人脑胶质瘤高表达Snail促进肿瘤细胞的侵袭

目的:观察Snail蛋白在人脑胶质瘤组织中的表达情况,探讨Snail表达对人脑胶质瘤U251细胞侵袭的影响。方法:收集首都医科大学附属北京天坛医院及北京安贞医院神经外科手术切除的脑胶质瘤组织65例,应用免疫组织化学S-P法检测人脑胶质瘤组织中Snail的表达。体外化学合成Snail序列特异性小干扰RNA(Snail-siRNA),应用脂质体介导转染U251细胞;RT-PCR、Western blotting检测转染后U251细胞中Snail mRNA和蛋白、E-cadherin蛋白表达水平变化,并采用Transwell小室检测转染后U251细胞侵袭能力的变化。结果:与正常脑组织相比,人脑胶质瘤组织中Snail蛋白阳性表达率明显增强(66.2%vs0,P<0.01),并且Ⅰ～Ⅱ级的胶质瘤组织阳性Snail阳性率明显低于Ⅲ～Ⅳ级(44.8%vs83.3%,P<0.01)。Snail-siRNA转染抑制U251细胞中Snail mRNA和蛋白的表达。Snail-siRNA转染组U251细胞中E-cadherin蛋白的表达明显高于Ctrl-siRNA组与未转染组(0.64±0.21vs0.15±0.16,0.21±0.19,P<0.01)。Snail-siRNA转染显著抑制U251细胞的侵袭(87.0±2.4vs140.0±4.9,136.0±5.3;P<0.05)。结论:人脑胶质瘤组织高表达Snail蛋白,siRNA干扰Snail蛋白的表达可抑制胶质瘤U251细胞的侵袭。     

上皮性肿瘤细胞中Snail与E-cadherin的表达及其与体外侵袭性的关系

目的 研究上皮性肿瘤细胞Snail与E-cadherin的表达以及与瘤细胞表型、转移潜能的关系。方法 采用Northern blot、共聚焦激光显微镜研究6株不同组织来源、不同分化程度及转移潜能的上皮性肿瘤细胞、1株正常上皮细胞、1株成纤维细胞中Snail与E-cadherin mRNA和蛋白表达与定位;Boyden小室体外侵袭实验反映细胞的转移潜能。结果 在分化程度较高的癌细胞和对照正常上皮细胞中,E-cadherin mRNA与蛋白表达较强,而Snail表达缺如;在分化程度低、转移潜能高的癌细胞和对照成纤维细胞中,E-cadherin、Snail mRNA及蛋白表达与上述情况相反。E-cadherin多定位于细胞胞浆和胞膜,Snail主要定位于胞核和胞浆。结论 在上皮性肿瘤细胞中E-cadherin和Snail在mRNA与蛋白表达水平上存在逆反关系,且与细胞分化、转移潜能相关。     

组织因子途径抑制物-2表达与肝癌细胞体外侵袭能力的实验研究

目的:研究肝癌组织中组织因子途径抑制物-2(tissue factor pathway inhibitor-2 ,TFPI-2)基因的表达,同时探讨TFPI-2对肝癌细胞侵袭能力的影响.方法:应用原位杂交法和免疫组织化学法检测30例肝癌患者的癌组织和癌旁正常肝组织中TFPI-2基因和蛋白的表达;通过脂质体法将TFPI-2基因转染人HepG2细胞,RT-PCR检测转染前后TFPI-2 mRNA的表达;Transwell小室法测定TFPI-2基因转染前后肝癌细胞体外侵袭迁移能力的变化.结果: 肝癌组织中TFPI-2 mRNA与蛋白的表达水平明显低于癌旁正常肝组织(P < 0.05);成功转染TFPI-2基因的肝癌细胞HepG2中证实有TFPI-2 mRNA的表达;与未转染的细胞相比,转染TFPI-2的细胞体外侵袭能力明显下降,穿膜细胞数分别为45.2±5.6和 87.8±4.5 ,差异有统计学意义(P < 0.05);而迁移能力无明显变化,转染前后HepG2细胞的穿膜细胞数分别为140.4±7.4和152.8±9.6,差异无统计学意义( P > 0.05).结论:肝癌组织中TFPI-2表达明显降低,TFPI-2基因表达可明显抑制肝癌细胞的体外侵袭能力.     

