组织醛固酮对白发性高血压大鼠心脏靶器官的损害和伊普利酮的保护作用

目的观察自发性高血压大鼠（Spontaneously hypertensive rats,SHR）中醛固酮和心室重构与心肌细胞凋亡的关系以及选择性盐皮质激素受体拮抗剂——依普利酮（Eplerenone,Epl）对心室重构和心肌细胞凋亡的抑制作用。方法20只8周龄雄性SHR随机分为2组,SHR—Epl组（Epl50mg／Kg）和SHR—C组（高血压对照组）,10只雄性WistarKyoto大鼠（WKY）作为正常血压对照组。用放射免疫方法检测血浆和心肌组织醛固酮浓度;通过检测天狼星红染色组织切片的胶原蛋白沉积分数来评价心肌纤维化;应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡;应用RT—PCR和Western—Blotting法检测Bel-2和BaxmRNA和蛋白表达。结果SHR—Epl组和SHR—C组较WKY组收缩压升高（P〈0．01）,但此两组间无差别。SHR—Ep1组、SHR—C组和WKY组的心重／体重分别是（3．48±0．56）,（4．04±0．27）和（2．78±0．12）mg／g;心肌细胞直径是（15．15±0．14）,（17．24±0．36）和（14．31±0．20）Ixm;胶原蛋白沉积分数是（3．81±0．30）,（4．39±0．23）和（3．48±0．23）％;凋亡指数是（0．36±0．21）,（1．95±0．17）和（0．21±0．05）％,SHR—C组均高于WKY组（P〈0．01）和SHR—Epl组（P〈005）,且SHR—Epl组高于WKY组（P〈0．05）。SHR—Epl组的Bcl-2／baxmRNA和蛋白表达比值高于SHR—C组（P〈0．05）。结论SHR心肌组织可以分泌醛固酮,且在心室重构和心肌细胞凋亡过程中起到重要的促进作用,Epl对SHR心室重构和心肌细胞凋亡有一定抑制作用。     

原发性高血压大鼠醛固酮与血管重构关系及依普利酮的治疗作用

目的 观察原发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)血管重构与醛固酮的关系以及依普利酮的治疗作用.方法 22只16周龄雄性SHR随机分为依普利酮治疗组[SHR-Epl组,n=11,100mg/(Kg·d)灌胃]和未治疗组(SHR组,n=11),WistarKyoto大鼠为正常对照组(n=12),SHR组和对照组同体积蒸馏水灌胃,共10周.采用放射免疫法检测血浆醛固酮和经反相高效液相提纯肠系膜动脉离体灌注液中血管组织醛固酮;取胸降主动脉和肠系膜上动脉制成石蜡切片,行Masson染色和HE染色,测量两动脉中膜厚度(MT)、中膜横截面积(MCSA)、中膜细胞平均核面积(MNA),分析血管重构指标与醛固酮水平的相关性.结果 SHR-Epl组和SHR组血浆及血管组织醛固酮均高于对照组(P＜0.05),且SHR-Epl组血浆醛同酮高于SHR组(P＜0.01),而血管组织醛固酮低于SHR组(P＜0.01).SHR-Epl组和SHR组胸降主动脉和肠系膜上动脉MT、MCSA和MNA均高于对照组(P＜0.01),并且SHR-Epl组低于SHR组(P＜0.01).胸降主动脉及肠系膜上动脉MT、MCSA、MNA与血浆醛固酮无相关,但与血管组织醛固酮呈正相关(r＞0,P＜0.01).结论 26周龄SHR大鼠血浆和血管组织醛固酮均升高,血管组织醛固酮水平的升高可能是加重血管重构的原因之一.依普利酮治疗可以降低血管组织醛固酮水平,改善血管重构.     

