罗格列酮对ADMA氧化应激损伤内皮生长晕细胞的影响

目的：观察过氧化物体增殖剂激活的受体γ（PPARγ）激动剂罗格列酮对非对称性二甲基精氨酸氧化应激损伤内皮生长晕细胞的影响。方法: 分离脐血中单个核细胞，采用贴壁培养法培养扩增内皮生长晕细胞（EOCs）。以10 μmol/L 非对称性二甲基精氨酸（ADMA）和不同浓度的罗格列酮（0、1、5、10 μmol/L）与第2代细胞孵育72 h，检测细胞的凋亡率、增殖能力、成血管能力，RT-PCR法检测内皮一氧化氮合酶（eNOS）mRNA的表达。结果: 采用贴壁法培养的细胞具有多种内皮细胞特性。ADMA能抑制细胞功能并增加细胞的凋亡率，1、5 μmol/L罗格列酮能够对抗这种损伤（P<0.01）并能够促进细胞的增殖（P<0.01）。但10 μmol/L罗格列酮的保护作用减弱或丧失，甚至可以抑制细胞的成血管能力(P<0.01)。5 μmol/L罗格列酮浓度组eNOS基因表达增强（P<0.01），10 μmol/L组eNOS基因表达减弱（P<0.01）。结论: 低浓度的罗格列酮（<10 μmol/L）能够减轻和保护由ADMA所致的内皮生长晕细胞的氧化应激损伤，并能够促进内皮生长晕细胞增殖，这种作用部分是通过活化eNOS基因实现的。     

罗格列酮上调成人隐匿性自身免疫糖尿病患者CD4+T细胞Foxp3 mRNA的表达

目的 观察罗格列酮对成人隐匿性自身免疫糖尿病(LADA)患者CD4+调节性T细胞的影响,旨在探讨罗格列酮的免疫调节机制.方法 采用磁珠分离LADA患者CD4+T细胞,1、10和100 μmol/L罗格列酮干预CIM+T细胞.MTT法检测细胞活性,3H-TdR掺人法检测增殖抑制率.流式细胞术检测CD4+CD25+T细胞比值.RT-PCR检测过氧化物酶体增殖激活受体-γ(PPARγ)mRNA、TGF-β1 mRNA表达,实时荧光定量PCR检测Foxp3 mRNA表达.结果 CD4+T细胞表达PPARγmRNA.罗格列酮抑制植物凝集素(PHA)刺激的CD4+T细胞增殖.1μmol/L和10μmol/L组罗格列酮作用的CD4+CD25+T细胞比例无明显变化,100 μmol/L组CD4+CD25+T细胞比例降低.10μmol/L罗格列酮上调CD4+T细胞的Foxp3 mRNA表达,但TGF-β1 mRNA表达无显著变化.小剂量IL-2参与下,1μmol/L罗格列酮(药理浓度范围内)升高CD4+T细胞Foxp3mRNA表达.结论 罗格列酮上调LADA患者CD4+T细胞Foxp3 mRNA表达,改善自身免疫耐受缺陷.     

罗格列酮抑制体外大鼠肝星状细胞活化

目的探讨罗格列酮（PPARγ配体）对肝星状细胞（HSCs）作用的机制。方法将原代HSCs随机分为3组：对照组;TGF-β1（5μg/L）组;TGF-β1加10μmol/L罗格列酮组。加药后48h用RT-PCR法检测细胞Ⅰ型前胶原的表达。用Western blot方法检测细胞SMAD3、SMAD4、SMAD7、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原的表达。免疫荧光化学标记,共聚焦显微镜下观察α-SMA的表达。用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞的增殖。结果TGF-β1明显促进HSCs的增殖,促进HSCs表达Ⅰ型胶原和α-SMA（P〈0.01）;罗格列酮显著降低TGF-β1的作用（P〈0.01）。各组细胞SMAD3、SMAD4、SMAD7的表达无明显差异。结论PPARγ配体可以抑制TGF-β1对HSCs的活化作用。     

