Fas在正常睾丸组织及精原细胞瘤中的表达

目的 :明确Fas在正常睾丸组织及精原细胞瘤中的表达情况。　方法 :采用免疫细胞化学、原位杂交、反转录PCR(RT PCR)法检测 8例正常睾丸组织及 34例精原细胞瘤组织中Fas蛋白及FasmRNA的表达。　结果 :免疫组织化学方法发现在正常睾丸组织中的 3类主要细胞 (Leydig细胞、Sertoli细胞及生殖细胞 )中均有Fas分子表达 ;免疫组织化学和原位杂交方法在精原细胞瘤中检测到Fas表达阳性率分别为 41.18%和 38.2 4% ,表达水平明显减低或丧失 ,多呈现小片状或点状表达 ;RT PCR方法证明正常人睾丸组织中有FasmRNA的表达。　结论 :Fas在精原细胞瘤中的表达明显减少或丧失可能是精原细胞瘤形成及进展的原因。     

睾丸肿瘤组织HLA—I抗原表达与预后的关系

为探讨睾丸肿瘤组织ＨＬＡ－Ｉ抗原表达与预后的关系，采用免疫组织化学方法（ＡＢＣ法）对５５例睾丸肿瘤组织的石蜡切片进行检测，以观察其ＨＬＡ－Ｉ抗原的表达情况。结果：正常睾丸组织、间质组织Ｌｅｙｄｉｇ细胞呈深棕黄染色，在曲细精管内Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞染色（＋＋）。５５例睾丸肿瘤组织中，精原细胞瘤Ｉ期的７２．０％，Ⅱ期的５４．６％染色；非精原细胞瘤仅Ⅰ期折７５．０％染色，ＨＬＡ－Ｉ抗原的表达随肿瘤临床分期     

Fas在正常睾丸组织及精原细胞瘤中的表达

采用免疫组化、原位杂交、反转录ＰＣＲ（ＲＴＰＣＲ）法检测正常睾丸及精原细胞瘤组织中Ｆａｓ蛋白及ＦａｓｍＲＮＡ的表达,以明确Ｆａｓ在正常睾丸组织及精原细胞瘤中的表达情况。材料与方法　精原细胞瘤石蜡标本为１９８７年至１９９７年本所病理室存档蜡块,均经病理确诊。正常睾丸组织蜡块共７例,病理切片证明均有正常睾丸发育。正常新鲜睾丸组织１例,来源于意外伤亡的健康青年,液氮冻存。免疫组化方法检测Ｆａｓ蛋白表达所用的一抗为亲和纯化的兔抗人Ｆａｓ多克隆抗体,Ｆａｓ（Ｃ２０）（购自美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ生物技术…     

睾丸肿瘤组织HLA－I抗原表达与预后的关系

为探讨睾丸肿瘤组织ＨＬＡ－Ｉ抗原表达与预后的关系，采用免疫组织化学方法（ＡＢＣ法）对５５例睾丸肿瘤组织的石蜡切片进行检测，以观察其ＨＬＡ－Ｉ抗原的表达情况。结果：正常睾丸组织、间质组织Ｌｅｙｄｉｇ细胞呈深棕黄染色（卅），在曲细精管内Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞染色（）。５５例睾丸肿瘤组织中，精原细胞瘤Ⅰ期的７２．０％，Ⅲ期的５４．６％染色；非精原细胞瘤仅Ⅰ期的７５．０％染色，ＨＬＡ－Ｉ抗原的表达随肿瘤临床分期增加而减弱或消失；ＨＬＡ－Ｉ抗原表达阳性的睾丸肿瘤的预后比表达阴性者好（Ｐ＜０．０５）。表明某些睾丸肿瘤ＨＬＡ－Ｉ抗原表达的减少与组织学类型、临床分期和肿瘤病理学特点有关。提示这些睾丸肿瘤能逃逸宿主的免疫监视，增加肿瘤的侵袭性；睾丸肿瘤组织中ＨＬＡ－Ｉ抗原表达可作为患者预后及监视治疗方案的有用指标。     

