高效液相色谱法测定大鼠纤维化肝组织中羟脯氨酸含量

目的 :测定肝纤维化大鼠肝脏中羟脯氨酸含量。方法 :采用2 ,4—二硝基氯苯柱前衍生化反相高效液相色谱法 ,以乙晴 -醋酸盐缓冲系统梯度洗脱 ,于360nm波长处测定羟脯氨酸含量。结果 :羟脯氨酸衍生物与其它氨基酸较好分离 ,并可准确定量。结论 :本方法快速、灵敏 ,分辨率高 ,尤其适用于临床肝纤维化患者肝穿刺后样本量极小的情况。     

离子色谱法测定鱼鳞胶原蛋白中羟脯氨酸含量方法的研究

目的建立离子色谱法测定鱼鳞胶原蛋白中羟脯氨酸的含量,为工艺研究提供检测依据。方法采用Aminopac PA-10氨基酸分析柱,用积分安培离子色谱法测定鱼鳞中羟脯氨酸的含量。结果羟脯氨酸在0.32~32μmol.L-1(进样量25μL)的范围内呈良好线性关系(y=3.341 1x+1.0087,r=0.999,平均回收率98.25%,RSD=2.04% n=5)。结论所建立的方法稳定可行,可作为判断鱼鳞胶原蛋白含量的一个定量指标。     

柱前衍生化-HPLC法测定市售3种胶类药材中L-羟脯氨酸和胶原蛋白的含量

目的:建立测定胶类药材中L-羟脯氨酸(L-Hyp)和胶原蛋白含量的方法,并比较对照药材与市售药材中两种成分的含量。方法:采用柱前衍生化法进行前处理,并采用高效液相色谱法测定样品中L-Hyp的含量:色谱柱为Kromasil C18,流动相为[乙腈-0.1 mol/L醋酸钠缓冲液(p H 6.5,7∶93,V/V)]-[乙腈-水(4∶1,V/V)](梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,检测波长为254 nm,柱温为43℃,进样量为20μL;再通过折算系数计算样品中胶原蛋白的含量。结果:L-Hyp检测质量浓度线性范围为2.5~40μg/m L(r=0.999 9);定量限为0.20μg/m L,检测限为0.05μg/m L;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<4.0%;加样回收率为96.03%~102.07%(RSD=2.20%,n=9)。28批市售药材中L-Hyp和胶原蛋白的含量有一定差异,其中13批市售阿胶药材与阿胶对照药材中两种成分的含量较为接近,而5批龟甲胶和7批鹿角胶药材中两种成分的含量高于其对照药材。结论:该方法准确、可靠,适用于测定胶类药材中L-Hyp和胶原蛋白的含量。     

组织羟脯氨酸含量微量测定方法及应用

羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)是机体胶原蛋白的主要成分之一,在正常胶原蛋白中含量约13.4%,在弹性蛋白中含量极少,而在其它蛋白则不存在.因此,不同组织中Hyp含量可作为衡量其胶原组织代谢的重要指标.肺纤维化时,肺组织内胶原纤维量增加.由于羟脯氨酸为胶原纤维所特有,以此作为肺纤维化的指标,可以判断纤维化程度[1].     

三重四级杆液质联用测定胶原蛋白海绵中L-羟脯氨酸含量

目的 建立液质联用法测定胶原蛋白海绵中L-羟脯氨酸的方法。方法 采用6 mol·L^-1盐酸-0.5%苯酚酸解胶原蛋白海绵,以乙腈-0.1%甲酸(5∶95)为流动相,质谱测定特征氨基酸L-羟脯氨酸,以茶氨酸为内标定量分析。结果 方法检出限为0.02 ng,线性范围为2.04～30.6μg·m L^-1,方法的重复性RSD为2.4%,准确度为98.3%(RSD=2.3%)。结论 本方法准确可靠,可作为胶原蛋白类产品的含量测定方法。     

重组人红细胞生成素胶原蛋白双层微条的制备及含量测定

目的:制备重组人红细胞生成素(rhEPO)胶原蛋白双层微条并建立其含量测定方法。方法:以胶原蛋白为包裹材料,以硫酸软骨素钠为释放调节剂,采用凝胶加压成型的方法制备双层微条;采用反相高效液相色谱法测定双层微条中rhEPO的含量。结果:rhEPO检测浓度线性范围为0 .25～20μg/ml(r=0 9998) ,平均回收率为96 .2% ,日内、日间精密度分别为0. 9%、2 .6%(n=3)。结论:rhEPO胶原蛋白双层微条制备方法简单可行,含量测定方法准确、可靠。     

