(P均0.05),联合用药组PC9/R的PTEN表达显著高于其余各组,有统计学意义(P均0.05)。结论:养阴解毒方可增加人肺腺癌耐药株细胞PC9/R对于吉非替尼的药物敏感性,两药联用有协同作用,养阴解毒方可提高PTEN的表达,抑制信号通路关键蛋白AKT的磷酸化,从而起到抑制肿瘤生长、逆转耐药的双重作用。     

扶正抗癌方联合吉非替尼治疗PS≤2分晚期NSCLC的疗效与安全性研究

目的探讨扶正抗癌方联合吉非替尼治疗体力状况评分(PS)≤2分且EGFR基因突变型晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效与安全性。方法连续入组51例PS≤2分的ⅢB/Ⅳ期病理组织学确诊且EGFR基因突变型NSCLC患者,随机分为治疗组25例及对照组26例,分别接受扶正抗癌方汤剂1次/d联合吉非替尼250 mg 1次/d和单药吉非替尼250 mg1次/d治疗,比较2组患者治疗后无进展生存时间(PFS)、总生存时间(OS)、客观缓解率(ORR)、疾病控制率(DCR)及毒性反应。结果治疗组PFS与OS较对照组显著延长(P均0.05),2组ORR及DCR比较均无显著性差异(P均0.05)。2组均出现Ⅰ~Ⅱ度皮疹、腹泻或口腔溃疡,治疗组少于对照组,但无显著性差异(P0.05)。结论扶正抗癌方联合吉非替尼治疗PS≤2分且EGFR基因突变型晚期NSCLC,可延长患者PFS及OS,且两药联合使用毒副反应有减少趋势,提示扶正抗癌方对吉非替尼有增效减毒的作用。     

扶正抗癌方联合吉非替尼治疗 PS≤2 分晚期 NSCLC 的疗效与安全性研究

目的探讨扶正抗癌方联合吉非替尼治疗体力状况评分（Ps）≤2分且EGFR基因突变型晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的疗效与安全性。方法连续入组51例PS≤2分的ⅢB／Ⅳ期病理组织学确诊且EGFR基因突变型NSCLC患者,随机分为治疗组25例及对照组26例。分别接受挟正抗癌方汤剂1次／d联合吉非替尼250mg1次／d和单药吉非替尼250mg1次／d治疗,比较2组患者治疗后无进展生存时间（PFS）、总生存时间（OS）、客观缓解率（ORR）、疾病控制率（DCR）及毒性反应。结果治疗组PFS与OS较对照组显著延长（P均〈0．05）,2组ORR及DCR比较均无显著性差异（P均〉0．05）。2组均出现I～Ⅱ度皮疹、腹泻或I：／腔溃疡,治疗组少于对照组,但无显著性差异（P〉0．05）。结论扶正抗癌方联合吉非替尼治疗PS≤2分且EGFR基因突变型晚期NSCLC,可延长患者PFS及OS,且两药联合使用毒副反应有减少趋势,提示扶正抗癌方对吉非替尼有增效减毒的作用。     

补中益气汤联合吉非替尼治疗肺腺癌随机平行对照研究

[目的]观察补中益气汤联合吉非替尼治疗肺腺癌疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将60例住院患者按病志号抽签简单随机分两组。对照组30例吉非替尼250mg,早餐后1h温服。治疗组30例补中益气汤,升麻、柴胡各3g,炙甘草、陈皮各6g,当归9g,土炒白术、人参各12g,炙黄芪15g等,1剂/d,水煎1000mL,早、中、晚口服;吉非替尼治疗同对照组。连续治疗3个月为1疗程。观测临床表现、基因T790M突变携带率、基因T790M突变时间、不良反应。连续治疗1疗程,判定疗效。[结果]治疗组CR20例,PR8例,SD1例,PD1例,总有效率93. 33%;对照组CR14例,PR9例,SD4例,PD3例,总有效率90. 00%;治疗组疗效优于对照组两组间无明显差异(P 0. 05)。基因T790M突变携带率两组间无明显差异(P 0. 05),基因T790M突变时间治疗组优于对照组(P 0. 01)。不良反应发生率治疗组略低于对照组,两组间无明显差异(P 0. 05)。[结论]补中益气汤联合吉非替尼治疗肺腺癌,疗效满意,无严重不良反应,值得推广。     