肿瘤-睾丸抗原SSX1基因mRNA在肝细胞肝癌中的表达

目的：检测肿瘤－睾丸抗原SSX1基因mRNA在肝细胞肝癌（HCC）中的表达情况。方法：用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）对47例HCC患者的癌组织和相应癌旁组织以及15例肝硬化和15例正常肝组织的SSX1基因mRNA表达情况进行检测，随机选择4例RT－PCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定。结果：47例HCC患者中，39例表达SSX1 mRNA，阳性率为83％，相应的癌旁组织中有3例为弱阳性，其中2例患者获得了离癌灶更远处的活检组织，对其进行RT－PCR检测，结果显示阴性；所测的15例肝化和15例正常肝组织均未检测到SSX1的表达。4例DNA测序结果表明RT－PCR产物确为SSX1 cDNA。SSX1的表达与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、血清甲胎蛋白（AFP）水平、乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）感染无显著相关性（P＞0．05）。结论：SSX1在HCC中呈高比例、高特异表达，可望成为HCC免疫治疗的理想靶位。     

端粒酶hTERT基因在男性不育症病人睾丸组织中的表达及其意义

目的 :研究端粒酶hTERT基因在男性不育症病人睾丸组织中的表达及其意义。　方法 :应用核酸原位杂交技术检测 4 7例男性不育症病人和 10例正常睾丸组织中端粒酶hTERT基因的表达和定位 ,并应用HPIAS 10 0 0高清晰度图像处理系统对hTERT阳性信号进行图像分析。　结果 :端粒酶hTERT基因阳性表达与生殖细胞 (精原细胞、精母细胞、精子细胞 )的分布定位一致 ,并且其表达强度与男性不育症病人睾丸组织中的生殖细胞的数量和密度显著相关 ,在唯Sertoli细胞综合征病人睾丸组织中无端粒酶hTERT基因的表达。　结论 :端粒酶活性的缺乏可能是生殖细胞发育停滞的原因之一     

E-cadherin、N-cadherin及β-catenin在精原细胞瘤中表达的变化

目的探讨上皮-钙黏素(E-cadherin)、神经-钙黏素(N-cadherin)及β-链蛋白(β-catenin)在精原细胞瘤中的表达及意义。方法采用S-P免疫组化法检测29例精原细胞瘤及10例正常睾丸E-cadherin、N-cadherin、β-catenin的表达水平,并进一步通过RT-PCR及蛋白免疫印迹技术(5例精原细胞瘤、5例正常睾丸)验证。结果免疫组化染色结果显示,正常睾丸细胞间连接处可见N-cadherin表达,而精原细胞瘤中未见N-cadherin表达;精原细胞瘤E-cadherin、β-catenin表达水平较正常睾丸显著下降,差异有显著性(P0.05);精原细胞瘤E-cadherin、β-catenin表达水平与肿瘤TNM分期相关性分析结果无显著性(P0.05,r1=0.2669,r2=-0.2280)。免疫印迹及PCR结果显示,精原细胞瘤E-cadherin、N-cadherin、β-catenin表达水平较正常睾丸显著下降,差异有显著性(P0.05)。结论精原细胞瘤中E-cadherin-β-catenin复合体及N-cadherin表达较正常睾丸显著下降,且与肿瘤TNM分期无显著相关,提示E-cadherin、β-catenin及N-cadherin的降低可能参与精原细胞瘤的癌变过程,但与肿瘤侵袭及转移过程无显著相关。     

nm23产物／NDPK表达与精原细胞瘤生物学行为

为了解ｎｍ２３在精原细胞瘤发生、进展过程中所起的作用，应用Ｓ－Ｐ免疫组织化学方法、兔抗ＮＤＰＫ多克隆抗体对精原细胞瘤及正常睾丸组织中ｎｍ２３产物／ＮＤＰＫ的表达进行了检测。结果：３８例肿瘤和５例正常睾丸生殖上皮组织中ｎｍ２３／ＮＤＰＫ均呈阳性表达。肿瘤组织中的表达强度明显高于正常生殖上皮组织，而与其组织病理类型无关，强表达缺失与肿瘤的转移行为有关。提示ｎｍ２３／ＮＤＰＫ在精原细胞瘤发生和转移抑制过程中可能起重要作用     

Survivin在睾丸生殖细胞瘤与无精子症患者睾丸组织中的表达

目的：探讨Survivin蛋白在睾丸生殖细胞瘤与无精子症患者睾丸组织中的表达情况及其临床意义。方法：采用免疫组织化学SABC法检测34例男性睾丸生殖细胞瘤和38例男性无精子症患者睾丸组织中Survivin蛋白的表达情况。结果：18例睾丸精原细胞瘤和16例非精原细胞瘤组织标本中Survivin蛋白的表达情况分别为88．9％和62．5％；在38例不同类型无精子症睾丸组织标本中，各组间Survivin蛋白的表达差异有统计学意义（P〈0．05），且表达情况与生精功能障碍严重程度呈负相关（r=-0．675，P〈0．05）。结论：在睾丸生殖细胞瘤和正常睾丸组织中可检测到Survivin蛋白的表达，Survivin蛋白可能是精子发生过程中的一个潜在标志物。     

