功能矫形前伸下颌对青春期大鼠咬肌NT-3表达影响的实验研究

目的：探讨功能矫形前伸下颌对青春期大鼠咬肌神经营养因子-3（neurotrophin-3，NT-3）表达的影响。方法：将40只4周龄雄性sD大鼠随机分为实验3d组、7d组、14d组、21d组和正常同步对照组，实验组大鼠佩戴功能矫治器，采用免疫组织化学染色法及RT-PCR检测大鼠咬肌NT-3及其mRNA的表达。结果：与对照组相比，实验3d、7d组咬肌纤维NT-3免疫阳性染色与mRNA表达均无明显变化；实验14d、21d组NT-3免疫阳性染色明显强于对照组，NT-3基因表达亦明显高于对照组。结论：功能矫形下颌前伸可致大鼠咬肌NT-3的表达发生改变，并且随着下颌前伸时间的延长，NT-3的表达量逐渐增加，NT-3表达改变提示咬肌在下颌前伸过程中发生了适应性的改建活动。     

功能矫治器前伸大鼠下颌后咬肌中BDNF表达变化的研究

目的:观察功能矫治器前伸青春期大鼠下颌对咬肌中脑源性神经营养因子(brain-derived neurotropic factor,BDNF)表达的影响.方法:将40只4周龄雄性SD大鼠随机分为实验3d组、7d组、14 d组、21 d组和同步正常对照组,共8组(n=5).实验组大鼠佩戴功能矫治器,建立下颌前伸动物模型;建模不同时间用免疫组织化学染色和RT-PCR检测各组大鼠咬肌中BDNF蛋白及其mRNA的表达水平.结果:与对照组相比,实验3d组、7d组BDNF蛋白和mRNA的表达均无显著性差异(P＞0.05);而实验14 d组、21 d组BDNF蛋白及mRNA表达水平均明显高于对照组(P＜0.05).结论:功能矫治器前伸下颌可使大鼠咬肌BDNF的表达水平随前伸时间的延长而逐渐增加,提示咬肌在下颌前伸中发生了适应性的改建活动.     

功能矫形前伸下颌对青春期大鼠咬肌NT-3表达影响的实验研究

目的:探讨功能矫形前伸下领对青春期大鼠咬肌神经营养因子-3(neurotmphin-3,NT-3)表达的影响.方法:将40只4周龄雄性SD大鼠随机分为实验3d组、7d组、14 d组、21 d组和正常同步对照组,实验组大鼠佩戴功能矫治器,采用免疫组织化学染色法及RT-PCR检测大鼠咬肌NT-3及其mRNA的表达.结果:与...     

下颌前伸对大鼠髁突软骨VEGF表达影响的研究

目的：探讨引导大鼠下颌前伸后,髁突软骨中血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达水平的变化。方法：50只35d龄雌性SD大鼠随机分为5组,每组随机分为实验组（5只）和对照组（5只）;实验组大鼠24h佩戴自制功能性矫治器引导下颌前伸;实验后3d、7d、14d、21d和30d分别处死各组大鼠;免疫组化方法检测髁突软骨中VEGF的表达。结果：对照组髁突软骨VEGF表达随时间延长而减弱,后部区域VEGF表达强于前部和中部：实验后第14d,21d和30d实验组VEGF表达强于相应对照组（P〈0．05）,其中14d时软骨后部VEGF表达较对照组增强幅度最大。结论：下颌前伸后大鼠髁突软骨细胞VEGF表达增强,说明其参与了软骨内骨化过程。     