高效液相色谱法测定鱼鳞中的Ⅰ型胶原蛋白的含量

目的建立反相高效液相色谱法测定鱼鳞中Ⅰ型胶原蛋白含量的方法。方法以ZORBAX 300SB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)为分离柱,以(A)5%乙腈+0.05%三氟乙酸(TFA)和(B)90%乙腈为流动相,线性梯度洗脱20min,流速1.0mL.min-1,紫外检测波长230nm。结果Ⅰ型胶原蛋白在56～4681μg.mL-1浓度范围内与峰面积具有良好的线性关系(r=0.9997),精密度,RSD 0.83%(n=6),加标平均回收率为100.38%,RSD1.87%。结论该方法简便快速、灵敏、准确,为鱼鳞Ⅰ型胶原蛋白的质控与定量检测提供了1种新的测定方法。     

柱前衍生 -反相高效液相色谱法测定扶正补血食疗方胶原蛋白含量

目的基于 RP-HPLC法对扶正补血食疗方中胶原蛋白含量进行测定,并通过正交试验优选出扶正补血食疗方中胶原蛋白的最佳提取方法。方法于 2021年 12月至 2022年 1月将样品以 6 mol/L盐酸于 110 ℃水解 24 h,利用 AQC试剂进行衍生,采用 Diamonsil-Cl8色谱柱( 250 mm×4.6 mm,5 μm)以流动相 A:无水乙酸钠 11.48 g,三乙胺 1.72 g,EDTA 1 mg,溶于 1L水中,用磷酸调 pH为 4.95;流动相 B:乙腈水溶液(体积分数,60%),梯度洗脱;柱温 37 ℃;检测波长 254 nm;流速 1 mL/min;进样量 10 μL。以羟脯氨酸含量为评价指标,考察煎煮时间、料水比、煎煮温度对胶原蛋白含量的影响,优化其制备工艺。结果羟脯氨酸在 10~500 mg/L浓度范围内线性关系良好( Y=0.036 5X+0.517 3,R2=0.999 1),平均回收率 95.11%,相对标准偏差( RSD)为     

天津市正常人尿总羟脯氨酸,脯氨酸、羟赖氨酸和赖氨酸分析及某些生理因素对其排泄的影响

采用高效液相色谱仪分析了112例天津市不同年龄组正常人尿的羟脯氨酸、脯氨酸、羟赖氨酸和赖氨酸含量。结果表明:1.羟脯氨酸和羟赖氨酸的排泄与年龄有关,9～15岁为最高峰,26～40岁趋恒定。2.胶原饮食对尿羟脯氨酸、脯氨酸、羟赖氨酸及赖氨酸的排泄有影响;普通饮食和素食对其排泄影响不大。3.男女之间差异无显著性。4.测定尿中的这些胶原蛋白的氨基酸,特别是羟脯氨酸和羟赖氨酸能反映体内胶原的转换率。     

妇康宁片中芍药苷的含量测定

目的:采用高效液相色谱法测定妇康宁片中芍药苷的含量。方法采用高效液相色谱法。流动相:乙腈-0.1%磷酸(14:86);流速为1.0ml/min;检测波长为230nm;外标法测定。结果平均回收率为99.21%,RSD=0.49%(n=5),芍药苷含量为5.15mg。结论该方法简便、快速、结果准确,适用于妇康宁片的质量控制。     

用双波长分光光度法测定大鼠小肠循环液中酚红的含量

采用双波长分光光度法测定了大鼠小肠循环液中酚红的含量 ,方法的线性范围为 1～ 8mg/L ,回收率为 99 88%～ 99 99% (n =5 ) ,日内RSD为 0 5 1%～ 1 2 7% (n =4) ,日间RSD为0 5 8%～ 2 2 9% (n =4) .     

HPLC法同时测定抗骨质疏松中成药中柚皮苷及淫羊藿苷的含量

目的:建立以高效液相色谱(HPLC)法同时测定几种抗骨质疏松类中成药中柚皮苷及淫羊藿苷含量的方法。方法:色谱柱为InertsilC1(8250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1mL·min-1,检测波长为285nm。结果:柚皮苷进样量在0.0874～8.74μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9999),加样回收率在99.3%～103.8%之间,RSD为2.18%～3.01%(n=6);淫羊藿苷进样量在0.0606～6.06μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9999),加样回收率在95.9%～98.6%之间,RSD为0.97%～1.66%(n=6)。结论:本法简便、准确、稳定、重复性好,可为评价含淫羊藿、骨碎补中药制剂的质量提供参考。     

HPLC同时测定芪仲腰舒丸中丹皮酚、肉桂酸和黄芪甲苷的含量

目的 建立HPLC法同时测定芪仲腰舒丸中丹皮酚、肉桂酸、黄芪甲苷含量的方法.方法 采用HPLC-DAD对该方中的肉桂酸、丹皮酚进行含量测定,流动相为乙腈-0.2%磷酸(25:75).检测波长282 nm,流速流速1.0 ml·min-1;采用HPLC-ELSD对该方中的黄芪甲苷进行含量测定,流动相乙腈-水(30:70...     

