猪去氧胆酸的纯化工艺

目的研究猪去氧胆酸中的杂质成分和纯化方法。方法运用重结晶和柱层析法进行分离和纯化。结果与结论从猪去氧胆酸中分离出一种主要杂质,建立了纯化猪去氧胆酸的方法。     

Identification of hypoxanthine in bovine follicular fluid

Bovine follicular fluid (bFF) blocks the occurrence of spontaneous germinal vesicle breakdown (GVBD) of isolated mouse oocytes. One of the active factors was purified by ultrafiltration through a PM-10 membrane filter, gel filtration through Sephadex G-25, and HPLC using a reversed-phase ODS-3 column and a Superose 12 column. This factor was identified as hypoxanthine by gas chromatography and mass spectrometry. The purified substance and hypoxanthine showed the same retention time on HPLC, and identical UV absorbance and mass spectra. There are other oocyte maturation inhibitors in follicular fluid that should be identified.     

芦荟大黄素的提取分离与含量测定

目的:建立芦荟大黄素的提取方法及含量测定方法.方法:采川葡聚糖凝胶分子筛及重结品的方法对芦荟中芦荟大黄素进行分离纯化,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定结构,并建立其薄层色谱(TLC)定性鉴别及高效液相色谱含量测定方法.结果:从芦荟中分离并鉴定出芦荟大黄素.TLC鉴别斑点清晰;芦荟大黄素进样浓度在17.2～258μg.mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9996),平均回收率为99.32%,RSD=1.48%(n=9).结论:本方法简便、准确,可用于芦荟大黄素的质量控制.     

穿龙薯芋中两种水难溶性甾体皂甙的结构研究

中国科学院成都生物研究所等单位用四川汶川,茂汶产的穿龙薯芋根茎为原料,研制成治疗冠心病,抗动脉粥样硬化的药——“穿龙冠心宁”,经鉴定有一定疗效。我们从“穿龙冠心宁”的原料穿龙薯芋(Dioscorea nipponica Makino)中提取出两种水难溶组分:其一为无色针状晶体,熔点275.5～280℃(分解),[α]_D~(21)-118°(C=0.39吡啶),易溶于吡啶,氯仿一甲醇(3:1)混合液和热甲醇,稍溶于氯仿,微溶于乙醇,不溶于水,命名为Da;其二亦为无色针状晶体,熔点293～295℃(分解),[α]_D~(21)-81°(C=0.31吡啶),易溶于吡啶,热正丁醇—乙醇—水(3:1:1)混合液,可溶于甲醇,微溶于乙醇,不溶于水,命名为Db。Da、Db与水溶性成分共存时,则具有较大的水溶性。     

Continuous counter current extraction, isolation and determination of solanesol in Nicotiana tobacum L. by non-aqueous reversed phase high performance liquid chromatography

A method of continuous counter current extraction in a large-scale production of solanesol from tobacco leaves was developed. The crude extract containing 15-20% solanesol was subjected to a series of steps, viz., saponification, solvent recrystallization and column chromatography. The pure material was characterized by FT-IR, ESI-MS, 1H NMR and 13C NMR spectrometry. The analysis was carried out by a simple and rapid non-aqueous reversed-phase high performance liquid chromatographic method on a Hypersil BDS C18 column (250 mm x 4.6mm, particle size 5 microm) with isopropyl alcohol-methanol (60:40, v/v) as mobile phase and detection at 215 nm. The product purity was between 95 and 98% (w/w) as determined by HPLC.     

微紫青霉对莪术醇的定向转化

使用微紫青霉对莪术醇(1)进行生物转化,采用硅胶柱色谱法从发酵液的乙酸乙酯萃取层中分离得到转化产物(2),利用理化及各种光谱手段鉴定其结构为15-羟基莪术醇.微紫青霉对莪术醇具有定向转化能力,获得转化产物的收率为24%,该转化产物为未见文献报道的新化合物.利用二维核磁共振等手段对其碳、氢信号进行了全归属.体外试验表明:化合物2对副流感病毒、呼吸道合孢病毒和单纯疱疹病毒I型具有较好的抑制作用.     