人参皂苷Rg1通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ调控脂多糖诱导的炎症反应中BV2小胶质细胞的极化

目的 通过脂多糖刺激BV2小胶质细胞建立炎症模型,探讨人参皂苷Rg1是否通过激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)受体蛋白对炎症的调控作用。方法 BV2小胶质细胞随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rg1组、罗格列酮组、GW9662组。对照组不做任何处理,模型组加入1 mg/L脂多糖,其他组在加入脂多糖处理后,再分别加入0.4 mmol/L人参皂苷Rg1、10μmol/L罗格列酮或10μmol/L GW9662。CCK-8法检测各组BV2小胶质细胞增殖情况;采用免疫荧光和免疫印迹法检测PPARγ、磷酸化核因子κBp65(p-NF-κB p65)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和人精氨酸酶1(ARG-1)蛋白的表达。ELISA法检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果 与对照组相比,模型组细胞增殖率明显上升,IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α炎症因子含量明显增高,免疫荧光和免疫印迹结果显示,iNOS和p-NF-κB p65阳性表达明显增多,PPARγ和ARG-1阳性表达明显减少(均P...     

PPARγ激动剂抗呼吸道合胞病毒感染作用的体外研究

目的 探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)激动剂的体外抗呼吸道合胞病毒(RSv)感染作用.方法 以细胞存活率和病毒抑制率为指标,应用细胞病变效应(CPE)法,观察不同浓度PPARγ激动剂对人肺腺癌(A549)细胞的CPE及RSV感染后CPE的抑制作用.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测PPARγ激动剂对A549细胞的毒性作用和RSV感染后细胞存活率和病毒抑制率的影响.结果 5～25μ mol/L15-脱氧前列腺素J2( 15 d-PGJ2)和10～50μmol/L罗格列酮干预的A549细胞未显示明显CPE,MTT比色法也显示以上浓度范围15 d-PCJ2和罗格列酮的A值明显高于RSV感染组(P＜0.01),但两种药物相比差异无统计学意义.15d-PGJ2和罗格列酮最适浓度分别为5μmol/L和10 μmol/L.结论 PPARγ激动剂既可减轻RSV感染后A549细胞的CPE,又可提高细胞存活率,具有体外抗RSV感染作用.     

罗格列酮上调高脂饮食老年大鼠骨骼肌CPTⅠ和PPARγ的表达

目的 观察高脂饮食对老年大鼠骨骼肌肉碱棕榈酰基转移酶Ⅰ（CPTⅠ）和过氧化体增殖物激活受体γ（PPARγ）的表达变化及罗格列酮的干预效果。方法 大鼠随机分为对照组、高脂组（HF）、罗格列酮干预组（RSG）,每组20只。应用清醒状态下正常葡萄糖高胰岛素钳夹技术的葡萄糖输注率评价胰岛素抵抗,用RT-PCR法和Western blot印迹技术检测骨骼肌CPTⅠ和PPARγ的表达。结果 高脂组骨骼肌甘油三酯（TG）升高而葡萄糖输注率明显下降（P<0.01）,骨骼肌CPTⅠ和PPARγ表达明显降低(CPTⅠb mRNA 3.16±0.59vs1.30±0.18) (PPARγmRNA1.48±0.25vs1.04±0.33)（P<0.05, P<0.01）,罗格列酮干预组显著缓解高脂组上述变化(CPTⅠb mRNA1.30±0.18vs2.84±0.72) (PPARγmRNA1.04±0.33vs2.13±0.42)（P<0.01）。结论 罗格列酮上调高脂饮食老年大鼠骨骼肌CPTⅠ和PPARγ的表达,可能是减少骨骼肌内脂质堆积改善胰岛素抵抗的机制之一。     

