肝癌中肝细胞生长因子受体的表达及意义

目的:研究肝细胞生长因子受体(c-Met)在肝癌患者组织及血浆中的表达,探讨c-Met在肝癌发生、发展所起的作用.方法:对肝癌及慢性肝炎患者进行调查,并且设立正常对照组,应用酶联免疫吸附法检测各组血浆c-Met水平;应用半定量RT-PCR法和免疫组织化学法分别检测各组肝组织中的c-Met mRNA及c-Met蛋白的表达.结果:肝癌患者血浆中的c-Met水平明显高于慢性肝炎患者和正常人群(均P<0.05).肝癌组织中的c-Met水平明显高于慢性肝炎组织和正常肝组织(均P<0.05).结论:c-Met在肝癌组织及血浆中呈高表达,可能与肝癌的发生、发展有关.     

喉鳞状细胞癌中肝细胞生长因子受体的表达及意义

目的研究肝细胞生长因子受体（c-Met）在喉鳞状细胞癌患者组织及血浆中的表达,探讨c—Met在喉鳞状细胞癌发生、发展所起的作用。方法喉鳞状细胞癌及喉乳头状瘤患者进行调查,并且设立正常对照组,应用酶联免疫吸附法检测各组血浆c—Met水平;应用半定量RT—PCR法和免疫组织化学法分别检测各组组织中c—MetmRNA及c—Met蛋白的表达。结果喉鳞状细胞癌患者血浆中的c—Met水平明显高于喉乳头状瘤患者和正常人群（均P〈0．05）。喉鳞状细胞癌组织中的c—Met水平明显高于喉乳头状瘤组织和正常组织（均P〈0．05）。结论c—Met在喉鳞状细胞癌组织及血浆中呈高表达,可能与喉鳞状细胞癌的发生、发展有关。     

肝癌生长因子与血管内皮生长因子在肺癌患者血清和组织中的表达及意义

【目的】探讨肝癌衍生生长因子（HDGF）和血管内皮生长因子（VEGF）表达水平与肺癌的关系。【方法】用酶联免疫吸附法（ELISA）检测健康对照组（14例）、良性肺病组（14例）、肺癌组（56例）血清中HDGF和VEGF表达水平。用免疫组织化学（IHC）的方法检测患者肺癌组织及肺癌旁正常肺组织中HDGF和VEGF的表达。【结果】肺鳞癌患者与肺腺癌患者相比,肺鳞癌患者血清HDGF水平显著增高（P<0.01）。未分化+低分化肺癌患者与中分化+高分化肺癌患者相比,未分化+低分化肺癌患者血清HDGF水平显著增高（P<0.01）;Ⅱ～Ⅳ期NSCLC患者血清HDGF和VEGF水平显著高于Ⅰ期患者（P<0.05）;有淋巴结转移者比无淋巴结转移的肺癌患者血清VEGF水平显著增高（P<0.05）;血清HDGF水平与血清VEGF水平呈显著的正相关关系（r=0.35, P<0.01）;肺癌组织中HDGF的表达水平显著高于肺癌旁正常肺组织（P<0.01）;肺癌组织中VEGF的表达水平也显著高于肺癌旁正常肺组织（P<0.05）;肺癌组织中HDGF的表达水平与VEGF的表达水平呈显著的正相关关系（r=0.75 P<0.05）。【结论】HDGF和VEGF可能与肺癌的生长、转移有关,并且两者之间可能存在着相互联系。     

肝细胞肝癌中ZNF146蛋白的表达及意义

目的：探讨锌指蛋白146（ZNF146）在肝细胞肝癌（HCC）癌组织中的表达及其临床意义。方法：收集40例HCC肿瘤组织和癌旁组织,采用逆转录-聚合酶链式反应和免疫组化检测HCC肿瘤组织、癌旁组织ZNF146基因mRNA和蛋白的表达,分析ZNF146表达与临床病理因素的关系。结果：HCC肿瘤组织中ZNF146 mRNA及其蛋白的表达明显高于癌旁组织,差异有统计学意义（P＜0.05）,在不同分期及不同大小肿瘤中ZNF146表达的差异有统计学意义（P＜0.05）,肿瘤直径≥5 cm、Ⅲ/Ⅳ期肿瘤患者中ZNF146表达明显增加,而在患者年龄、性别、是否有HBsAg感染的不同组别中ZNF146表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：ZNF146在HCC组织中表达增高,可能参与与肿瘤发生和演进,ZNF146有可能是HCC潜在的生物标志物之一。     

