从IL—2水平探讨黄芪及黄芪多糖的免疫调节作用

本文报道了黄芪及其多糖对正常小鼠和大黄脾虚模型小鼠体内、体外白细胞介素2(IL—2)产生的影响。大黄脾虚模型小鼠IL—2活性比正常小鼠明显降低;25～200%黄芪水煎剂以及50～200mg/ml黄芪多糖均能使大黄脾虚模型小鼠低下的IL—2活性提高;但对正常小鼠则无影响。提示IL—2产生增加可能是黄芪“扶正”的重要机制之一,也是其调节免疫功能的分子免疫学基础之一;IL—2活性有可能是“脾气”的内涵之一。     

猪苓多糖和氢化考的松对小鼠腹腔巨噬细胞的作用——细胞化学研究

小鼠注射猪苓多糖和氢化考的松7天后,取其腹腔巨噬细胞,进行细胞化学的定性及定位;并用 MPV-2型显微分光光度计进行定量研究。发现应用氢化考的松后,细胞内的 AcPase、ATPase 和 ANAE 活性下降,多糖含量减少。注射猪苓多糖以后,ATPase、AcPase 和 ANAE 活性增强,多糖含量显著增多。猪苓多糖和氢化考的松同时注射,酶活性及多糖含量与对照组无明显区别。     

猪苓多糖对小鼠NK,LAK活性的影响

猪苓多糖2mg/只,rIL—2 5×1~4U/只,腹腔注射C57BL/6小鼠,连续9天,能明显抑制小鼠皮下移植性B16恶性黑色素瘤的生长,与对照组及单用rIL—2组比较有显著性差异(P<0.05～0.01)。~3H—TdR掺入法检测小鼠脾细胞NK及内源性LAK活性,发现只有猪苓多糖 rIL—2组的NK及内源性LAK活性提高显著(P<0.05),其它单用猪苓多糖与rIL—2两组的NK及内源性LAK活性增加不显著(P>0.05)。说明猪苓多糖与rIL—2有协同作用,猪苓多糖可作为生物反应调节剂(BRM),用于LAK/rIL—2为主的肿瘤生物学疗法。     

黄芪多糖佐剂对脾脏NK细胞及NKT细胞的作用

目的观察脾脏NK细胞及NKT细胞在黄芪多糖（APS）发挥免疫佐剂功能的作用。方法使用鸡卵白蛋白（OVA）与APS经皮下免疫C57BL/6小鼠3次。末次免疫7～14d,取血清,使用ELISA观察OVA特异性抗体的含量;分离脾脏淋巴细胞,使用流式细胞仪检测NK和NKT细胞的百分比含量;使用PMA和Ionimycin刺激淋巴细胞,使用细胞内细胞因子染色的方法检测IFN-γ和IL-4的分泌情况。结果 APS组小鼠OVA特异性抗体含量明显高于OVA组小鼠（P〈0.05）,但小鼠脾脏内NK和NKT细胞的百分比含量与OVA组和正常小鼠差别不大（P〉0.05）。经PI刺激以后,APS组小鼠脾脏内NK细胞中IL-4＋细胞明显高于OVA组和正常组（P〈0.05）,且IFN-γ＋细胞的比例明显下降（P〈0.05）;虽然经过PI刺激以后,APS组小鼠脾脏内NKT细胞中IL-4＋细胞升高不明显,但是IFN-γ＋细胞的比例明显下降（P〈0.05）。结论 APS可以通过调节NK和NKT细胞的功能来促进体液免疫应答。     

白细胞介素2与调节性T细胞介导的免疫耐受

调节性T细胞(Tregs)可以诱导机体对自身抗原和过敏原产生免疫耐受,从而维持机体免疫稳态.白细胞介素(IL)-2是一种具有双向免疫调节作用的糖蛋白,其不仅可以增强免疫反应,更重要的是可以维持Tregs的稳定及其介导的免疫耐受.研究IL-2与Tregs功能活性及其介导的免疫耐受的关系对更好地了解免疫相关性疾病的发病机制和指导临床正确使用IL-2或IL-2拮抗剂具有重要意义.     