扶正抗癌方联合吉非替尼对肺癌A549细胞的影响及机制

目的观察扶正抗癌方联合吉非替尼对肺癌A549细胞生长、凋亡的影响,探讨其协同抗肿瘤的可能机制。方法应用MTT法检测扶正抗癌方(0.211、0.316、0.474、0.711、1.067、1.6、2.4、3.6 mg/m L)和吉非替尼(3.95、5.92、8.18、13.33、20、30、45、67.5!mol/L)对A549细胞增殖的影响;用流式细胞术观察对照组(完全培养液组)、中药组(扶正抗癌方,1.6 mg/m L)、西药组(吉非替尼,45!mol/L)、联合组(扶正抗癌方1.6 mg/m L+吉非替尼45!mol/L)A549细胞凋亡;用Western blot检测各组EGFR、p-EGFR、EZH2、PPAR-γ及P53蛋白表达。结果扶正抗癌方及吉非替尼均有抑制肿瘤细胞增殖作用。扶正抗癌方联合吉非替尼干预后细胞凋亡率为(12.6±4.5)%,明显高于扶正抗癌方(4.6±0.7)%及吉非替尼(7.8±2.7)%,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,联合组p-EGFR、EZH2下调(P0.05),PPAR-γ及P53蛋白上调(P0.05),西药组及中药组EZH2下调(P0.05),中药组PPAR-γ上调(P0.05);与西药组比较,联合组p-EGFR下调(P0.05),PPAR-γ上调(P0.05);与中药组比较,联合组p-EGFR下调(P0.05)。结论扶正抗癌方联合吉非替尼能显著抑制A549细胞的增殖生长,促使肿瘤细胞凋亡;其协同抗肿瘤活性的机制可能与下调p-EGFR、EZH2及上调PPAR-γ、P53蛋白有关。     

扶正抗癌方联合吉非替尼抑制非小细胞肺癌增殖的机制研究

目的探讨扶正抗癌方联合吉非替尼对A549、H1650增殖的抑制作用及分子机制。方法用MTS活力检测法观察药物对细胞增殖的影响;蛋白质印迹法检测药物对p-EGFR、p-STAT3、p-ERK和p-Akt(Ser473)蛋白表达的影响。结果用扶正抗癌方(2 mg/mL)干预细胞,A549和H1650细胞活力明显下降(P0.01);扶正抗癌方(2 mg/mL)和吉非替尼(1μmol/L)联合作用后,与吉非替尼单独给药相比,A549和H1650细胞活力下降更加明显(P0.05);提示扶正抗癌方能抑制A549、H1650细胞的增殖,且联合吉非替尼后抑制效果更好。用扶正抗癌方(2 mg/mL)分别作用于A549细胞和H1650细胞,加药2 h开始抑制p-EGFR的激活,且随着时间的推移抑制作用更加明显;提示扶正抗癌方能以时间依赖性抑制p-EGFR的表达(P0.05)。扶正抗癌方组、吉非替尼组及联合给药组均能明显下调p-STAT3、p-ERK和p-Akt(Ser473)蛋白的表达(P0.05);与吉非替尼单药组相比,联合给药组对以上3种蛋白的下调作用更明显(P0.05)。结论扶正抗癌方联合吉非替尼可通过介导EGFR通路,抑制p-STAT3、p-ERK和p-Akt(Ser473)的表达,进而抑制A549、H1650细胞的增殖。     