肝细胞肝癌组织中B细胞淋巴瘤因子9的表达及临床意义

目的 :探讨B细胞淋巴瘤因子9(B-cell lymphoma 9,BCL9)在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达情况及临床意义。方法:采用Western Blot法检测8对新鲜冰冻HCC和对应癌旁组织中BCL9的蛋白表达;采用免疫组织化学法检测100例HCC和对应癌旁组织石蜡切片中BCL9的表达情况,并分析HCC中BCL9的表达与临床病理参数之间的关系。结果:Western Blot结果显示BCL9在HCC中的表达显著高于对应癌旁组织;免疫组化结果显示BCL9在HCC中主要定位于细胞核和细胞质,呈高表达,而在对应癌旁组织中主要定位于细胞质,表达较低或缺失;BCL9在HCC中的表达与肿瘤的分化程度和淋巴侵犯相关(P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤直径、包膜完整、门静脉癌栓、血清HBs Ag、甲胎蛋白及肝硬化无关(P>0.05)。结论:BCL9在HCC中高表达,可能参与了HCC的发生、发展及转移。     

血管内皮生长因子对原发性肝癌诊治的意义

恶性肿瘤患者血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)的表达研究国内外已有大量报告,原发性肝癌(下称肝癌)是我国常见的恶性肿瘤之一,为探讨VEGF对肝癌的诊断及治疗有何意义,我们采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定94例肝癌血清中的VEGF的水平,并以非肿瘤患者作对照,结果报告如下.     

肝细胞癌变过程中血管内皮生长因子的表达变化

目的：观察肝细胞癌变过程中血管内皮生长因子（VEGF）的动态改变及相互关系。方法：以含0.05%2-乙酰氨基芴（2-FAA）颗粒饲料连续喂饲雄性SD大鼠12周诱发肝细胞癌变,在此过程中以免疫组织化学法、Western blot技术及酶联免疫吸附法（ELISA）观察VEGF的表达特征及其相互关系。结果：组织学证实SD大鼠在喂饲2-FAA后,肝细胞出现颗粒样变性、不典型增生及肝细胞癌（HCC）的变化;肝细胞中VEGF呈粽色阳性颗粒,主要存在于细胞浆,偶见于细胞核;癌变过程中VEGF表达率和VEGF/β-actin比率分别为：对照组25%和0.16±0.02、肝细胞变性组88.9%和0.29±0.04、癌前病变组100%和0.52±0.03及癌变组100%和0.84±0.02;VEGF表达在蛋白水平均随着病理组织学的改变呈梯度增加,表现为癌变组明显高于对照组和肝细胞变性组（P〈0.05）;肝癌中VEGF在肝细胞内呈强阳性表达;肝组织与血清VEGF的动态改变呈显著正相关关系（r=0.785,t=8.00,P〈0.01）。结论：VEGF表达异常与肝癌的发生发展有关,其表达增加有助于肝癌早期诊断,也是肝癌治疗的分子靶目标。     

癌-睾丸抗原SSX基因在肝细胞癌中mRNA水平的表达及意义

目的观察癌-睾丸抗原SSX基因在肝癌组织和肝癌细胞株中mRNA水平的表达情况,探究该基因家族的表达与肝癌的诊断、治疗的关系,进而评价该基因家族作为肝癌免疫治疗靶点和多价肿瘤疫苗研制的可行性。方法对28例肝细胞癌和癌旁组织、3例肝硬化组织以及肝癌细胞株7404、HePG2、7721采用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）方法检测癌-睾丸抗原SSX基因在mRNA水平的表达情况。结果SSX-1、SSX-2、SSX-3在肝癌癌旁组织和肝硬化组织中均不表达。在收集的肝细胞癌组织中SSX-1、SSX-3基因表达阳性率较高（53．6％、57．1％）,SSX-2表达阳性率相对较低（35．7％）,其中SSX-1、SSX-2、SSX-3三种基因共同表达的有6例（21．4％）,至少有两种SSX基因表达的有23例（82．1％）。结论癌-睾丸抗原某些SSX基因在肝细胞癌中高频率表达与肝癌的发生、发展有关,同时基因的共同表达结果又为多价瘤苗的研究提供了实验方向。     