PPARγ激动剂抗呼吸道合胞病毒感染作用的体外研究

目的 探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ（PPARγ）激动剂的体外抗呼吸道合胞病毒（RSv）感染作用.方法 以细胞存活率和病毒抑制率为指标,应用细胞病变效应（CPE）法,观察不同浓度PPARγ激动剂对人肺腺癌（A549）细胞的CPE及RSV感染后CPE的抑制作用.采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测PPARγ激动剂对A549细胞的毒性作用和RSV感染后细胞存活率和病毒抑制率的影响.结果 5～25μ mol/L15-脱氧前列腺素J2（ 15 d-PGJ2）和10～50μmol/L罗格列酮干预的A549细胞未显示明显CPE,MTT比色法也显示以上浓度范围15 d-PCJ2和罗格列酮的A值明显高于RSV感染组（P＜0.01）,但两种药物相比差异无统计学意义.15d-PGJ2和罗格列酮最适浓度分别为5μmol/L和10 μmol/L.结论 PPARγ激动剂既可减轻RSV感染后A549细胞的CPE,又可提高细胞存活率,具有体外抗RSV感染作用.     

罗格列酮对非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝组织肿瘤坏死因子α表达的作用

探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliforator-activated receptor-γ,PPAR-γ)激动剂罗格列酮对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)小鼠肝组织肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响及其在NASH进展中的作用.选取健康雄性C57BL/6J小鼠15只,随机分为3组:对照组、模型组和罗格列酮干预组.酶法检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和甘油三酯(triglyceride,TG)水平.HE染色光镜下观察肝组织切片脂肪变程度、炎症活动度和纤维化程度.采用RT-PCR和Western印迹法检测TNF-α mRNA和蛋白的表达.结果表明:HE染色显示对照组小鼠肝脏未出现明显脂肪变、炎症和纤维化,而模型组肝脂肪变及炎症明显,罗格列酮干预组上述病变减轻.肝组织TNF-α mRNA及蛋白表达依次为模型组>罗格列酮干预组>对照组(TNF-α mRNA和蛋白条带吸光度值依次为:1.11±0.01、0.99±0.02、0.91±0.00和0.99±0.01、0.60±0.01、0.47±0.01,P＜0.01).结论:在高脂、胆碱-蛋氨酸缺乏饮食(high fat, methionine and choline deficienct diet, MCD)诱导的小鼠NASH模型中,肝组织TNF-α的表达与NASH的进展有关;PPAR-γ特异性激动剂罗格列酮可抑制TNF-α的表达,阻止NASH的进展,为NASH的靶向性治疗药物的选择提供了新思路.     

罗格列酮对肝星状细胞的生物学特性及PDGF表达的影响

目的 观察罗格列酮对体外培养的肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)增殖、凋亡、细胞周期、超微结构及表达α-SMA、PDGF-B的影响.方法 MTT法检测罗格列酮对HSC增殖的影响;流式细胞仪(FCM)检测罗格列酮对HSC细胞周期和凋亡率的影响;免疫组化SABC法检测罗格列酮对HSC表达α-SMA、PDGF-B的影响;电镜观察罗格列酮对HSC超微结构的影响.结果 MTT法检测显示罗格列酮对HSC的增殖具有抑制作用,抑制率随着罗格列酮浓度的增加而增加;FCM检测:罗格列酮作用后,HSC的凋亡率、G0/G1期细胞比例均随着浓度的增加而增加,各浓度组凋亡率的增加均具有显著性意义(P<0.01);免疫组化染色显示HSC中α-SMA、PDGF-B的表达水平随着罗格列酮浓度的增加而减少,且两者的表达具有紧密相关性(r=0.971);电镜观察显示HSC的生长状态受到抑制,部分细胞呈现凋亡相关的超微结构改变.结论 罗格列酮能抑制HSC的增殖、活化,其作用机制可能与阻滞HSC于G0/G1期、诱导HSC凋亡及降低HSC的PDGF表达有关.     

