双氢青蒿素对体外培养阴道毛滴虫作用的电镜观察

目的 观察双氢青蒿素（DHA）对阴道毛滴虫超微结构的影响。 方法 在2.5×10⁶个／ml滴虫培养液中加入双氢青蒿素1 mg／ml。 37 ℃ 培养3 和3.5 h, 进行扫描电镜观察，培养2.5和4 h进行透射电镜观察。 结果 双氢青蒿素作用滴虫后，虫体细胞膜受损明显，表面皱褶加深、表膜凹陷，并出现裂隙。细胞核膜破损，细胞核和细胞质均出现裂隙。内质网呈囊状肿胀，氢化酶体受损、变形。细胞质从细胞膜破裂处溢出。 细胞膜剥脱后细胞核、氢化酶体和盾等结构裸露。最后虫体变性、坏死。 结论 双氢青蒿素能破坏阴道毛滴虫膜系结构并导致虫体裂解死亡。     

双氢青蒿素对阴道毛滴虫微丝作用的观察

目的　探讨双氢青蒿素对阴道毛滴虫的杀伤效果及作用机制。　方法　用含双氢青蒿素的肝浸汤培养基培养阴道毛滴虫 ,观察药物对滴虫的杀灭效果 ;用激光共聚焦显微镜观察双氢青蒿素作用前后滴虫微丝的变化。　结果　随药物作用时间延长和药物浓度增加 ,阴道毛滴虫死亡率增高。同一时间随着药物浓度的增高 ,虫体死亡率升高 (P <0 .0 1)。作用 6h ,双氢青蒿素 0 .6mg ml虫体死亡率是 2 0 % ,而 1.0mg ml时高达 85 % ;同一药物浓度随着作用时间延长 ,滴虫死亡率也升高 (P <0 .0 5 ) ,药物 0 .8mg ml时 ,6h、8h、10h、12h和 14h死亡率分别是 43 %、68%、86%、97%和 10 0 %。药物作用后滴虫微丝排列疏松 ,有空隙生成。排列杂乱无序。　结论　双氢青蒿素可作用于滴虫微丝结构 ,破坏微丝 ,具有较强的杀滴虫作用。     

白头翁体外抗阴道毛滴虫的效果及扫描电镜观察

目的　探讨白头翁杀阴道毛滴虫作用机制。　方法　利用不同浓度白头翁水提液 (PWE)进行体外抗滴虫实验 ,并用光镜及扫描电镜观察白头翁作用后滴虫的形态变化。　结果　随着药物作用时间的延长和药物浓度的增加 ,滴虫死亡率增高。 5mg/ml药物作用 8h ,滴虫死亡率达到 10 0 %。白头翁水提液 2 4h杀灭滴虫的最低有效浓度为 1.2 5mg/ml。药物作用后虫体内空泡增多 ,颗粒堆积 ,虫体裂解。扫描电镜显示 ,虫体表面皱褶加深 ,表膜凹陷、剥脱、破裂 ,鞭毛和波动膜受损。　结论　白头翁可直接作用于虫体表膜 ,具有较强的抗滴虫作用。     

治糜灵栓体外抗阴道毛滴虫的作用

目的 观察治糜灵栓体外杀灭阴道毛滴虫效果,为临床应用提供依据.方法 以实验药物治糜灵及对照药物甲硝唑配制大豆蛋白胨液体药物培养基,接种临床分离的阴道毛滴虫,培养24 h,观察药物的抗滴虫作用.结果 随着药物作用时间的延长和浓度的增加,滴虫死亡率升高,虫体裂解,密度下降.治糜灵对阴道毛滴虫的最低有效浓度为15 mg/ml.结论 治糜灵对阴道毛滴虫有较强的抑制作用.     

白头翁体外抗阴道毛滴虫的效果及扫描电镜观察

目的 探讨白头翁杀阴道毛滴虫作用机制。方法 利用不同浓度白头翁水提液(PWE)进行体外抗滴虫实验，并用光镜及扫描电镜观察白头翁作用后滴虫的形态变化。结果 随着药物作用时间的延长和药物浓度的增加，滴虫死亡率增高。5mg／ml药物作用8h，滴虫死亡率达到100％。白头翁水提液24h杀灭滴虫的最低有效浓度为1．25mg／ml。药物作用后虫体内空泡增多，颗粒堆积，虫体裂解。扫描电镜显示，虫体表面皱褶加深，表膜凹陷、剥脱、破裂，鞭毛和波动膜受损。结论 白头翁可直接作用于虫体表膜，具有较强的抗滴虫作用。     

