SDF-1/CXCR4与缺血性视网膜病变

缺血性视网膜病变常导致视网膜新生血管形成,是常见的致盲性眼病之一.主要包括增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)、视网膜静脉阻塞(RVO)、眼缺血综合征(OIS)、大动脉炎眼底病变等.其他的病变还包括由血液病,如贫血、白血病、红细胞增多症、血小板减少性紫癜、镰状细胞血红蛋白病等引起的视网膜慢性缺血.视网膜组织代谢极为旺盛,其内层的血液供应又源自终末分支的视网膜血管,因此极易发生缺血性病变.视网膜缺血缺氧常导致视网膜新生血管形成.虽然新生血管形成是机体的一种保护性反应,在组织修复及缺血再灌注方面起着重要作用,但其继发病变如:玻璃体积血、增殖性视网膜病变及新生血管性青光眼等可引起视力丧失.     

NGF结合抗VEGF在糖尿病患者视网膜病变中的作用及IGF-1和VEGF的相关性

目的 研究神经生长因子(NGF)和抗血管内皮生长因子(VEGF)联合用药对糖尿病视网膜病变(DR)患者治疗效果.方法 DR并伴有视网膜神经损害患者随机分为对照组和治疗组.对照组行NGF肌肉注射;治疗组NGF肌肉注射同时,行眼球内注射抗VEGF药物,对两组进行图形视觉诱发点位和闪光视网膜电图检查;患者眼球房内房水中VEG...     

血浆VEGF和PAI-1与糖尿病视网膜病变严重程度关系研究

目的探讨不同程度糖尿病视网膜病变患者血浆中血管内皮生长因子(VEGF)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAT-1)水平的变化规律及其意义。方法收集2007年1月至12月新疆石河子大学医学院第一附属医院内分泌科和眼科就诊的2型糖尿病患者72例。用酶联免疫吸附双抗体夹心法检测血浆VEGF和PAT-1水平。结果(1)糖尿病患者的血浆VEGF质量浓度明显高于正常对照组(NC组)[(17.86±12.25)ng/L],背景期视网膜病变组(BDR组)[(93.41±54.69)ng/L]明显高于无视网膜病变组(NDR组)[(52.17±21.81)ng/L]和增殖期视网膜病变组(PDR组)[(61.24±37.55)ng/L],但PDR组与NDR组比较差异无统计学意义;(2)糖尿病患者血浆PAI-1高于正常对照组,BDR组[(58.29±20.53)μg/L]和PDR组[(66.84±23.81)μg/L]明显高于NDR组[(44.88±16.36)μg/L],但BDR组和PDR组比较差异无统计学意义。结论糖尿病视网膜病变患者存在着血管内皮细胞的损伤和低纤溶状态,检测糖尿病患者血浆中VEGF和PAI-1对糖尿病视网膜病变的早期诊断和及时干预治疗可能具有重要意义。     

血清VEGF及ICAM-1水平与糖尿病视网膜病变患者微血管损伤的关系

目的探讨血清中血管内皮生长因子(VEGF)及细胞间黏附分子(ICAM)-1水平与糖尿病视网膜病变(DR)患者微血管损伤之间的关系。方法未应用抗凝类药物治疗的2型糖尿病(T2DM)患者120例,根据临床及眼底检查确诊将其分为非DR(NDR)组(n=56)、非增生型DR(NPDR)组(n=30)、增生型DR(PDR)组(n=34)。比较各组微血管病变发生率;采用流式细胞仪检测内皮细胞(ECs)、内皮祖细胞(EPCs)计数百分比;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组血清中VEGF及ICAM-1水平。结果 PDR组糖尿病肾病(DN)及神经病变的发生率明显高于NDR组和NPDR组(均P<0.05);与未发生微血管病变患者相比,发生微血管病变患者的EPCs水平明显下降,而ECs、VEGF和ICAM-1水平均明显升高(均P<0.05);不管是否发生微血管病变,PDR组的ECs、VEGF和ICAM-1水平均高于NDR组和NPDR组,NPDR组均高于NDR组,PDR组EPCs水平低于NPDR组,NPDR组低于NDR组(均P<0.05);PDR组VEGF、ICAM-1水平与ECs水平呈正相关(r=0.995,0.852,P<0.05),与EPCs水平呈负相关性(r=-0.895,-0.920,P<0.05)。结论 VEGF和ICAM-1在DR患者微血管损伤中高表达,与ECs和EPCs密切相关,提示VEGF和ICAM-1在DR患者微血管损伤形成中与血管内皮功能密切相关。     

