不同药物雾化引痰查结核分枝杆菌结果分析

目的 为解决无痰肺结核患者的痰结核菌检查,提高痰检率?方法 对362 例门诊无痰肺结核病人随机分为1 ?2 ?3 组,分别应用3-6 % 盐水?0-1 % 薄荷水?10 % 盐水进行超声雾化引痰,荧光法查结核杆菌?结果 三组药物的排痰率第2 组明显较高( P< 0-01) ,第1 ?3 组间无差异?有效排痰率第2 组明显较低( P< 0-01) ,第1 ?3 组间无差异?排痰病人菌阳检出率第1 ?2 ?3 组分别为22-1 % ?6-8 % ?14-2 % ,第1 组明显高于第2 组( P< 0-01) ,但与第3 组相比无差异( P> 0-05) ?有效排痰病人痰菌检出率三组间无差异( P>0-05) ?结论 3-6 % 盐水超声雾化引痰可使73-1 % 的无痰病人引出痰,其中22-1 % 查到结核分枝杆菌,经济方便?易于推广?     

不同药物雾化引痰查结核分枝杆菌结果分析

目的 为解决无痰肺结核患者的痰结核菌检查,提高痰检率。方法 对３６２例门诊无痰肺结核病人随机分为１、２、３组,分别应用３．６％盐水、０．１％薄荷水１０％盐水进行超声雾化引痰,荧光法查结核杆菌。结果 三组药物的排痰率第２组明显较高（Ｐ〈０．０１）,第１、３组间无差异。排痰病人菌阳检出率第１、２、３组分别为２２．１％、６．８％、１４．２％,第１组明显高于第２组（Ｐ〈０．０１）,但与第３组相比无差异（Ｐ     

1284份痰标本分枝杆菌涂片镜检与培养结果分析

摘要：目的 通过痰标本分枝杆菌涂片镜检与培养结果分析,了解平谷区实验室分枝杆菌痰涂片和培养方法的质量控制情况。方法 收集1284份痰标本,采用中国防痨协会推荐的直接涂片萋尼(Ziehl-Neelsen)染色法和分枝杆菌分离培养方法进行检查。结果 涂片阳性率12.2％(157/1284),分离培养阳性率12.9％(166/1284)。初诊痰标本涂阳培阳率为11.1％（106/958）,涂阴培阳率为4.0％（38/958）,涂阳培阴率为0.5％（5/958）;随访患者涂阳培阴率为8.6％（28/326）,涂阳培阴标本痰菌量87.9％（29/33）在2+以下,71.4％（20/28）涂阳培阴出现在治疗第2、3个月末的痰标本。随访患者涂阳培阴率明显高于初诊患者,差异有统计学意义（P<0.001）。本年度抽检玻片盲法复检,未发生定性错误和阳性结果的量化误差。结论 通过涂片镜检和分枝杆菌分离培养结果的比较,能够相互印证送检标本检查结果的准确性。平谷区实验室分枝杆菌痰涂片和培养方法的质量控制有待改善和提高。     

痰标本采集、储存及运输过程对培养结果影响的分析

目的 通过分析某市级结核病实验室痰培养数据,总结县级运送阳性痰标本至市级进行痰培养工作模式对痰培养结果的影响因素。 方法 对江苏省某市级结核病实验室2010年4月-10月痰培养数据进行分析。 结果 该实验室初诊涂阳病人痰培养共计475例,对痰标本采集、储存、运输、培养等各个环节进行分析,得出：不同送样县区（P=0.007）,不同痰标本数量（P=0.008）,不同送样时间间隔（P=0.037）,不同痰标本阳性级别（P=0.001）的痰培养结果均有统计学意义。 结论 由县级运送痰标本至市级进行痰培养,应在采集标本时严格按照《中国结核病防治规划实施工作指南》（以下简称《指南》）要求采集即夜晨3份痰标本,提高送检痰标本质量,尽快送检,并加强对不同县区样品采集运送人员的培训。     