TGF-β1和N-cadherin在精原细胞瘤中的表达及二者的关系

目的检测转化生长因子-β1(TGF-β1)及神经-钙粘素(N-cadherin)在精原细胞瘤中的表达并探讨二者关系。方法采用SP免疫组化法检测34例精原细胞瘤及15例正常睾丸中TGF-β1、N-cadherin的表达水平。构建N-cadherin质粒载体,转染NCCIT精原细胞瘤细胞系,经外源性人重组TGF-β1干预,荧光法检测N-cadherin的表达。结果免疫组织化学染色结果显示,正常睾丸间质细胞、生精上皮细胞、长形精子及支持细胞间紧密连接处均可见TGF-β1表达,N-cadherin则表达于支持细胞间紧密连接处。精原细胞瘤中未见N-cadherin表达,但TGF-β1表达水平较正常睾丸显著增高,且差异有显著性(P0.05);TGF-β1可降低精原细胞瘤细胞株中N-cadherin的表达水平。结论精原细胞瘤中TGF-β1高表达,N-cadherin低表达,且重组TGF-β1可降低精原细胞瘤细胞系N-cadherin表达,提示TGF-β1可能通过下调N-cadherin在精原细胞瘤癌变过程中起重要作用。     

内皮细胞表达孕酮受体的分子生物学证据

本研究检测孕酮受体在人内皮细胞上的基因表达。包括ＲＴ－ＰＣＲ检测分离的脐静脉内皮细胞以及用地高辛标记的ＲＮＡ探针进行原位杂交观察在周期子宫内膜及肌层中血管内皮细胞上的表达。结果显示脐静脉内皮细胞、子宫内膜及肌层血管内皮细胞均有孕酮受体ｍＲＮＡ的表达。     

FasmRNA在增生性瘢痕中的表达

目的：探讨FasmRNA在增生性瘢痕中的表达情况,方法：原位杂交法检测42例增生性瘢痕和42例正常皮肤组织中FasmRNA的表达,采用逆转录PCR检测42例增生性瘢痕中FasmRNA的表达。结果：原位杂交法检出42例增生性瘢痕和42例正常皮肤组织中FasmRNA表达率分别为23％和64％,差异有显著性（P＜0．01）;RT－PCR法检出42例增生性瘢痕中FasmRNA阳性表达25例,阳性率为59．5％,阳性表达组中无缺失突变,结论：FasmRNA在增生性瘢痕中表达明显减少,可能是瘢痕形成的重要原因之一。     

Angiogenesis and lymphangiogenesis in stage 1 germ cell tumours of the testis

OBJECTIVE: To determine whether angiogenesis can be used as an additional prognostic indicator in patients with stage 1 germ cell tumours of the testis. PATIENTS AND METHODS: Paraffin sections were assessed immunohistochemically from 51 patients with clinical stage 1 germ cell tumours of the testis (28 seminoma, 23 teratoma) treated by orchidectomy and surveillance only. Sections were analysed for microvascular density (MVD), and expression of the angiogenic factors vascular endothelial growth factor (VEGF) and thymidine phosphorylase (TP). In addition, in the seminoma cases the presence of mRNA for the lymphangiogenic factor VEGF-C was examined by in situ hybridization, and its corresponding receptor VEGFR-3 by immunohistochemistry. RESULTS: Teratoma specimens had a significantly higher mean (range) MVD (85, 26-163; P < 0.01) than both seminoma (37, 16-91) and four normal specimens (26, 18-30). Teratoma specimens also had significantly higher VEGF expression than both seminoma and normal specimens (P < 0.01). Despite these differences between groups, and indeed individual tumours, there was no significant correlation between MVD and VEGF, or between either MVD or VEGF and relapse-free survival. TP expression was significantly greater in tumours than in normal specimens (P < 0.02) but with very little inter-tumour variation. VEGF-C mRNA and VEGFR-3 protein were detected in a third to a half of cases, with expression mostly around endothelial vessels. CONCLUSIONS: The marked differences between normal testis and tumours implicate angiogenesis in the biology of germ cell tumours of the testis. In addition, the detection of factors involved in lymphangiogenesis in some seminomas, tumours which initially metastasize primarily to lymph nodes, indicate that although not prognostic in this study, further studies are warranted in both these areas in the search for further prognostic indicators and therapeutic targets.     

