抗凝组分Acoagulatin的纯化鉴定及其抗凝特性

目的 从蝮蛇毒中分离纯化一种组分acoagulatin并进行鉴定。观察其抗凝作用。方法 经DEAE-Sepharose Fast Flow和CM-sepharose Fast Flow离子交换柱层析，从蝮蛇毒中分离、纯化得到acoagulatin，分别采用Biosep-sec-S2000型HPLC分子筛柱层析、还原性SDS-PAGE(5％浓缩胶，12％分离胶)电泳进行纯度和相对分子质量测定，将不同浓度acoagulatin与抗凝兔血混合，测定凝血时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)。结果 Acoagulatin的相对分子质量为31400，由两个亚基组成，相对分子质量分别为14400和17000，能显著地延长PT和APTT，对TT没有影响。结论 采用DEAE-Sepharose Fast Flow和CM-sepharose Fast Flow两种离子交换柱层析分离蛇毒，能分离出纯度高的组分acoagulatin，该组分具有抗凝活性。     

蝮蛇毒蛋白C激活物的纯化与抗血小板活性

目的　研究蝮蛇毒蛋白C激活物 (PCA)组分对兔血小板聚集性的影响。方法　借助DEAE Cellulose、SP SephadexC 5 0及SP SephadexG 75柱层析 ,以离子交换和凝胶过滤法从江浙蝮蛇 (AHV)粗毒中分离纯化PCA抗凝组分 ;SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)检测其纯度和分子量。比浊法测定血小板聚集率。结果　从AHV分离纯化的PCA抗凝组分经SDS PAGE电泳测定为单一区带 ,相对分子质量为 14 0 0 0左右 ,等电点 pH 4 .7;该PCA在体外对由诱聚剂ADP诱导的血小板聚集呈剂量依赖性的抑制作用 ,其IC50 为 12 5 μg/ml。PCA(1.0mg/kg) 体内给药可逆性抑制血小板聚集反应。结论　从蝮蛇毒中纯化的这种PCA抗凝组分可通过抑制血小板聚集而影响血凝过程。     

蓝萼甲素抗凝血作用研究

目的:研究蓝萼甲素抗凝血作用.方法:测定蓝萼甲素对小鼠毛细管凝血时间和尾尖出血时间的作用;测定蓝萼甲素对小鼠凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血激酶时间(APTT)、血浆复钙时间(PRT)的影响.测定蓝萼甲素对家兔体外TT、PT、APTT和PRT的影响.结果:蓝萼甲素能显著延长小鼠毛细管凝血时间和尾尖出血时间;显著延长小鼠TT、PT、APTT和PRT.蓝萼甲素在体外显著延长家兔TT、APTT和PRT.结论:蓝萼甲素具有抗凝血活性.     

短尾蝮蛇毒磷脂结合抗凝蛋白的抗凝作用及其机理研究

目的:研究短尾蝮蛇毒磷脂结合抗凝蛋白的抗凝作用及机理.方法:用薄层层析方法确定抗凝蛋白与磷脂酰胆碱结合.按试剂盒说明进行活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)含量以及对凝血因子的测定.结果:短尾蝮蛇毒磷脂结合抗凝蛋白具有精氨酸酯酶活性,能明显地延长活化部分凝血活酶时间(APTT)和稀释的蝰蛇毒时间(DRVVT),减少组织凝血活酶抑制试验(TTI)试剂的磷酯浓度,能加速其抗凝作用,其抗凝活性与磷脂结合及干扰Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ因子活性有关.结论:短尾蝮蛇毒磷脂结合抗凝蛋白能够抗凝、抑制Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ因子活性并与磷脂结合.     

影响凝血实验结果准确性因素分析

①目的 观察和分析在凝血测定过程中,影响凝血测定结果 准确性的常见因素.②方法 对采血量合格的凝血标本在不同放置时间和离心条件下对凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)进行测定.③结果 抽血量在1.6mL(8∶1)和2.0mL(10∶1)时,PT、APTT、FIB差异有统计学意义(P<0.05),TT差异无统计学意义(P>0.05),抽血量在1.4mL(7∶1)和1.2mL(6∶1)时,PT、APTT、FIB、TT差异均有统计学意义(P<0.05).室温下放置4h,APTT、TT测定结果 与即刻测定结果 差异有显著性(P<0.05),PT、FIB差异无统计学意义(P>0.05),室温放置8h、24h,PT、APTT、FIB、TT差异有统计学意义(P<0.05).标本离心5min与10min相比,PT、APTT、FIB差异有显著性(P<0.05),TT差异无统计学意义(P>0.05).标本离心15min和20min与10min相比,PT、APTT、FIB、TT差异无显著性(P>0.05).④结论 凝血试验前标本的采集和处理对保证结果 的准确性非常关键,在日常工作中,应该严格把握好各个环节,减少误差,为临床科室提供准确可靠的诊断依据.     