毛冬青中五环三萜ⅡexgeninA的制备及活性研究

目的：分离制备毛冬青三萜类化合物ilexgeninA,并初步探讨其药理活性,为阐明毛冬青的活性成分提供实验依据。方法：综合运用柱层析和重结晶法等分离纯化方法进行化合物的制备,采用^1H和^13CNMR波谱分析的方法对化合物的结构进行鉴定;小鼠口服给予不同剂量的ilexgeninA,通过考察其对凝血时间、出血时间、小鼠耳廓微循环血流速度的影响评价其药理活性。结果：ⅡexgeninA各剂量组与对照组相比,对小鼠出血时间和凝血时间均无明显影响（P〉0．05）;ⅡexgeninA中、高剂量（50、100mg·kg^-1）组对小鼠耳廓微循环无明显影响,但低剂量组（25mg·kg^-1）可显著加快小鼠耳廓微循环血流速度（P〈0．05）。结论：小鼠口服给药后,ilexgeninA未显示出明显抗凝效果,但能促进小鼠耳廓毛细血管开放,改善微循环,其机制尚需进一步研究。     

石杉碱甲的分离纯化工艺

目的:研究一种石杉碱甲的工业化分离纯化工艺,以达到批量生产之目的。方法:通过对石杉碱甲理化性质的分析,以中性氧化铝为填料对石杉碱甲粗品进行柱色谱分离纯化,采用薄层色谱-柱色谱考察了各因素的影响,以石杉碱甲回收率和含量为考察指标,寻找最佳工艺参数。结果:柱色谱最佳分离条件为:洗脱剂体系为氯仿-甲醇(v/v)=100∶5,100∶10,流速为3mL.min-1,柱床体积比为25∶1,进料量为10 mL,柱温为室温,在此条件下石杉碱甲回收率达97.6%,含量达99.2%。结论:该工艺条件能够在简单的条件下实现石杉碱甲批量分离纯化,具有工业应用价值。     

三斑海马的化学成分研究

目的 研究三斑海马的化学成分。方法 采用乙醇提取和硅胶柱色谱、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱色谱、反相C₁₈柱色谱等方法对三斑海马化学成分进行分离纯化，通过理化性质、波谱数据和文献对比，对得到的化合物进行结构鉴定。结果 从三斑海马中分离得到8个化合物，分别鉴定为：L-苯丙氨酸(1)、丙氨酸(2)、肌苷(3)、胆固醇(4)、N-乙酰基酪胺(5)、尿嘧啶(6)、D-甘露醇(7)、河豚素(8)。结论 化合物5、7、8为首次从三斑海马中分离得到。     

重组人红细胞生成素大规模制备中反相色谱的条件优化

目的优化重组人红细胞生成素(rhEPO)大规模制备纯化中主要影响回收率的反相色谱的条件,提高回收率。方法采用反相纯化作为三步法纯化的第一步,利用R1型反相填料采用不同分步洗脱条件进行洗脱。结果优化后经第一步反相色谱所得rhEPO蛋白纯度达70%,再通过阴离子交换和凝胶过滤色谱纯化,rhEPO终产物的纯度可达100%,体内比活达1.91×105IU/mg,rhEPO蛋白的回收率提高了1.2倍。结论优化的反相纯化条件(30%乙醇-1.5 mol/L尿素,60%乙醇-3.0 mol/L尿素)能更有效的从培养上清中大量纯化出rhEPO,回收率高。获得的产品纯度高,体内外活性好。适合大规模纯化。     

Isolation of salicylsalicylic acid, acetylsalicylsalicylic acid, and acetylsalicylic anhydride from aspirin tablets by extraction and high-pressure liquid chromatography.