人胃癌组织中PPARγ的表达及其配体对胃癌细胞生长的影响

目的探讨过氧化物酶体增殖激活物受体γ(PPARγ)在人类胃癌中表达的意义及其配体15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)对人类胃癌MGC803细胞生长的影响及机制。方法RT-PCR检测PPARγ及survivin mRNA表达;Western blot检测MGC803细胞PPARγ、survivin、S期激酶相关蛋白2(Skp2)及p27蛋白表达;免疫组化检测组织PPARγ蛋白表达。MTT法检测增殖;流式细胞术检测凋亡及细胞周期;Hoechst33342染色观察细胞凋亡的形态学变化。结果PPARγ蛋白阳性表达率,胃癌75.0%(40例)明显高于癌旁胃黏膜25.0%(40例)及正常胃黏膜20.0%(40例)(P<0.001),后两者无明显差别。PPARγmRNA及蛋白阳性表达率,肠型胃癌95.0%(20例)明显高于弥漫型胃癌55.0%(20例)(P<0.05)。15d-PGJ2作用MGC803细胞24 h后,5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L和40μmol/L组增殖抑制率(%)和凋亡率(%)均高于0μmol/L组(P<0.001),且随浓度的增加而升高;30μmol/L组的增殖抑制率(%)和凋亡率(%),也随时间的延长而升高;G1/G0期细胞比例,30μmol/L组[(61.33(1.53)%]明显高于0μmol/L组[(31.33(2.31)%](P<0.01)。随15d-PGJ2作用MGC803细胞浓度的升高,survivin mRNA和蛋白及Skp2蛋白表达均降低,p27蛋白表达升高,而PPARγmRNA及蛋白表达却没有变化。结论PPARγ表达与胃癌组织学类型有关。15d-PGJ2可能通过诱导凋亡及将细胞阻滞在G1/G0期,抑制人类胃癌MGC803细胞的生长,survivin和Skp2表达下调及p27表达上调可能在这个过程中起重要作用,这些可能不依赖PPARγ。提示15d-PGJ2可能是治疗胃癌的有效试剂。     

1092例汉,维,哈,回四民族胎儿体重,头径及前囟的测量

对１０９２例４－１０月龄汉，维，哈，回四民族胎儿体重，头径及科囟等六个项目的外形进行了测量。各径的测量数据经统计处理，建立了不同民族胎龄与各测量指标和颅顶及前囟面积的回归方程。     

慢性复合性应激对大鼠学习和记忆影响及海马中CaMKⅡ CaMmRNA和CREBmRNA水平的变化

目的探讨慢性复合应激对大鼠学习与记忆的作用,以及Ca2 /钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、钙调蛋白(CaM)mRNA、环腺苷酸反应元件结合蛋白(CREB)mRNA水平的变化及其在学习和记忆中的作用。方法Wistar大鼠被随机分为慢性复合应激组(16只)和对照组(16只)。慢性复合应激组动物给予6周的慢性复合应激刺激,制备慢性复合应激模型;Morris水迷宫和Y迷宫测试大鼠空间学习和记忆的行为表现;免疫组织化学、Western blotting和RT-PCR检测大鼠海马CaMKⅡ、CaM mRNA和CREB mRNA水平的变化;观察分析CaMKⅡ在海马CA1和CA3区的分布和表达;电镜观察海马CA3区突触间隙的宽度和突触后致密物质(PSD)的厚度的变化。结果慢性复合应激6周后,应激组大鼠的学习与记忆能力均高于对照组(P<0.05,P<0.01);应激组海马CA3区突触间隙的宽度为5.0580±1.4216,PSD的厚度为20.9547±2.5693。与对照组相比,海马CA1和CA3区辐射层和始层CaMKⅡ的免疫染色明显增强,特别是始层;CaMKⅡ、CaM mRNA及CREB mRNA水平均明显增高(P<0.05,P<0.01)。结论慢性复合性应激后,大鼠的学习与记忆能力增强;海马CaMKⅡ、CaM mRNA和CREB mRNA水平增加可能是参与了慢性复合应激性学习记忆增强的机制。     