川芎嗪对糖尿病大鼠视网膜的保护作用

目的探讨川芎嗪（TMP）治疗糖尿病视网膜病变（DR）的效果及其机制。方法将链脲佐菌素诱发糖尿病（DM）模型的36只大鼠随机分为DM组和TMP治疗组（每组18只）,同时设同批次同种属健康大鼠10只作为对照组,TMP治疗组每天用100mg／kg的TMP灌胃1次,DM组和对照组每天用100mg／kg的生理盐水灌胃1次,4个月结束实验。剥离各组视网膜,以NADPH组织化学方法显示微血管,并测量微血管面积密度;制作视网膜组织匀浆,ELISA法测定血管内皮生长因子（VEGF）浓度。结果DM组视网膜微血管面积密度和VEGF浓度均明显高于对照组及TMP治疗组（P均〈0．01）;TMP治疗组视网膜微血管面积密度和VEGF浓度均明显高于对照组（P〈0．05）． 结论 TMP对DR有治疗作用,其机制可能是抑制VEGF生成及微血管增生。     

MMP-9、TIMP-1和VEGF在视网膜母细胞瘤中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）和血管内皮生长因子（VEGF）在视网膜母细胞瘤（RB）中的表达及其与RB分化程度和视神经浸润的关系。方法应用MMP-9、TIMP-1单克隆抗体、VEGF多克隆抗体,采用PV6000免疫组化方法,对32例RB常规石蜡包埋标本进行MMP-9、TIMP-1和VEGF表达的测定。结果MMP-9和VEGF在RB中表达阳性率分别为56.25%（18/32）和68.75%（22/32）,均与RB的分化程度及视神经浸润有关（P均〈0.05）。TIMP-1的阳性表达率（18.75%,6/32）与RB的分化程度及视神经浸润无关（P〉0.05）。MMP-9和VEGF在RB中的表达明显正相关（P〈0.05）。结论MMP-9可以通过激活VEGF并上调VEGF的表达,促进RB组织中新生血管的生成。     

老年2型糖尿病患者血清SDF-1、血管内皮功能和血脂水平变化及意义

目的探讨老年2型糖尿病(T2DM)患者血清基质细胞衍生因子(SDF)-1、血管内皮功能和血脂的水平变化及意义。方法选择老年单纯T2DM患者83例作为观察组;同期健康体检者72例作为对照组。清晨空腹抽取外周静脉血,分离血清标本,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定SDF-1和内皮素(ET)-1含量,采用硝酸还原法测定一氧化氮(NO)含量,采用全自动生化分析仪测定血脂含量。比较两组空腹血糖(FPG)和糖化血红蛋白(Hb A1c)、SDF-1、血管内皮功能、血脂四项水平,FPG和Hb A1c与SDF-1、NO、ET-1和血脂的相关性。结果观察组FPG和Hb A1c明显高于对照组(P<0.05);观察组血清SDF-1水平明显低于对照组(P<0.05);观察组NO水平明显低于对照组(P<0.05),而ET-1水平明显高于对照组(P<0.05);观察组总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平明显高于对照组,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显低于对照组(均P<0.05);FPG和Hb A1c与SDF-1、NO和HDL-C呈线性负相关,与ET-1、TC、TG和LDL-C呈线性正相关(均P<0.05)。结论老年T2DM患者血清SDF-1水平下降,血管内皮功能紊乱及血脂异常,FPG和Hb A1c与SDF-1、NO和HDL-C呈线性负相关,与ET-1、TC、TG和LDL-C呈线性正相关。     

