补体系统及其抑制剂与脑血管疾病研究进展

脑血管疾病是一种发病率、致残率和死亡率都很高的疾病。由于其起病多较急骤，且发病机制和病理生理过程相当复杂，给临床治疗带来了很大困难。近年来研究者发现脑血管疾病中补体激活参与了多重损伤环节，阐明其具体的病理生理机制对于脑血管疾病的预防和治疗具有重要意义。     

补体及调节剂与阿尔茨海默病

炎性机制在阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)发病过程中起重要作用,补体也被认为参与了颅内慢性炎性反应。颅内补体主要由脑内神经元、胶质细胞等产生。在AD发病过程中,补体可能被以β淀粉样蛋白为主的抗原物质通过经典途径、旁路途径、甘露聚糖结合凝集素(MBL)途径等激活。激活的补体发挥了神经毒性作用。但也有一些研究结果表明某些补体成分可保护神经元免受损伤。AD发病过程中补体存在过度活化。补体调节剂是一类能够调节补体活性的物质,已应用于治疗一些疾病。AD的补体调节治疗现处于动物实验阶段。     

脑脊液中的补体系统

中枢神经系统疾病可引起脑脊液补体变化。补体经典、替代途径参与细菌性脑膜炎病变过程 ;Alzheimer病可通过外源凝集素途径激活补体 ;重症脑外伤替代途径参与继发性脑损害 ;多发性硬化不但经典途径激活 ,而且补体激活程度和病变严重程度密切相关 ,表明脑脊液补体激活也加重中枢神经系统病变。     

补体系统与脑损伤

目前学术界普遍认为各种原因的颅脑损伤后存在颅内炎性反应,而实验和临床研究发现补体系统的激活在此过程中起着正负两方面的重要作用。1脑内补体成分的来源补体系统是存在于人与脊椎动物血清与体液中,由30多种可溶性蛋白和膜结合蛋白组成的限制性蛋白酶解系统。因血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的存在,脑内补体来源有其特殊性。1.1脑内补体合成1987年Levi-Strauss首次证明了脑细胞能合成补体成分。之后的研究陆续证实,人类星形细胞株在细胞因子的刺激下能表达和分泌补体的绝大部分成分,且星形细胞还能合成细胞因子,通过自分泌形式调…     

脑心通对大鼠局灶性脑缺血脑组织补体C3的影响

目的:探讨脑心通对大鼠局灶性脑缺血损伤后脑组织补体C3表达的影响。方法:参照longa等方法制成大鼠局灶性大脑中动脉阻断(MCAO)模型,将大鼠分为假手术组、生理盐水组、大剂量脑心通组、中剂量脑心通组、小剂量脑心通组,分别给予不同剂量药物,于术后6h,24h,48h,72h和7d进行神经功能评分(NDS),处死后取脑组织观察脑含水量的变化,病理切片HE染色观察组织病理学改变,免疫组织化学的方法测定补体C3的动态变化。结果:脑心通治疗组的神经功能评分均降低,病理损伤均减轻,大、中剂量脑心通组治疗后脑水肿明显减轻(P<0.05),补体C3的表达明显减少(P<0.05)。结论:脑心通可能通过减轻脑水肿,降低脑内补体C3的表达对大鼠缺血脑组织损伤产生保护作用。     

脑血管支架材料与补体C3的变化

脑血管疾病病死率高。由于脑血管迂曲、细小,以及脑血管支架置入手术的风险比其他部位血管高许多,所以脑血管支架置入器械开发难度也较大。研发的首要任务之一就是选用合适的生物医用材料。生物材料表面可激活和放大补体旁路途径,使补体C3转变为C3b样分子,形成C3转化酶C3bBb,使补体在生物材料表面被活化。     

补体在脑出血后脑水肿中的作用

脑出血是临床常见的急性脑血管病，其发病机制和病理生理过程相当复杂。近年来研究发现，补体在实验性大鼠脑出血继发脑水肿中有重要作用。本从脑出血时补体的来源，补体激活的机制，补体介导脑损伤机制，补体调节因子的作用及补体抑制剂的应用等方面做一综述。     