早产儿凝血功能指标监测的临床意义分析

目的:探讨对早产儿进行凝血功能指标、凝血时间监测的价值。方法:选取150例早产儿为研究组,100例足月儿为对照组,对两组部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)及纤维蛋白原(FIB)指标进行检测。结果:胎龄小于37周的早产儿在APTT、TT及PT上均较足月儿延长,FIB较足月儿降低(P <0. 05);轻度与重度窒息的早产儿APTT、TT及PT较足月儿延长,FIB降低(P <0. 05);早期出血、出血期早产儿在APTT、TT及PT上较足月儿延长,FIB降低(P <0. 05)。结论:针对早产儿,实施凝血功能指标、凝血时间监测,可判断颅内出血及新生儿窒息情况,为新生儿预后判断提供帮助,值得推广。     

凝血标本放置温度、时间对凝血检验结果的影响分析

目的:探讨凝血标本放置温度、时间对凝血检验结果的影响。方法:选取进行血液实验室检查的70例患者为研究对象,将血液标本置于室温下,观察不同的时间(0 h、2 h、4 h,24 h)以及在不同温度(-4℃、-20℃)保存24 h,对PT、APTT、TT和FIB进行检测比较。结果:室温条件下,与0 h相比,2 h后检测,PT、APTT、TT和FIB差异无统计学意义(P>0.05);4 h后检测,PT、APTT、TT指标出现时间增加,且随放置时间增加而增加(P<0.05),FIB无明显变化;放置24 h,PT、APTT和TT出现明显延长,FIB无明显变化((P>0.05)。-4℃下保存24 h,PT、APTT、TT和FIB差异无统计学意义(P>0.05),-20℃时,APTT出现延长(P<0.05)。结论:采集标本后应及时送检,尽快分离血浆,常温下血浆标本应在2 h内完成测定;-4℃下血浆标本保存24 h,PT、APTT、TT和FIB等指标测定结果未受影响,低温保存应注意避免标本冻融过程。     

临床检验凝血系统

目的 讨论临床检验凝血系统.方法 凝血酶原时间(PT)测定、纤维蛋白原(FIB)检测、活化部分凝血活酶时间(APTT)测定、凝血酶时间(TT)测定、凝血因子II、V、Ⅶ、X因子活性测定和凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ活性测定.结论 对凝血系统进行检验有助于观察患者口服抗凝药后的状况,同时也对部分疾病诊断提供依据.     

孕妇不同孕期凝血功能检测的变化及其临床意义

凝血4项为凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fbg)及凝血酶时间(TT)，是目前临床用于诊断与观察血栓形成、抗凝治疗疗效的常用指标。孕妇血栓发病率是相当高的，多见于静脉血栓和盆腔静脉血栓，也可发生大脑血栓与肝静脉血栓。我们通过测定不同孕期孕妇凝血4项指标，来观察其变化，并对其临床意义进行探讨。     

海螵蛸多糖的提取分离及活性组分CPS-1的纯化

目的:从海洋中草药海螵蛸(乌贼骨)中提取分离得到多糖活性物质.对粗多糖中主要的活性组分CPS-1进行纯化,得到成分相对均一的天然活性多糖.方法:用热水抽提法提取海螵蛸多糖粗品,并对提取工艺进行正交设计,优化提取方法.对粗品组分进行总糖量测定.用DEAE-Sepharose F.F柱及Sepharose CL-6B柱对海螵蛸多糖粗品进行分离.通过活性检测实验确定活性部分.最后使用Sephacryl S-300柱进一步纯化.用HPLC来检测精品多糖的纯度.标准曲线法测定相对分子质量.结果:成功得到海螵蛸粗多糖.经过离子交换柱DEAE-Sepharose Fast Flow和Sepharose CL-6B柱及分子筛Sephacryl S-300柱的进一步分离纯化和活性跟踪,最后得到相对均一的活性精品多糖CPS-1,其含糖量达93.6%,相对分子质量为1×106.结论:不同的提取条件影响海螵蛸多糖的得率.不同性质的分离材料能够将相对分子质量及电荷有差异的多糖分离,达到分离的目的.精品多糖CPS-1是从海洋中草药海螵蛸中得到的均一多糖组分.     