阿托伐他汀与自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡的关系研究

目的通过观察阿托伐他汀对自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats，SHR）心肌细胞凋亡的影响，初步探讨高血压心室重塑的可能机制。方法20只雄性SHR随机分为阿托伐他汀干预组（ATV组）和生理盐水组（NS组），以10只正常血压雄性WKY大鼠作为正常对照组（WKY组）分别给予阿托伐他汀和生理盐水灌胃，10周后进行心肌细胞凋亡等指标的测定。结果NS组大鼠和ATV组大鼠与WKY组大鼠相比，左室心肌细胞凋亡指数、血清及左室心肌中TNF-α蛋白、AngⅡ蛋白和血清中ET-1蛋白表达明显升高（P〈0．05），eNOS活性显著降低（P〈0．05），而ATV组大鼠与NS组大鼠比较，eNOS活性ATV组大鼠显著高于NS组大鼠（P〈0．05），余各指标均显著低于NS组大鼠（P〈0．05）。结论阿托伐他汀抑制高血压大鼠心肌细胞凋亡，减轻心室重塑和改善心功能可能与其抑制TNF-α、AngⅡ、ET-1的表达，提高eNOS活性有关。     

白藜芦醇对力竭运动大鼠心肌细胞凋亡影响

目的摘探讨白藜芦醇对力竭运动大鼠心肌细胞氧化应激、凋亡影响及机制。方法成年雄性SD大鼠随机分为5组:对照组、力竭运动组、白藜芦醇50、100、200 mg/kg组,检测大鼠心肌组织缺血缺氧面积、心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛、Ca~(2+)-ATPase含量,TUNEL法检测心肌细胞凋亡率,Western blot法检测心肌细胞Bax和caspase-3蛋白表达。结果与对照组比较,力竭运动组大鼠心肌缺血缺氧面积[(112.27±48.27)μm~2]与心肌组织丙二醛含量[(3.98±0.75)nmol/mgpro]明显升高、心肌组织SOD活性[(30.54±4.29)U/mgpro]与Ca~(2+)-ATPase活性[(0.32±0.03)mol/(mg·h)]明显下降、心肌细胞凋亡指数[(23.4±2.3)%]与心肌组织Bax、caspase-3蛋白表达[(1.28±0.32)、(1.59±0.12)]明显升高;与力竭运动组比较,200 mg/kg白藜芦醇组大鼠心肌缺血缺氧面积[(22.12±10.22)μm~2]与心肌组织丙二醛含量[(1.65±0.11)nmol/mgpro]明显减少、心肌组织SOD、Ca~(2+)-ATPase活性[分别为(69.57±9.02)U/mgpro、(0.72±0.11)mol/(mg·h)]明显升高、心肌细胞凋亡指数[(10.4±1.3)%]与心肌组织Bax、caspase-3蛋白表达[(0.36±0.11)、(0.62±0.13)]明显降低(P0.01);呈明显剂量效应关系。结论白藜芦醇可有效缓解大鼠力竭运动所致氧化应激状态,其机制可能与降低心肌组织Bax、caspase-3表达水平,减少心肌细胞凋亡有关。     

叶酸对柯萨奇病毒B3诱导乳鼠心肌凋亡保护作用

目的 探讨叶酸对柯萨奇病毒B3诱导的乳鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关基因与蛋白表达的影响.方法 取成熟健康雌性Wistar大鼠随机分为4组,分别为对照、叶酸、柯萨奇病毒B3及柯萨奇病毒B3+叶酸组;孕前灌胃给予叶酸2周,孕第5d腹腔注射给予柯萨奇病毒B3,连续5d;取自然分娩乳鼠心肌细胞,切片观察乳鼠心肌损伤;原位末端标记法( tunel)检测乳鼠心肌细胞凋亡;蛋白免疫印迹(western blot)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定乳鼠心肌细胞凋亡相关Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白及基因表达.结果 柯萨奇病毒组乳鼠心肌细胞损伤明显,凋亡细胞增加,加用叶酸后状态改善;病毒组乳鼠心肌细胞Bax、Caspase-3蛋白表达(0.608±0.060,0.951±0.038)及基因表达(0.951 ±0.098,0.960±0.074)高于病毒+叶酸组,病毒组Bcl-2蛋白表达(0.350±0.037)及基因表达(0.423±0.051)低于病毒+叶酸组.结论 怀孕母鼠早期感染柯萨奇病毒可致乳鼠心肌细胞凋亡增加,补充叶酸对乳鼠心肌细胞凋亡具有明显保护作用.     