骨关节结核各类标本进行结核分枝杆菌培养与PCR检测的阳性率结果分析

目的 比较骨关节结核病灶中脓液、干酪、肉芽及死骨组织的结核分枝杆菌培养阳性率,及结核分枝杆菌BACTEC MGIT 960（简称“MGIT 960”）培养、改良罗氏培养基培养、PCR检测的联合阳性率.方法 2011年6月至2012年5月首都医科大学附属北京胸科医院收治的经病理明确诊断为骨关节结核的患者50例,通过手术获取病灶中的脓液（50份）、干酪（42份）、肉芽（48份）及死骨组织标本（43份）,分别进行结核分枝杆菌MGIT 960培养及改良罗氏培养基培养,比较4种组织标本的培养阳性率,计算2种培养方法的联合阳性率;对脓液标本单独通过PCR方法进行了阳性率检测;计算脓液标本3种方法的联合阳性率.结果 4种标本MGIT 960培养的阳性率依次为：死骨组织（41.9％,18/43）＞脓液（40.0％,20/50）＞肉芽（33.3％,16/48）=干酪（33.3 ％,14/42）;4种标本改良罗氏培养阳性率依次为：肉芽（20.8％,10/48）＞脓液（20.0％,10/50）＞死骨组织（16.3 ％,7/43）＞干酪（14.3％,6/42）;脓液的PCR检测阳性率为48.0％（24/50）.MGIT 960和改良罗氏培养2种结核分枝杆菌培养方法的联合阳性率为50.0％（25/50）,而PCR检测、MGIT960和改良罗氏培养3种方法的联合阳性率为68.0（34/50）.结论 骨关节结核患者,应尽可能选择多种标本以提高培养阳性率.MGIT 960培养可以作为首选的细菌学诊断方法,但如果再联合使用改良罗氏培养和PCR扩增技术,能够进一步提高检出阳性率.     

手术标本中结核分枝杆菌检测及临床意义研究

目的探讨结核病患者手术切除标本进行结核分枝杆菌检测的临床意义。方法应用罗氏培养、液体培养及定量RT—PCR方法检测12例不同化疗疗程后行手术,术中取材的标本中结核分枝杆菌。结果不同化疗疗程的手术标本中可以应用罗氏培养法及液体培养法检测到结核分枝杆菌,并有病例存在结核分枝杆菌持留菌特征性ICL及ACR的高表达。结论手术标本是结核菌培养及持留菌检测的很好材料,对患者术后化疗有指导意义。     

手术标本中结核分枝杆菌检测及临床意义研究

目的探讨结核病患者手术切除标本进行结核分枝杆菌检测的临床意义。方法应用罗氏培养、液体培养及定量RT—PCR方法检测12例不同化疗疗程后行手术，术中取材的标本中结核分枝杆菌。结果不同化疗疗程的手术标本中可以应用罗氏培养法及液体培养法检测到结核分枝杆菌，并有病例存在结核分技杆菌持留菌特征性ICL及ACR的高表达。结论手术标本是结核菌培养及持留菌检测的很好材料，对患者术后化疗指导有指导意义。     

利用PCR技术检测537份新疆结核病人痰标本中的结核分枝杆菌

目的 提高聚合酶链反应在检测人结核分枝杆菌中的特异性和敏感性。方法 在聚合酶链反应中对4种DNA片段即结核杆菌特异插入列IS6110,IS1081,和16SrRNA,65kDa摸板进行了比较;为获取较多的细菌DNA,临床痰标本处理采用了国际标准化方法主要包括用一定量的N－乙酰－L半胱胺酸和氢氧化钠处理痰标本;改进了RCR混和液的成份即添加了甘油,dUTP－尿嘧啶糖基化酶。结果 选择IS6110作为结核杆菌特异性摸板用于检测细菌DNA,制备出了6批人结核杆菌PCR检测试剂盒,在对来自新疆结核病研究所的537份痰标本的检测中发现,谝试剂盒检测的特异性为65.97%,敏感性为93.53%。结论 改良TB－PCR试剂盒显示有较高的敏感性,特异性还有待于进一步完善,该试剂盒在临床诊断中有一定的价值。     