功能性矫治器引导大鼠下颌前伸后二腹肌中金属蛋白酶的表达研究

目的：研究功能性矫治器引导大鼠下颌前伸后二腹肌中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMPs）表达，探讨功能性矫治器作用过程中咀嚼肌适应性变化的生物学机制，为矫形性治疗提供新的理论依据。方法：采用实时荧光定量PCR和免疫组化染色法观察戴矫治器组和不戴矫治器组大鼠3、7、14、21d二腹肌前腹中MMP-2、MMP-9表达和表达差异。结果：①MMP-2mRNA、MMP-9mRNA表达在矫治前后存在差异：实验组3d、21d与对照组相比存在差异，实验组表达增加。实验组相比：21d比14d表达增加，21d比7d表达增加。对照组相比：21d比3d表达增加，14d比3d表达增加。②MMP-2、MMP-9蛋白表达差异：MMP-2蛋白表达水平在14d（p〈0．01）和21d（p〈0．05）组有差异，实验组表达增强。MMP-9蛋白表达水平在7d（p〈0.05）、14d（p〈0．05）和21d（p〈0．01）组均有差异，实验组表达增强。结论：功能性矫治器引导大鼠下颌前伸后咀嚼肌中MMP-2，MMP-9参与了咀嚼肌的适应性变化。     

成年大鼠下颌功能性前伸后嚼肌浅层的超微结构改变

目的：观察成年大鼠下颌功能性前伸后嚼肌浅层的超微结构变化。方法：成年雄性SD大鼠40只,随机分为4个实验组和4个对照组,每组5只。实验组大鼠配戴固定的前伸下颌矫治器,对照组不配戴矫治器。分别于下颌前伸7d、14d、28d和60d处死实验组和对照组大鼠。取大鼠左右侧的嚼肌浅层,制作电镜标本,透射电镜下观察成年大鼠嚼肌浅层的超微结构变化。结果：实验组大鼠嚼肌浅层部分细胞在大鼠下颌功能性前伸7d时萎缩,前伸60d时形态不规则。实验组大鼠下颌前伸7d,部分嚼肌浅层细胞内肌丝断裂;前伸14d和28d时,嚼肌浅层细胞内肌丝的排列方向紊乱;前伸60d时,嚼肌浅层细胞内局部可见肌丝方向紊乱。大鼠下颌功能性前伸7d和14d时,实验组大鼠嚼肌浅层细胞内肌浆网多见;前伸28d时线粒体多见、形态改变;前伸60d时,肌丝间的线粒体仍多见。结论：成年大鼠下颌功能性前伸后嚼肌浅层细胞的形态、肌丝的排列和结构、线粒体和肌浆网的功能发生了改变。     

功能性矫治器引导大鼠下颌前伸后二腹肌中金属蛋白酶的表达研究

目的:研究功能性矫治器引导大鼠下颌前伸后二腹肌中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)表达,探讨功能性矫治器作用过程中咀嚼肌适应性变化的生物学机制,为矫形性治疗提供新的理论依据.方法:采用实时荧光定量PCR和免疫组化染色法观察戴矫治器组和不戴矫治器组大鼠3、7、14、21 d二腹肌前腹中MMP-2、MMP-9表达和表达差异.结果:①MMP-2mRNA、MMP-9mRNA表达在矫治前后存在差异:实验组3 d、21 d与对照组相比存在差异,实验组表达增加.实验组相比:21 d比14 d表达增加,21 d比7 d表达增加.对照组相比:21 d比3 d表达增加,14 d比3 d表达增加.②MMP-2、MMP-9蛋白表达差异:MMP-2蛋白表达水平在14 d(p＜0.01)和21 d(p＜0.05)组有差异,实验组表达增强.MMP-9蛋白表达水平在7 d(p＜0.05)、14 d(p＜0.05)和21 d(p＜0.01)组均有差异,实验组表达增强.结论:功能性矫治器引导大鼠下颌前伸后咀嚼肌中MMP-2,MMP-9参与了咀嚼肌的适应性变化.     