葡萄糖酸—δ—内酯体外抗阴道毛滴虫作用的研究

目的 通过对葡萄糖酸－δ－内酯体外抗阴道毛滴虫作用的实验观察,为该药的临床应用提供依据。方法 以实验药物葡萄糖酸－δ－内酯及对照药物甲硝唑制成大豆蛋白胨液体药物培养基,接种临床分离的阴道毛滴虫,进行24h培养,观察药物的抗滴虫作用。结果 随着药物作用时间的延长和浓度的增加,滴虫死亡率升高,虫体裂解,密度下降。该药对阴道毛滴虫的最低有效浓度为16mg/ml。结论 葡萄糖酸－δ－内酯对阴道毛滴虫有较强的抑制作用。     

葡萄糖酸-δ-内酯体外抗阴道毛滴虫作用的研究

目的通过对葡萄糖酸-δ-内酯体外抗阴道毛滴虫作用的实验观察,为该药的临床应用提供依据.方法以实验药物葡萄糖酸-δ-内酯及对照药物甲硝唑制成大豆蛋白胨液体药物培养基,接种临床分离的阴道毛滴虫,进行24 h培养,观察药物的抗滴虫作用.结果随着药物作用时间的延长和浓度的增加,滴虫死亡率升高,虫体裂解,密度下降.该药对阴道毛滴虫的最低有效浓度为16 mg/ml.结论葡萄糖酸-δ-内酯对阴道毛滴虫有较强的抑制作用.     

硝唑尼特体外抑杀阴道毛滴虫效果观察

目的观察硝唑尼特体外抑杀阴道毛滴虫效果。方法分别以2、1、0.5、0.25、0.125、0.062 5和0.031 25mg/ml,硝唑尼特作用于阴道毛滴虫携病毒株与无病毒株12和24 h,观察体外抑杀效果。实验以甲硝唑作为药物对照。结果随着药物浓度的增加和作用时间的延长,硝唑尼特对两种虫株的抑制率均增高,显微镜下可见滋养体活力下降,培养基底部有死亡虫体沉淀,染色后可见滋养体细胞质内有空泡,鞭毛脱落,虫体变形,细胞核变形,细胞膜破裂,细胞溶解。经统计学分析,硝唑尼特对阴道毛滴虫两种虫株的抑制率差异无统计学意义(χ2=0.12,P>0.05)。在24 h时,甲硝唑对阴道毛滴虫无病毒株抑制率为81.06%,硝唑尼特(1 mg/ml)对阴道毛滴虫两种虫株的抑制率可达100%,硝唑尼特对阴道毛滴虫无病毒虫株的抑制率显著高于甲硝唑(χ2=4.43,P<0.01)。结论硝唑尼特对阴道毛滴虫两种虫株均有较好的抑杀作用,其中对无毒株阴道毛滴虫的抑杀效果硝唑尼特优于甲硝唑。     

甲硝唑对阴道毛滴虫作用的流式细胞分析

目的 :了解甲硝唑对阴道毛滴虫的作用机制。方法 :应用流式细胞术 ( FCM)检测阴道毛滴虫的细胞周期和甲硝唑对该虫细胞周期的影响。结果 :对照组中 ,阴道毛滴虫细胞周期的时相分布为 G0 /G1期 70 .3%,S期 13.6% ,G2 M期 13.5%和自然死亡率为 2 .8%左右。各用药组虫体的细胞周期时相因药物浓度和随时间推移而改变。尤其给药 9h后 ( 2 0 μg/ml) ,虫体死亡率为4 6.6% ,与对照组相比有显著性差异 ( P<0 .0 1),G0 /G1期和 G2 M期虫体明显减少 ,S期出现积累。结论 :甲硝唑对阴道毛滴虫 G2 M期有抑制作用。     

黄藤素体外抗阴道毛滴虫的药效学研究

目的体外测试黄藤素的抗阴道毛滴虫活性。方法设计实验组、已知疗效对照组和阴性对照组,溴甲酚紫比色法及酶标仪体外测定药物作用于阴道毛滴虫后不同时间、不同药物浓度的培养基A490值,经线性回归分析,绘制IC50曲线图,进行药效学比较分析。结果体外培养2h,甲硝唑阴道毛滴虫药效较黄藤素快;第4h～12h,两种药物的IC50值较接近,此时段内两种药物的抗滴虫药效相当;第24h,黄藤素的IC50值为6.64μg/ml,低于甲硝唑的IC50值(9.53μg/ml);第48h,甲硝唑的IC50值下降至5.38μg/ml,黄藤素的IC50值为6.95μg/ml。结论黄藤素体外抗阴道毛滴虫的活性与甲硝唑相当,是一类理想的抗阴道毛滴虫候选药物,具有良好的开发利用前景。     