CVF干预对大鼠实验性脑出血后C9表达及脑水肿的影响

目的 研究大鼠实验性脑出血后血肿周围补体成分C9的表达情况及其与脑水肿的关系,探讨补体C9在脑出血后继发性损伤中的作用以及应用眼镜蛇毒因子（CVF）干预后的影响.方法 采用立体定向技术,将自体不凝血注入大鼠尾状核制备脑出血模型,将动物分为假手术组、出血组和CVF干预组,分别在不同时间断头取脑,连续切片作补体C9免疫组化染色和HE染色.结果 脑出血后2 h血肿周围脑组织开始表达C9,24 h达高峰;各组与假手术组之间比较有差异（P＜0.01）;血肿周围脑组织含水量在ICH后6 h开始增加（P＜0.05）,12 h明显增加,24～72 h达高峰（P＜0.01）,此后逐渐回落,2 w基本恢复正常水平.对侧半球相应部位及假手术对照组脑组织含水量没有明显变化;C9的表达脑组织含水量呈正相关关系（r=0.833,P＜0.05）;经CVF干预后,血肿周围组织C9表达量及脑组织含水量明显下降,干预组与出血组之间比较有显著差异（P＜0.01）.结论脑出血后补体级联激活,C9表达明显增加,脑组织含水量增加,经CVF干预后,C9表达下降,脑水肿减轻,能达到神经保护作用.     

醒脑静对脑出血大鼠脑水肿及血肿周围基质金属蛋白酶-9和补体C3的影响

目的 探讨醒脑静改善脑出血后脑水肿的作用机制,及其对血肿周围基质金属蛋白酶-9和补体C3的影响.方法 72只健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组、出血组和醒脑静组.自体血注射法建立脑出血模型,Garcia法评价神经功能;于湿重法检测脑组织含水量;根据伊文蓝浓度评价血-脑屏障通透性;免疫组织化学检测血肿周围脑组织中基质金属蛋白酶-9和补体C3表达水平.结果 经醒脑静治疗后,大鼠神经功能评分逐渐增加(均P<0.05),至手术后72 h达峰值水平(P<0.05),且手术后48和72h神经功能评分均高于出血组(P<0.05).手术后72 h,出血组大鼠脑组织含水量升高,血-脑屏障通透性增加,基质金属蛋白酶-9和补体C3表达阳性细胞数目增多(均P<0.05);经醒脑静治疗后,脑组织含水量降低,血-脑屏障通透性下降,基质金属蛋白酶-9和补体C3表达阳性细胞数目减少,与出血组比较差异有统计学意义(均P<0.05).结论 醒脑静通过下调血肿周围脑组织中基质金属蛋白酶-9和补体C3表达水平而达到保护血-脑屏障、减轻血管源件腑水肿的作用.     

眼镜蛇毒因子在大鼠脑缺血-再灌注损伤中的作用研究

目的 探讨眼镜蛇毒因子（CVF）抑制补体在大鼠脑缺血-再灌注损伤中的作用。方法 采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,缺血2h后再灌注。治疗组用CVF抑制补体腹腔内注射,对照组注射等量生理盐水,检测缺血-再灌注后不同时点各组脑组织补体C1q和C3d蛋白表达情况及神经功能缺损评分、脑组织含水量的变化。结果 治疗组补体C1q和C3d表达、神经功能评分及脑组织含水量均明显低于对照组（均P〈0.05）。结论 CVF具有脑保护作用。     

补体在脑出血后脑组织损伤机制中的作用

目的研究补体C9在大鼠实验性脑出血(ICH)后血肿周围组织中的表达情况,探讨补体C9在ICH后脑水肿中的作用以及应用眼镜蛇毒因子(CVF)干预后对血肿周围组织C9表达及脑组织含水量变化的影响。方法采用立体定向技术,将自体不凝血注入大鼠尾状核制备ICH模型,将动物分为假手术组、出血组和CVF干预组,分别在不同时间断头取脑,连续切片分别作补体C9免疫组化染色和HE染色,并进行脑组织含水量测定(干湿重法)。结果ICH后2h血肿周围脑组织开始表达C9,24h达高峰。血肿周围脑组织含水量在ICH后2h开始增加(P<0.05),6h明显增加,24～72h达高峰(P<0.01),此后逐渐回落,1周基本恢复正常水平,脑组织含水量与C9的表达呈正相关关系(r=0.938,P<0.01);对侧半球相应部位及假手术对照组脑组织含水量没有明显变化;经CVF干预后,血肿周围组织C9表达明显下降,干预组与出血组之间比较有显著差异(P<0.01)。CVF干预组脑组织含水量明显低于常规ICH组(P<0.01)。结论脑出血后补体级联激活C9表达明显增加,并证明通过CVF干预后,C9表达下降,脑水肿减轻,能达到神经保护作用。     

补体系统与Alzheimer病（综述）

研究表明,经典补体通路的全部补体成分,多种补体调节蛋白及其受体等均在Alzheimer病（AD）脑内存在和上调表达,且与含Aβ和AD病理结构密切相关,经典补体通路在AD患者脑内的活化以及活化的补体成分与AD病理损害之间的高度相关性表明,补体系统可能参与了AD的脑内病毒活动。     