南方红豆杉水提物抑制T790M突变及c-MET扩增导致的吉非替尼耐药体外研究

目的研究南方红豆杉水提物抑制T790M突变及c-MET扩增所致吉非替尼耐药机制。方法应用MTT法检测不同浓度南方红豆杉水提物(0.25、0.5、1、2、4 mg/mL)和吉非替尼(3、6、12、18、30μmol/L)对H1975、H820细胞株增殖的影响,根据结果筛选最佳后续实验药物浓度,计算各组半数抑制浓度(IC_(50))和两药联合指数(CI);将对照组(1640培养液)、南方红豆杉组(0.25μmol/L)、吉非替尼组(3μmol/L)及联合组(南方红豆杉0.25μmol/L+吉非替尼3μmol/L)H1975和H820细胞药物处理72 h后,采用Western Blot检测EGFR、p-EGFR、AKT、p-AKT及PI3K蛋白表达,采用qRT-PCR检测EGFR、PI3K及AKT mRNA表达。结果在H1975和H820细胞中联合组达到IC_(50)所需的吉非替尼浓度明显小于吉非替尼组,且CI1。在H1975细胞中,与对照组比较,南方红豆杉组EGFR、p-EGFR、PI3K及p-AKT蛋白表达降低(P0.01,P0.05),吉非替尼组AKT蛋白表达降低(P0.05),联合组EGFR、p-EGFR、AKT、p-AKT及PI3K蛋白表达降低(P0.01,P0.05)。与吉非替尼组比较,南方红豆杉组EGFR、p-EGFR、p-AKT蛋白表达降低(P0.01),联合组EGFR、p-EGFR、PI3K及p-AKT蛋白表达降低(P0.01)。在H820细胞中,与对照组比较,南方红豆杉组EGFR、PI3K、p-AKT蛋白表达下调(P0.01),联合组p-EGFR、PI3K、p-AKT蛋白表达降低(P0.01)。与吉非替尼组比较,南方红豆杉组EGFR、p-AKT蛋白表达降低(P0.01,P0.05),联合组p-EGFR、PI3K、p-AKT蛋白表达降低(P0.01)。在H1975及H820细胞中,与对照组比较,吉非替尼组AKT及PI3K mRNA表达降低(P0.01,P0.05),南方红豆杉组及联合组EGFR、AKT及PI3K mRNA表达降低(P0.01)。与吉非替尼组比较,联合组EGFR、AKT及PI3K mRNA表达降低(P0.01)。结论南方红豆杉水提物能增强吉非替尼对H1975、H820细胞增殖抑制作用,可抑制T790M突变和c-MET扩增所致的吉非替尼耐药,其机制与抑制EGFR/PI3K/AKT通路有关。     

扶正抗癌方通过cMet通路逆转H1650细胞对吉非替尼耐药的研究

目的探讨扶正抗癌方逆转H1650细胞对吉非替尼耐药的分子机制。方法 CCK8活力检测法分别观察吉非替尼、扶正抗癌方及两者联合给药对H1650细胞增殖的影响;蛋白质印迹法检测扶正抗癌方对p-c Met(Tyr1349)、c Met和pEGFR(Tyr1068)表达的影响。结果 H1650细胞对吉非替尼产生耐药;扶正抗癌方以浓度和时间依赖性抑制H1650细胞的增殖(P0.05);扶正抗癌方联合吉非替尼抑制H1650细胞增殖效果优于扶正抗癌方单药(P0.05);扶正抗癌方以时间依赖性下调p-c Met(Tyr1349)、c Met和p-EGFR(Tyr1068)的表达(P0.05)。结论扶正抗癌方可通过抑制c Met通路逆转H1650细胞对吉非替尼的耐药。     

肺岩宁方联合吉非替尼对肺腺癌H1975细胞体外增殖的影响

目的 观察吉非替尼耐药肺腺癌H1975细胞在肺岩宁方、吉非替尼作用下体外增殖情况,探讨肺岩宁方逆转吉非替尼耐药可能的机制。方法 选取肺腺癌T790M突变耐药株H1975细胞,分为对照组、吉非替尼组、肺岩宁方组和联合干预组。CCK-8法检测各组细胞在不同时间点(0 h、24 h、48 h、72 h)的增殖率;Western blot检测EGFR-PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达的影响。结果 CCK-8结果显示,肺岩宁方组对于H1975细胞在体外增殖呈剂量依赖性抑制,即随着药物浓度的提高而增加;联合干预组对于抑制细胞体外增殖效果较单药明显。Western blot显示,联合干预组可下调p-EGFR、p-Akt、pmTOR的表达。结论 肺岩宁方联合吉非替尼可抑制H1975细胞的体外增殖,体外抑制效果较单药治疗明显;其延缓吉非替尼耐药机制可能与下调EGFR-PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达有关。     