扁桃酸对感染小鼠腹水中弓形虫速殖子超微结构的影响

为探讨扁桃酸的杀虫机制,应用透射电镜观察扁桃酸对感染弓形虫小鼠治疗24h、72h和死亡后弓形虫速殖子的超微结构变化,扁桃酸20mg/ml,0.25ml/只,2次/d经口灌服和经尾静脉注射途径给药,同时用乙胺嘧啶5mg/ml,0.25ml/只,1次/d作为药物对照。结果显示,扁桃酸在不同时期对弓形虫的超微结构均有破坏作用,且随药物作用时间延长,其杀虫作用增强。扁桃酸主要破坏虫体的细胞膜、细胞质中的线粒体、棒状体和内质网等,致密颗粒减少或消失。虽然乙胺嘧啶较扁桃酸对虫体的破坏程度稍强,但乙胺嘧啶在杀灭虫体的同时也破坏了腹水中正常细胞,而扁桃酸对正常细胞几乎无损伤。结果表明,扁桃酸的杀虫机制主要是破坏虫体细胞膜、细胞器和染色质,从而破坏了虫体赖以生存的理化环境和物质能量的代谢,破坏了虫体的遗传物质和遗传信息,抑制虫体的增殖。扁桃酸是高效低毒的抗弓形虫药物。     

阴道毛滴虫双链RNA病毒感染及其对甲硝唑耐药性的影响

目的调查河南地区阴道毛滴虫临床分离株阴道毛滴虫病毒感染情况,探索病毒感染对阴道毛滴虫甲硝唑耐药性的影响。方法 TYM(trypticase-yeast extract-maltose)无菌培养基培养阴道毛滴虫临床分离株,达到纯培养后提取虫体总核酸(DNA和RNA),进行1%琼脂糖凝胶电泳分析;连续稀释法测量每株虫体的甲硝唑最小致死浓度。结果对30株阴道毛滴虫总核酸进行电泳,其中6株有5.5 kb双链RNA病毒带,病毒感染率为20.0%。阴道毛滴虫病毒阴性组甲硝唑最小致死浓度为(24.27±20.899)μg/ml,病毒阳性组为(5.68±3.588)μg/ml,差异有统计学意义(t=2.143,P<0.05)。结论河南地区阴道毛滴虫临床分离株中检测到阴道毛滴虫病毒,无阴道毛滴虫病毒寄生的虫体易发生甲硝唑抵抗。     

铁离子对体外培养的阴道毛滴虫生长的影响

目的研究铁离子对体外培养的阴道毛滴虫生长的影响。方法在TYM(trypticase-yeast extract-maltose)培养基(pH6.0)中,分别加入100、200、300和400μmol/L铁离子,并设不加铁离子组为对照组,阴道毛滴虫初始浓度为1×105/ml,于37℃定量纯培养。采用台盼蓝染色法镜下观察并计数活滴虫数和死滴虫数,绘制生长曲线和存活率曲线,并计算对数生长期内世代时间。通过连续稀释的方法测定在加入200μmol/L铁离子培养基和对照组培养基中甲硝唑对阴道毛滴虫的最小致死浓度(minimal lethal concentration,MLC)。结果在加入100、200、300和400μmol/L铁离子的培养基中,阴道毛滴虫均于40h达最高密度,分别为2.9×106、3.2×106、3.1×106和2.8×106/ml,对照组阴道毛滴虫于54h达最高密度,为2.5×106/ml。400μmol/L铁离子组阴道毛滴虫的世代时间为(6.8±0.7)h,较100～300μmol/L铁离子组的世代时间[(4.8±0.3)、(4.8±0.2)和(5.0±0.4)h]延长(均P﹤0.05),而100～400μmol/L铁离子组的世代时间均短于对照组[(10.2±3.1)h](均P﹤0.05)。在加入200μmol/L铁离子的培养基中阴道毛滴虫的甲硝唑最小致死浓度为(23.44±11.56)μg/ml,显著低于对照组[(31.25±15.44)μg/ml](均P﹤0.05)。结论阴道毛滴虫在加入100～400μmol/L铁离子的TYM培养基中生长较快,且甲硝唑对阴道毛滴虫的最小致死浓度较小。     

替硝唑体外抗毛滴虫效果观察

本文观察了替硝唑(Tinidazole)对体外培养的两株阴道毛滴虫和一株人毛滴虫的作用.该药与阴道毛滴虫共同培养,48h的100％致死浓度为20μg/ml,在2μm/ml浓度时,有一定程度的抑制作用;与甲硝唑对比,替硝唑的作用低一个稀释度。该药与人毛滴虫共同培养,48h的100％致死浓度为20μg/ml,在4μg/ml浓度时,有一定程度的抑制作用,与甲硝唑对比,作用相同。     