常见无机盐对aPTT、PT、TT测定的影响

目的探讨常用无机盐对活化部分凝血酶时间（aPTT）、凝血酶原时间（PT）和凝血酶时间（TT）的影响。方法以不同浓度的NaCl、KCl、NaHCO3、NaH2PO4为样品测定aPTT、PT和TT。结果四种无机盐能够明显延长aPTT、PT、TT时间,呈现出体外抗凝作用,作用强度与浓度呈正相关。四种盐抗凝能力强弱如下：NaH2PO4＞NaHCO3＞NaCl＞KCl。结论无机盐会参与到凝血过程,对aPTT、PT和TT产生影响,如果样品中含有无机盐,应考虑到其影响。     

肿瘤患者凝血指标变化的临床意义

目的：观察不同恶性程度肿瘤患凝血象的变化并探讨其临床意义，方法：用法国STAGO compact全自动凝血分析仪对40例正常对照，20例子宫肌瘤，92例恶性实体肿瘤（肺癌22例，食管癌20例，胃癌，结直肠癌30例，宫颈癌20例）的凝血酶原时间（PT），活化部分凝血酶时间（APTT），纤维蛋白原（Fbg)，凝血酶时间（TT）进行检测，结果：各种恶性肿瘤患PT，APTT，TT水平较正常对照组升高，但无显性差异，Fbg则显增高（P＜0．01），子宫肌瘤患上述指标与正常对照组之间无统计学差异，结论：恶性实体肿瘤Fbg含量增高，机体处于高凝状态，有血栓形成趋势。     

妊娠期妇女凝血指标变化的临床意义

目的:探讨妊娠期妇女凝血指标变化的临床意义。方法:用法国STAGO compact全自动凝血分析仪对39例正常对照、76例中孕组(孕20～28周)及54例晚孕组(孕37～40周)妇女的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fbg)、凝血酶时间(TT)进行检测。结果:中孕组、晚孕组与正常对照组相比,APTT及TT缩短,Fbg水平升高,差别均有非常显著性意义(P<0.01),PT无统计学差异(P<0.05);晚孕期与中孕期相比,PT和APTT有所延长,存在显著性差异(P<0.05)。结论:妊娠期妇女凝血功能有增强的趋势,机体呈现高凝状态,可能有利于产后快速有效止血。     

标本放置时间对凝血酶原时间和活化的部分凝血活酶时间检测结果的影响

  目的 探讨凝血功能异常时,标本放置时间对PT和APTT检测结果的影响。方法 利用STA-R全自动血凝仪及配套试剂,测定不同放置时间下70例血凝标本PT和APTT的检测结果 。根据PT 和APTT的正常参考值,将空腹（0 h）检测结果分为正常组（PT：11.0~14.3 s,APTT：32.0~43.0 s）和异常组（PT>14.3 s,APTT>43.0 s）。将标本于室温下分别放置 1、2、4、6、8、12、24 h,检测其PT和APTT,对结果进行统计学分析。结果 正常组PT与APTT标本分别室温存放8 h和4 h检测结果基本稳定。异常组PT与APTT标本分别室温存放4 h和2 h检测结果基本稳定。异常组较正常组检测结果更易受标本放置时间的影响,PT标本放置6 h、APTT标本放置4 h,检测结果即发生明显的改变。结论 对于凝血异常者,标本放置时间对检测结果影响甚大,PT和APTT测定均应于标本采集后2 h内尽快进行。     

血浆钙离子浓度对血小板聚集、凝血指标和血栓弹力图检验结果的影响

目的 探讨血浆钙离子(Ca2+)浓度对凝血相关参数检验结果的影响.方法 收集门诊体检志愿者静脉血标本,添加不同剂量氯化钙,采用血浆比浊法、凝固法和全血复钙法分别进行血小板聚集率(n=42)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)等凝血指标(n=21)和血栓弹力图(n=30)检测.结果 血浆Ca2+浓度在0.1-33.7 mmol/L时,二磷酸腺苷(ADP)和花生四烯酸(AA)诱导的血小板聚集率分别为(51.8±9.6)%-(94.7±4.8)%和(64.4 4±12.2)%-(93.2±5.5)%,随Ca2+浓度的增高而增高;Ca2+浓度为39.0 mmol/L时,血小板聚集率明显降低[ADP和AA诱导的血小板聚集率分别为(9.1±5.3)%和(11.1±4.5)%,均P<0.01]. Ca2+浓度在0.1-33.7 mmol/L时,PT随Ca2+浓度的增高而增高;TT的变化呈"V"型,以Ca2+浓度为4.4mmol/L时最小;APTT随Ca2+浓度的增高而降低,当Ca2+浓度>0.5 mmol/L时,APTT测不出值.Ca2+浓度在0.4～27.3 mmol/L时,血栓弹力图反应时间和凝固时间的变化呈"V"型,在Ca2+浓度为2.1 mmol/L时最小或接近最小;a角和最大幅度变化呈"∧"型,均以Ca2+浓度为2.1 mmol/L时最大.结论 血浆Ca2+浓度对凝血相关参数检验结果有明显影响,高钙(≥39 mmol/L)抑制血小板聚集、凝血因子活性和血液凝固,2.1 mmol/L是以全血复钙法进行血栓弹力图检测的适宜Ca2+浓度.     