Pin1和CyclinD1在原发性肝癌中的表达及意义

目的：检测原发性肝细胞癌（肝癌）及癌旁组织中Pinl及CyclinD1的表达,探讨Pinl及CyclinD1在肝癌发病中的作用。方法：采用逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）方法,对收集的42例经手术切除及病理学证实的肝癌患者的癌组织标本及相应癌旁组织中Pin1及CyclinD1基因进行检测,分析两者之间的相关性及其与肝癌临床病理学特征的关系。结果：Pinl基因和CyclinD1基因在肝癌组织中均呈高表达,明显高于癌旁组织（分别为0．487±0．043与0．291±0．038及0．493±0．072与0．313±0．050,均P〈0．05）。Pin]和CyclinD1与肿瘤的大小、有无包膜、有无转移、AFP、分期均无明显的相关性（P〉0．05）,但Pin1与CyclinD1的表达有相关性（P〈0．01）。结论：肝癌中Pin1的过表达可能促进CyclinD1表达,由此诱导了肿瘤的发生;Pin1可能成为治疗肝癌的新靶点。     

人附睾蛋白4在上皮性卵巢癌组织及血清中表达

目的 :探讨人附睾蛋白4(HE4)在卵巢癌患者组织及血清中的表达及临床意义。方法 :选取卵巢癌患者40例、卵巢良性肿瘤30例及对照组30例,用免疫组化法检测组织中HE4蛋白表达水平,应用酶联免疫吸附试验检测血清中HE4水平。结果:HE4在卵巢癌组患者的血清及组织中的表达高于卵巢良性肿瘤及对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。术前HE4血清水平与卵巢上皮癌患者的病理类型(r=0.25,P=0.022)、组织学分级(r=0.43,P=0.001)、临床分期(r=0.51,P=0.001)、有无淋巴结转移(r=0.22,P=0.027)均呈正相关;与年龄无相关性(P=0.124)。结论:检测卵巢癌组织及血清中HE4水平,可作为卵巢癌诊断、评价其恶性进展的参考指标,可用于指导临床综合治疗。     

甘氨酸对肝纤维化及肝硬化大鼠肝组织肝细胞生长因子表达的影响

目的 探讨甘氨酸对肝纤维化及肝硬化大鼠肝组织肝细胞生长因子(HGF)表达的影响. 方法 将40只雄性Wistar大鼠随机分为5组:正常对照组(C组),肝纤维化(HF)模型组,肝硬化(HC)模型组,肝纤维化甘氨酸干预组(HF G)及肝硬化甘氨酸干预组(HC G).观察外周血浆内毒素(endotoxin),丙氨酸氨基转移酶(ALT)和血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,免疫组化染色分析肝组织肝细胞生长因子(HGF)的表达情况. 结果 血浆endotoxin、ALT及血清TNF-α水平在HF及HC组明显高于C组(P<0.01),而在HF G及HC G组分别低于HF及HC组(P<0.05).HGF在HF及HC组的表达均显著高于C组(P<0.01,P<0.05),在HC组的表达低于HF组(P<0.05),而在HF G及HC G组分别高于HF及HC组(P<0.05). 结论 甘氨酸可减轻肝纤维化及肝硬化大鼠的肝损伤,这可能部分是通过上调肝组织HGF的表达实现的.     