共刺激分子B7-H3表达对肝细胞癌转移的影响及机制研究

目的 探讨共刺激分子B7-H3在肝细胞癌（HCC）转移中的作用及其机制。方法 选择术中或术后病理组织学证实存在转移的HCC患者37例（转移组）,以同期按1∶1匹配无转移患者（无转移组）为配对资料,采用免疫组化法检测HCC及其对应癌旁组织和转移灶中B7-H3的染色情况。设计针对B7-H3基因的shRNA沉默质粒转染肝癌HepG2细胞,采用RT-PCR和Western blotting分别检测转染前后上皮间质转化（EMT）机制相关分子E-钙粘蛋白、波形蛋白和N-钙粘蛋白mRNA和蛋白水平的变化。结果 原发灶边缘和转移灶较原发灶存在更高强度的B7-H3表达。转移组原发灶B7-H3染色强度明显高于无转移组（P=0.01）。B7-H3 shRNA转染组HepG2细胞中E-钙粘蛋白mRNA和蛋白表达分别为1.27±0.23和1.03±0.27,均高于对照质粒转染组（0.71±0.16,0.80±0.05）和未转染组（0.63±0.11,0.71±0.09）,差异有统计学意义（P＜0.05）。B7-H3 shRNA转染组波形蛋白mRNA和蛋白表达量为0.31±0.14和0.36±0.06,均低于对照质粒转染组（0.79±0.09,0.81±0.15）和未转染组（0.82±0.04,0.98±0.15）,差异有统计学意义（P＜0.05）。B7-H3 shRNA转染组N-钙粘蛋白mRNA和蛋白表达量为0.68±0.09和0.56±0.16,均低于对照质粒转染组（1.28±0.26,0.86±0.09）和未转染组（1.42±0.17,1.02±0.11）,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 共刺激分子B7-H3可通过调控EMT对HCC肿瘤转移发挥促进作用。     

肝细胞癌组织中FoxP3+调节性T细胞与上皮间质转化和患者预后的关系

背景与目的：肿瘤微环境中的调节性T细胞(tumor-infiltrating regulatory T cells,Tregs)在肿瘤的发生、发展中起重要作用,上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是恶性肿瘤获得转移和侵袭能力的重要生物学过程,但对肝癌浸润性Tregs与EMT之间的关系尚不清楚,本研究探讨原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织浸润的Tregs与EMT的关系及其临床意义。方法：采用免疫组化和核酸原位杂交技术检测74例原发性HCC和20例癌旁组织中Tregs标志物FoxP3和EMT标志物(E-cadherin、Vimentin蛋白和Snail mRNA)的表达。结果：HCC组织中每高倍视野的FoxP3+Tregs数为9.7(3.8~20.2)个,癌旁组织为1.7(0.5~4.2)个(P＜0.Ol),有门静脉癌栓和镜下癌栓的HCC组织Tregs数高于无门静脉癌栓和镜下癌栓组(P＜0.05),高Tregs组术后无瘤生存率、总体生存率均低于低Tregs组(P＜0.05,P＜0.01)。Spearman相关分析表明,E-cadherin阳性率分别与另两种EMT标志物呈负相关(Vimentin：r=-0.572,P＜0.01;Snail：r=-0.597,P＜0.01)。Tregs数量与E-cadherin呈负相关(r=-0.513,P＜0.05),与Vimentin和Snail呈正相关(Vimentin：r=0.598,P＜0.01;Snail：r=0.423,P＜0.05)。结论：HCC组织中浸润的Tregs有利于肝癌的侵袭、转移,与EMT关系密切,并且对患者预后判断有一定的参考价值。     