扶正抗癌颗粒联合吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌随机双盲对照试验

目的评价扶正抗癌颗粒联合吉非替尼治疗表皮细胞生长因子受体（EGFR）基因突变晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者疗效。方法采用随机、双盲、安慰剂对照的方法，纳入EGFR基因突变的晚期NSCLC患者70例，随机分为治疗组（吉非替尼+扶正抗癌颗粒）和对照组（吉非替尼+安慰剂颗粒剂）。治疗至肿瘤进展或发生不可耐受的毒副反应或死亡。观察两组患者疾病控制率（DCR）、疾病无进展生存时间（PFS）及毒性反应。结果治疗组与对照组DCR分别为93.90%和90.30%，两组差异无统计学意义 （P>0.05）。治疗组PFS为13.5个月，对照组PFS是11.7个月，两组差异有统计学意义（P<0.05）。治疗组2例患者出现皮疹，对照组中8例患者出现皮疹，两组差异有统计学意义（P<0.05）。结论扶正抗癌颗粒联合吉非替尼在可延长EGFR突变晚期NSCLC患者PFS，减轻酪氨酸激酶抑制剂引起的不良反应。     

杀白细胞毒素基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的红霉素耐药基因的检测

目的了解杀白细胞毒素(PVL)基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MR-SA)的红霉素耐药基因(ermA/B/C)检出情况。方法收集2007年1月—2008年6月分离自河北医科大学第一医院临床患者的MRSA 45株,采用聚合酶链反应对45株MRSA的ermA/B/C和PVL基因进行检测,分析PVL基因阳性MRSA的ermA/B/C检出率。结果45株MRSA中有33株检出ermA/B/C,检出率为73%(33/45);有12株检出PVL基因,检出率为27%(12/45);12株PVL基因阳性MRSA中有9株检出ermA/B/C,检出率为75%(9/12);33株PVL基因阴性MRSA中仅24株检出ermA/B/C,检出率为73%(24/33)。结论PVL基因阳性与PVL基因阴性MRSA的ermA/B/C检出率基本一致,MRSA的重要致病基因——PVL的产生可能与红霉素耐药基因ermA/B/C无关。     

糖心康对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡促进与抑制因子基因表达的调控作用

目的探讨糖心康对糖尿病心肌损伤的保护作用及机理。方法采用STZ加高脂饮食造模。治疗组以中药糖心康灌胃,空白组及模型组以生理盐水灌胃,以基因芯片技术TUNEL法检测心肌细胞凋亡。结果模型组细胞凋亡较正常组发生率明显增加,两组比较差异非常显著(P<0.01),而糖心康组心肌凋亡率则下降,模型组大鼠Fas基因蛋白表达增强,与正常组比较差异非常显著(P<0.01),而糖心康组Fas基因表达减弱,与模型组比较差异显著(P<0.01),模型组Bcl-2表达减弱,而糖心康组Bcl-2表达较模型组增强,二者比较差异显著(P<0.01)。利用基因芯片技术在心肌基因表达谱中筛选出与细胞凋亡有关的促进与抑制因子基因主要有2个,即AFO41376,M75720。结论糖心康有抑制心肌细胞凋亡作用,可使Fas基因、AFD41376基因表达下调,使Bcl-2,M75720表达上调。这也是中药复方糖心康具有心肌损伤保护作用的机制之一。     