黄芪多糖对IL－2／LAK抗肿瘤增强作用的动物实验研究

采用Ｃ５７ＢＬ／６鼠荷其自发产生的黑色素瘤Ｂ＿１６细胞，以生存期为指标，建立了黄茂多糖（ＡＰＳ）增强ＩＬ－２／ＬＡＫ抗肿瘤作用的动物模型，结果表明：ＡＰＳ自身具有一定的抗肿瘤作用，ＡＰＳ（５ｍｇ／ｋｇ）与ＩＬ－２／ＬＡＫ（５×１０￣３Ｕ／ｋｇ、５×１０￣７／ｋｇ）的抗肿瘤作用相似，荷瘤鼠生存期分别为２１．５７±１．８１天和２０．８６±１．８６天（荷瘤对照鼠为１５．７１±０．４９天）；ＡＰＳ对ＩＬ－２／ＬＡＫ的抗肿瘤效应有明显的增强作用，二者在上述剂量下联合应用，荷瘤鼠生存期为２４．８６±２．７３天（Ｐ＜０．０１）。并对荷瘤鼠进行动态细胞免疫功能观察，提示：ＡＰＳ和ＩＬ－２／ＬＡＭ均具有抵抗鼠脾ＮＫ细胞活性，ＩＬ－２产生能力和腹腔Ｍψ吞噬能力下降的作用，ＡＰＳ对ＩＬ－２／ＬＡＫ仍有显著增强效应。     

白细胞介素对NK细胞的调控作用及其分子机制

自然杀伤(natural killer,NK)细胞是一种大颗粒淋巴细胞,能够介导非特异性免疫应答,在机体抗肿瘤、抗感染等过程中发挥重要作用。白细胞介素通过影响NK细胞的分化、成熟、增殖和细胞毒作用参与对其免疫功能的调控。本文综述了白细胞介素对NK细胞功能的调控作用及其可能的分子机制。     

黄精多糖干预骨质疏松性骨折大鼠白细胞介素1和白细胞介素6的表达

背景：骨质疏松性骨折主要是由于雌激素减少引发的高转换型骨质疏松并发症,给予雌激素能够得到有效地纠正。 目的：观察黄精多糖对骨质疏松性骨折大鼠细的胞因子的影响。 方法：6月龄雌性SD大鼠行卵巢切除建立骨质疏松症大鼠模型90 d后,锯断胫骨建立骨质疏松性骨折模型。骨折1周后,分别以400,200,100 mg/kg黄精多糖灌胃和0.066 mg/kg雌二醇肌肉注射给药治疗。 结果与结论：相比于一般性骨折大鼠,骨质疏松性骨折大鼠血清白细胞介素1,6的表达升高;400 mg/kg黄精多糖或雌激素干预治疗后,大鼠血清的白细胞介素1,6的表达明显降低(P < 0.05),但200和100 mg/kg黄精多糖对大鼠血清的白细胞介素1,6的表达没有影响(P > 0.05),提示黄精多糖干预治疗骨质疏松性骨折需要较高浓度     

白细胞介素—2放射免疫测定和质量控制

本文阐述了血清，尿液及激活淋巴细胞悬浮培养液中白细胞介素－２水平测定的放射免疫分析方法，该方法特异性强，与其它免疫因子和类似物的交叉反应率均〈０．０１％，测定的灵敏度达１ｎｇ／ｍｌ。关于ＲＩＡ的质量控制，保持标准品ＩＬ－２的免疫活性是关键，当然＾１２５Ｉ－ＩＬ－２的比活度和抗血清的质量也是很重要的。     