联合瑞舒伐他汀和氨氯地平对老龄自发性高血压大鼠心脏保护作用的研究

目的研究联合瑞舒伐他汀和氨氯地平对老龄自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)心脏保护作用。方法选取20月龄雄性SHR及年龄匹配的雄性(Wistar Kyoto,WKY)大鼠,分为WKY对照组、SHR空白组、SHR瑞舒伐他汀组、SHR氨氯地平组、SHR瑞舒伐他汀-氨氯地平组(联合用药组),每组10只。氨氯地平10 mg/kg/d,瑞舒伐他汀钙40mg/kg/d,喂养10周。测量各组大鼠体重、鼠尾动脉血压、血脂;实验结束时心脏超声测量室壁厚度、左心室内径、射血分数、二尖瓣E/A及组织多普勒Sm、Em等指标,左心室插管及股动脉插管行血流动力学检查,测量左心室舒张末压(left ventricular enddiastolic pressure,LVEDP)、左心室内压上升最大速率(+dp/dtmax)、左心室内压下降最大速率(-dp/dtmax)、舒张时间常数τ。结果瑞舒伐他汀组用药前后无创血压无明显变化,氨氯地平和联合用药组用药前后血压明显下降;SHR空白组心肌间质纤维化较WKY对照组明显增加,而氨氯地平和瑞舒伐他汀组心肌间质纤维化较SHR空白组明显减轻,联合用药组SHR心肌间质纤维化较各单药组进一步显著减轻;各SHR组左心室舒张末期室间隔和左心室后壁较WKY对照组均显著增厚,左心室内径、射血分数、E/A、Sm各组间均未见显著差异,但SHR的E/Em显著升高,3用药组E/Em均较SHR空白组明显回落;各组间+dP/dtmax未见显著性差异。与WKY对照组比较,SHR空白组的-dP/dtMax、左心室舒张末压和舒张时间常数τ均显著升高,氨氯地平组和瑞舒伐他汀组较SHR空白组有明显回落,联合用药组则进一步降至与WKY对照组一致的水平;TUNEL染色心肌细胞凋亡指数明显升高,氨氯地平和瑞舒伐他汀组较SHR空白组明显下降,联合用药组则进一步降至WKY对照同等水平。结论瑞舒伐他汀在氨氯地平降压的基础上,可以进一步逆转老龄大鼠心肌纤维化,改善左心室舒张功能。     

不同有氧运动时间对小鼠心肌细胞凋亡的影响

目的比较不同有氧运动时间对小鼠心肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法 80只2月龄雄性清洁级BALB/c小鼠随机分为短期静止组、长期静止组、短期运动组和长期运动组各20只。短期静止组和短期运动组小鼠饲养和有氧训练3个月,长期静止组和长期运动组小鼠饲养和有氧训练6个月。分别采用TUNE法、RTPCR法和蛋白印迹法测定心肌细胞凋亡情况以及Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达。结果长期运动组小鼠心肌细胞凋亡指数较其他三组小鼠明显下降(P0.05),并且心肌Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平、Bcl-2/Bax比值较长期静止组及短期静止组小鼠显著上升(P0.05),而Bax mRNA及蛋白表达水平较长期静止组、短期静止组显著下降(P0.05)。与短期运动组比较,长期运动组Bcl-2/Bax mRNA比值及蛋白比值得到明显改善(P0.05)。短期运动组小鼠的心肌细胞凋亡指数以及心肌Bcl-2、Bax表达较短期静止组有所改善,但差异无统计学意义。结论 6个月有氧运动训练可有效阻止小鼠心肌细胞凋亡,改善心肌细胞Bcl-2、Bax表达和Bcl-2/Bax水平是其重要的作用途径。     