DNA条形码等分子鉴定技术与动植物类中药材的鉴定

中药材鉴定是控制中药质量、确保用药安全与效果的首要环节。DNA分子鉴定是从基因层面上进行中药材鉴别的手段,准确率高。DNA分子鉴定包括电泳技术、免疫技术、随机扩增多态性DNA(RAPD)、限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)、扩增片段长度多态性(AFLP)、简单重复序列(ISSR)及DNA条形码等,以DNA条形码应用最为广泛。DNA条形码是基因组中相对较短的、可用于物种鉴定的特异性基因片段。植物类中药材的条形码多选用核基因和叶绿体基因DNA片段,如叶绿体psbA-trnH基因、内转录间隔区(ITS)、叶绿体核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶大亚基(rbcL)和RNA转录体Ⅱ型内含子剪切酶基因(matK)等;动物类中药材的条形码多来自核基因和线粒体基因DNA,主要有线粒体细胞色素C氧化酶亚基1(COⅠ)、核糖体RNA(rRNA)和线粒体细胞色素b基因(CytB)等。综述动植物类中药材DNA分子标记与鉴定技术应用进展,并探讨DNA条形码在药用动植物类中药材鉴定中存在的局限性及发展前景,为中药质量控制提供参考。     

Survivin、P53突变基因、PTEN基因在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究

目的探讨凋亡抑制基因Survivin、P53突变基因和抑癌基因PTEN在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及相关性。方法：应用免疫组织化学法（SP），检测60例NSCLC组织标本和20例正常肺组织标本中的Survivin、P53突变基因、PTEN基因表迭情况。结果①在60例NSCLC组织标本中，Survivin、P53，PTEN表迭结果分别为47例（78．33%）、42例（70．00%）、27例（45．00％）。在20例正常肺组织标本中，Survivin、P53基因无表达，PTEN阳性表达18例（90%）。②Survivin、P53在NSCLC组织中的阳性表达明显高于正常肺组织（P〈0．01）。Survivin的阳性表达与NSCLC的组织学类型、分化程度、是否淋巴结转移及TNM分期无相关性（P〉0．05），P53的阳性表达与NSCLC的组织学类型、分化程度、TNM分期无相关性（P〉0．05），与NSCLC的有无淋巴结转移有相关性（P〈0．05）。PTEN在正常肺组织中的阳性表达明显高于NSCLC组织（P〈0．01）。PTEN的阳性表达与NSCLC的组织学类型及TNM分期无相关性（P〉0．05），与NSCLC的分化程度、有无淋巴结转移有相关性（P〈0．05）。③Survivin与P53在NSCLC的表达无相关性（P〉0．05），PTEN与Survivin、P53在NSCLC的表达均有显著差异（P〈0．05）。结论Survivin、P53突变基因、PTEN基因的异常表达与非小细胞肺癌的发生发展有关；三者在NSCLC的发生发展中起协同作用；P53突变基因和PTEN基因可作为诊断肺癌和评价肺癌预后的参考标志及基因治疗的新靶点。     

中西药物对肺腺癌放射增敏基因表达谱初步研究

目的:利用基因芯片技术研究扶正增效方、甲硝唑对肺腺癌放射增敏基因表达谱,筛选出中西药物对放射增敏的差异表达基因及其共同表达基因。方法:捉取中西药物加放射组癌组织及单纯放射组癌组织RNA,分别用Cy5-dCTP或Cy3-dCTP标记,再与38500点人基因芯片杂交,筛选中西药物加放射组与单纯放射组差异表达基因。结果:中药加放射组与单纯放射组差异表达基因857条,上调349条,下调508条,其中39条GeneBank中登录,差异显著基因中15条表达上调,21条表达下调,分别为凋亡、转录调节、信号转导、细胞周期、DNA损伤与修复、免疫等相关基因;差异极显著基因1条,为THRA。西药加放射组与单纯放射组差异表达基因47条,已知显著差异基因3条,分别为DNA损伤与修复、转录调节、信号转导等相关基因。只有RARA基因在中西药放射组出现差异表达。结论:中西药物放射增敏存在不同的基因表达谱,说明中西药物放射增敏基因机制不尽相同,筛选出的特异表达基因和共同表达基因为进一步研究放射增敏药物开发和建立放射增敏动物模型具有重要意义。     