国人颅底孔面积的对称性研究及由孔径推算孔面积的回归方程

本文对100具成都出土的成人颅骨颅底外面的卵圓孔、棘孔、破裂孔、颈动脉管外口、颈静脉孔及其所分三部(前部、中间部、后部)的长径、宽径和面积等进行了测量,并研究了上述各孔左右面积的对称性。卵圆孔:左>右52.00±5.00％,右>左44.00±4.96％;棘孔:左>右53.00±4.99％,右>左42.00±4.96％;破裂孔:左>右50.00±5.00％,右>左46.00±4.98％;颈动脉管外口:左>右37.00±4.83％,右>左58.00±4.94％;颈静脉孔:左>右21.00±4.07％,右>左76.00±4.27％。而其前部:左>右47.00±4.99％,右>左50.00±5.00％;中间部:左>右46.00±4.98％,右>左37.00±4.83％;后部:左>右19.00±3.92％,右>左79.00±4.07％。颈静脉孔、颈静脉孔后部右>左的百分比明显地大于左>右的百分比(x~2分别为60.96,72.04)。本文还进一步研究了当孔两侧不对称时,左右面积的大小倍数关系。颅底孔的非对称性对临床有参考价值,面积的比较比常用的长、宽径比较更为正确、灵敏。为方便实用,本文列出了上述各孔由孔长径、宽径乘积推算孔面程的回归方程,并列出了由颈静脉孔长径、宽径乘积推算颈静脉孔后部面积的回归方程。     

APP17肽对D-半乳糖脑老化小鼠海马凋亡相关基因表达的影响

目的 研究APP17肽对D-半乳糖脑病小鼠海马神经元凋亡的影响。方法 用D-半乳糖制备脑老化模型，皮下注射APPl7肽治疗D-半乳糖脑老化小鼠，3个月后取脑组织做Bcl-2、Bax、cREB、AKt、AIF免疫组织化学染色。结果 D-半乳糖脑病小鼠海马内Bax、AIF阳性反应神经元胞浆与突起深染，而正常小鼠及APPl7肽保护的D-半乳糖小鼠海马阳性细胞数目少，染色淡；D-半乳糖小鼠海马内Bcl-2、CREB、AKt阳性细胞数日少，染色淡；而正常小鼠及APP17肽保护的D-半乳糖小鼠海马阳性反应神经元胞浆与突起深染。结论 促进凋亡的Bax、AIF在D-半乳糖小鼠海马表达增加；抑制凋亡的Bcl-2、CREB、AKt在D-半乳糖小鼠海马表达降低。APP17肽能影响D-半乳糖脑病小鼠脑内Bcl-2、Bax、CREB、AKt、AIF的表达，使之接近正常。     

MEANINGS OF COMMUNITY IN CONTEXTS OF MULTICULTURE: THE ROLE OF CITIZENSHIP,IDENTITY, AND CULTURAL CHANGES

Sense of community (SOC) can be an important concept in relation to cultural and social changes affecting Western societies because of immigration. The focus of this article is on community, immigration, and contexts of multiculture as the starting point to analyze changes and their consequences in everyday lives. Interviews were conducted with 15 leaders living in Reggio Emilia's Station Zone (Italy) to explore meanings of SOC in the contexts of multiculture. The interviews were analyzed for recurring and unique themes. Results show the importance of immigrants’ culture of origin, which affects their idea of community, as well as feelings about identity and citizenship, perceptions of the context, and intercultural relation. Different results were found for participants who are native to Italy. We discuss the results with reference to SOC and immigration in a global world.     