BCYRN1对结直肠癌转移表型的影响及其机制探讨

目的:探究长链非编码RNA脑细胞质RNA1(BCYRN1)在结直肠癌组织中的表达特征及其与细胞侵袭转移的关系。方法:35例结直肠癌组织及相应的癌旁正常组织收集于2016年3月至2017年12月期间经我院普外科行结直肠癌根治术的患者，采用实时荧光定量PCR（Real-time fluorescence quantitative PCR，RT-qPCR）技术检测结直肠癌及癌旁正常的组织中BCYRN1、Snail及E-cadherin的mRNA表达水平；比较不同来源组织中BCYRN1、Snail及E-cadherin表达差异并分析BCYRN1与Snail及E-cadherin表达的相关性；分析BCYRN1表达与患者病理资料间的关系。采用过表达载体慢病毒转染技术外源性上调结直肠癌细胞SW480中BCYRN1的表达以此作为实验组细胞，转染空白对照载体的SW480作为对照组细胞，Transwell侵袭及迁移实验检测细胞转移能力；RT-qPCR技术检测Snail及E-cadherin mRNA表达的变化；Western Blot实验检测Snail及E-cadherin蛋白表达水平的变化。结果:实验组Transwell基底膜侵袭及迁移细胞数显著高于对照组，实验组BCYRN1及Snail mRNA表达显著高于对照组，E-cadherin mRNA表达显著低于对照组，Snail蛋白表达显著高于对照组，E-cadherin蛋白表达显著低于对照组。BCYRN1及Snail mRNA在结直肠癌组织中表达显著高于癌旁正常的组织，E-cadherin mRNA在结直肠癌组织中表达显著低于癌旁正常的组织，结直肠癌组织中BCYRN1与Snail mRNA表达显著正相关，与E-cadherin mRNA表达显著负相关，结直肠癌组织中BCYRN1高表达患者TNM分期及浸润深度显著高于低表达患者。结论:BCYRN1可通过Snail/E-cadherin途径促进结直肠癌侵袭转移能力。     

siRNA沉默Snail基因对胃癌SGC7901细胞株增殖及侵袭能力的影响

目的探讨转录因子Snail在胃癌SGC7901细胞株增殖及侵袭转移过程中的作用,为胃癌的基因治疗提供有效靶点。方法化学合成针对Snail的靶向siRNA,同时以转染阴性对照siRNA、转染脂质体转染试剂和空白细胞作为对照。RT-PCR检测转染效率,MTT检测Snail siRNA对SGC7901细胞增殖能力的影响,Boyden chamber检测Snail siRNA对SGC7901细胞侵袭能力的影响。结果与各对照组相比,转染SnailsiRNA组SGC7901细胞Snail mRNA的表达下降,且随转染时间延长,Snail mRNA的表达下降明显(P<0.05)。MTT结果显示转染Snail siRNA组SGC7901细胞在转染后48、72 h较对照组增殖能力明显下降(P<0.05);Boyden chamber结果显示转染Snail siRNA组SGC7901细胞在转染后48、72 h较对照组穿膜细胞数明显下降(P<0.05);转染Snail siRNA组各时间点之间增殖能力和侵袭转移能力的差异也有统计学意义(P<0.05)。结论转录因子Snail在胃癌的发生、发展及侵袭转移中发挥重要作用,可作为胃癌基因治疗的有效靶点。     

胃癌细胞中COX-2通过NF-κB/Snail调控E-cadherin表达的机制

目的 探讨COX-2调控E-cadherin表达的相关信号通路及分子机制,揭示COX-2与胃癌侵袭转移的关系及作用机制.方法 采用不同浓度的选择性COX-2抑制剂塞来昔布干预人胃癌细胞株SGC-7901不同时间后,应用实时荧光定量RT-PCR法和Western blot法检测SGC-7901细胞中COX-2、NF-κB、Snail及E-cadherin mRNA和蛋白的表达情况.结果 随着塞来昔布作用剂量的增大和干预时间的延长,COX-2、NF-κB和Snail mRNA及蛋白的表达量均显著下降(P＜0.05),呈剂量和时间依赖性降低;E-cadherin mRNA及蛋白的表达量上升(P＜0.05),呈剂量和时间依赖性升高.采用Spearman相关分析,显示COX-2与NF-κB及COX-2与Snail蛋白表达呈正相关性(r =0.881,P＜0.01;r =0.839,P＜0.01);COX-2与E-cadherin蛋白表达呈负相关性(r=-0.814,P＜0.01).结论 COX-2可能通过NF-κB/Snail信号通路调控E-cadherin的表达,进而参与胃癌的浸润转移过程.     