高温高湿环境对自发性高血压大鼠胸主动脉细胞凋亡的影响

目的探讨高温高湿环境对大鼠胸主动脉血管功能的影响及其可能机制,为防控炎热环境下心血管疾病的发病提供科学的理论依据。方法将正常对照大鼠(Wistar kyoto rats,WKY)和自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)各24只,按每天热应激时间的不同随机分为6组,分别为WKY对照组、热应激8 h组、热应激24 h组及SHR对照组、热应激8 h组、热应激24 h组,每组8只。对照组室温为24℃,热应激组室温为32℃,热应激时间为1周。热应激前后分别测定各组大鼠血压;热应激结束后,用20%乌拉坦(1 ml/100 g)麻醉大鼠,分离大鼠胸主动脉血管,采用器官浴槽测定胸主动脉血管环对去甲肾上腺素的反应性;采用RT-PCR法检测大鼠胸主动脉血管组织凋亡基因caspase-3、Bcl-2、Bax的m RNA表达量;采用Western-blot方法检测胸主动脉血管组织凋亡蛋白Bcl-2和Bax蛋白水平的变化。结果与热应激前比较,SHR热应激8 h和24 h组大鼠的收缩压和舒张压均明显升高,差异有统计学意义(P0.05或P0.05)。与WKY大鼠比较,SHR大鼠的胸主动脉血管反应性升高,差异有统计学意义(P0.05)。高温高湿环境可使大鼠胸主动脉caspase-3m RNA表达量升高,Bcl-2 m RNA表达量降低,Bax m RNA表达量升高,差异均有统计学意义(P0.05)。SHR热应激8 h和24 h组大鼠的Bax m RNA表达量高于SHR对照组,差异有统计学意义(P0.01)。结论高温高湿环境对大鼠胸主动脉血管有一定的损伤,这些损伤作用可能与机体适应程度及细胞凋亡机制有关。     

低硒与心肌细胞氧化损伤机制及凋亡相关基因的表达

目的观察低硒对大鼠心肌组织脂质过氧化物、心肌细胞超微结构及细胞凋亡相关基因的影响。方法建立对照组、低硒组、补硒组3个组别大鼠模型,结合光镜及电镜下心肌组织及其超微结构病理变化,对其血清硒、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）、心肌组织匀浆丙二醛（MDA）水平及心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax、P53蛋白表达进行检测及对比分析。结果低硒组大鼠血清硒水平及血清GPx活性水平均显著低于正常对照组和低硒加硒组,低硒组大鼠心肌组织匀浆MDA水平显著高于正常对照组和低硒加硒组。低硒组大鼠心肌线粒体膜及细胞核膜上清晰可见高电子密度反应产物聚集。低硒组大鼠心肌Bcl-2、Bax、P53的基因表达（PI％）均显著高于正常对照组大鼠;低硒组大鼠Bcl-2基因表达（PI％）显著低于低硒加硒组大鼠;而Bax、P53的基因表达（PI％）均显著高于低硒加硒组。结论低硒可以引起线粒体膜、细胞核膜磷脂过氧化损伤,进而造成心肌细胞线粒体损伤,同时可引起大鼠心肌细胞抑制凋亡基因Bcl-2和促进凋亡基因Bax、P53的基因表达相应增强,但BcF2／Bax比值相对下降,促进凋亡的发生。补硒可以诱导抑制凋亡基因Bcl-2基因表达的上调,使其基因表达增强,同时相对抑制促凋亡基因Bax和P53的表达。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡及其基因表达的影响

