三株抗rhIL－6单克隆抗体识别表位的鉴定及IL－6的双单克隆抗体夹心RIA检测方法的建立

采用放射免疫标记抗体竞争结合法，对３株抗ｒｈＩＬ－６单克隆抗体识别的表位进行了鉴定。按识别表位的不同，将３株单克隆抗体分为两组：一组ＳＩ８，ＳＩ９识别相同或相近的表位，另一组ＳＩ７。在表位鉴定的基础上，选择识别不同表位的单克隆抗体，由此获得最佳组合，灵敏度为８０ｐｇ／ｍｌ。通过对肾脏病人血清ＩＬ－６水平检测，所得结果与以ＩＬ－６依赖株Ｂ９生物学检测结果一致，且重复性好，特异性强。     

6株抗rhlL－8单克隆抗体识别表位的鉴定及双单克隆抗体夹心法ELISA检测IL－8方法的建立

采用酶标抗体竞争结合试验对６株抗ＩＬ－８单克隆抗体识别的表位进行了鉴定。按识别表位的不同可将６株单克隆抗体分为两组，一组包括２Ｇ２、４Ｃ３和４Ｅ１，识别相同或相近的表位；另一组包括４Ｄ７、５Ｃ９和５Ａ４，识别相同或相近的表位。在表位鉴定的基础上，选择识别不同表位的单克隆抗体用于建立双单克隆抗体夹心法ＥＬＩＳＡ检测ＩＬ－８，其中以４Ｄ７为包被抗体，４Ｃ３为酶标抗体的组合可获得最高的敏感性，对单核细胞源性ｒｈＩＬ－８（ＭＩＬ－８）及内皮细胞源性ｒｈＩＬ－８（ＥＩＬ－８）检测的敏感性可分别达到１５６ｐｇ／ｍｌ及３１２ｐｇ／ｍｌ。     

抗人重组IL—1单克隆抗体的制备及初步鉴定

以重组人ＩＬ－１免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞６５３融合，得到一组分泌抗人重组ＩＬ－１单克隆抗体的杂交瘤细胞。对其中的３株 ＹＡ１３３、ＹＡ１４０和ＹＡ１６３进行了初步鉴定，抗体类别为ＩｇＧ，亚类均为ＩｇＧ１，免疫转印显示，３株抗体均能特异性地识别分子量为１７．５ｋＤ的ＩＬ－１蛋白条带，ＥＬＩＳＡ法证明与其它细胞因子如：ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＴＮＤ－α，ＩＦＮ－γ和ＧＭ－ＣＳＦ均无     

抗白细胞介素—6受体单克隆抗体的制备

用白细胞介素－６（ＩＬ－６）依赖性人多发性骨髓瘤细胞株ＸＧ－１作为免疫原，我们成功地制备获得一株分泌抗人ＩＬ－６受体单克隆抗体的杂交瘤，命名为ＳＩ１５。夹心ＥＬＩＳＡ和位点竞争试验表明，ＳＩ１５和抗人ＩＬ－６受体单克隆抗抗Ｍ１９识别ＩＬ－６受体上的同一位点，对ＩＬ－６受体的生物活性无影响。     

一组抗人重组IL－6单克隆抗体的制备及鉴定

以基因重组的人ＩＬ－６免疫了Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，利用小鼠杂交瘤技术，建立了２０余株分泌抗人重组ＩＬ－６单克隆抗体的杂交瘤，并对其中的Ｃ＿（９２）、Ｃ＿（９７）、Ｃ＿（２０３）、Ｃ＿（２２０）进行了较系统的鉴定，其抗体类别均为ＩｇＧ，亚类分别为ＩｇＧ＿（２ａ）、ＩｇＧ＿１、ＩｇＧ＿（２ａ）和ＩｇＧ＿（２ａ）。它们均特异性地识别ＩＬ－６，而与多种其它因子和无关蛋白无交叉反应。免疫转印结果显示，各单抗均能识别分子量为１７ｋＤ的ＩＬ－６单一条带，并具有中和ＩＬ－６生物活性的效应。     

IL—2和IL—6融合蛋白的分子生物学特性的研究

本文应用酶联免疫吸附技术对ＩＬ－６／２融合蛋白进行了定性，定量分析，测定其等电点，并对该蛋白的表位，柔性和抗原性进行了计算机模拟，ＥＬＩＳＡ测试结果表明；融合蛋白ＩＬ－６／２含有ＩＬ－２和ＩＬ－６两个结构域，可分别与ＩＬ－２与ＩＬ－６单克隆抗体结合，且两个结合无明显空间排阻效应，这与计算机的表拉，柔性和抗原性分析结果一致。     

大肠杆菌菌株（λ衍生噬菌体）／PBR322衍生质粒作为人IL—6表 …

为探索人白细胞介素－６在原核细胞中高效表达的途径，选用ＢＬ２１／ＰＥＴ－２８作为表达系统，以聚质反应技术扩增了ｈＩＬ－６的经补ＤＮＡ的编码区，引入了ＥｃｏＲＩ和ＨｉｎｄⅢ位点。用限制性内切酶ＥｃｏＲＩ和ＨｉｎｄⅢ酶切后，克隆于ＰＥＴ－２８载体的相应位点，转化ＤＨ５α。选出必克隆，经ＤＮＡ序列分析，表明其编码区内无非特异突变。将重组质粒转子ＤＨ５α，筛选阳性克隆，用异基硫代β－Ｄ－半乳糖苷进行诱导表     