Notch信号通路对肝癌细胞迁移的调控机制研究

目的：探讨Notch信号通路对肝癌细胞迁移的调控机制。方法体外培养HepG2、MHCC97H、Huh-7肝癌细胞株和HL-7702正常肝细胞株,Transwell小室检测细胞迁移能力,蛋白免疫印迹法检测各细胞系Snail、E-cadherin蛋白表达水平,实时定量RT-PCR检测Snail、E-cadherin mRNA表达水平;采用DAPT阻断Notch信号通路,比较其对细胞迁移能力和Snail、E-cadherin蛋白及mRNA表达水平的影响。结果 HepG2、MHCC97H、Huh-7细胞株迁移能力高于HL-7702细胞株（P﹤0.05）,HepG2、MHCC97H、Huh-7肝癌细胞株迁移能力比较差异无统计学意义（P﹥0.05）。HepG2、MHCC97H、Huh-7细胞Snail蛋白及mRNA高于HL-7702细胞,E-cadherin蛋白及mRNA表达低于HL-7702细胞（P﹤0.05）,HepG2、MHCC97H、Huh-7细胞间Snail、E-cadherin蛋白及mRNA表达差异无统计学意义（P﹥0.05）。HepG2、MHCC97H、Huh-7细胞经DAPT处理后迁移能力低于未经DAPT处理的细胞株（P﹤0.05）,HL-7702细胞DAPT处理与未经DAPT处理迁移能力比较差异无统计学意义（P﹥0.05）。DAPT处理后,HepG2、MHCC97H、Huh-7细胞株Snail蛋白及mRNA表达水平降低,E-cadherin蛋白及mRNA表达增加,与未经DAPT处理的细胞株比较差异具有统计学意义（P﹤0.05）,HepG2、MHCC97H、Huh-7细胞间Snail、E-cadherin蛋白及mRNA表达差异无统计学意义（P﹥0.05）。结论 Notch信号通路可能是通过调控Snail、E-cad-herin通路调控肝癌细胞的迁移过程。     

基因沉默HIF-1α在结直肠癌SW480细胞的缺氧与上皮-间质转化中的作用

目的通过基因沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α),研究其对结直肠癌SW480细胞的生长增殖、侵袭迁移能力,及对锌指转录因子(Snail)与上皮钙黏蛋白(E-cadherin)表达的影响和作用。方法利用氯化钴(CoCl2)化学诱导建立结直肠癌SW480细胞的缺氧模型,设计合成HIF-1α的小干扰RNA(HIF-1α-siRNA)并将其转染入细胞内。通过四甲基偶氮唑兰(MTT)法检测细胞的体外生长增殖活性,体外侵袭实验(Transwell法)检测细胞的体外侵袭迁移力,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫蛋白印迹(Western blot)检测细胞中HIF-1α、Snail及E-cadherinmRNA与蛋白的表达情况。结果 MTT法检测结果显示,缺氧条件下,基因干扰组的OD值及细胞存活率均降低(P<0.05);体外侵袭实验结果显示,基因干扰组侵袭迁移率降低(P<0.05);RT-PCR与Western blot检测结果显示,基因干扰组中HIF-1α和Snail mRNA和蛋白的表达明显降低,E-cadherin mRNA和蛋白的表达明显增强(P<0.05),对3种因子进行相关性分析,结果显示HIF-1α和Snail的表达呈正相关,HIF-1α和Snail均与E-cadherin的表达呈负相关(P<0.05)。结论 RNA干扰沉默HIF-1α基因可抑制结直肠癌SW480细胞的体外生长增殖和体外侵袭迁移能力,其机制可能是由于基因沉默HIF-1α导致细胞中Snail低表达,E-cadherin高表达,抑制了EMT发生、发展所致。     