目的　观察 2型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡率、凋亡调控基因Bax、Bcl-2的表达变化及罗格列酮的干预作用。方法　8周龄SD大鼠高热量饮食一月后 ,腹腔注射小剂量链脲佐菌素 (STZ 3 0mg/kg) ,成模后分别于 12、2 4周宰杀动物 ,采用光镜、原位末端标记法、流式细胞术检测心肌细胞凋亡及心肌Bax、Bcl -2表达水平。结果　糖尿病大鼠心肌凋亡细胞数明显增多 ,Bax蛋白表达显著上调 ,Bax/Bcl-2比值增加 (P均 <0 0 1) ,Bcl -2蛋白表达有所下降 ,但无统计学意义。罗格列酮干预组凋亡率降低 (P <0 0 1) ,升高的Bax蛋白表达下调 ,降低的Bcl -2蛋白表达上调 ,但与糖尿病未治疗组均无统计学差异 (P >0 0 5 )。结论　心肌细胞凋亡在糖尿病大鼠心肌病变进程中起一定作用 ,罗格列酮可抑制心肌细胞凋亡 ,但与Bax、Bcl -2的调控关系不大。     

Candesartan治疗对SHR大鼠心肌AngⅡ及其受体表达的影响

目的观察Candesartan早期治疗对SHR大鼠心肌纤维化及心肌AT1、AT2表达的影响,探讨其抗心肌纤维化的机制。方法选取4周龄的雄性自发性高血压大鼠SHR（Spontanous Hypertensive Rat,SHR）及与之年龄性别相配的正常大鼠WKY;动物分组：WKY组、SHR组、Candesartan治疗组（SHR—Can组,给药4周后停药,继续喂养至24周）;尾袖法测定大鼠血压,断头取血,称量全心与左心质量,计算心体比与左室质量指数;放免法测定血浆及心肌AⅡ水平;免疫组化法检测心肌组织中AT1、AT2的表达;Western blotting法测定心肌AT1、AT2的表达水平;天狼星红染色测定心肌胶原指数。结果8周龄后,与SHR组相比,SHR—Can组血压明显下降并持续24周（P〈0．05）;HR-Can组心体比及左室质量指数明显低于SHR组（P〈0．05）;SHR组血浆中AⅡ水平与WKY组相比明显增高（P〈0．01）,SHR—Can组与SHR组相比降低（P〈0．05）;心肌组织AⅡ含量SHR—Can组明显低于SHR组（P〈0．05）。心肌免疫组化染色示：与WKY相比,SHR大鼠AT1、AT2明显增高（P〈0．05）;与SHR相比,SHR-Can组心肌中AT1、AT2明显减少（P〈0．05）。Western blotting结果示：SHR组AT1、AT2表达水平明显高于WKY组（P〈0．05）;SHR—Can组AT1、AT2表达水平明显降低（P〈0．05）。天狼星红染色心肌胶原含量SHR—Can组明显低于SHR组（P〈0．05）。结论Candesartan早期治疗可抑制SHR大鼠高血压的形成与发展,也可抑制SHR心肌纤维化并降低心脏指数,还能降低SHR心肌AT1、AT2的表达,Candesartan抑制心肌纤维化可能与心肌局部AT1、AT2表达水平有关。     