基质细胞衍生因子-1对大鼠视网膜血管内皮细胞功能的影响及其与MAPK/Erk信号通路的关系

目的探讨基质细胞衍生因子(SDF)-1及MAPK/Erk信号通路抑制剂U0126对体外培养的大鼠视网膜血管内皮细胞(MRVEC)增殖的影响。方法体外培养的MRVEC采用0、25、50和100μg/L的SDF-1处理,100μg/L SDF-1处理体外培养的MRVEC细胞0、24、48和72 h,采用Western印迹方法检测MRVEC细胞中MAPK/Erk信号通路的磷酸化活化情况,采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测MRVEC细胞的增殖情况。采用MAPK/Erk信号通路抑制剂U0126预处理MRVEC细胞,观察MAPK/Erk信号通路在SDF-1调控MRVEC细胞增殖中的作用。结果与100μg/L的SDF-1处理组相比,25、50和100μg/L的SDF-1均可显著上调MRVEC细胞中Erk的磷酸化水平,加强MRVEC细胞的增殖能力(P0.01),且这种作用具有剂量依赖性。采用Erk信号通路阻断剂U0126阻断MRVEC细胞中的Erk信号通路后,SDF-1促MRVEC细胞增殖的能力显著降低(P0.01)。结论胰岛素可通过激活MRVEC细胞中的MAPK/Erk信号通路,进而增强MRVEC细胞的增殖能力,从而在糖尿病视网膜病变中发挥一定的作用。     

NGF联合抗VEGF对糖尿病模型大鼠视网膜组织中氧化应激和VEGF表达的影响

目的 研究联合应用神经生长因子(NGF)与抗血管内皮生长因子(VEGF)对实验性糖尿病大鼠视网膜组织氧化应激反应和VEGF含量变化的影响。方法 选用清洁级健康雄性Wistar大鼠,分为正常对照组、模型组、NGF组和NGF+抗VEGF组。利用高脂高糖饮食+腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型,在大鼠饲养至16 W出现视网膜病变后,给予NGF组和NGF+抗VEGF组大鼠肌肉注射NGF,NGF+抗VEGF组同时给予眼球内注射抗VEGF药物。比较各组房水中VEGF含量和空腹血糖水平;生理记录仪检测各组视网膜暗反应(ERG)变化;比色法检测各组视网膜组织中丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)水平;免疫组化检测各组视网膜组织中VEGF蛋白水平。结果 各组注射3 w后,与模型组相比,NGF组和NGF+抗VEGF组血糖值无明显变化(P>0.05);与模型组比较,NGF组和NGF+抗VEGF组视网膜组织中MDA水平显著减少(P<0.05),CAT和SOD水平明显升高(P<0.05);免疫组化结果表明,与模型组相比,VEGF在NGF组和NGF+抗VEGF...     

VEGF和色素上皮衍生因子的表达失衡对糖尿病肾病的影响

建立链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型,用免疫组化法观察肾小管间质血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)的表达变化;体外培养大鼠肾成纤维细胞(NRK),用RT-PCR检测高糖对VEGF和PEDF mRNA表达的影响.结果 显示糖尿病大鼠肾脏组织VEGF表达增加,而PEDF表达下降.在NRK细胞,高糖呈时间、剂量依赖性地增加VEGF和抑制PEDF的mRNA表达.提示VEGF和PEDF的表达失衡可能在糖尿病肾病的发生发展中起一定作用.     

辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏保护作用及对尿VEGF排泄的影响

目的观察辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏保护作用及对尿中血管内皮生长因子（VEGF）排泄的影响。方法Wistar大鼠24只,分为正常对照（NC）组、糖尿病（DM）组、辛伐他汀组（Sim）组。于成模后第2、4、8周时,检测各组的血糖、12小时尿视黄醇结合蛋白（RBP）、白蛋白（Alb）、VEGF排泄率,第8周时用透视电镜检查肾小球基底膜、系膜区的病理改变。结果（1）第2、4、8周时,DM组和Sim组尿Alb、RBP、VEGF排泄率均高于NC组（P〈0.01）,Sim组较DM组明显减少（P〈0.01）;尿VEGF排泄率与尿Alb、RBP排泄率及肾脏肥大指数存在正相关关系。（2）光镜和电镜下Sim组肾小球和肾小管-肾间质病变较DM组明显减轻,同NC组相比仅有少量病变。结论辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用,可能与其抑制肾脏VEGF过度表达有关。     

白藜芦醇对糖尿病大鼠肾脏叉头转录因子O1表达的影响

以链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型,白藜芦醇治疗12周后,与糖尿病未治疗组比较,治疗组大鼠尿白蛋白、血肌酐和尿素氮明显降低(均P＜0.05),肾脏病理学变化明显改善,肾脏叉头转录因子O1( FoxO1)、过氧化氢酶mRNA表达均明显升高(P＜0.05),FoxO1蛋白磷酸化水平明显降低(P＜0.05),提示白藜芦醇可能通过调节FoxO1的表达而对糖尿病肾脏起保护作用.     