前伸青春期大鼠下颌后翼外肌细胞膜乙酰胆碱受体特性变化的研究

目的　研究功能矫形前伸青春期大鼠下颌后,翼外肌细胞膜乙酰胆碱受体最大结合容量和亲和性的变化,探讨功能矫形的神经肌肉调控机理。方法　选用40只5周龄SD雄性大鼠,随机分为实验组和对照组各20 只。实验组大鼠戴自制上颌功能矫治器,引导下颌前伸,对照组不做任何处理,分别在实验第1、3、7、14天处死大鼠,采用放射受体分析法测定2组大鼠翼外肌肌细胞膜上乙酰胆碱受体的最大结合容量和亲和常数。结果　实验组大鼠翼外肌细胞膜上乙酰胆碱受体最大结合容量明显大于对照组,具有高度亲和力。结论　功能矫形可增加翼外肌细胞膜上乙酰胆碱受体与乙酰胆碱的结合量。     

青春期大鼠下颌功能性前伸后翼外肌的超微结构改变

目的观察青春期大鼠下颌功能性前伸后翼外肌的超微结构变化。方法青春期雄性Sprague-Dawley大鼠40只,随机分为4个实验组和4个对照组,每组5只。实验组配戴固定的前伸下颌矫治器。对照组不配戴矫治器。分别于下颌前伸3 d、7 d、14 d、28 d处死实验组和对照组大鼠。取大鼠左右侧翼外肌,制作电镜标本,透射电镜下观察翼外肌的超微结构变化。结果下颌前伸3天时,实验组大鼠翼外肌肌细胞内部分肌丝溶解;下颌前伸7 d和14 d时,肌丝方向紊乱,肌小节宽度不规则。下颌前伸3 d、7 d和14 d时,翼外肌肌细胞内肌丝间及肌膜下线粒体增多、形态改变。下颌前伸7 d和28 d时,翼外肌肌细胞内肌浆网多见。下颌前伸28 d时,翼外肌肌细胞内肌丝方向基本一致。结论青春期大鼠下颌功能性前伸后翼外肌的超微结构发生改建。     

功能矫治器引导大鼠下颌前伸咀嚼肌中MMPs表达

目的研究功能性矫治器引导大鼠下颌前伸后咀嚼肌中MMPs表达，探讨功能性颌骨矫形过程中咀嚼肌适应性变化的分子机制，为矫形治疗提供理论依据。方法采用RT—PCR，免疫组化染色法观察大鼠二腹肌前腹中MMP-2、MMP-9表达。结果①大鼠二腹肌前腹实验组和对照组中MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA均表达。②MMP-2蛋白表达水平在14d（P〈0．01）和21d（P〈0．05）组有差异；MMP-9蛋白表达水平在7d（P〈0．05）、14d（P〈0．05）和21d（P〈0．01）组均有差异，实验组均表达增强。结论①MMP-2、MMP-9参与了咀嚼肌正常的生长发育过程。②功能性矫治器引导大鼠下颌前伸后咀嚼肌中MMP-2、MMP-9参与了咀嚼肌的适应性变化。     

咬合垂直距离降低后大鼠咬肌的酶组织化学定量研究

目的：观察咬合垂直距离降低后大鼠咬肌酶组织化学特征的改变。方法：将40只雄性SD大鼠随机平均分为实验组与操作对照组,采用人为降低牙冠高度的方法降低实验组大鼠咬合垂直距离,实验开始3、10、30、60d时处死动物,取深层咬肌行辅酶Ⅰ-四氮唑还原酶（NADH-TR）染色,借助显微图像分析系统计算分析各型肌纤维的平均横截面积及百分构成比变化。结果：（1）大鼠深层咬肌由Ⅱa与Ⅱb两种肌纤维构成;（2）实验60天组大鼠Ⅱa型肌纤维平均截面积（mCAS-2a）明显小于实验3天组和同期操作对照组（P〈0.05）;（3）实验60天组Ⅱb型肌纤维平均截面积（mCAS-2b）明显大于实验3天组和同期操作对照组（P〈0.05）;（4）实验60天组Ⅱb型肌纤维所占百分构成比明显高于实验3天组与同期操作对照组（P〈0.05）。结论：咬合垂直距离降低后大鼠咬肌发生了形态结构的功能适应性改建。     