miR-221在急性心肌梗死大鼠中表达及其作用

目的探讨miR-221在急性心肌梗死(AMI)大鼠中的表达及其作用。方法在45只SD清洁级雄性大鼠中随机抽取35只通过冠状动脉左前降支结扎大鼠建立AMI模型,将其中建模成功的30只大鼠随机分为AMI组、对照组及抑制组,每组各10只;另抽取未建模的10只大鼠设立假手术组,采用冠状动脉左前降支穿线不结扎。其中对照组用携带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒空载体miR-221阴性对照以4×10~7病毒数量进行心肌组织局部注射转染,抑制组用携带miR-221 inhibitor慢病毒以4×10~7病毒数量进行心肌组织局部注射转染,AMI组和假手术组每天给予等量生理盐水,隔日1次连续2周;记录大鼠心脏功能。采用原位末端凋亡法(TUNEL)检测心肌凋亡指数(AI),RT-PCR法检测miR-221表达,Western blot法检测Bax、Bcl-2、PI3K和p-AKT蛋白表达。结果与假手术组大鼠miR-221表达量(0.18±0.02)比较,AMI组(1.16±0.12)和对照组(1.18±0.12)大鼠的miR-221表达量均升高(均P0.01),抑制组大鼠miR-221表达量(0.30±0.03)均低于AMI组和对照组大鼠的miR-221表达量(均P0.01);与假手术组大鼠Bax(0.13±0.01)、Bcl-2(0.53±0.05)、PI3K(0.45±0.04)和p-AKT(0.87±0.09)蛋白表达量比较,AMI组和对照组大鼠的Bax蛋白表达量均上调(均P0.01),Bcl-2、PI3K和p-AKT蛋白表达量均下调(均P0.01);抑制组大鼠较AMI组和对照组大鼠Bax表达量均下调(P0.01),Bcl-2、PI3K和p-AKT蛋白表达量均上调(P0.01)。结论 miR-221在AMI大鼠心肌组织中高表达,下调miR-221表达可通过激活PI3K/AKT信号通路调控下游蛋白Bax及Bcl-2的表达抑制AMI大鼠心肌细胞凋亡。     

miR-423-5p参与AMI大鼠心肌细胞凋亡的机制研究

目的探讨miR-423-5p对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法采用冠状动脉左前降支结扎法建立AMI大鼠模型,将其随机分为模型组、阴性组和干扰组,另设只开胸穿针不做冠状动脉结扎的假手术组,每组7只;采用Real-time PCR检测各组心肌组织中miR-423-5p的表达水平,心脏彩超检测各组大鼠的心脏功能,TCC法检测各组大鼠的心肌梗死面积,TUNEL法检测各组心肌细胞的凋亡指数,Western blot检测Cleaved caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白的表达水平。结果与假手术组相比,模型组和阴性组中miR-423-5p表达水平、左室收缩末期内径(LVDS)、左室舒张末期内径(LVDD)和Bcl-2蛋白表达水平均降低,而左室长轴缩短分数(FS)、左室射血分数(LVEF)、心肌细胞凋亡指数、心肌梗死面积和Cleaved caspase-3、Bax蛋白表达水平均明显升高(P0.05);与模型组和阴性组相比,干扰组中上述指标变化明显逆转(P0.05)。结论 miR-423-5p可通过下调Cleaved caspase-3、Bax和上调Bcl-2表达抑制AMI大鼠心肌细胞凋亡,改善心脏功能,从而减轻AMI。     

乙醇对心肌细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响

目的 研究乙醇对心肌细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响.方法 将雄性昆明种小鼠随机分为4组,每组6只,分别给予10%,20%,30%的乙醇和生理盐水腹腔注射,每日1次,连续30 d,通过心肌细胞的核固红-结晶紫和免疫组织化学染色,分析细胞凋亡及凋亡相关Bcl-2）和Bcl相关蛋白（基因--B细胞淋巴瘤/白血病-2基因（B-cenlymphoma/leukemia-2,Bcl-associated xprotein,Bax）的表达.结果实验组部分心肌细胞核染色质凝集,染为蓝紫色;定量分析显示,实验组异常的心肌细胞核明显多于对照组（P＜0.01）.实验组心肌细胞中Bcl-2的表达弱于对照组（P＜0.01）,且分布不均;而实验组心肌细胞中Bax的表达明显增强（P＜0.01）,可见棕色粗大颗粒.结论 心肌细胞凋亡在乙醇对心肌影响的发生机制上发挥一定的作用;随着乙醇浓度的增加,心肌细胞的凋亡征象愈加明显;乙醇引起的心肌细胞凋亡与凋亡相关基因Bcl-2和Bax的异常表达有关.     