Snail与E-cadherin在上皮性肿瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨Snail与E-cadherin蛋白表达在上皮性肿瘤中的临床意义。方法:应用免疫组织化学SP法,研究150例人肝癌、乳腺癌、宫颈癌、子宫内膜癌与卵巢癌临床标本及30例相应正常组织中Snail与E-cadherin蛋白的表达及定位。结果:在上述5种组织中,Snail主要表达于癌组织细胞核、细胞质,相应正常组织往往缺如,且在肝癌、乳腺癌中Snail表达与肿瘤转移有一定的相关性,并与E-cadherin表达呈负相关。E-cadherin定位于细胞膜,在肝、乳腺的正常组织中E-cadherin强表,相应癌组织中其表达往往下降或缺如;而在宫颈癌、内膜癌与卵巢癌中,E-cadherin表达与癌变无明显相关性。结论:Snail、E-cadherin的表达在肝癌、乳腺癌中具有重要意义,Snail有可能作为肝癌、乳腺癌肿瘤转移的生物学标志。     

Snail蛋白对E-钙黏蛋白表达的抑制在上皮性卵巢癌细胞侵袭及淋巴结转移中的作用

目的:探讨Snail蛋白对E-钙黏蛋白(E-cad)表达的抑制在上皮性卵巢癌细胞侵袭及淋巴结转移中的作用。方法:选择人卵巢癌细胞株C13,将Snail/siRNA、Snail/smRNA分别转入C13细胞,以PBS作为空白对照组,检测E-cad蛋白表达情况,采用Transwell上室进行细胞侵袭性及淋巴结转移实验分析。结果:C13细胞空白对照组、Snail/smRNA组、Snail/siRNA组,12 h穿膜细胞数分别为98.24±7.92、90.93±8.38和21.48±4.85,Snail/siRNA组与另两组相比有显著性差异(P＜0.05);Snail/siRNA组的转移细胞与另两组相比也有显著性差异(P＜0.05)。相对于Snail/smRNA组,Snail/siRNA组细胞E-cad的蛋白水平降低,两组差异有统计学意义(P＜0.05),而空白对照组则没有明显变化(P＞0.05）。结论:Snail蛋白对E-cad表达的抑制能抑制上皮性卵巢癌细胞的侵袭及转移,能够在分析卵巢癌转移分子机制时给予理论支持,为靶向逆转的研究提供了可供参考的靶点。     

非小细胞肺癌中Snail、HIF-1α和E-cadherin表达的临床意义及相关性

目的探讨Snail、乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、E-钙黏素(E-cadherin)在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达的临床意义及相关性。方法采用免疫组织化学法检测62例NSCLC患者肺癌组织和20例癌旁组织Snail、HIF-1α、E-cadherin蛋白表达,并分析与临床病理因素的关系。结果肺癌组织中Snail、HIF-1α及E-cadherin阳性表达率分别为64.5%、59.7%和54.8%,癌旁组织分别为15%、10%和100%。三种蛋白在肺癌组织及癌旁组织表达差异有统计学意义(P<0.05)。Snail和HIF-1α表达升高及E-cadherin降低与肺癌临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。HIF-1α和Snail表达均与E-cadherin表达呈负相关性(P<0.05),但HIF-1α和Snail表达未显示相关性(P>0.05)。结论 Snail和HIF-1α表达升高、E-cadherin表达降低与肺癌发生发展和转移有关,Snail、HIF-1α和E-cadherin检测有助于评估肺癌恶性程度及预后。     