血清肝细胞生长因子水平与乳腺癌临床病理特征的关系

目的探讨血清肝细胞生长因子(HGF)水平与乳腺癌临床病理特征的关系及临床意义。方法应用酶链免疫吸附法检测100例可手术乳腺癌患者治疗前的血清HGF水平,比较年龄、雌激素受体表达情况、肿瘤大小、组织学分级、淋巴结状况及TNM分期与HGF关系。结果血清肝细胞生长因子与乳腺癌淋巴结状况、临床分期及组织学分级有关(P<0.05),而与患者年龄、肿瘤大小及雌激素水平无关(P>0.05)。结论血清肝细胞生长因子可能在乳腺癌的发生发展中起重要作用,可能是乳腺癌预后的独立指标。     

肝细胞生长因子及其受体c-Met在子宫内膜癌中的表达

目的　探讨肝细胞生长因子 (HGF)及其受体c Met蛋白表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系。方法　应用免疫组化法检测 2 0例正常子宫内膜 ,4 6例子宫内膜癌组织中HGF及c Met蛋白的表达。结果　①正常子宫内膜HGF及c Met在增生期内膜的表达明显高于分泌期子宫内膜的表达。②子宫内膜癌c Met表达与临床分期、病理分级明显相关 (P <0 .0 5 ) ,Ⅰ、Ⅱ期低于Ⅲ、Ⅳ期 ,G1、G2 级低于G3 级。与年龄、肌层浸润、淋巴结转移无关 (P>0 .0 5 )。半定量分析 :HGF表达与子宫内膜癌Ⅲ +Ⅳ期有关 (P <0 .0 5 )。结论　HGF/c Met系统在子宫内膜癌的侵袭进展中起重要作用 ,c Met可能成为判断子宫内膜癌预后的良好参考指标。HGF及c Met联合检测对于判断子宫内膜癌预后有重要意义     

Serum Vascular Endothelial Growth Factor-C and Vascular Endothelial Growth Factor Level in Patients with Colorectal Carcinoma and Clinical Significance

The opti mal staging approachin patients withcolorectal carcinoma(CRC)who have been in-volved in lymph node metastasis on computedtomography(CT)scans or magnetic resonance i m-aging scans(MRI)is far less reliable and contro-versial,because the i maging criteria for tumor in-volvement are relied on the size and shape of thelymph nodes.But as we known,accurate tumorstaging is essential for choosing the appropriatetreat ment strategy for patients with CRC.The in-volvement of lymph nodesis ani…     

肝细胞生长因子（HGF）在胎儿各脏器的分布

本实验应用免疫组织化学法，研究人肝细胞生长因子在６－７个月胎儿各脏器的分布情况，结果显示了ＨＧＦ大量分布于胎儿的肝脏，其中以较小的、核深染的肝细胞为主。在肾脏，ＨＧＦ呈中等量分布。在胃、十十指肠、胰腺、肾上腺等ＨＧＦ只有少量的分布。     

增生性玻璃体视网膜病变玻璃体中肝细胞生长因子的变化

目的：定量研究肝细胞生长因子（HGF）在增生性玻璃体视网膜病变（PVR）患者玻璃体中的水平。方法：采用双夹心酶联免疫吸附测定法检测正常对照组10只眼，PVR－A，B组7只眼PVR－C组13只眼，PVR－D组16只眼。结果：玻璃体内HGF的含量：正常对照组1．8－7．4μg.L^-1；PVR－A，B组3．8－12．8μg.L^-1，PVR－C组7．7－20．1μg.L^-1；PVR－D组10．3－24．6μg.L^-1，PVR各组玻璃体中HGF的含量比正常对照组显著升高（P＜0．01）；PVR－C，D组玻璃体中HGF的含量较PVR－A，B组的含量升高（P＜0．05orP＜0．01）；PVR－D组玻璃体中HGF的含量与PVR－C组比较含量升高（P＜0．05）。玻璃体中HGF的偏量随着PVR的发展而呈上行性升高，结论：PVR患者玻璃体中HGF含量升高，HGF可能参与了PVR的病理过程。     