不同性状痰标本的前处理液沉渣对MGIT 960液体培养法污染率的影响

目的探讨不同性状的痰标本前处理液沉渣对MGIT 960液体培养污染率的影响及污染菌种的鉴定,以更好地控制污染。方法收集2018年1-2月于北京胸科医院门诊就诊的疑似肺结核患者痰标本共162份,其中干酪痰和血痰标本各20份,黏液痰标本122份。每份痰标本分为2份,每份5 ml,经前处理液消化处理15 min, 1份记录沉渣质量,1份取0. 5 ml上清(上清接种组)及0. 5 ml沉渣(沉渣接种组)分别接种于MGIT 960液体培养管中培养并进行涂片抗酸染色鉴定,分别记录上清接种组和沉渣接种组的培养结果 ,并对污染标本进行16S rDNA测序分析以鉴定菌种。结果 162份痰标本中,干酪痰标本消化处理15 min后所得沉渣质量[(0.17±0. 14) g],高于黏液痰标本[(0. 09±0. 07) g]和血痰标本[(0. 10±0. 07) g],差异均有统计学意义(F值分别为14. 56、4. 29,P值分别为0.00、0. 01),血痰标本前处理液的沉渣质量略高于黏液痰,差异无统计学意义(F=0. 09,P=0.80)。沉渣接种组标本污染率为16.05%(26/162),高于上清接种组[0.00%(0/162)],差异具有统计学意义(Fisher精确检验,P=0.00)。沉渣接种组不同性状的痰标本污染率不同,由大到小依次为血痰[50. 00%(10/20)]、干酪痰[15.00%(3/20)]和黏液痰[10.66%(13/122)],差异具有统计学意义(χ~2=15.61,P=0.00)。26例患者污染标本中,5例未扩增出DNA,其余21例鉴定结果分别属于10种菌,以芽孢杆菌和链球菌较为突出,分别占23.08%(6/26)和15.38%(4/26)。结论痰标本前处理液沉渣是MGIT 960液体培养法受污染的主要原因之一,接种时避免沉渣存在能够有效降低污染率。     

手术标本中结核分枝杆菌检测及临床意义研究

目的 探讨结核病患者手术切除标本进行结核分枝杆菌检测的临床意义。 方法 应用罗氏培养、液体培养及定量RT-PCR方法检测12例不同化疗疗程后行手术,术中取材的标本中结核分枝杆菌。 结果不同化疗疗程的手术标本中可以应用罗氏培养法及液体培养法检测到结核分枝杆菌,并有病例存在结核分枝杆菌持留菌特征性ICL及ACR的高表达。 结论 手术标本是结核菌培养及持留菌检测的很好材料,对患者术后化疗指导有指导意义。     

痰模型及目测涂片法检测抗酸杆菌的比较研究

目的 评价痰模型涂片法检测抗酸杆菌的价值。 方法 对1089份初诊为活动性肺结核患者的痰标本,分别应用模型涂片法、目测涂片法检测抗酸杆菌,并与罗氏培养结果进行比较。检测结果比较采用χ²检验和秩和检验,以P＜0.05为差异有统计学意义。 结果 模型涂片法阳性检出率31.68%（345/1089）,高于目测涂片的24.24%（264/1089）（χ²=14.955;P＜0.05）,模型涂片法与目测涂片法的质量指标合格率分别为痰细胞（94.21%,86.41%）、痰膜大小（98.99%,75.30%）、厚薄（96.14%,74.29%）、染色（94.49%,87.60%）、痰膜脱落（97.43%,86.41%）,较目测涂片法均明显提高（χ²值分别为37.915、272.799、206.432、31.683、89.011,P值均=0.001）。以罗氏培养结果为标准,模型涂片法灵敏度为82.69%（344/416）,Kappa值为0.853,优于目测涂片法［灵敏度为63.46%（264/416）,Kappa值为0.682］,说明模型涂片法与罗氏培养法具有较好的一致性。 结论 模型涂片既继承了目测涂片检测抗酸杆菌的简便快速,又较目测涂片制片质量和阳性检出率明显提高,具有较高的敏感度、特异度,适合基层实验室推广应用。     

对BACTEC^TM MGIT960培养报告结果为阴性的培养管中颗粒性物质的研究

目的 探讨使用BACTEC^TM MGIT960进行分枝杆菌培养时,仪器报告结果为阴性的MGIT960培养管中颗粒的性质及成因。 方法 收集北京市结核病胸部肿瘤研究所2010年1月至2010年12月进行分枝杆菌培养的标本中31份仪器报告阴性但有颗粒形成的培养管,分别对颗粒性物质进行抗酸染色、罗氏培养和BACTEC^TM MGIT960传代培养。对培养阳性的标本进行菌种鉴定、药敏试验。选择8株培养阳性的标本进行低细菌载量接种试验来分析颗粒形成的原因,包括2株结核分枝杆菌复合群,3株蟾蜍分枝杆菌和3株胞内分枝杆菌,每株将1个麦氏浓度的菌悬液用生理盐水连续稀释至10^-5、 10^-6、10^-7、 10^-8 倍,各接种到2支培养管。 结果 31份仪器报告阴性但有颗粒形成的培养管,有29份经再次传代培养后获得阳性培养结果,其中24份（24/29）用颗粒直接涂片后进行显微镜抗酸杆菌检查结果为阳性。29份培养阳性的菌株包括7株蟾蜍分枝杆菌,4株胞内分枝杆菌和18株结核分枝杆菌复合群。接种量为10^-6、10^-7、 10^-8 浓度的蟾蜍分枝杆菌培养管中均有颗粒形成,阳性比例分别为4/6、5/6、6/6。 结论 BACTEC^TM MGIT960进行结核分枝杆菌培养时,仪器报告阴性的MGIT960培养管中颗粒多为活的分枝杆菌;BACTEC^TM MGIT960系统颗粒的形成与低细菌载量有关,颗粒形成也有一定的种属特异性,主要集中在蟾蜍分枝杆菌和胞内分枝杆菌。     