外燥对小鼠气管细胞凋亡与bcl-2基因及bax基因表达的影响

目的观察外燥对小鼠气管细胞凋亡与bc l-2基因及bax基因表达的影响。方法30只昆明种小鼠随机分为常温常湿组(A组),温燥组(B组),凉燥组(C组),每组10只。经处理后第14天用免疫组化法检测各组气管细胞凋亡率(%)、bc l-2、bax阳性指数(PI,%)、bc l-2/bax累积阳性指数(AI,%)与bc l-2:bax蛋白表达比值。结果3组小鼠气管细胞凋亡率均≤0.3%;B组与C组bc l-2 PI与AI均低于A组(P<0.01),B组、C组气管细胞bc l-2:bax蛋白比值中bax增加。结论外燥致气管细胞bc l-2表达降低、bc l-2:bax蛋白比值改变,bc l-2、bax阳性细胞以气道炎性病灶或纤毛缺损处多见,提示与外燥分子致病机制有关。     

核酸——中药活性成分与基因治疗

本文根据现代基因治疗作用原理 ,提出核酸类物质作为中药活性成分之一 ,可通过胃肠自然生理过程 ,进入机体细胞 ,发挥基因治疗作用 ,这为中药研究提供了一个全新的思路。     

核酸—中药活性成分与基因治疗

本文根据现代基因治疗作用原理 ,提出核酸类物质作为中药活性成分之一 ,可通过胃肠自然生理过程 ,进入机体细胞 ,发挥基因治疗作用 ,这为中药研究提供了一个全新的思路。     

Ki-67和Pten在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的：探讨子宫内膜癌组织中pten和Ki-67蛋白表达以及与子宫内膜癌发生、发展及预后的关系。方法：应用免疫组化SP法检测子宫内膜增生15例，子宫内膜不典型增生28例，子宫内膜癌62例中Ki-67和pten基因的表达，并分析其与子宫内膜癌发生，发展及预后的关系。结果：子宫内膜癌组中Ki-67蛋白阳性率明显高于增生期子宫内膜组及子宫内膜不典型增生组Ki-67蛋白阳性率（P〈0．05，P〈0．05），而子宫内膜癌组中pten蛋白阳性率明显低于子宫内膜不典型增生组及增生期子宫内膜组pten蛋白阳性率（P〈0．05，P〈0，05）；Ki-67在子宫内膜癌中的表达与组织分化、临床分期均显著相关（P〈0．01，P〈0．05），但其与肌层浸润、淋巴结转移无关（P〉0．05，P〉0．05），pten的表达与组织分化、肌层浸润深度、临床分期及淋巴结转移均显著相关（P〈0．5，P〈0．05，P〈0．01，P〈0．05）。结论：Ki-67和pten可能在子宫内膜癌的发生、发展及预后起着重要的作用，同时也是诊断子宫内膜癌及癌前病变的有价值的分子标记物。     

蟾酥逆转大肠埃希菌耐药性的研究

目的：探讨蟾酥对耐药大肠埃希菌的体外抗菌效果及其逆转细菌耐药的部分机理。方法：分别检测水提蟾酥和醇提蟾酥对耐药大肠埃希菌的最小抑菌浓度（MIC）,采用PCR方法分别检测与低于一个MIC浓度梯度的水提蟾酥和醇提蟾酥作用前、作用1、5、10天的耐药大肠埃希菌耐药基因（TEM、SHV、DHA、CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-9、OXA-2、OXA-10、oprD2）,同时采用RT-PCR方法检测阳性耐药基因mRNA的表达情况。结果：水提蟾酥和醇提蟾酥对耐药大肠埃希菌的最小抑菌浓度分别为1：4,1：8,耐药大肠埃希菌的TEM和CTX-M-9基因在蟾酥作用前后均为阳性,其余耐药基因在蟾酥作用前后均为阴性,蟾酥作用前及作用1天后,耐药大肠埃希菌的TEM和CTX-M-9的mRNA为阳性,而作用5天后,TEM和CTX-M-9的mRNA检测阴性。结论：耐药大肠埃希菌携带多种耐药基因,蟾酥具有逆转耐药大肠埃希菌的耐药性,其逆转机理可能与其抑制耐药基因表达有关。