慢性丙型肝炎患者外周血单核细胞中丙型肝炎病毒RNA正、负链的检测

选择ＨＣＶ基因组５’非编码区的两对引物，利用逆转录巢式ＰＣＲ技术对３５例慢性丙型肝炎患者的血清中正链ＨＣＶＲＮＡ、ＰＢＭＣ中正、负链ＨＣＶＲＮＡ进行检测。结果血清中正链ＨＣＶＲＮＡ阳性率为６２．９％（２２／３５），ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶＲＮＡ的阳性率为５４．３％（１９／３５），负链ＨＣＶＲＮＡ的阳性率为３４．３％（１２／３５）。同时对第２次ＰＣＲ的阳性产物进行限制性片段长度多态性分析（ＲＦＬＰ），进一步证实ＰＣＲ产物为ＨＣＶ特异性扩增产物，结果说明ＨＣＶ能在ＰＢＭＣ中存在或复制，即肝细胞并非ＨＣＶ感染与复制的唯一场所。ＰＢＭＣ可能作为病毒长期滞留场所，使病毒感染持续存在，是丙型肝炎易发生慢性化的原因之一。     

丙型肝炎病毒在外周血单个核细胞中复制状态的研究

采用套式逆转录ＰＣＲ方法检测２６例丙型肝炎及丙型肝炎病毒携带者的血清，外周血单个核细胞及其末次洗液中的ＨＣＶＲＮＡ。结果２６例血清中正链ＨＣＶＲＮＡ全部阳性；外周血单个核细胞中正链ＨＣＶＲＮＡ２２例阳性、负键ＨＣＶＲＮＡ１５例阳性；末次洗液中正链ＨＣＶＲＮＡ全部阴性。说明ＨＣＶ不仅感染ＰＢＭＣ，而且在其中复制．与丙型肝炎的复发、慢性化及干扰素治疗的疗效不佳有关。     

丙型肝炎病毒成外周血单个核细胞中复制状态的研究

采用套式逆转录ＰＣＲ方法检测２６例题内型肝炎及丙型肝炎病毒携带者的血清，外周血清单个核细胞及其末次洗液中的ＨＣＶＲＮＡ。结果２６例血清中正链ＨＣＶＲＮＡ全部阳性；外周血单个核细胞中正链ＨＣＶＲＮＡ２２例阳性、负链ＨＣＶＲＮＡ１５是性；末次洗液中正链ＨＣＶＲＮＡ全部阴性。说明ＨＣＶ不仅感染ＰＢＭＣ而且在其中复制，与丙型肝炎的复发、慢性化及干扰素治疗的疗效不佳有关。     

血液透析及肾移植患者乙型和丙型肝炎病毒感染状况分析

测定２０９例肾透析患者血液中ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＣＶ－ＲＮＡ，阳性率ＨＢＶ－ＤＮＡ为２．４％、ＨＣＶ－ＲＮＡ为１６．３％；７６例肾移植后患者阳性率ＨＢＶ－ＤＮＡ为２．６％、ＨＣＶ－ＲＮＡ为２３．７％；对照组阳性率ＨＢＶ－ＤＮＡ为１．８％、ＨＣＶ－ＲＮＡ为２．０％。ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率在各组间无显著差异，Ｐ＞０．０５；血液透析组和肾移植组ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性率高于对照组，且有显著性差异Ｐ＜０．０１；肾移植组高于肾透析组，但无显著性差异，Ｐ＞０．０５。ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性合并ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性为４２．９％（３／７）。５２例ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性患者基因分型为Ⅱ型７６．９％、ⅡⅢ型１１．５％、Ⅲ型１１．５％。介于目前的状况，对献血检测，对阳性患者进行ＨＢＶ－ＤＮＡ、ＨＣＶ－ＲＮＡ检测，对阳性患者实行分机透析，是降低血透及肾移植患者乙、丙型肝炎病毒医院感染的关键。     

聚合酶链反应检测血浆及外周血单个核细胞中HCV—RNA的意义

目的 为提高丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶ－ＲＮＡ）的率。方法 采用套式逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,检测２００例抗－ＨＣＶ阴性,ＡＬＴ反复异常,临床疑似丙型肝炎患的血浆及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果 ５２例患血浆中检出ＨＣＶ－ＲＮＡ,阳性率为２６％,７８例患ＰＢＭＣ中检出ＨＣＶ－ＲＮＡ,阳性率为３９％,其中两同时双阳性有２２例,阳性率为１１％。结论 同步检测丙     

应用聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎患者的HBV一DNA

应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测１０８例乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ一ＤＮＡ，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物（ＨＢＶＭ）的血清中结果有所不同：（１）在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率８６．１１％（３１／３６）；（２）在ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率５５．８８％（１９／３４）；（３）在抗ＨＢｓ、抗ＨＢｅ和ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率为２０％（２／１０）；（４）在抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率为２５％（２／８）；文中就ＰＣＲ检测的结果及临床意义作了扼要的讨论。     