青蒿素衍生物体外抗卡氏肺孢子虫作用的扫描电镜观察

目的 观察体外培养的卡氏肺孢子虫(Pc)经双氢青蒿素、青蒿琥酯作用后不同时相虫体表面结构变化。方法 将Pc接种入含HepG-2细胞的培养皿内并分别加入双氢青蒿素50μmol/L、青蒿琥酯100μmol/L、喷他脒15μmol/L、0.3％乙醇与空白对照。双氢青蒿素组于用药后1、2、4、8、12、16h作扫描电镜观察,后4组于用药后12h取样作扫描电镜观察。结果 双氢青蒿素作用2h后,Pc表面开始出现损伤,最初为表面绒毛脱落,残存绒毛肿胀呈球状,虫体体积增大。随着时间延长,虫体表面损伤明显,8h后表膜出现大小不等孔洞。青蒿琥酯组改变相同,但较轻微。结论 青蒿素衍生物可引起Pc虫体表膜损伤,通透性增加,功能障碍。     

鸡冠花体外抗阴道毛滴虫作用研究

为探讨鸡冠花体外抗阴道毛滴虫的作用,将不同浓度的鸡冠花水提物作用于体外培养的阴道毛滴虫,记录药物作用后不同时间阴道毛滴虫死亡率。结果随着药物作用时间的延长和药物浓度的增加,阴道毛滴虫死亡率增高。鸡冠花水提物杀伤阴道毛滴虫的最低有效浓度为5.00 mg/ml,鸡冠花作用后的阴道毛滴虫体内充满大量颗粒和空泡,部分虫体裂解、内容物外溢。表明鸡冠花具有较强的抗阴道毛滴虫作用。     

白头翁对阴道毛滴虫氨基酸代谢的影响

目的探讨白头翁对阴道毛滴虫氨基酸代谢的影响。方法采用浓度为0.625mg/ml白头翁水提液进行体外抗阴道毛滴虫实验,用氨基酸色谱测定仪检测白头翁作用后滴虫的氨基酸种类和含量变化。结果加药组阴道毛滴虫含16种氨基酸,与未加药对照组相同。加药组阴道毛滴虫氨基酸含量除蛋氨酸外均显著减少。结论白头翁可干扰阴道毛滴虫氨基酸的代谢。     

白头翁体外抗阴道毛滴虫透射电镜观察

目的 探讨白头翁杀阴道毛滴虫作用机制。方法 用浓度1．25mg／ml白头翁水提液进行体外抗滴虫实验，并用透射电镜观察白头翁作用后滴虫的超微结构变化。结果 在约物作用下，滴虫粗面内质网排列紊乱、脱颗粒，核糖体解聚，虫体内空泡增多、变大。随着药物作用时间的延长，高尔基复合体肿胀变形，细胞核核质疏松，核膜不完整，最终虫体破裂，内部结构不能分辨。结论 白头翁具有较强的抗滴虫作用，可损伤虫体内部结构，多种细胞器受损。     

塞克硝唑苯甲酸酯体外抗阴道毛滴虫作用的研究

目的 研究塞克硝唑苯甲酸酯体外抗阴道毛滴虫的效果。 方法　 以肝浸汤培养基培养阴道毛滴虫,将滴虫混悬液接种于96孔培养板中,分塞克硝唑苯甲酸酯组、塞克硝唑组、甲硝唑组、不加药物的对照组及空白组,通过四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）观察塞克硝唑苯甲酸酯的体外抗滴虫效果。另将滴虫混悬液接种于试管中,分塞克硝唑苯甲酸酯组、塞克硝唑组、甲硝唑组和不加药物的对照组,通过计数法观察塞克硝唑苯甲酸酯的体外抗滴虫效果。 结果　 培养24 h后,塞克硝唑苯甲酸酯浓度为0.15、0.31、0.63、1.25、2.50、5.00、10.0及20.0 μg/ml时呈浓度依赖性地抑制滴虫增殖（t=9.02, P<0.01）,MTT法相对抑制率分别为14.6%、28.7%、31.3%、60.4%、89.0%、89.2%、95.6%和100%;计数法相对抑制率分别为18.2%、31.1%、39.7%、68.8%、84.6%、90.1%、94.6%和100%。培养6～24 h,呈时间依赖性地抑制滴虫增殖。体外抗阴道毛滴虫的最低杀灭浓度为20 μg/ml,最低抑制浓度为0.15 μg/ml。 结论　 塞克硝唑苯甲酸酯具有较强的体外抗滴虫效果。     

中草药白头翁对阴道毛滴虫蛋白的影响

采用浓度为0.625mg/ml白头翁水提液进行体外抗阴道毛滴虫(简称滴虫)实验,药物作用2h和4h后,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测白头翁作用后滴虫可溶性蛋白组成和含量变化。结果显示,正常滴虫蛋白图谱共有28条蛋白带。药物作用2h,与对照组比较,5条蛋白带含量增加,4条蛋白带含量明显降低。药物作用4h,与对照组比较,5条蛋白带含量增加,5条蛋白带含量明显降低,另出现一条新蛋白带。