缺氧及HIF-1α对结直肠癌上皮-间质转化及侵袭增殖的影响

目的 研究不同缺氧条件下缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、锌指转录因子Snail及上皮钙黏蛋白(E-cadherin)在结直肠癌SW480细胞中的表达水平,以及它们对细胞的增殖凋亡和侵袭迁移力的影响,探讨三者在结直肠癌的缺氧及上皮间质转化中的作用及可能机制.方法 利用氯化钴(CoCl2)化学诱导细胞缺氧模型,实验分组:常氧组、低氧组和无氧组.采用MTT法检测结直肠癌SW480细胞的生长增殖活性,体外侵袭实验(Transwell小室法)检测细胞的侵袭迁移力,流式细胞术(FCM)检测细胞的凋亡及周期变化,RT-PCR及Western blot检测细胞中HIF-1α、Snail及E-cadherin mRNA与蛋白的表达.结果 MTT结果显示随CoCl2浓度的增加结直肠癌SW480细胞的增殖活性逐渐增加(P＜0.05);Transwell结果显示随缺氧程度的增加穿过基质膜和聚碳酸酯膜的细胞数逐渐增多,侵袭迁移率增加(P＜0.05);FCM检测结果显示与常氧组比较,无氧组和低氧组G0/G1期SW480细胞明显减少,G2/S期细胞明显增多,细胞凋亡率降低(P＜0.05);RT-PCR与Western blot检测结果显示低氧组、无氧组与常氧组比较,SW480细胞内HIF-1α和Snail mRNA与蛋白的表达增加,E-cadherin mRNA和蛋白的表达降低(P＜0.05),且HIF 1 α和Snail的表达呈显著正相关.HIF-1α、Snail与E-cadherin的表达均呈显著负相关(P＜0.05).结论 缺氧及HIF-1α可促进结直肠癌SW480细胞株的体外生长增殖活性,抑制其凋亡,增强其体外侵袭迁移能力,其机制可能是缺氧诱导HIF-1α表达上调直接作用于SW480细胞产生,亦可能是缺氧或HIF-1α表达上调通过促进Snail表达,抑制E-cadherin表达,间接导致EMT的发生发展而产生.     

Snail蛋白表达与胃癌浸润转移的相关性研究

目的：研究Snail蛋白在胃癌中的表达与胃癌浸润转移的关系。方法：应用免疫组织化学sP法，检测Snail蛋白在87例胃癌和24例正常胃粘膜组织中的表达及其在细胞中的定位。结果：Snail蛋白高度表达于胃癌组织的细胞核、细胞质，正常胃粘膜组织中表达较少甚至不表达，阳性率分别为89．6％和29．1％，两者有统计学意义（P〈0．05）。Snail的表达与胃癌的组织学分化、浸润深度和淋巴结转移有关（P〈0．05）。结论：胃癌的侵袭转移与Snail蛋白的表达有关，Snail蛋白有可能成为胃癌侵袭转移的生物学标志。     

锌指转录因子Snail及E-钙黏附素在食管鳞癌中的表达及意义

目的：检测锌指转录因子Snail及E-钙黏附素（E-cadherin）蛋白在食管鳞癌中的表达,分析其与食管鳞癌侵袭、转移的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测Snail及E-cadherin在62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果：食管鳞癌组织中Snail及E-cadherin蛋白表达均与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关（P<0.05);在食管鳞癌癌变过程中Snail蛋白表达在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次降低,分别为79.0%（49/62）、48.4%（15/31）、17.7%（11/62）,组间比较差异有统计学意义（χ²=50.129,P<0.01）;而E-cadherin蛋白在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次升高,分别为40.3%（25/62）、71.0%（22/31）、95.2%（59/62）,组间比较差异有统计学意义（χ² =48.426,P<0.01）。进一步相关性分析表明：Snail和E-cadherin蛋白在食管鳞癌组织中的表达呈负相关。结论：Snail及E-cadherin蛋白的异常表达可能与食管鳞癌的发生、发展密切相关,二者的联合检测有可能作为食管鳞癌侵袭、转移的重要生物学标志。     

RECK及MMP-14在肝细胞肝癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨RECK及MMP-14与肝细胞肝癌（HCC）的侵袭转移以及预后的关系。方法：用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测61例HCC患者癌组织、癌旁肝组织以及18例正常肝组织中RECK及MMP-14的mR-NA表达情况;并分析RECK及MMP-14的mRNA的表达与相关临床参数的关系。结果：RECKmRNA在HCC组织中的表达水平显著低于在癌旁肝组织和正常肝组织中的表达水平（P〈0.01）,而在癌旁肝组织和正常肝组织中的表达水平差异无显著性（P〉0.05）;MMP-14mRNA在肝癌组织的表达水平显著高于在癌旁肝组织中的表达水平（P〈0.01）,在癌旁肝组织中的表达水平显著高于在正常肝组织中的表达水平（P〈0.01）。RECKmRNA和MMP-14mRNA在HCC组织中的表达呈负相关（P=0.027）,而两者在癌旁肝组织及正常肝组织中的表达无相关性。RECKmRNA在HCC组织中的表达水平与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移及术后复发等明显相关,而与肿瘤直径、肿瘤个数、血清AFP水平、肿瘤分化程度以及癌旁有无肝硬化等无明显关系。MMP-14mRNA在HCC组织中的表达水平与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移、术后复发、肿瘤直径大小明显相关,而与肿瘤数目、血清AFP水平、肿瘤分化程度以及癌旁有无肝硬化等无明显关系。结论：本研究提示RECK及MMP-14的mRNA表达与HCC的浸润转移有关,RECK及MMP-14可能在肝细胞肝癌的发生、发展中起重要作用,有可能作为预测肝癌复发、转移的参考指标。     