Aspirin and four salicylate impurities of aspirin (salicylic acid, acetylsalicylsalicylic acid, acetylsalicylic anhydride, and salicylsalicylic acid) were resolved by silica gell TLC and by high-pressure liquid chromatography (HPLC) on a reversed-phase C18 column. Care was necessary in the choice of a column because of similar column failed to resolve these five compounds. Salicylsalicylic acid was isolated from aspirin tablets by extraction followed by reversed-phase C18 HPLC. The structure of this compound was confirmed by comparison with an authentic sample of salicylsalicylic acid by HPLC, TLC, IR and UV spectrophotometry, and mass spectrometry. Two other compounds, acetylsalicylic anhydride and acetylsalicylsalicylic acid, which had been previously identified by chromatography as impurities in aspirin, were isolated and further characterized.     

超临界CO2萃取结合柱层析法提取和纯化丹参中的丹参酮ⅡA

目的:优化用超临界CO2从丹参中萃取丹参酮ⅡA的工艺条件,并建立纯化丹参酮ⅡA的柱层析法。方法:以HPLC法测定丹参酮ⅡA的含量。采用正交试验优化超临界CO2萃取丹参酮的条件,考察夹带剂用量、萃取压力、萃取温度和分离温度对提取效果的影响。用100~200目的中性氧化铝柱层析,以苯进行洗脱,收集相关流份,减压回收溶剂后经无水乙醇重结晶得到丹参酮ⅡA晶体。结果:超临界CO2萃取丹参酮ⅡA的最优条件为:夹带剂用量120 ml,萃取压力20 MPa,萃取温度50℃,分离温度35℃。柱层析后重结晶得到纯度为93.49%的丹参酮ⅡA晶体。结论:超临界CO2萃取丹参酮具有操作简便、方法可靠、切实可行、无有机溶剂残留的优点,结合柱层析法可获得高纯度晶体。     

大苞鸢尾种子的化学成分研究

目的:研究鸢尾科鸢尾属植物大苞鸢尾(Iris bungei Maxim.)种子的化学成分。方法:采用渗漉方法提取,硅胶柱色谱方法进行成分分离,用重结晶、凝胶柱色谱等方法进行纯化,并通过光谱分析和理化常数鉴定化合物的结构。结果:从大苞鸢尾种子的乙醇提取物共分离得到11个化合物,分别鉴定为鸢尾酚(1)、鸢尾间苯二酚(2)、射干醌P(3)、3-羟基马蔺子甲素(4)、马蔺子甲素(5)、大苞鸢尾醌(6)、3β-(9,10-顺式-十八烯氧基)-5-胆甾烯(7)、齐墩果-12-烯-3α,23-二醇(8)、熊果酸(9)、β-谷甾醇(10)和正十五烷醇(11)。结论:以上化合物除4和6外,其他均为首次从该植物中分离得到。     

大叶紫珠的化学成分

目的对大叶紫珠的化学成分进行研究。方法利用硅胶、Sephadex LH 20柱色谱分离和重结晶纯化,根据理化性质和NMR波谱数据进行结构鉴定。结果分离并鉴定了6个化合物,分别为α香树脂醇(αamyrin,1)、乌苏酸(ursolic acid,2)、2α,3α,19α三羟基12烯28乌苏酸(2α,3α,19αtrihydroxyurs 12 en 28 oic acid,3)、桦木酸(betulinic acid,4)、β谷甾醇(βsitosterol,5)、胡萝卜苷(daucosterol,6)。结论化合物1、3为首次从该植物中分离得到。     

中华眼镜蛇毒核糖核酸酶的分离纯化及其特殊生物学活性

目的从中华眼镜蛇毒中分离纯化核糖核酸酶,并研究其生物学活性。方法以中华眼镜蛇毒为原料,采用SP-Trisacryl阳离子交换色谱、Sephadex G-75凝胶色谱、C8反相色谱等纯化方法,分离纯化具有核糖核酸酶活性的蛋白质,表征其酶学性质,检测其抑菌性、抗肿瘤细胞作用及抗氧化作用。结果 SDS-PAGE电泳显示纯化的中华眼镜蛇毒核糖核酸酶(Na-RNase)为相对分子质量为13 000的单一成分。该酶最适反应温度为40℃,最适pH值为6.5,米氏常数为3.67μmol/L,最大反应速率为3.52 pmol/s。在体外抑菌实验中,在8μmol/L的浓度下对大肠艾希菌和金黄葡萄球菌均未显示出显著抑制作用;在体外细胞毒性实验中,对于Hela肿瘤细胞和正常的人成纤维细胞在8μmol/L的浓度下无明显抑制作用;在抗氧化实验中,浓度达到71.5μmol/mL时,对小鼠肝微粒体脂质过氧化反应的抑制率为41.30%。结论中华眼镜蛇毒中的核糖核酸酶具有抗氧化作用,可能作为氧化还原的调节剂,在有关的疾病治疗方面具有应用的潜能。     