核辐射接触人员淋巴细胞增殖与凋亡水平检测

目的 研究核辐射接触人员淋巴细胞增殖及凋亡状况.方法 选取某单位从事核作业的核辐射接触人员80名及30名非核接触人员,抽取空腹静脉血分别检测淋巴细胞增殖活性、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞凋亡抑制基因-2(Bcl-2)、Bax等指标.结果 接触组细胞增殖活性、PCNA、Bcl-2分别为(0.83±0.06),(53.97±7.57),(21.53±5.19),均较对照组[分别为(0.90±0.07),(60.37±7.75),(25.72±5.21)]明显降低(P<0.05);Bax(31.69±5.68)较对照组(26.38±5.55)明显增高(P<0.05).结论 长期低剂量核接触对从业人员淋巴细胞增殖及凋亡水平有一定的影响.     

通心络在糖尿病大鼠心肌细胞凋亡中的作用与机制

目的研究不同剂量通心络在糖尿病大鼠抗心肌细胞凋亡中的作用及机制。方法将雄性SD大鼠随机分为5组,分别为正常对照组、糖尿病模型组和通心络低剂量、中剂量、高剂量治疗组,分别灌胃给予对应药物。12周后取心肌进行HE染色观察,Western blot检测测Bax、Bcl-2及caspase3的表达。结果 HE染色观察心肌结构:糖尿病模型组较正常对照组心肌超微结构出现大量异常的病理改变,如心肌细胞肿胀变性、炎细胞浸润、成纤维细胞增生、血管内皮间质增厚等。通心络各治疗组较糖尿病模型组心肌结构的病理改变明显减轻。Western blot结果显示:与正常对照组比较,糖尿病模型组Bcl-2表达下降(P0.05),Bax、caspase3表达上升(P0.05);与糖尿病模型组比较,通心络治疗各组Bcl-2表达上升(P0.05),Bax、caspase3表达下降(P0.05);通心络高剂量组与低剂量组比较Bcl-2表达上升(P0.05),Bax、caspase3表达下降(P0.05);与通心络低剂量组比较,通心络中剂量组Bcl-2表达上升(P0.05)。结论中药通心络对糖尿病大鼠有减轻心肌细胞凋亡的效果,其机制可能与提高Bcl-2的表达、抑制Bax和caspase3的表达相关,通心络治疗具有一定的剂量依赖性。     

萝卜硫素对阿霉素所致体外培养心肌细胞凋亡的影响

目的观察萝卜硫素对阿霉素所致心肌细胞凋亡的保护作用。方法 2012年3月—2013年3月选择出生1~3 d的SD大鼠30只,进行心肌细胞培养。培养4 d后心肌细胞随机分为5组:正常对照组、阿霉素损伤组、萝卜硫素低剂量组、萝卜硫素中剂量组、萝卜硫素高剂量组各6只。作用48 h后行心肌细胞活力测定、超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量、心肌细胞凋亡率测定。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,P0.05为差异有统计学意义。结果阿霉素损伤组心肌细胞活力、SOD活性[0.296±0.011、(2.296±0.011)U/L]低于正常对照组(P0.05),高、中、低剂量萝卜硫素组心肌细胞活力(0.491±0.014、0.411±0.012、0.341±0.052)、SOD活性[(4.452±0.014)、(3.981±0.012)、(3.341±0.052)U/L]高于阿霉素损伤组(P0.05);阿霉素损伤组MDA含量、心肌细胞凋亡率[(3.247±0.241)μmol/L、(50.8±2.2)%]高于正常对照组(P0.05),高、中、低剂量萝卜硫素组MDA含量、心肌细胞凋亡率低于阿霉素损伤组(P0.05)。结论萝卜硫素可通过其抗氧化及抑制心肌细胞凋亡作用对阿霉素所致心肌损伤起到保护作用。     