人IL—6三维结构及构效分析

人白细胞介素－６（ｈＩＬ－６）三维结构的研究对于揭示其作用机理，研制具有不同活性的ｈＩＬ－６突变体和进行基于ｈＩＬ－６三维结构的药物分子设计都具有重要的指导意义，本文概述了ｈＩＬ－６三维结构的模型，并总结了对ＩＬ－６活性部位研究的进展。     

扩张型心肌病IL—6及IL—1活性的初步研究

应用ＭＴＴ比色法及ＣｏｎＡ活化小鼠胸腺细胞增殖法检测了３０例扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者及２０例正常人（ＮＣ）的血清血细胞介素６（ＩＬ－６）、白细胞介素１（ＩＬ－１）的活性，结果发现ＤＣＭ患者ＩＬ－６及ＩＬ－１活性均明显高于ＮＣ组。提示：ＩＬ－６及ＩＬ－１功能紊乱参与了ＤＣＭ的病理过程。     

rhIL—1β,rhIL—2和rhIL—6对体外培养海马神经胶质细胞c—fos表 …

采用免疫组织化学方法观察了重组人白细胞介素－１β、重组人白细胞介素－２和重组人白细胞介素－６对体外培养大鼠海马神经胶质细胞ｃ－ｆｏｓ表达的影响。结果证明，培养１２ｄ的海马神经胶质细胞与重组人白细胞介素－１β（１００Ｕ／ｍｌ）、重组人白细胞介素－２（２００Ｕ／ｍｌ）和重组人白细胞介素－６（２００Ｕ／ｍｌ）一起孵育２ｈ后出现ＦＯＳ－免疫反应阳性的细胞核，随着所给剂量的逐渐加大，ＦＯＳ反应阳性胞核数量也     

应用RT—PCR技术检测糖尿病人外周血单个核细胞中IL—6mRNA的表…

为探索ＩＬ－６是否在ＩＤＤＭ的发病中起作用，本文报告了我们采用反转录聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对ＩＤＤＭ病人，ＮＩＤＤＭ病人，正常儿童正常成人四组受试者的外周血单个核细胞中的ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达水平初步研究。以内源性β２微球蛋白的ｍＲＮＡ作为内对照，与靶序列ＩＬ－６ｍＲＮＡ在同一管内同时反转录及扩增，以特异的ＰＣＲ产物产量之比ＩＬ－６／β２ｍ表示ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达的相对水平，结果显示：在１２例     

抗人白介素6受体单抗的制备和鉴定

利用重组人可溶性ＩＬ－６受体免疫小鼠后，制备了两株抗ＩＬ－６Ｒ的单克隆抗体１７６／Ｂ６帮１５１／Ｈ１２两者分别识别ＩＬ－６胞外肽段的近膜区和远膜区。免疫迹分析表明，两株单抗均能够特异地结合天然的膜ＩＬ－６Ｒ蛋白，然而不能阻断ＩＬ－６Ｒ的生物功能。     

IL－2和IL－6融合蛋白的分子生物学特性的研究

本文应用酶联免疫吸附技术对ＩＬ－６／２融合蛋白（ＦＰＩＬ－６／２）进行了定性、定量分析，测定其等电点，并对该蛋白的表位、柔性和抗原性进行了计算机模拟。ＥＬＩＳＡ测试结果表明：融合蛋白ＩＬ－６／２含有ＩＬ－２和ＩＬ－６两个结构域，可分别与ＩＬ－２和ＩＬ－６单克隆抗体结合，且两个结合无明显空间排阻效应，这与计算机的表位、柔性和抗原性分析结果一致。从计算机模拟也可以看出ＦＰＩＬ－６／２的抗原性与ＩＬ－２和ＩＬ－６的一致性，而且接头区抗原性较低，这为该蛋白的实际临床应用提供了一定的保证。     

电转人IL6受体基因对急性白血病细胞生物学特性的影响

为了探索重组ＩＬ６－ＰＥ４０融合蛋白靶向杀伤白血病的效应，我们已成功地将编码人ＩＬ６Ｒ的全长ｃＤＮＡ转入ＢＮＭＬ大鼠急性早幼粒细胞白血病ＬＴ１２细胞中。本文研究了ＩＬ６Ｒ ｃＤＮＡ转入ＬＴ１２细胞后对该细胞原有生物学特性的影响。结果表明：①ＬＴ１２－ＩＬ６Ｒ＾＋细胞与原代细胞五种酶学组化无任何区别；②ＬＴ１２－ＩＬ６Ｒ＾＋细胞不仅高表达ＩＬ６Ｒ而且仍保持原的表面抗原性质，如与ＲＭ－１２４单抗结合；