补体系统激活变化趋势与急性脑梗死关系的临床研究

目的动态观察脑梗死患者发病后1月内补体C3和超敏C-反应蛋白（Hs-CRP）含量的变化趋势及其与梗死灶体积、神经功能缺损程度的相关性。方法分别在发病后12、24、48、72h、7、14d和1月,采用免疫散射比浊法测定56例脑梗死患者补体C3和Hs-CRP含量,观察并记录所有病例的病灶体积、神经功能缺损评分。同时选取46例健康受试者作为对照组。结果（1）病例组补体C3和Hs-CRP在不同测定时点浓度不同（F=163.456和97.622,P〈0.001）,表现为发病12h时补体C3和Hs-CRP浓度即有所增加,此后随着发病时间的增加浓度呈上升趋势,至发病7d达峰值,随后逐渐下降,至1月时趋于正常。（2）病例组血清C3、Hs-CRP的浓度于发病后12、24、48、72h、7、14d均高于对照组（P〈0.05）,1月时2组比较无明显差异（P〉0.05）;（3）病例组血清补体C3、Hs-CRP水平与梗死灶体积有关系,体积越大,血清补体C3、Hs-CRP水平越高。大、中病灶组血清补体C3、Hs-CRP浓度明显高于小病灶组（P〈0.05）;（4）病例组血清补体C3、Hs-CRP水平与神经功能缺损程度有关系,神经功能缺损越重,血清补体C3、Hs-CRP水平越高。重、中度神经功能缺损组血清补体C3、Hs-CRP浓度明显高于轻度缺损组（P〈0.05）。结论（1）急性缺血性脑卒中患者在急性期C3、Hs-CRP含量增高,存在补体系统激活。补体激活可能参与了急性缺血性脑卒中后脑组织的炎症过程;（2）急性缺血性脑卒中患者C3、Hs-CRP与脑梗死体积、神经功能缺损程度之间有密切关系,反映卒中时脑组织的损害程度。     

酒精中毒大鼠脑血管病变及相应脑组织损伤的病理观察

目的　观察酒精中毒后大鼠脑血管病变、脑组织损伤情况及探讨相关机制。方法　 Wistar雄性大鼠酒精灌胃 4周造成慢性酒精中毒模型。通过光学显微镜观察酒精中毒后大鼠脑血管的病理变化及相应脑组织的损伤。结果　酒精中毒组大鼠额叶脑内小血管内弹力膜厚薄不一 ,出现皱褶 ,内皮细胞部分脱落 ,中膜平滑肌细胞及外膜胶原纤维增生 ;大脑皮质、海马、小脑皮质等部位均有神经细胞数目缺失及不同程度的细胞变性及损伤 ,但以小脑皮质的改变尤为明显。结论　酒精中毒后可以引起脑血管自身结构的改变并影响脑血流 ,造成缺血缺氧性改变 ,可能是酒精中毒后脑损伤的机制之一。     

补体靶向治疗在神经系统自身免疫性疾病中的应用

补体是机体免疫系统的重要组成部分, 在免疫监视和组织稳态中起着至关重要的作用。越来越多的证据表明, 补体激活不仅可以对机体产生保护作用, 而且参与多种自身免疫性疾病的发生和发展。补体激活不当会导致或加重视神经脊髓炎谱系疾病、重症肌无力以及吉兰-巴雷综合征等多种神经系统自身免疫性疾病。近年来, 随着对补体的认识不断加深, 补体靶向治疗也成为众多自身免疫性疾病的临床研究热点。文中通过介绍补体参与神经系统自身免疫病的具体机制以及补体靶向治疗的最新进展, 希望能够对该新兴治疗领域的发展起到抛砖引玉的作用。     

补体分子调控TGFβ1/smad通路减少蛛网膜下腔出血后神经元凋亡的作用及机制

目的 探讨补体分子对蛛网膜下腔出血（SAH）后神经元凋亡的影响及可能的机制。方法 将90只大鼠随机分为假手术组、SAH模型组、SAH模型+补体分子组,每组30只。采用枕大池单次注射自体血的方法建立SAH模型,SAH后24 h采用Garcia评分和平衡木试验评分评定神经功能缺损程度。成功建模24 h后,称取脑组织湿质量和干质量,计算脑组织含水率。绘制伊文思蓝标准曲线,评估血-脑屏障通透性。采用免疫荧光染色观察各组小胶质细胞活化情况,蛋白质免疫印迹法（WB）检测各组补体C3、TGFβ1/smad蛋白的表达情况,TUNEL法检测神经元凋亡情况。结果 与假手术组相比,SAH模型组大鼠的Garcia评分和平衡木试验评分均降低,脑组织含水率和血-脑屏障通透性均增加,小胶质细胞活化程度增强,补体C3、TGFβ1/smad蛋白的表达水平升高,神经元凋亡率增加（P<0.05）。与SAH模型组相比,SAH模型+补体分子组大鼠的Garcia评分和平衡木试验评分均升高,脑组织含水率和血-脑屏障通透性均降低,小胶质细胞活化程度减弱,补体C3、TGFβ1/smad蛋白的表达水平降低,神经元凋亡率减少（P&l...     