青春期大鼠前伸下颌后浅层嚼肌细胞膜乙酰胆碱受体研究

目的研究功能矫形前伸青春期大鼠下颌后，前伸下颌的浅层嚼肌细胞膜乙酰胆碱受体最大结合容量和亲和性的变化，探讨功能矫形的神经肌肉调控机制。方法选用40只5周龄SD雄性大鼠，随机分为实验组和对照组各20只。实验组大鼠戴自制上颌功能矫治器，引导下颌前伸，对照组不戴。采用放射受体分析法测定2组大鼠浅层嚼肌肌细胞膜上乙酰胆碱受体的最大结合容量和亲和性值。结果实验组大鼠浅层嚼肌细胞膜上乙酰胆碱受体最大结合容量明显增加，具有高度亲和力，大于对照组。结论功能矫形可增加浅层嚼肌细胞膜上乙酰胆碱受体与乙酰胆碱的结合量及亲和力，导致肌肉的结构与功能发生适应性改建。     

p-JAK2和p-STAT3在实验性牙移动牙周组织中的表达及意义

目的：观察实验性牙齿移动过程中,大鼠牙周组织中磷酸化Janus激酶（JAK2）与信号转导因子和转录活化因子（STAT3）的表达和分布。方法：选用24只7周龄雌性Wistar大鼠,每只大鼠上颌左右两侧分别为实验侧和对照侧,建立大鼠实验性牙移动的模型。将大鼠随机分成3组,分别在加力后3、7、14d处死动物。制备标本,用免疫组化染色法检测p-Jak2和p-Stat3在大鼠牙周组织中的表达,并采用计算机图像分析软件Image J对各组p-Jak2和p-Stat3在牙周组织中的表达强度进行定量分析。结果：p-Jak2和p-Stat3在正常牙周膜中均有表达,且在受力3、7、14d后,p-Jak2实验组受压力侧和受牵张力侧均较对照组表达升高;p-Stat3在受力3、7d后,实验组受压力侧和受牵张力侧较对照组表达升高,但受力14d后,实验组受压力侧和受牵张力侧与对照组的表达并无明显统计学差异。结论：正常牙周组织中存在p-Jak2和p-Stat3,且p-Jak2和p-Stat3参与了牙周组织改建的过程,这说明Jak2/Stat3信号转导通路参与了牙周组织改建中细胞内的信号传递。     

兔下颌角骨外板磨除术后咬肌不同处理方式与骨的适应性研究

目的:通过对兔下颌角骨外板磨除术后咬肌不同处理方式与骨的适应性相关指标的测定,比较咬肌不同处理方式与下颌骨变化的差异,为下颌角肥大手术方式的选择提供依据.方法:雌性家兔50只,3个月龄,分为2组,每组25只.左侧为手术侧,第1组行下颌角骨外板磨除术后将咬肌与翼内肌缝合,第2组行下颌角骨外板磨除术后咬肌不做缝合固定.每组在术后第1、2、4、8、12周时分别处死5只动物,手术侧咬肌称重,切取手术侧部分骨组织连同其上部分咬肌作病理切片,行HE染色,光镜下观察细胞形态,在200倍镜下用HJ-YG病理诊断分析系统测量肌小节长度和肌细胞面积,用游标卡尺测量下颌骨的厚度.采用SPSS 13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:术后第4、8、12周,第2组咬肌重量减轻,与第1组相比有显著性差异(P＜0.05).术后4、8、12周,第2组下颌骨厚度未增加,第1组下颌骨厚度增加,有显著性差异(P＜.05).术后1、2、4周,第2组肌小节长度较第1组短,有显著性差异(P＜0.05).术后8、12周,第2组肌细胞面积较第1组小,有显著性差异(P＜0.05).结论:兔下颌角骨外板磨除术后肌小节长度、咬肌细胞面积、骨细胞等发生了适应性改建,尤其是游离咬肌后咬肌失去张力,其附着点上移,致使其发生明显萎缩.下颌骨愈合后厚度不增加.     