犬间质来源细胞因子-1的基因克隆和体内分布及在急性心肌梗死中的表达变化

目的克隆犬间质来源细胞因子-1（Stromal derived factor-1，SDF-1）全长cDNA，并研究其在犬体内不同组织的表达分布情况及其在急性心肌梗死后的动态变化规律。方法用RT-PCR的方法克隆出犬SDF-1全长cDNA，经过双向序列测定加以确认。通过结扎冠状动脉左前降支制备犬急性心肌梗死模型。实验动物分为2组：心肌梗死组犬（MI组）和假手术组犬（S组），MI组再按观察时点随机分为2h，7d和4周，采用Real-timeRT-PCR检测SDF-1的mRNA表达情况，用HE染色观察心肌形态变化。结果（1）成功克隆犬SDF-1全长cDNA；（2）SDF-1在正常犬的心肌、脑、脾脏、肝脏、血管、肾脏、骨骼肌、睾丸和肺中均有构成性表达；（3）AMI后，心梗区的SDF．1mRNA的表达于2h开始下降，7d继续下降，4周开始回升，接近正常对照（假手术组）的水平，周围正常心肌于2h开始下降，7d开始回升，4周继续上升。心梗2h，SDF-1mRNA表达水平，心梗区高于周围正常区（P〈0．01），7d和4周时则低于周围正常区（P〈0．05）。结论SDF．1在正常的生理功能调节中具有重要的意义，它还可能与干细胞向缺血心肌的动员和归巢相关。     

Heme oxygenase-1 promotes neovascularization in ischemic heart by coinduction of VEGF and SDF-1

Heme oxygenase-1 (HO-1) is a stress-inducible enzyme with multiple protective functions in cardiovascular systems. Studies have shown that the timely cardiac HO-1 overexpression at acute phase of ischemic infarction (MI) provides protection via its anti-apoptotic and anti-inflammatory effects. Here we demonstrate that a delayed HO-1 transduction mediated by a recombinant adeno-associated virus in ischemic hearts of mice with permanent coronary artery ligation significantly attenuated left ventricular fibrosis and cardiac dysfunctions examined at 4 weeks post MI. HO-1-mediated protection was correlated with enhanced vascularization in the ischemic myocardium. HO-1 gene transfer resulted in a notable increase in the number of c-kit⁺- stem cells recruited to the infarcted area at 10 days after ligation. HO-1-mediated stem cell recruitment was also demonstrated in the heart of non-ischemic mice receiving intravenous infusion of green fluorescent protein-bearing bone marrow stem cells. Additional experiments revealed that vascular endothelial growth factor (VEGF) and stromal cell-derived factor-1 (SDF-1) were highly induced in HO-1 transduced myocardium. Mononuclear cell infiltration was evident and colocalized with angiogenic factors in the same region. Flow cytometry analysis of the mononuclear cells isolated from HO-1-transduced left ventricles revealed that over 50% of cells expressed CD34, a marker of hematopoietic stem cells and endothelial progenitor cells. VEGF and SDF-1 blockade by neutralizing antibodies significantly attenuated HO-1-mediated neovascularization and protection in infarcted mice. These data suggest that cardiac HO-1 gene transfer post MI provides protection at least in part by promoting neovascularization through inducing angiogenic factors and the recruitment of circulating progenitor/stem cells.     

硫化氢对糖尿病大鼠心肌纤维化及CX40和CX45表达的影响

目的探讨气体信号分子硫化氢(H2S)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠心肌纤维化及缝隙连接蛋白C×40和C×45的影响。方法 SD大鼠随机分为对照组、糖尿病大鼠组(STZ组)、硫化氢干预糖尿病大鼠组(STZ+H2S组)及硫化氢干预正常大鼠组(H2S组)。腹腔注射STZ(40 mg/kg)建立糖尿病模型;糖尿病模型建立后,STZ组与H2S组每天腹腔注射浓度为100μmol/kg硫氢化钠溶液(H2S供体);8 w后处死大鼠。碱水解法检测羟脯氨酸表达水平;Western印迹检测CX40和CX45蛋白的表达。结果与对照组相比,STZ组大鼠心肌组织羟脯氨酸表达明显增加(P0.01),CX40表达明显下降(P0.001),而CX45表达明显增多(P0.01)。与STZ组相比,硫化氢干预后的STZ+H2S组大鼠心肌组织羟脯氨酸明显下降(P0.01),CX40表达明显升高(P0.01),CX45表达有下调趋势,但结果未显示出统计学意义。结论 H2S可改善糖尿病大鼠心肌纤维化,同时上调CX40蛋白的表达,可能参与糖尿病大鼠的心肌纤维化和缝隙连接重构的调控。     