三种危险因素的协同致肝癌作用

为分析黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）、乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）和丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）在致人原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）时可能的协同作用，对同份人ＨＣＣ组织分别采用高效液相色谱法、嵌套式ＰＣＲ及逆转录嵌套式ＰＣＲ检测ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ，检出率分别为６７．７％（２１／３１）、８８．２％（６０／６８）和１３．２％（９／６８）。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶＤＮＡ重叠检出率为５８．１％（１８／３１），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为８．８％（６／６８），由４例ＨＣＣ患者重叠检出ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ；同步检测对照组，３种危险因素全部阴性。结果表明，３种危险因素均与人类肝癌直接相关，并且存在着协同致癌效应     

HBV感染孕妇血清HBVM与TORCH抗体检测

目的了解ＨＢＶ感染孕妇血清ＨＢＶＭ与ＴＯＲＣＨ抗体阳性率。方法应用ＥＬＩＳＡ法筛查出９３例ＨＢＶ感染孕妇,并用ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ。分娩时取脐血测弓形体（Ｔｏｘ）、风疹病毒（ＲＶ）、巨细胞病毒（ＣＭＶ）、单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨＳＶ－Ⅱ）四种病原血清特异性ＩｇＭ和风疹病毒ＩｇＧ抗体。结果９３例ＨＢＶ感染孕妇中ＴＯＲＣＨ总感染率４７．３１％。单项抗体阳性率２５．８１％,７例为２项抗体阳性,２例３项抗体阳性。原发宫内感染以Ｔｏｘ最高（１２．９０％）,ＣＭＶ次之（６．４５％）,随后ＨＳＶ－Ⅱ（５．３８％）,ＲＶ最低（３．２３％）。孕妇ＨＢｓＡｇ阳性组,ＰＣＲＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率７６．９２％,ＴＯＲＣＨ感染率６１．５４％。ＨＢｓＡｇ阴性组,ＰＣＲＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率３８．８９％,ＴＯＲＣＨ感染率３７．０４％。结论脐血ＴＯＲＣＨ感染率与母血ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡ相关（相关系数分别为０．１４、０．２９、０．１５）。乙肝感染孕妇ＴＯＲＣＨ的抗体筛查对优生优育是非常有用的指标。     

应用聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎患者的HBV—DNA

应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测１０３例乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物（ＨＢＶＭ）的血清中结果有所不同：（１）在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率８６．１１％（３１／３６）；（２）在ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率５５．８８％（１９／３４）；（３）在抗ＨＢｅ和ＨＢｃ阳性血清     

抗—HCV阳性单采浆供血员HGV感染随访研究

为了解单采浆供血员庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染及其转归，对１０２名抗－ＨＣＶ阳性单采浆供血员冻存血清进行抗－ＨＧＶ和ＨＧＶＲＮＡ检测，对抗－ＨＧＶ和（或）ＨＧＶＲＮＡ阳性者作３年随访研究。采用ＥＩＡ法检测抗－ＨＧＶ，包被抗原来自ＨＧＶ不同功能区的合成肽。应用ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＧＶＲＮＡ，引物选自ＨＧＶＮＳ３区。结果表明，抗－ＨＣＶ阳性单采浆供血员ＨＧＶＲＮＡ阳性率为１９．６１％（２０／１０２），抗－ＨＧＶ阳性率为１７．６５％（１８／１０２），ＨＧＶ感染率（抗ＨＧＶ和／或ＨＧＶＲＮＡ阳性）为２４．５１％（２５／１０２），而对照组仅为０．９４％（１／１０６）。提示单采血浆是ＨＧＶ感染的重要危险因素。ＨＧＶＲＮＡ和抗－ＨＧＶ的３年阴转率分别为３５．００％（７／２０）和１１．１１％（２／１８），说明ＨＧＶ感染有慢性携带趋势     

我国部分地区献血员庚型肝炎病毒感染情况调查

用蛋白工程的方法，合成了庚型肝炎病毒（ＧＢＶＣ／ＨＧＶ）ＮＳ３区一段多肽，并用该条多肽初步建立了抗ＧＢＶＣ／ＨＧＶ酶联免疫试验方法（ＥＩＡ）。用该法检测我国部分地区２８７０份ＨＢｓＡｇ和抗ＨＣＶ均阴性的健康献血员血清。结果：抗ＧＢＶＣ／ＨＧＶ的流行率为３．４８％（１００／２８７０）。其中１００份抗ＧＢＶＣ／ＨＧＶ阳性血清用逆转录套式聚合酶链反应法（ＲＴＰＣＲ）检测，ＧＢＶＣ／ＨＧＶＲＮＡ的阳性率为６２．０％（６２／１００）。     