模拟失重后再超重对猴咬肌细胞SERCA mRNA表达的影响

目的：探讨模拟失重后再超重环境对猴咬肌细胞SERCA1a、SERCA2a mRNA表达的影响。方法：健康雄性猕猴23只,随机分为正常对照组（A组）和实验组：模拟失重（B组）,模拟超重（C组）,失重后再超重分别为＋11Gx/270s（D1组）、＋13Gx/230s（D2组）、＋15Gx/200s（D3组）和＋13Gx/230s恢复第10d（D4组）。实验期间,各组喂养条件相同,在实验结束后动物恢复第2d（A、B、C、D1、D2、D3组）和恢复第10d（D4组）处死取材,组织置于液氮中保存。采用常规方法制作冰冻切片,通过HE染色观察猴咬肌细胞组织形态学变化;使用RT-PCR方法检测猴咬肌细胞SERCA1a、SERCA2a mRNA的表达。结果：组织病理学观察可见,对照组猴咬肌细胞结构正常;实验组咬肌细胞胞膜边界模糊不清,间质增宽;模拟失重后再超重组肌细胞肿胀,偶见细胞核呈扁平状,移位胞浆中央。采用RT-PCR检测发现,各实验组与对照组相比,猴咬肌细胞SERCA1a mRNA表达均增强,SERCA2a mRNA除D4组外,其他实验组表达增强,其差异有统计学意义（P〈0.05）;D2、D3组与B组相比,SERCA1a mRNA表达升高,差异显著（P〈0.01）;D2、D3组与C组比较,SERCA1a mRNA表达增强,有显著差异（P〈0.01）;D4组与D2组比较,SERCA1a、SERCA2a mRNA表达均下降,有统计学意义（P〈0.05）。结论：模拟失重、模拟超重和模拟失重后再超重环境均可造成猴咬肌细胞组织形态学不同程度地改变,并可引起SERCA1a、SERCA2a mRNA表达增强,其中模拟失重后再超重恢复第10d咬肌细胞组织形态学趋于正常结构,SERCA1a、SERCA2a mRNA表达呈恢复下降趋势。     

Effects of denervation of the masseter nerve and bite raising on the masseter muscle of developing rats

The effects of masseteric denervation and bite raising on muscle fiber type differentiation were examined in the masseteric muscle of developing rats by histological and histochemical studies. Three-week-old Wistar rats had of their masseteric nerve at right side dissected, and a part of them were bite raised at anterior region one week after denervation for three weeks. The unoperated side and number of sham animals served as control. The animals were killed 3, 7, 10, 14, 21, 28, 35, 49 days later and then their masseter muscles were removed wholly and weighed them. After freezing of superficial and deep masseter muscles serial sections were made and HE staining carried out, ATPase staining and NADH-TR staining. On the photographs of the HE stained specimens, I measured the diameter of the muscle fibers. Gross findings on the denervated group, revealed the lower incisors shifted to unoperated side and on with the bite raising group, it shifted to the operated side. In denervated animals, the wet weight of the masseter muscle had decreased significantly. The masseteric muscle fibers in three-old-week control rats were undifferentiated on ATPase staining, but it became well differentiated on and after four-old-week. The superficial masseter of control mainly composed of type 2B fibers. In the deep masseter, about 10% type 1 and 2C fibers were found in limited area around the muscle spindles, and surrounded with type 2A and 2B fibers. In superficial masseter muscle of the denervated group, the percentage of type 2A fibers increased, and that of type 2B fibers decreased. The type 2C fibers were found from the 21st days after denervation. In deep masseter muscles, the percentage of type 1 and 2A fibers decreased, and that of type 2B and 2C fibers increased. In the denervated bite raising group, the composition of the muscle fiber type approached the control group. These results as above suggested, masseteric denervation causes degeneration of muscle fiber composition, and the possibility that early preventive treatment like bite raising may recover the muscle fiber composition normally.     