2型糖尿病大鼠肝脏肝细胞核因子(HNF)-4α、HNF-1α基因表达研究

以RTPCR方法检测胰岛素抵抗(IR)大鼠及2型糖尿病(DM)大鼠肝脏肝细胞核因子(HNF)4α及HNF1αmRNA表达水平。结果显示肝脏HNF4α及HNF1αmRNA表达量在IR大鼠显著低于正常对照大鼠,在DM大鼠则进一步降低。两基因表达改变可能与IR及2型DM有关。     

MCP-1和VEGF在卵巢癌中的表达及临床意义

目的探讨卵巢癌(OCa)及正常卵巢组织单核细胞趋化蛋白(MCP)-1和血管内皮生长因子(VEGF)表达及临床意义。方法采用免疫组化法检测OCa组织及OCa盆腔腹膜转移灶、上皮性良性肿瘤及卵巢良性疾病组织MCP-1、VEGF表达,分析其与OCa生物学特征间关系。结果 MCP-1在OCa及转移灶阳性率明显高于正常卵巢组织及卵巢良性肿瘤(P0.05);VEGF在OCa中阳性率明显高于正常卵巢组织及卵巢良性肿瘤(P0.05)。结论 MCP-1及VEGF在OCa中表达明显上调,与OCa血管生成及浸润、转移有关,可能在OCa发生发展中起重要作用。     

二黄糖肾康对糖尿病肾病模型大鼠肾脏细胞凋亡及Bax和Bcl-2表达的影响

目的观察二黄糖肾康对糖尿病肾病(DN)模型大鼠肾脏功能、细胞凋亡及Bax和Bcl-2表达的影响。方法SD大鼠单侧肾切除加腹腔注射链脲佐菌素复制DN模型,每日灌胃二黄糖肾康,8w后检测肾功能,流式细胞术检测肾脏细胞周期、凋亡数目及Bax和Bcl-2蛋白表达。结果二黄糖肾康明显改善DN大鼠肾功能,减少肾脏皮质细胞凋亡数目,影响肾脏细胞周期,降低Bax的表达,Bcl-2的表达增加。结论二黄糖肾康能通过降低肾脏凋亡数目,调节Bax和Bcl-2在肾脏细胞凋亡中的表达而保护肾功能。     

糖尿病大鼠肝脏损伤与胆固醇调节元件结合蛋白-1c及蛋白激酶表达的相关性

目的 动态研究2型糖尿病大鼠肝脏脂质代谢紊乱所致的损伤和细胞凋亡及其与固醇调节组件结合蛋白-1c(SREBP-1c)及C Jun氨基端激酶(JNK)表达的关系. 方法 试验大鼠分为4组:(1)糖尿病组,64只,用高糖高脂饲料喂养,予链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg个次性腹腔注射复制糖尿病模型;(2)正常对照组,37只,饲以普通饲料,腹腔注射柠檬酸盐缓冲液;(3)STZ组,42只,饲以普通饲料,腹腔注射STZ;(4)高糖高脂组,37只,饲以高糖高脂饲料,腹腔注射柠檬酸盐缓冲液.在不同阶段抽样检查动物体质量、肝质量、空腹血糖、空腹胰岛素(FINS)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST);观察肝脏病理组织学变化及超微结构变化;用实时荧光定量PCR技术检测SREBP-1c、JNK蛋白及mRNA的表达;用流式细胞术检测肝脏细胞凋亡.比较不同组间的差异. 结果(1)糖尿病组大鼠体质量比正常对照组、STZ组、高糖高脂组明显下降(P＜0.05),肝质量则明显上升(P＜0.05);糖尿病组大鼠空腹血糖、FINS、TG、TC、ALT、AST亦明显升高(P＜0.05).光镜下见肝细胞脂肪变性、炎性细胞浸润,网状纤维增多;电镜显示细胞器结构紊乱,随着病程延长病变逐渐加重,肝细胞凋亡增高;SREBP-1c、JNK蛋白及mRNA的表达增高.(2)高糖高脂组亦呈类似的肝脏病变及SREBP-1c、JNK蛋白及mRNA的表达增高的改变,但程度较轻. 结论 胰岛素抵抗和高血糖可导致糖尿病肝脏病变;2型糖尿病、SREBP-1c、JNK表达升高参与了肝脏脂质代谢紊乱与细胞凋亡.