广西肝癌高发区壮族自然人群中流行的HCV,HBV的分子生物学研究

在广西肝癌高发区壮族自然人群中采集血清标本１７７６人份，采用ＥＬＩＳＡ方法检测抗－ＨＣＶ、ＨＢｓＡｇ，ＰＣＲ技术检测ＨＣＶ－ＲＮＡ、ＨＢＶ－ＤＮＡ，并对ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性的６９份标本采用型特异性引物进行基因分型。结果显示：（１）研究人群中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性率为３．８８％；（２）流行的ＨＣＶ基因以Ｉ型或与其它型别的混合感染为主；（３）Ｉ型感染者中ＬＡＴ的异常率高于其它型别的感染者；（４）当地ＨＣＶ伴     

血液制品丙肝病毒与艾滋病毒检测

目的了解１９９３～１９９５年度临床使用的新鲜冰冻血浆（ＦＦＰ）和血液制品中艾滋病毒（ＨＩＶ）、丙肝病毒（ＨＣＶ）的感染情况。方法用ＥＬＩＳＡ、ＷＢ和ＰＣＲ对１１０批ＦＦＰ、人血丙种球蛋白、人血白蛋白检测了抗ＨＣＶ、ＨＣＶＲＮＡ、抗ＨＩＶ（１＋２）、ＨＩＶ－１ＲＮＡ。结果所有血制品抗ＨＣＶ的平均阳性率为１９．１％,ＨＣＶＲＮＡ为１７．３％;１９９３～１９９４年度ＦＦＰ的抗ＨＣＶＨＣＶＲＮＡ阳性率比１９９５年度高（３０％、２６％和０．５％）;人血丙球的抗ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ阳性率明显高于人血白蛋白（３０％、２０％和０．５％）;８９批抗ＨＣＶ阴性血制品ＨＣＶＲＮＡ的阳性率为５．６％,所有血制品的抗ＨＩＶ（１＋２）和ＨＩＶ－１ＲＮＡ均阴性。结论１９９３～１９９５年度临床上所使用的血制品,特别是１９９３～１９９４年度的ＦＦＰ,有传播ＨＣＶ的危险,这与当时没有对所有供血者进行抗ＨＣＶ筛检有关。     

干扰素治疗丙型肝炎疗效相关因素分析

目的：探讨预测干扰素治疗慢性丙型肝炎（ＣＨＣ）疗效的临床上适用、简便、易行的指标。方法：对采用干扰素（ＩＦＮα－１ｂ）治疗３２例ＣＨＣ临床资料进行观察,包括治疗前后肝功能（ＡＬＴ、ＳＢ、ＧＧＴ）、抗－ＨＣＶＯＤ水平、ＨＣＶ基因型、ＨＣＶＲＮＡ、ＳＩＬ－２Ｒ、β２－ＭＧ等,治疗结束时有效者为肝功能复常同时ＨＣＶＲＮＡ阴转,其余反应模式均为无效者。结果：ＨＣＶ基因型为Ⅲ型患者疗效（５／１０）明显高于Ⅱ型（２／１９）（Ｐ＜０．０５）,有效者治疗前血清抗—ＨＣＶＯＤ明显低于无效者（Ｐ＜０．０５）,治疗后有效者β２－ＭＧ升高水平（３．４５±１．０８）ｍｇ／Ｌ明显高于无效者（１．３３±０．９５）ｍｇ／Ｌ（Ｐ＜０．０５）,而两者治疗前ＡＬＴ、ＳＢ、ＧＧＴ、ＩｇＭ、β２－ＭＧ患者的年龄无明显差别（Ｐ＞０．０５）。结论：感染ＨＣＶ基因型,治疗前抗—ＨＣＶＯＤ水平及治疗后β２－ＭＧ变化对预测ＩＦＮ治疗ＣＨＣ疗效有一定参考价值。     

用RT—PCR法分析合肥地区HCV基因型

应用逆转录－ＤＮＡ聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），对合肥地区的１９５例病人的血清进行了ＨＣＶＲＮＡ检测及基因型分析。结果显示，８０例ＨＣＶＲＮＡ阳性标本中，７０例（８７．５％）为Ⅱ／１ｂ型ＨＣＶ感染，７例（８．８％）为Ⅲ／２ａ型，３例（３．７％）为Ⅱ和Ⅲ型混合感染，未发现Ⅰ／１ａ和Ⅳ／２ｂ型ＨＣＶ感染。     