原发性肝癌患者肝动脉化疗栓塞前后血管内皮生长因子表达水平的研究

目的分析血管内皮生长因子（VEGF）在原发性肝癌（PHC）患者肝动脉化疗栓塞（TACE）前后血清中的表达水平及其意义。方法采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测20例健康人血清中的VEGF表达水平和对32例临床确诊的原发性肝癌病人进行肝动脉化疗栓塞术,分别检测术前1天、术后28天血清VEGF和甲胎蛋白（AFP）的表达水平并分别进行比较、分析。结果 32例PHC患者血清中VEGF表达水平（225.13±120.24）ng/L明显高于健康人群（27.28±22.86）ng/L（P〈0.01）,具有显著性差异,全部病例术前1天、术后28天血清中VEGF平均表达水平分别为（225.13±120.24）ng/L、（160.52±80.57）ng/L（P〈0.05）,具有显著性差异,证实VEGF在肝癌的生长转移和发展中起重要的作用,TACE治疗前后血清VEGF下降变化与术后病灶区碘油沉积情况和/或伴有门静脉癌栓有明显相关性,对肝癌近期治疗疗效具有良好的敏感性,尤其是在AFP阴性病例中其意义尤为显著;能够更直观地反映肿瘤血管的破坏程度和治疗疗效。结论血清VEGF是一项独立于AFP的、能够更好地做为原发性肝癌介入疗效评价标准的指标,能够反映肝癌的进展、转移及预后。     

肝细胞生长因子及受体促进人大肠癌细胞血管内皮生长因子表达

目的:观察不同浓度肝细胞生长因子对体外培养的大肠癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法:体外培养人大肠癌细胞,分别加入不同浓度的人重组肝细胞生长因子和或其受体抑制剂Herbimycin A(HA),用Western blot、RT-PCR、ELISA等方法检测肝细胞生长因子对其受体磷酸化表达及大肠癌细胞VEGF表达的影响.结果:肝细胞生长因子在10～100 ng/ml浓度范围内较对照组相比显著促进大肠癌细胞VEGF mRNA(增加了4～5倍)、蛋白质表达(增加了3～10倍);Western blot检测肝细胞生长因子引起其受体磷酸化,并与其诱导的VEGF表达相关.结论:体外培养条件下,肝细胞生长因子呈剂量依赖性促进大肠癌细胞VEGF表达,其表达与其受体磷酸化水平相关;其受体磷酸化抑制剂可以抑制大肠癌细胞VEGF表达.     

Establishment of a sandwich ELISA method for detection of vascular endothelial growth factor in serum samples of hepatocellular carcinoma patients

Objective To establish a sandwich ELISA method for detecting vascular endothelial growth factor （VEGF） in sera of population and the patients with hepatocellular carcinoma （HCC）. Methods Full length and two truncated human VEGF cDNA sequences were amplified from a commercial plasmid pBLAST49-hVEGF by PCR and inserted into the prokaryotic-expression plasmid pET-32a or pGEX-2T. Various VEGF proteins were expressed and purified from E. coli in His-Trx or GST fusion forms. The specific VEGF antibodies were elicited in experimental rabbits and mice by immunization of the full length VEGF fusion protein His-Trx-VEGF1-165. After purification of antibodies with chromatograph of Protein G, a sandwich ELISA technique was established. Serum VEGF levels were evaluated in 229 adults and 291 HCC patients. Results SDS-PAGE displayed that the molecular weights of the expressed full length （His-Trx-VEGF1-165）, N-terminal （His-Trx-VEGF1-100） and C-terminal （GST-VEGF100-165） human VEGF fusion proteins were about 38KD, 31KD, and 33KD, respectively. Western blots confirmed that the prepared antisera were able to recognize both prokaryoticly and eukaryoticly expressed recombinant VEGF proteins. Assays of serially diluted His-Trx-VEGF1-100 by the established sandwich ELISA method showed that the linear range of the standard curve was 0.625-320 ng/mL, with the squared correlation coefficient R^2=0.991. Screening of a serum panel containing 291 serum samples of HCC patients and 229 health adults revealed that the average VEGF level in HCC patients was higher than that in healthy controls, with a statically significant difference. Conclusion The established sandwich ELISA reflects the level of serum VEGF and provide scientific basis for screening metastasis and recurrence of HCC using serum VEGF as an index.