临床分枝杆菌培养中同步筛检依赖利福平菌的应用价值探讨

目的 探讨分枝杆菌培养中同步筛检依赖利福平结核分枝杆菌（依R菌）的临床应用价值,以期为临床依R菌早期发现提供帮助。 方法 采用临床典型依R菌株在罗氏（L-J）培养基上的最佳生长利福平药物浓度100μg/ml（简称“L-J R100”）,建立临床依R菌初代筛检模式,即在临床分枝杆菌BD960快速分离培养中,平行接种L-J R100 管和罗氏空白对照管（L-J对照）培养;按照其模式对重庆市公共卫生医疗救治中心2011年3月7日至2012年2月15日期间共5362份临床标本平行培养结果进行统计分析（实验结果录入瑞美检验网络LIS系统）。 结果BD960、L-J R100和L-J对照管3种方法平行培养的总阳性检出率为43.92% (2355株/5362份),其中BD960阳性检出率39.56%（2121株/5362份）,L-J对照管阳性检出率25.57%（1371株/5362份）。BD960阴性但L-J对照管培养阳性者234份;L-J R100阳性703株,占检出阳性的29.85%(703株/2355株）;发现有依R菌现象的258株（合计221例,其中重复出现依R菌现象2次的33例、3次的1例、4次的3例,另外有14株L-J R100阳性而对照为阴性的绝对依赖株）,占L-J对照管阳性的18.82%（258株/1371株）,占L-J R100阳性的36.70%（258株/703株）。 结论 临床分枝杆菌培养中同步筛检依R菌能分离到绝对依赖株,可提早为临床提示分离阳性株是否为利福平依赖菌或耐药菌;同时可提高分枝杆菌培养阳性检出率;其方法简单易行,有较好的临床应用价值。     

四县（区）结核病防治机构固体培养能力建设调查

目的 评估固体培养试验在我国县（区）级结核病防治机构（简称“结防机构”）应用的可行性。方法 选取黑龙江省北林区和兰西县及湖南省湘潭县和岳阳县4个县（区）级结核病实验室,自2010年5月至2011年2月连续纳入2059例具有肺结核可疑症状的初诊患者,收集患者痰标本完成分枝杆菌涂片镜检和固体培养试验,按月统计涂阳培阴率和污染率。按照培养试验室内质量控制要求,初诊患者涂阳培阴率要求低于10%,污染率要求控制在2%～5%。 结果 （1）全部患者涂片和培养阳性率分别为18.3%（376/2059）和26.6%（547/2059）,差异有统计学意义（χ²=129.2,P<0.01）。（2）北林区涂阳培阴率为16.5%(23/139),超过正常要求低于10%的水平。湘潭县和岳阳县培养污染率分别为5.6%(157/2800) 和9.7%(252/2590),超过正常要求低于5%的水平。其余县（区）涂阳培阴率和培养污染率均处于正常范围。结论4个县（区）级实验室初步具备了分枝杆菌固体培养试验能力。     