卡介菌多糖核酸对T细胞集落形成及IL－2受体表达的调节作用

本文用体外实验方法，研究ＢＣＧ－ＰＳＮ对ＴＬ－ＣＦｕ形成及ＩＬ－２Ｒ表达的调节作用。结果表明，当ＢＣＧ－ＰＳＮ浓度为８０μｇ／ｍｌ时，ＴＬ－ＣＦＵ形成及ＩＬ－２Ｒ表达均达到峰值，对ＩＬ－２Ｒ表达的调节于７２ｈ达最高水平，并且．ＴＬ－ＣＦＵ形成和ＩＬ－２Ｒ表达均显著高于对照组。提示ＢＣＧ－ＰＳＮ能增进Ｔ淋巴细胞功能。     

胸腺因子D对LAK细胞活性诱导的影响

本文报道利用ＭＴＴ法和４小时５１Ｃｒ释放法，在有或无ＩＬ－２存在的情况下，研究了ＴＦＤ对正常人ＰＢＭＣ体外增殖、ＬＡＫ活性诱导的影响。结果表明：单纯ＴＦＤ不能促进静止的淋巴细胞增殖，也不能诱导出高活性的ＬＡＫ细胞，但可促使经ＩＬ－２活化的淋巴细胞进一步增殖如先用ＩＬ－２活化淋巴细胞２４小时，再加入ＴＦＤ联合诱导，第４天时，ＬＡＫ活性可达８１．３±６．５％，明显高于单用ＩＬ－２组（Ｐ＜０．０１）。     

观察佛波脂和二甲基亚砜联合诱导人肺腺癌GLC分化过程中的形态和超微结构

目的 探讨佛波脂(TPA)和二甲基亚砜(DMSO)联合诱导分化剂对人肺腺癌GLC细胞形态的影响。方法 采用细胞计数，光镜、扫描电镜与透射电镜观察，经过TPA和DMSO联合诱导的人肺腺癌GLC细胞增殖以及形态和超微结构的变化。结果 经过联合诱导分化剂作用后，细胞增殖受到抑制，细胞体积增大，呈现扁平铺展状态，细胞核质比例变小，核仁数量减少。细胞表面微绒毛减少，细胞边缘丝状伪足减少，片状伪足增多，核形态较规则，核内异染色质减少，常染色质增多，细胞质中的细胞器数量增多，结构趋于正常。结论 TPA和DMSO联合诱导能够一定程度改变GLC细胞恶性形态结构特征并对GLC细胞具有一定的诱导分化作用。     

CO-OPERATION OF IL-1 AND IL-2 ON T-CELL ACTIVATION IN MONONUCLEAR CELL CULTURES

In search of an optimized anti-cancer immunotherapy, the combination of IL-2 and IL-1 has been tried. In an in-vitro LAK model, this cytokine cocktail seemed to be quite promising. In our in-vitro model of IL-2 induced T-cell activation we have therefore investigated the co-operation of these two potent immunostimulators. Mononuclear cells were stimulated with CD3 activating antibody in the presence of different cytokines and blocking or neutralizing antibodies. Cytokine concentrations were detected in the supernatants with ELISA. Intracellular IFN-γ and IL-4 in the different T-cell subsets was measured by flow cytometry. IL-1 and IL-1 receptor antagonist (IL-1Ra) were up-regulated by IL-2, this was achieved independently of IL-12 or CD40/CD40L interaction. As a negative feedback mechanism, IL-1β induced its natural antagonist, IL-1Ra. Both endogenous and exogenous IL-10 suppressed IL-1β and induced IL-1Ra, thus markedly decreased the amount of functional IL-1. The combination of IL-2 and IL-1β lead to a mildly increased Interferon-gamma (IFN-γ) secretion (+20%, p < 0.05), however, this appeared to be the result of an increased IFN-γ production per secreting cell, rather than of an increased recruitment of non-secreting cells. Similarly, IL-6 was also induced in an additive fashion (+30%, p < 0.05). For both cytokines, this effect could be significantly augmented by neutralizing IL-1Ra. Concentrations of IL-2 induced IL-10 and soluble Fas ligand (sFasL) were not affected by IL-1β. We were thus able to demonstrate that IL-1 relays its activity through different pathways than IL-2. Furthermore, we could show that the potentially synergistic action of IL-2 and IL-1 was hindered by the simultaneous induction of signficant amounts of IL-1Ra. From the latter findings we conclude that the combination of IL-2 and IL-1 for cytokine-induced anti-tumor activity may not, but a combination of IL-2 and anti-IL-1Ra might prove beneficial.     