脑红蛋白-中风及神经退行性疾病治疗的新靶点

当脑组织受到亚致死性损伤时,会激活内源性保护通路来保护脑组织。随着大批的通过抑制缺血治疗中风的临床试验失败,通过内源性神经保护来治疗中风和神经退行性疾病似乎更有潜力和前景。脑红蛋白是一种与氧结合的球蛋白,在神经元内大量表达。众多证据表明,在体外培养及动物身上,脑红蛋白都是内源性神经保护分子,对脑缺氧/缺血、氧超载相关损伤及神经退行性疾病,如阿尔茨海默病均有保护作用。因此,上调内源脑红蛋白的表达将可能是一种治疗神经系统疾病的新疗法。本文总结了最近关于脑红蛋白的生物学功能、基因表达调控及神经元保护机制的研究。     

载脂蛋白JmRNA在大鼠脑梗死模型中的表达

目的探讨载脂蛋白J(apoJ)在大鼠脑梗死急性期的作用及其可能的机制.方法清洁级SD雄性成年大鼠84只,随机分为正常对照组、假手术组、脑梗死后6 h组、24 h组、3 d组、5 d组和7 d组.用线栓法制备永久性局灶脑梗死模型,动物处死后测脑含水量,并检测apoJ及补体C3mRNA的表达值.结果对照组大鼠脑内有apoJ mRNA表达;各模型组缺血侧ApoJ mRNA表达增高.ApoJ mRNA表达值与脑含水量呈负相关(r=-0.212,P＜0.05),与补体C3mRNA表达水平呈正相关(r=0.509,P＜0.01).结论大鼠脑梗死后apoJ表达增高,3 d达高峰.ApoJ可能有保护缺血脑组织的作用.     

DF-521巴曲酶对大鼠脑出血后脑水肿区补体表达的影响

目的 :观察降纤酶制剂对大鼠脑出血后脑水肿形成及血肿周边脑组织补体C3d和C9表达的影响。方法 :一侧基底节区注射自体血 10 0 μL制作大鼠脑出血 2 4、72h模型 ,一组给予腹腔注射降纤酶制剂DF 5 2 1巴曲酶处理 ,一组不给 ,另设一组空白对照脑内注射生理盐水 10 0 μL。用干湿重法 ,测定大鼠脑组织的含水量 ;免疫组化法检测C3d的表达 ,免疫Westernblot方法研究脑组织补体C9表达情况。结果 :大鼠脑出血后 ,血肿侧脑组织含水量上升 ,同时出血侧脑组织内C3d和C9的表达量增加 ;给予DF 5 2 1巴曲酶制剂处理后 ,血肿侧脑水肿减轻〔2 4h由 (81 8± 1 14 ) %降至 (79 46± 0 68% ) ,P <0 0 1;72h由 (83 14± 0 3 6) %降至 (81 0 9±0 3 4) % ,P <0 0 1〕 ;并且脑组织C3d和C9的表达较对照组有所下降。结论 :降纤酶制剂能下调脑出血后血肿周边脑组织补体C3d和C9的表达并减轻大鼠脑出血后脑水肿的程度。     

大鼠脑缺血再灌组织中补体沉积及降纤酶干预的实验观察

目的本实验旨在观察脑缺血再灌损伤中是否有补体参与，其参与是否与组织坏死有关，蛇毒制剂降纤酶对其有无干预作用。方法制成大鼠大脑中动脉缺血2h再灌22h动物模型，运用免疫组化方法检测再灌组织中的补体沉积，并给予降纤酶处理，观察其干预效果。结果补体C3在缺血再灌组织中大量沉积，为强阳性；降纤酶干预后补体沉积减少，为弱阳性；正常组及假手术组脑组织中无补体沉积。经X2检验证实补体沉积与组织坏死关系密切（P＜0．01）。给药组白细胞浸润较未给药组明显减少（P＜0．05），组织损伤程度也相对较轻。结论脑缺血再灌组织中有大量补体参与，补体的参与同组织坏死有密切关系。蛇毒制剂降纤酶可减少缺血再灌组织中补体的沉积，从而削减白细胞浸润，减轻脑组织损伤程度。