标本离心时间及放置时间对凝血筛选检测的影响

目的探讨不同离心时间及标本放置时间对凝血四项检测结果的影响。方法收集住院患者合格标本50例,按不同离心条件及放置时间进行活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（Fib）检测。结果标本以3 000 r/min离心5 min APTT、PT缩短,与离心10 min作对照差异有统计学意义（P〈0.05）,TT、Fib差异无统计学意义（P〉0.05）;标本离心8 min四项凝血指标与对照组相比差异无统计学意义（P〉0.05）。标本室温放置2 h各项检测结果与即刻测定结果差异无统计学意义（P〉0.05）;室温放置4 h、6 h APTT、PT测定结果与对照组差异有统计学意义（P〈0.05）,TT、Fib差异无统计学意义（P〉0.05）。结论标本3 000 r/min离心8 min即可进行凝血筛选检测;标本放置时间对APTT、PT检测结果影响较大,标本室温放置时间不宜超过2 h。     

药物流产后凝血功能变化分析

目的:了解早孕妇女药物流产后凝血功能的变化。方法:检测30例早孕妇女服药前和第一次服药后第8天的凝血酶原时间(PT),活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶时间(TT)。结果:服药后PT明显缩短(P<0.05),APTT和TT差异无显著性(P>0.05)。结论:早孕妇女进行药物流产后,阴道流血时,生理上外源性凝血作用明显加强。     

液体组织凝血活酶试剂在COACHROMEⅣ 仪器上的应用

目的　探讨自制液体组织凝血活酶试剂的应用效果。方法　以进口组织凝血活酶试剂为标准 ,标定自制液体组织凝血活酶试剂的国际敏感度指数 (ISI) ,并用两组试剂在COACHROMEⅣ仪器上对 35例患者血浆进行对比检测。结果　自制液体组织凝血活酶试剂的ISI值高于进口组织凝血活酶试剂的ISI值 ,但两组试剂的PT结果 (INR值 )相关性较好(r=0 .9798,P <0 .0 0 1 ) ,重复性符合规定 (<5 % )。结论　自制液体组织凝血活酶试剂可以应用于临床     

6种凝血活酶试剂测定凝血酶原时间评价

目的探讨不同来源的凝血活酶试剂对凝血酶原时间(PT)测定的影响.方法选择病人组40例及抗凝治疗组20例,在STA-Compact全自动凝血仪上采用配套试剂(R1)和其他5种不同ISI值的凝血活酶试剂(R2～6)测定PT,结果用SPSS10.0 for Windows 2000进行统计学处理.结果R1～R5测定PT的批内CV为1.15%～4.9%,R6为7.3%;R1和R2的批间CV分别为2.38%、3.45%,R3～R6为6.43%～8.10%;与R1测定结果相比较,R2～R6测定病人组PT的相关系数分别为0.992、0.912、0.940、0.600和0.120,其中R6测定PT有显著性差异(P＜0.05);当凝血酶原时间国际标准化比值(INR)＞2.0时,R3～R6测定抗凝治疗组的INR结果差异均有显著性意义(P＜0.05).加入33.3μmol/L胆红质、8.6mmol/L甘油三脂和0.62g/L血红蛋白对R2～R6测定PT均有显著性影响(P＜0.05).结论除该仪器配套试剂R1外,其它5种不同来源的凝血活酶试剂对测定结果均存在不同程度的差异.建议使用原装配套试剂与仪器组成标准的检测系统,有效确保PT测定结果的准确性和可靠性.     

重度烧伤患者PT、APTT检测的临床价值

目的 探讨重度烧伤患者的凝血系统变化。方法 用法国产全自动血凝固分析仪,检测107例烧伤患者和正常对照组的PT、INR、PTR、凝血酶原活动度和APTT。结果 烧伤面积小于30％Ⅱ-Ⅲ度的中轻度烧伤患者与正常对照组比较无差异（P＞0．05）;而30％－49％Ⅱ-Ⅲ度重度烧伤组和50％－79％Ⅱ-Ⅲ度的特度烧伤组分别与正常对照组比较,差异均有显著性,（P＜0．05）;大于80％Ⅱ-Ⅲ度特重烧伤组与正常对照组比较差异有显著性（P＜0．01）。结论 重度、特重度烧伤患者,PT、APTT有明显延长,提示患者凝血系统障碍,有低凝血倾向,应予重视。