切除大鼠肾上腺对丘脑下部CRF、VP和OT的影响——免疫组织化学研究

几乎只有向脑室内注入秋水仙素之后,才能在其丘脑下部室旁核(PVN)显示促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)免疫反应神经元。然而,我们切除肾上腺也能显示这类神经元,而且其细胞数目在术后3周时明显多于1周。切除肾上腺又用秋水仙素处理,细胞的数目及其免疫反应强度增加得更加显著。切除肾上腺1、3周后,PVN前份背内侧区出现一群淡染的VP样神经元。术后PVN内OT样神经元无明显变化。在正中隆起(ME)处:切除肾上腺1周时,外带CRF样纤维免疫反应强度较正常明显减弱,3周时又恢复到正常水平。1周时减弱的原因本文作了推测。外带VP样纤维的免疫反应在术后1周时不减弱,而是增加,3周时增加得更明显。OT样纤维束居于ME内带,术后1周时没有明显变化,3周时其免疫反应有所增强。切除肾上腺后即用地塞米松治疗,结果PVN及ME内CRF、VP免疫反应与未治疗者比较,均受到不同程度的抑制。上述结果证明,肾上腺对CRF和VP均具有反馈抑制作用,并说明它们都参与了丘脑下部-腺垂体-肾上腺轴的调控。然而,对OT还需进一步研究。     

掌骨长度,前后径,横径和重量的测定

用甘肃出土的１７７副、（男１２７副、女５０例）３５４侧、１７７０根汉族成人掌骨的长度，前后径、横径和重量进行了测量，测量数据作了统计学处理，并作了男女、同侧、左右两侧的对比。结果表明：除第１、４掌骨少数项目具有性别和侧别差异外，多数无统计学差异。     

CYTOLOGICAL CHARACTERS, TRANSFORMATION, AND ONTOGENESIS OF DERMAL HISTIOCYTES AND FIBROBLASTS OF RATS

Cell morphology of histiocytes and fibroblasts was observed light- and electron microscopically in the subcutaneous connective tissue of unstimulated adult rats. Striking ultrastructural differences between them were noted in the cell surface characters, extent and development of endoplasmic reticula, especially of rough-surfaced ones, and volumes of lysosomal components. Rosetting assays revealed that histiocytes were positive for EA- and EAC-rosette formation and capable of engaging in immunophagocytosis. However, fibroblasts were negative for both rosettings. In the experiments of vital staining with lithium carmine, Fesin phagocytosis, carrageenin granuloma formation, in vivo culture by intraperitoneal implantation of difision chambers, and subculture, cytological changes of histiocytes or macrophages and fibroblasts, as well as their transformation, were investigated. Although fibroblasts often simulated histiocytes under certain stimulated conditions, no transformation of fibroblasts into histiocytes was confirmed. Ontogenetically, histiocytes already existed in the subepidermal mesenchyme of rat fetuses before differentiation of undifferentiated mesenchymal cells into fibroblasts and showed no relationship to the flbroblasts. Ultrastructural cell morphology and cultural characteristics of the fetal histiocytes were presented and their possible origin was discussed briefly.     

卡氏肺孢子虫的分类、命名、体外培养及其动物模型的建立

以往所称的“卡氏肺孢子虫” (Pneumocystiscarinii,Pc)能感染包括人和实验动物在内的多种哺乳动物 ,免疫力低下的宿主感染后能引起致命的卡氏肺孢子虫肺炎 (Pneumocystiscariniipneumonia,PCP )或称肺孢子虫病(Pneumocystosis)。国际上已将原感染人体的卡氏肺孢子虫 (Pneumocystiscarinii)更名为Pneumocystisjeroveci,国内张瑞娟、朱淮民( 2 0 0 3)将其译为耶氏肺孢子虫 ,然尚未被广泛应用。其生物学分类也由原来动物界的原虫定为真菌界的真菌类。重新命名和跨界的分类归属具有重要意义 ,然而 ,国内有关“卡氏肺孢子虫”的报道 ,尚未启…