母婴间乙型肝炎与丙型肝炎双重感染的研究

从流行病角度，利用分子生物学技术及免疫学方法，对２１０例产妇血清及新生儿 脐带血清，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）、反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），检测乙型肝炎病毒（ＨＢＶ） 及丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）标志物，其结果为：ＨＢｓＡｇ阳性产妇的新生儿阳性率为６５．５％，ＨＢｅＡｇ阳 性产妇的新生儿阳性率为８１．８％，抗－ＨＣＶ阳性产妇的新生儿阳性率为７５．０％，ＨＢＶ－ＤＮＡ及 ＨＣＶ－ＲＮＡ双重阳性产妇的新生儿阳性率为１００．０％，说明母婴间存在乙型肝炎（ＨＢ）、丙型肝炎 （ＨＣ）及双重感染，其垂直传播可发生于宫内及围产期，是婴幼儿患病毒性肝炎的主要感染途径。 由于乙型肝炎及丙型肝炎的临床表现无特异性，不能从临床症状和体征中得以诊断，所以建立敏 感、特异的实验检测方法，为临床提供早期诊断依据，建立围产期保健制度，分娩过程中对婴儿加 强保护，阻断传播途径，是目前可行的有效措施。控制和降低病毒性肝炎的母婴间传播，有利优生 优育，提高人口素质的基本国策。”     

丙型肝炎病毒母婴传播的研究

检测７３２名产妇血中ＨＣＶ标记，抗ＨＣＶ（ＥＬＩＳＡ）和ＨＣＶＲＮＡ（ＰＣＲ）均阳性者３３例（３３／７３２，４．５％），其所生的３３名新生儿中有２３名的脐血检到ＨＣＶＲＮＡ（２３／３３，６９．７％）。对其中２７例新生儿的随访（平均１９．６月）表明，母婴传播感染的２２例新生儿，ＨＣＶ病毒血症在出生后逐渐阴转，血清ＨＣＶＲＮＡ阳性率（ＫａｐｌａｎＭｅｉｅｒ法计算）６月龄时为８１．８％，１２月龄时为４５．０％，１８月龄时为３０．０％，３０月龄为１６％，提示这些新生儿的ＨＣＶ感染发生于产前或分娩时的可能性。新生儿体内来自母体的ＩｇＧ类抗ＨＣＶ抗体出生后３个月即已基本阴转；婴儿本身在随访期间未检到有此类抗ＨＣＶ的产生。随访婴儿血清ＡＬＴ水平均正常，提示ＨＣＶ母婴传播感染的婴儿呈亚临床状态。     

聚合酶链反应法检测戊型肝炎病人粪便HEV—RNA

应用逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）法，对２６例散发性戊型肝炎（ＨＥ）患者发病后４～２８天收集的９１份粪便标本进行ＨＥＶＲＮＡ检测，并与同病期系列血清ＨＥＶＲＮＡ及ＡＬＴ水平作比较，以了解散发性ＨＥ患者的粪便排病毒规律。结果表明，患者粪便ＨＥＶＲＮＡ阳性率为４２．３％（１１／２６），与血清ＨＥＶＲＮＡ阳性率（５３．８％）相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。粪便ＨＥＶＲＮＡ检出率在发病头５天内为７５％（３／４），随后即与血清ＡＬＴ水平一样出现明显下降，于发病后１６～２０天降至１９．２％（５／２６），最长一例持续阳性至发病后２３天。上述结果提示，ＨＥ患者的粪便排病毒主要发生在疾病的急性期早期，将其隔离期定为病后３周可能比较合理。     

乙型和庚型肝炎病毒感染与肝细胞癌血清流行病学研究

为探讨乙型和庚型肝炎病毒（ＨＢＶ和ＨＧＶ）感染与肝细胞癌（ＨＣＣ）发生的关系，采用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）对８５例ＨＣＣ患者血清进行了ＨＢＶ和ＨＧＶ血清标志和ＨＧＶＲＮＡ检测，结果ＨＣＣ患者中ＨＢＶ感染率为７７．６５％；ＨＧＶ感染率为２７．０６％，ＨＧＶ和ＨＢＶ重叠感染率（２２．３５％）明显高于ＨＧＶ单独感染率（４．７１％）。结果提示：ＨＢＶ感染为ＨＣＣ发生的重要原因；ＨＧＶ感染可能参与ＨＣＣ的发生；而ＨＧＶ和ＨＢＶ重叠感染是否有可能增加ＨＣＣ的发生，值得进一步探讨     

丙型肝炎诊断方法的研究概况

本文对丙型肝炎病毒第一代抗－ＨＣＶ检测，重组免疫印迹法（ＲＩＢＡ），第二代抗－ＨＣＶ检测，ＩｇＭ抗－ＨＣＶ检测，ＰＣＲ检测ＨＣＶ ＲＮＡ，肝细胞内的ＨＣＶ抗原检测，肝细胞ＨＣＶ ＲＮＡ检测，分泌物中的ＨＣＶ ＲＮＡ检测，以及精子细胞中的ＨＣＶ检测等最新进展作了综述，并对这些方法的使用价值和临床意义作了述评。