心力衰竭家兔尾加压素Ⅱ心肌表达的研究

目的 研究血管活性物质尾加压素Ⅱ在心力衰竭家兔心肌表达的改变及意义.方法 (1)心肌梗死后6周心力衰竭家兔实验组和假手术对照组分别测定血流动力学指标;(2)制备心肌标本,免疫组化染色方法检测心肌细胞尾加压素Ⅱ表达.结果 (1)两组心脏重量比较:心力衰竭组左室重量明显高于对照组(P＜0.05);(2) 血流动力学变化:心力衰竭组心率、动脉血压、左室舒张末压较对照组明显升高,左室压力最大上升速率、最大下降速率与对照组比较明显下降;(3)心肌细胞尾加压素Ⅱ表达:心力衰竭组左室心肌细胞尾加压素Ⅱ蛋白表达的阳性细胞率(64.23±13.2)%,右室心肌(56.23±10.6)%;左右心室心肌细胞与对照组比较均有明显差异(P＜0.05).结论 心肌梗死后心力衰竭家兔心肌细胞尾加压素Ⅱ表达增加,推测尾加压素Ⅱ以自分泌和(或)旁分泌形式对心血管组织直接发挥作用.     

乌司他丁对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响

目的研究乌司他丁对心肌缺血再灌注凋亡现象的影响,探讨乌司他丁对心肌缺血的保护作用。方法检测磷酸肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)含量,了解心肌细胞损伤的程度,Tunel法观察心肌细胞凋亡情况,免疫组化检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的变化。结果显示缺血再灌注损伤组的CK、LDH度较对照组明显增高,其凋亡指数较对照组增多,Bcl-2的蛋白表达较对照组减少而Bax的蛋白表达较对照组增加。乌司他丁预处理组与缺血预处理组的CK、LDH浓度较缺血再灌注组明显降低,其凋亡指数较缺血再灌注组减少,Bcl-2蛋白表达较缺血再灌注组增加而Bax的蛋白表达较缺血再灌注组降低。结论乌司他丁预处理通过抑制心肌细胞的凋亡而对缺血再灌注的心肌起保护作用。     

超声对活鼠胚胎心肌细胞凋亡影响的研究

目的 观察诊断级超声波对活鼠胚胎心肌细胞Bcl-2及Bax表达及其凋亡的影响。方法 采用孕14d的Wistar大鼠36只,分为6组,分别为2.5MHz照射10 min、7MHz照射10 min、10 min对照组、2.5MHz照射40 min、7MHz照射40 min、40 min对照组(7MHz探头,Isppa=227W/cm²,Ispta=385mW/cm²;2.5MHz探头,Isppa=94.5W/cm²,Ispta=15.6mW/cm2)。采用免疫组化检测胎鼠心肌Bax及Bcl-2的表达,用TUNEL法及电镜检测胎鼠心肌细胞的凋亡情况。结果 统计显示同一样本不同胚胎间差异无显著性(P>0.05)。7MHz照射40 min组胎鼠心肌组织Bcl-2(+),Bax蛋白阳性(+),2.5MHz照射40min组胎鼠心肌组织Bcl-2阳性(+),Bax阳性(-),7MHz照射10min组胎鼠心肌组织Bcl-2(+),Bax蛋白阴性(-),2.5MHz照射10 min组胎鼠心肌组织Bcl-2阳性(+),Bax阳性(-),两组对照组两者均为(-);TUNEL试验及电镜显示7MHz照射40 min组较其他组凋亡差异有显著性(P<0.05),其余各组与对照组之间差异无显著性(P>0.05)。结论 较高强度诊断级超声波较长时间辐照可导致胎鼠心肌细胞凋亡,Bcl-2及Bax在该过程中起调节作用,小剂量的超声波可以促进Bcl-2表达来抑制细胞凋亡。