反相高效液相色谱法测定生化汤中阿魏酸及其血药浓度

目的建立一种测定生化汤中阿魏酸含量及兔口服生化汤后血清中游离阿魏酸浓度的方法。方法采用高效液相色谱法以甲醇-冰醋酸-水（30∶0.3∶69.7）为流动相,ZorbaxSB-C     

薄荷麝香草酚搽剂中2成分的含量测定

目的：建立薄荷麝香草酚搽剂中薄荷脑和麝香草酚的含量测定方法。方法：旋光法测定薄荷脑的含量,紫外分光光度法测定麝香草酚的含量。结果：薄荷脑在1.6～5.6mg/ml范围内浓度和吸收度具有良好的线性关系（r=0.9991）,平均回收率为100.7%,RSD为0.7（n=9）;麝香草酚在8.1～32.5μg/ml范围内浓度和吸收度具有良好的线性关系（r=0.9994）,平均回收率为100.4%,RSD为1.6（n=9）;结论：该法准确、可靠、快速,可用于薄荷麝香草酚搽剂的质量控制。     

RP-HPLC法测定人血清中茶碱与多索茶碱的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法同时测定人血清中茶碱、多索茶碱浓度的方法。方法:血清采用15%高氯酸进行沉淀后测定,其中色谱柱为InertsilODS-SP,流动相为甲醇-水(25∶75),检测波长为273nm,流速为1mL·min-1,柱温为30℃,内标为巴比妥钠。结果:茶碱、多索茶碱血清浓度分别在0.24～30.69mg·L-1、0.25～31.83mg·L-1范围内线性关系良好(r均为0.9999),最低定量限分别为0.24、0.25mg·L-1;平均相对回收率分别为99.62%～103.92%、96.26%～102.22%;日内RSD分别为0.44%～1.79%、0.54%～1.68%;日间RSD分别为1.68%～2.15%、0.83%～1.57%。结论:本方法简便、快速、准确、灵敏,可用于临床茶碱、多索茶碱血药浓度监测。     

HPLC法测定润燥止痒胶囊中游离蒽醌的含量

目的建立HPLC法测定润燥止痒胶囊中何首乌、制何首乌游离蒽醌的含量。方法采用Eclipse XDB-C18(5μm,150mm×4.6mm)色谱柱,以甲醇为流动相A,0.1%磷酸溶液为流动相B,进行梯度洗脱,检测波长254nm。结果大黄素在0.0514～1.3878μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率(n=6)为103.8%,RSD为1.1%;大黄素甲醚在0.017216～0.464832μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率(n=6)为102.7%,RSD为1.4%。结论本法简便,准确,可作为该制剂的定量分析方法。     

HPLC 法测定双黄滴丸中黄芩苷和绿原酸的含量

目的建立HPLC法测定双黄连滴丸中黄芩苷和绿原酸含量的方法。方法采用C18色谱柱,乙腈-0．1％磷酸溶液为流动相（梯度洗脱）,流速为1．0ml-min^-1,检测波长为318nm。结果黄芩苷线性范围为0．1-0．5g·L^-1,平均回收率=98．50％,RSD=1．13％;绿原酸线性范围为0．024-0．12g·L^-1,平均回收率=98．25％,RSD=0．37％。结论该方法简便、可靠、准确,可用于该制剂的质量控制。     

Characterization of bovine collagens using capillary electrophoresis

A capillary electrophoresis method was developed and characterized for analyzing the spectrum of collagen subspecies in collagen preparations. The Bio-Rad CE-SDS protein kit was used for the dynamic sieving separation of collagen subspecies in this CE method (DSCE). The optimized method utilized a 36 cm (or 24 cm) x 50 microm uncoated capillary, electrophoretic injection at 10 kV for 10 s, a run voltage of 15 kV, a capillary temperature of 20 degrees C, and UV detection at 220 nm. A preliminary validation of the method was performed. The assay had good repeatability (RSDs for peaks were 15%), and responses were linear for assay solutions with collagen concentrations from 0.125 to 1.25 mg/ml. The DSCE electropherogram of bovine skin collagen provided a profile of subspecies similar in number and relative abundance to that generated by scanning of Coomassie-stained SDS-PAGE gels.