辛伐他汀对牙周炎大鼠牙移动保持阶段OPG表达影响的实验研究

目的：观察牙周炎大鼠正畸性牙齿移动保持阶段,全身给予辛伐他汀对牙周组织中OPG表达的影响。方法：选用雄性Wistar大鼠65只,随机分组。1）空白对照组：不做任何处置。2）阴性对照组和实验组：根据Fishcer等人的方法,在大鼠上颌第一磨牙牙颈部用3～0丝线龈缘水平进行结扎,28d后诱导形成大鼠牙周炎,牵引其上颌第一磨牙向近中移动。实验组在加力装置去除前1d开始,腹膜下注射辛伐他汀,阴性对照组注射生理盐水,1次/d,分别保持1、3、7、14、21、28d后处死,免疫组化染色配合定量分析方法观察上颌第一磨牙牙根的近远中侧OPG的表达变化。结果：移动牙近中牙周组织OPG的表达在加力结束后逐渐减少,第7天时阴性对照组低于空白对照组,14d后两组均有少量增加;远中侧阴性对照组OPG的表达在加力结束后1、3d变化不明显,而实验组OPG的表达逐渐增加,但在21d后变化不明显。相同时间段比较,实验组OPG表达量均高于阴性对照组。结论：辛伐他汀能够增加牙周炎大鼠正畸牙移动后牙周组织中OPG的表达量。     

中药丹参和骨碎补对大鼠正畸牙牙齿移动的比较研究

目的：研究中药丹参和骨碎补在大鼠正畸牙移动过程中对其牙周组织改建的作用。方法：选取72只SPF级Wistar雌性大鼠,随机分为丹参组、骨碎补组和对照组三组,每组24只,建立大鼠正畸牙齿移动实验模型,丹参组每日灌服6 g/kg丹参水煎剂,骨碎补组每日灌服6 g/kg骨碎补水煎剂,对照组每日灌服3 ml生理盐水,每隔7 d加力1次。三组动物于正畸加力7、14、21、28 d分批次处死,每次6只;剥离头颅骨,测量牙齿移动的距离及牙槽骨的密度,同时制作上颌第一磨牙区牙周组织切片,光学显微镜观察牙周组织改建情况,并进行统计学分析。结果：丹参组、骨碎补组牙齿移动距离均大于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,丹参组和骨碎补组之间差异无统计学意义（P〉0.05）;光镜下观察三组的破骨细胞数量均呈现先增加后变平缓趋势,丹参组和骨碎补组较对照组增加更为显著（P〈0.05）,丹参组和骨碎补组之间差异无统计学意义（P〉0.05）;三组的牙槽骨密度都呈现降低趋势,丹参组和骨碎补组较对照组降低缓慢（P〈0.05）,丹参组和骨碎补组之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：灌服丹参和骨碎补水煎液可促进大鼠牙周膜内破骨细胞生成并维持牙槽骨密度,有利于大鼠正畸牙齿移动。     

Effects of facial nerve denervation on masseter muscle of the rats

The effects of unilateral facial nerve denervation on the facial growth were studied by physiological and by histochemical examinations, using four- week- old Wistar rats. Two hundred twenty rats were divided into three groups: a control group, a group of subjects which resection of the left facial nerve, and a sham operation group. The rats were killed 1, 5, 10, 30, 60, 90, 120 days later. The superficial and deep masseter muscle fibers on both sides were classified into type I and type IIA or IIB on the basis of myosin ATPase activity and the diameter of these fibers was measured. The masseter muscles were stained with H&E and NADH-TR. Electromyogram recordings were analyzed during the rest position, stretch reflex, voluntary action and eating of solid foods in half of all groups. (1) The face of rats after denervation deviated to the right side, and the maxillo-facial skeleton was affected from the 30th day. (2) In the denervation groups the right side showed higher action potentials than the left side. (3) In the deep masseter muscles near muscle spindle in the denervated groups, the percentage of type I fibers on the right side increased on the 90th day, and that of type IIA fibers decreased on the 30th day. (4) The diameter of the deep masseter muscle fibers, of type I, IIA and IIB increased on the right side. These results prove that facial nerve denervation led to a functional disorder and a transformation of growing direction.