Identification of okadaic acid from a Caribbean dinoflagellate, Prorocentrum concavum

Lipid-soluble toxins were isolated from a Caribbean strain of the epiphytic dinoflagellate Prorocentrum concavum Fukuyo. The major lipid-soluble toxin (LD50 = 210 +/- 15 micrograms/kg i.p. in mice) was purified by normal and reversed-phase column chromatography and characterized by 1H NMR and mass spectrometry. The toxin was identified as okadaic acid by interpretation of the spectral data. Okadaic acid was previously identified as a toxic component of the related species P. lima (Ehrenberg) Dodge. The finding of okadaic acid production in P. concavum and P. lima, abundant primary producers in the ciguatera-endemic Caribbean, suggests that the role of this toxin in the etiology of ciguatera may be more significant than previously thought.     

海洋来源青霉菌Penicillium polonicum H92次级代谢产物的研究

目的 对源自福建漳江口红树林底部海水沉积物的青霉菌Penicillium polonicum H92的次级代谢产物进行化学成分和生物活性研究.方法 综合利用有机溶剂萃取、硅胶柱色谱、反相硅胶(ODS)柱色谱、凝胶(Sephadex LH-20)柱色谱、薄层色谱、半制备高效液相色谱等多种手段对青霉菌Penicillium...     

素馨花中一个新的环烯醚萜苷

为研究木犀科植物素馨花干燥花蕾的化学成分， 通过硅胶柱色谱、 Sephadex LH-20柱色谱、 HPLC和重结晶等方法进行分离纯化， 根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定结构， 从素馨花干燥花蕾70%乙醇提取物中分离得到6个环烯醚萜苷类化合物， 分别鉴定为素馨花苷(I)、 jaspolyoside (II)、 8-epi-kingiside (III)、 10-羟基橄榄苦苷(IV)、 10-羟基女贞苷(V)、 oleoside-7,11-dimethyl ester (VI)。化合物I为新化合物，其余为首次从本植物中分离得到。     

牡蛎活性肽的制备及其理化性质的初步研究

目的从牡蛎蛋白质的酶解物中分离制备活性肽并对其理化性质进行初步研究。方法采用胰蛋白酶对牡蛎蛋白质进行酶解,使其释放出具备特殊活性的活性肽,将含有活性肽的粗提物分别用Sephadex G25凝胶柱层析,DEAE-Sepharose FF离子交换柱层析和C18反相柱进行分离和纯化。结果牡蛎活性肽粗提物经过分离纯化制备出3个组分F31,F32,F41。组分F32,F41的等电点分别是7.12和7.08;组分F31,F32,F41的相对分子质量分别为885,810及409;其蛋白含量分别为51.9%,80.2%及99.8%;其糖含量分别为19.2%,4.3%及0%。结论以胰蛋白酶作用的最佳条件采用一步酶解的工艺,牡蛎蛋白质可以得到良好的酶解,同时得到的牡蛎活性肽粗提物活性较高。     

Matlystatins, new inhibitors of typeIV collagenases from Actinomadura atramentaria. I. Taxonomy, fermentation, isolation, and physico-chemical properties of matlystatin-group compounds.

During the course of a screening for inhibitors of typeIV collagenases, new metabolites, designated matlystatins, have been isolated from an actinomycete strain, which was identified as a strain of Actinomadura atramentaria. Matlystatins were composed of five congeners, which were separated and purified by n-butanol extraction and chromatography.