硒对LAK细胞活性的影响及其机理研究

研究了硒在体外对LAK细胞活性的影响及作用机理,结果证明在LAK细胞的诱导阶段加入10~5～10mol/L亚硒酸纳能增强LAK细胞的杀伤和增殖活性。采用流式细胞仪测Tac(IL—2Rα)表达,Slot-Blot检测硒对LAK细胞的IL—2RαmRNA水平的影响,结果表明硒能增强LAK细胞的Tac抗原表达和IL-2RαmRNA的水平,提示硒可能通过促进Tac的表达增强了LAK细胞对IL—2的敏感性,从而提高了LAK细胞的增殖及杀伤活性。因此硒可望作为一种新型的免疫调节剂用于抗肿瘤治疗。     

枸杞子提取物对人淋巴细胞表面IL-2R表达的影响

研究了枸杞子提取物(LBr)对白细胞介素2受体(IL—2R)表达的影响。用FACS法和APAAP法研究了LBr作用3天对PHA活化扁桃体单个核细胞(TMNC)表面IL—2Rα、IL—2Rβ表达的影响,发现合适浓度的LBr(1.9ng/ml～7.8μg/ml)可促进IL—2R的表达。对α链表达的促进作用于第1天即出现,第3天达高峰,第5天始明显下降以至消失。     

锂增强小鼠LAK细胞活性及其体内抗瘤作用的研究

本文观察了锂体外对小鼠ＬＡＫ细胞的作用及其体内抗瘤作用，以期找到一种能增强ＬＡＫ细胞活性，降低ＩＬ－２毒副作用的免疫调变剂。在ＩＬ－２诱导ＬＡＫ的同时加入ＬｉＣｌ，则能增强ＬＡＫ细胞的活性。以Ｃ５７ＢＬ／６小鼠接种Ｂ１６黑色素瘤细胞为荷瘤小鼠模型，比较了ＩＬ－２／ＬＡＫ，单独锂及ＩＬ－２／ＬＡＫ合并锂三组的抗瘤作用，结果表明，单独锂及ＩＬ－２／ＬＡＫ组与对照组相比均有抗瘤作用，但ＩＬ－２／ＬＡＫ和锂一起作用，其抗瘤作用最强，表现为能抑制肿瘤的生长及延长荷瘤小鼠的存活时间。因此，锂可望作为一种新型的免疫调节剂用于免疫性疾病及肿瘤的治疗。     

激光对细胞内反应氧、钙离子浓度及细胞膜完整性的影响

目的 探讨在激光扫描共焦显微镜(LSCM)观测活细胞的过程中,激光对细胞内反应氧(ROS)、细胞内钙离子浓度([Ca2 ]i)和细胞膜完整性的影响.方法 用H2DCFDA、Fluo-4AM和Calcein-AM/PI分别检测488nm激光对脐静脉内皮细胞株(ECV-304)细胞内ROS、[ca2 ]i和细胞膜完整性的影响,Ultra view LCI(live cell image)共聚焦成像系统采集并分析结果.结果 激光照射后细胞内 DCF 的荧光强度迅速上升,约80s达到峰值,随后下降并逐渐回到基础水平;Fluo-4的荧光强度在70min内持续平缓地上升;Calcein 的荧光强度明显下降,少量细胞PI阳性染色.结论 488nm激光照射可引起细胞内ROS和[Ca2 ],的增加,但对细胞膜的完整性没有显著影响.