分枝杆菌双相罗氏培养基在结核病诊断中的应用研究

目的 评价分枝杆菌双相罗氏培养基在结核病诊断中的价值,探讨其在我国基层实验室应用的可行性。方法采取多中心试验方法,在我国3个省的3个地市级结核病诊疗机构连续纳入2014年10月至2015年10月期间的初诊肺结核可疑症状者2320例,其中15例因分枝杆菌改良罗氏培养基(简称“罗氏培养基”)和分枝杆菌双相罗氏培养基(简称“双相培养基”)中的1种或2种培养污染或结果缺失,对两种培养基培养结果进行比较时不计入分析。每例患者留取3份痰标本(即时痰、夜间痰、晨痰)进行萋-尼染色法涂片镜检(简称“涂片”),并选取2份性状好的痰标本同时进行罗氏培养基培养、双相培养基培养。使用SPSS 24.0软件,采用配对χ²检验比较两种培养基的阳性检出率,以P<0.05为差异有统计学意义;分别以罗氏培养基培养结果、临床诊断为标准对双相培养基的检测效能进行评价;采用Wilcoxon秩和检验对罗氏培养基与双相培养基检出时间的差异进行统计学分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果罗氏培养基和双相培养基两种培养方法阳性检出率分别为19.65%(453/2305)和22.00%(507/2305),差异有统计学意义(χ²=22.091,P=0.000);以罗氏培养基培养结果为标准,双相培养基的敏感度为91.39%(414/453),特异度为94.98%(1759/1852),一致率为94.27%(2173/2305);以临床诊断为标准,罗氏培养基和双相培养基的ROC曲线下面积分别为0.694(95%CI:0.672~0.715)、 0.707(95%CI:0.685~0.728);罗氏培养基报阳时间中位数(四分位数)[M(Q₁,Q₃)]为28(21,34)d,双相培养基报阳时间M(Q₁,Q₃)为18(14,24)d,差异有统计学意义(Z=15.114,P=0.000)。结论双相培养基较罗氏培养基具有更高的阳性检出率,诊断价值较高,报阳时间明显缩短,是一种可以作为结核病临床诊断的参考方法,在我国基层实验室有一定推广应用价值。     

纳米磁珠富集处理临床标本在分枝杆菌培养中的初步应用

目的 以罗氏培养基作为培养检测介质,验证采用PEG600纳米磁珠富集临床标本中分枝杆菌的可行性。 方法 采用PEG600纳米磁珠富集法、离心法（3000×g,20 min）和直接接种法3种方式处理94份临床标本（来源于南京市胸科医院2012年12月至2013年3月间门诊和病房的94例肺结核患者）,在固体罗氏培养基上进行培养。比较3种方法的培养阳性率、污染率以及平均初生长时间。对于计数资料采用卡方检验进行统计分析,以 Kolmogorov-Smirnov法检测正态性,非正态分布的计量资料采用Wilcoxon秩和检验进行分析,P<0.05为差异有统计学意义。 结果 直接接种法、离心法、磁珠富集法的阳性率分别为29.79%(28/94)、43.62%(41/94)、41.49%(39/94);污染率分别为2.91%(3/103)、4.85%(5/103)、3.88%(4/103);平均初生长时间［中位数(上下四分位数)］分别为28(21,40)、21 (21,35)、21 (21,35) d。磁珠富集法、离心法阳性率均高于直接接种法,差异均有统计学意义（χ²值分别为9.09、11.08,P值均＜0.01）。磁珠富集法、离心法的初生长时间均短于直接接种法,差异均有统计学意义（Z值分别为－3.983、－3.980,P值均＜0.01）。离心法与磁珠富集法之间在阳性率与平均初生长时间上差异均无统计学意义（阳性率比较：χ²＝0.25,P=0.62;平均初生长时间比较：Z=－0.557,P=0.577）。 结论 磁珠富集法在培养的阳性率与初生长时间上均优于直接接种法,与离心法所得结果相似;由于其对环境的污染概率小,易于批量处理,具备很好的临床应用前景。     

超声分散技术在分枝杆菌液体培养污染再处理中的应用效果分析

目的:评估超声分散技术在分枝杆菌液体培养污染标本再处理中的应用效果。方法:对山东省公共卫生临床中心门诊和住院收治的4490例疑似肺结核和795例确诊肺结核患者的痰标本进行液体培养,观察痰培养阳性率、污染率以及报告污染时间。将报告污染的MGIT培养管内容物充分混匀,并将其平均分为两份标本,一份纳入直接组(259例),另一份纳入超声组(259例),两组分别应用直接处理法和超声分散法进行污染标本的再处理。观察两组再处理后培养阳性率和污染率,并比较两组结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex, MTBC)与非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria, NTM)的检出率。结果:5285例患者痰标本培养阳性率为17.7%(935/5285),污染率为4.9%(259/5285)。157例(60.6%)患者的培养污染报告时间为1～3 d, 100例(38.6%)报告时间为4～10 d, 2例(0.8%)为11～20 d。直接组与超声组阳性率分别为7.3%(19/259)和13.9%(36/259);污染率分别为26.6%(6...