Fas配体mRNA在大肠癌组织的表达及其临床意义

目的研究Fas配体mRNA表达与大肠癌生物学行为及临床预后的关系.方法应用原位杂交方法检测Fas配体mRNA在52例大肠癌组织中的表达.结果大肠癌Fas配体mRNA表达阳性率为58%(30/52).存在癌周炎性反应的大肠癌组织中FasLmRNA阳性率为25%(3/12),而无癌周炎性反应的大肠癌阳性率为68%(27/40),两者差异有显著性意义(P＜0.05).Fas配体mRNA表达在DukesB期组38%(10/26),C期组为73%(16/22),D期组为100%(4/4),差异有显著性(P＜0.05).FasLmRNA阳性组术后5年累积生存率为50%(15/30),明显低于阴性组86%(19/22),两者差异有显著性意义(P＜0.05).结论Fas配体对大肠癌临床分期和预后起重要作用.     

促性腺激素释放激素拮抗剂对大鼠睾丸支持细胞雄激素受体和Fas配体基因表达的影响

本实验利用注射促性腺激素释放激素拮抗剂（ＧｎＲＨ Ａ）引起睾丸生精细胞程序化死亡的大鼠模型，用地高辛标记的大鼠雄激素受体和Ｆａｓ配体的ＲＮＡ探针对大鼠睾丸石蜡切片进行原位杂交，观察雄激素受体和Ｆａｓ配体基因在生精细胞凋亡中的变化。结果显示，ＧｎＲＨ Ａ处理后曲细精管有退行性变，原位杂交表明此时Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞的雄激素受体表达明显减低，而Ｆａｓ配体表达显著升高。提示Ｆａｓ配体的表达可能与生精上皮细胞程序化死亡关系密切。     

Expression of myc family oncogenes in primary human testicular cancer

In order to understand the role of myc family genes (c-myc, N-myc and L-myc) in the development and progression of human testicular cancer, we have analyzed the expression of myc family genes in three different types of primary human testicular cancer (seminoma, embryonal carcinoma and teratocarcinoma) and normal testis using Northern blot analysis. Expression of N-myc gene, which is usually limited in the neoplasms derived from neuroectoderm, was detected in seven out of ten cases of seminomas and two out of two cases of embryonal carcinomas. Gene amplification was not observed in these cases. Expression of N-myc gene was not detected in teratocarcinomas and normal testes. Expression of c-myc gene was observed in seminomas, embryonal carcinomas, teratocarcinomas and normal testes, but specific expression of c-myc gene was not seen in these cancers and normal testes. Expression of L-myc gene was not detected in all cases examined in our studies. Since N-myc gene expression was observed only in undifferentiated testicular neoplasm, such as seminoma and embryonal carcinoma, its expression may be positively related to the development and progression of special types of human testicular cancer.     

Fas mRNA在泌尿系肿瘤组织中的表达

目的 了解Ｆａｓ ｍＲＮＡ在泌尿系肿瘤组织中的表达情况。方法 采用逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测３７例泌尿系恶性肿瘤组织中Ｆａｓ ｍＲＮＡ的表达，其中肾癌２１例，膀胱癌１１例、肾盂癌４例，前列腺肉瘤１例；原位杂交法检测３４例肾癌和１９例癌旁正常肾组织中Ｆａｓ ｍＲＮＡ的表达。结果 ３７例肿瘤组织中检出Ｆａｓ ｍＲＮＡ阳性表达共２０例，阳性率为５４％，阳性表达组织中未发现有缺失突变的存在。其中肾     

Distribution of pituitary adenylate cyclase‐activating polypeptide (PACAP) in the human testis and in testicular germ cell tumors

Pituitary adenylate cyclase‐activating peptide (PACAP) is a neuropeptide expressed in the central nervous system and peripheral organs. Previous studies revealed the role and distribution of PACAP in the rodent testis, however, its presence in the human testis and in testicular germ cell tumors is not known. We used RT‐PCR and immunohistological observations to investigate whether human testicular tissue and testicular germ cell tumors contain PACAP. The mRNAs for PACAP and its receptors were detected in total RNA extracted from human testes. PACAP immunoreactivity was observed in spermatogonia and spermatids from normal testes. In contrast, diffuse PACAP immunopositivity was observed in seminoma tumor cells, while only faint immunoreactivity was observed in embryonal carcinoma cells. Our data suggest that PACAP may play a role in human spermatogenesis and in testicular germ cell tumor development.