柠檬酸合成酶对卵巢癌SKOV3细胞上皮间质转化的影响

目的:探讨柠檬酸合成酶（citrate synthase,CS）对上皮性卵巢癌（epithelial ovarian cancer,EOC）细胞SKOV3上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transformation,EMT）及生物学行为的影响。方法:利用Lipofectamine 2000体外瞬时转染化学法合成的CS siRNA,通过实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和Western blot检测转染效率;Transwell实验检测转染前后SKOV3细胞侵袭和迁移能力的变化;Western blot检测转染前后上皮标记分子E-cadherin、间质标记分子Vimentin蛋白水平和Wnt通路关键分子β-catenin蛋白水平,实时荧光定量PCR检测转染前后EMT相关转录因子Slug、Snail和Twist的mRNA水平。结果:siRNA干扰序列显著降低SKOV3细胞中CS表达;CS低表达显著抑制SKOV3细胞的侵袭和迁移能力,促进上皮标记分子E-cadherin表达,抑制间质标记分子Vimentin表达,降低Wnt通路关键分子β-catenin表达;EMT相关转录因子Snail和Twist表达显著降低(P＜0.001,P＜0.01),Slug表达下降不显著(P＞0.05)。结论:CS低表达显著抑制卵巢癌SKOV3细胞EMT,其机制可能是通过降低Snail和Twist转录因子实现的,为卵巢癌的转移治疗提供初步的实验及理论基础。     

EHD2与E-cadherin 在肝细胞肝癌中的表达及其相关性

  目的  研究EHD2、E-cadherin蛋白在肝细胞肝癌中的表达及两者相关性。  方法  Western blot法和免疫组织化学法检测肝细胞肝癌及对应的癌旁组织中EHD2与E-cadherin表达情况,分析两者的相关性及与患者临床病理学参数及预后的关系。  结果  EHD2、E-cadherin蛋白在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织,且两者的表达水平与肝癌的组织分化程度、静脉侵袭及淋巴结转移密切相关（P＜0.05）,与年龄、性别、肿瘤大小等参数无相关性。EHD2、E-cadherin低表达与肝癌患者的不良预后显著相关（P＜0.05）。  结论  EHD2、E-cadherin蛋白表达与肝细胞肝癌的发生发展有关,两者的联合检测有助于肝细胞肝癌的诊断、恶性程度及预后的评估。      

喉鳞癌组织Snail mRNA与E-cadherin mRNA表达及其临床意义的探讨

目的:观察Snail mRNA与E-cad-herin mRNA在喉鳞癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:应用原位分子杂交方法,分别检测Snail mRNA与E-cadherin mRNA在60例喉鳞癌、30例不典型增生和20例慢性炎症组织中的表达。结果:Snail mRNA在喉鳞癌中的表达高于不典型增生和慢性炎症组织中的表达,而E-cadherin mRNA在喉鳞癌中的表达低于不典型增生和慢性炎症组织中的表达,差异均有统计学意义,P值均<0.05;Snail mRNA、E-cadherin mRNA与喉鳞癌甲状软骨累及淋巴结转移、TNM分期、T分期、临床分型、病理分级有关(P值均<0.05),而两者均与性别、年龄、肿瘤大小无关,P值均>0.05;喉鳞癌Snail mRNA和E-cadherin mRNA的表达呈明显负相关,r=-0.504,P<0.05。结论:E-cadherin mRNA低表达与Snail mRNA高表达可能是喉黏膜恶性转变以及喉鳞癌发生浸润转移的重要生物学标志,联合检测E-cadherin mRNA和Snail mRNA对预测喉鳞癌浸润转移有重要意义。